灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠NGF的影响

目的:探讨灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠海马组织的神经生长因子NGF(nerve growth factor)变化。方法:取健康、雄性Wistar大鼠30只,随机将其分成三组。正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组。灵芝孢子粉组和模型组用PTZ(35mg/kg)进行腹腔注射;正常组用无菌生理盐水腹腔注射。灵芝孢子粉组在灌胃的同时给灵芝孢子粉;其余正常对照组和模型组均以生理盐水灌胃。灌胃之后每天对动物进行观察,并记录是否发生癫痫以及持续的时间,以连续5d出现Ⅱ级以上痫性发作作为癫痫的点燃标准。采用免疫组化法检测海马区NGF免疫反应性。结果:灵芝孢子粉组和模型组实验动物全部达到点燃标准。模型组:海马免疫反应阳性细胞数明显高于正常组。灵芝孢子粉组:NGF明显低于模型组(P<0.01))。结论:灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠的NGF过度表达,对神经细胞起保护作用,以减轻对癫痫大鼠中枢神经系统造成的损害,起到了抗癫痫作用。     

动态观察红藻氨酸致痫大鼠海马神经细胞凋亡与wtp53表达的意义

目的：探讨红藻氨酸(KA)致痫大鼠海马神经细胞凋亡与野生型p53(wtp53)蛋白表达的关系。方法：采用KA诱导痛痫发作大鼠模型。以TUNEL方法标记DNA片段，原位检测凋亡细胞；免疫组化SP法检到wtp53蛋白。结果：注射KA72h后，癫痫发作大鼠海马CAl区凋亡神经细胞达高峰及wtp53蛋白表达在24h大量出现；wtp53蛋白表达与细胞凋亡呈正相关。结论：癫痫神经细胞凋亡与wtp53表达密切相关；痫性发作使wtp53表达上调，从而诱导神经细胞凋亡。     

NGF对癫痫大鼠海马神经细胞wtp53表达的影响

为探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对红藻氨酸（ＫＡ）诱导癫痫发作大鼠海马神经细胞野生型ｐ５３（ｗｔｐ５３）蛋白的表达有无抑制作用，我们采用ＫＡ诱导癫痫大鼠模型，分别于１２小时，２４小时，４８小时用免疫组织化学ＳＰ法检测ｗｔｐ５３蛋白表达及ＮＧＦ对其表达的结果。     

大鼠胃癌相关基因p53和p21表达的研究

目的 研究中重度异型增生与胃癌发生的关系。方法 用免疫组化ＡＢＣ法对相关癌基因ｐ５３和ｐ２１在鼠胃癌发生过程中的表达进行研究。结果 中、重度异型增生及胃癌中ｐ５３表达明显高于正常对照组及轻度异型增生，Ｐ２１也趋于同样的结果。结论 证实中重度异增生与胃癌关系，它可作为胃癌的危险信号，为临床判断胃粘膜上皮异型产生的癌变趋向提供同依据。     

宫颈癌p53蛋白表达和细胞增殖活性

目的 研究Ｐ５３蛋白,ＰＣＮＡ,ＤＮＡ含量在宫颈癌及癌前病变组织的表达及其意义。方法 用免疫组化ＡＢＣ法和图像分析法,检测Ｐ５３蛋白,ＰＣＮＡ和ＤＮＡ含量,对５６例正常宫颈粘膜,宫颈上皮内瘤变,宫颈浸润性鳞癌进行研究。结果：Ｐ５３表达阳性率,ＰＣＮＡ细胞增殖指数和ＤＮＡ含量随癌组织分级依次增高,Ｐ５３蛋白在正常粘膜不表达,在宫颈上皮瘤变和原位癌少量表达,在宫颈浸润癌表达明显增高,结果,Ｐ５３含量和     

野生型p53诱导基因1研究进展

p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因.过去20多年来,人们对p53基因的认识经历了癌蛋白抗原,癌基因到抑癌基因的3个认识转变,现已认识到,引起肿瘤形成或细胞转化的突变型p53蛋白是野生型p53基因突变的产物,是一种肿瘤促进因子,它可以抑制正常p53蛋白的功能,而野生型p53基因是一种抑癌基因,它的失活对肿瘤形成起重要作用[1].     

尼膜同对戊四氮致痫大鼠海马神经细胞凋亡和p~(53)蛋白表达的影响

目的 :探讨尼膜同对癫痫发作大鼠海马神经细胞凋亡与 p53蛋白表达的影响。方法 :采用戊四氮致痫大鼠模型 ,以原位末端标记 ( TUNEL)法检测凋亡细胞 ;免疫组化法检测 p53蛋白。观察大鼠癫痫发作后 48h其海马 CA1区神经细胞凋亡和 p53蛋白表达变化及尼膜同对它们的影响。结果 :戊四氮致痫后 ,大鼠海马 CA1区凋亡细胞和 p53蛋白表达均明显增加 ,p53蛋白表达与细胞凋亡呈正相关 ( r=0 .846,P<0 .0 0 1 ) ;尼膜同干预后 ,凋亡细胞数及 p53蛋白表达均显著性降低 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :尼膜同对癫痫所致神经细胞凋亡有抑制作用 ,其抑制凋亡的分子机制可能是通过抑制 p53蛋白表达而实现的     

腺病毒介导的野生型p53基因表达对入胰腺癌细胞生长的影响

目的探讨恢复野生型ｐ５３（ｗｔｐ５３）基因表达对胰腺癌细胞生长的影响。方法构建一个Ｅ１区缺失但能表达ｗｔｐ５３基因的５型腺病毒载体Ａｄ５ＣＭＶｗｔｐ５３，该载体含有人ＣＭＶ启动子、人野生型ｐ５３基因和ＳＶ４０ｐｏｌｙＡ信号。载体经腺病毒包装细胞２９３细胞包装、扩增后，转染人胰腺癌ＰＣ－２细胞。ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证实，转染的细胞有外源ｗｔｐ５３基因的表达。结果与对照组相比，转染有Ａｄ５ＣＭＶｗｔｐ５３的ＰＣ－２细胞生长速度减慢、增殖率降低，软琼脂集落形成能力丧失。结论以腺病毒为载体恢复野生型ｐ５３在胰腺癌细胞的表达，可抑制癌细胞的生长和部分逆转其恶性表型。     

宫颈癌微血管密度和p53蛋白表达的临床意义

目的：探讨微血管密度、Ｐ５３蛋白表达在宫颈癌中的临床意义和相关关系。方法：应用免疫组化Ｓ－Ｐ法检测３８例宫颈癌中Ｐ５３蛋白表达，以Ⅷ因子相关抗原作为血管内皮细胞标记物测定其微血管密度。结果：宫颈癌患者的微血管密度明显高于对照组（Ｐ〈０．０５），在临床Ⅱ期明显高于１期，在血管间质浸润生明显高于阴性（Ｐ〈０．０５），但与组织学分级、淋巴结有无转移以及癌的浸润深度无关；Ｐ５３蛋白随临床分期的递增、癌的浸     

血清p53抗体与肿瘤

肿瘤抑制基因p53基因的突变是恶性肿瘤中最常见的基因突变。血清p53抗体是机体对突变型p53蛋白产生免疫应答的产物。Crawford首先在乳腺癌患者的血清中发现p53抗体,随后,相继在肺癌、大肠癌、食管癌、肝癌、膀胱癌、卵巢癌等患者血清中检测到p53抗体。研究进一步发现,p53抗体生物学意义与p53基因相同,     

三七和灵芝孢子粉提取混合物对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨三七和灵芝孢子粉提取混合物对小鼠免疫功能的影响.方法:144只BALB/C雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高剂量组和溶剂对照组,前3组分别给予0.25 g/kg、0.49 g/kg、1.48 g/kg的三七和灵芝孢子粉提取混合物,溶剂对照组给予蒸馏水,连续灌胃30 d后分为3个亚组,分别检测以下指标:脏器/体质量比值、24 h足跖肿胀度、脾淋巴细胞增殖能力,溶血空斑数、半数溶血值,碳廓清能力、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性.结果:高剂量三七和灵芝孢子粉提取混合物可增强小鼠脾淋巴细胞增殖能力,使小鼠24 h足跖肿胀度增加,促进抗体和血清凝血素的生成,提高NK细胞活性(P均＜0.05);各剂量组对免疫器官/体质量比值、小鼠碳廓清能力和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响(P均＞0.05).结论:三七和灵芝孢子粉提取混合物对正常小鼠免疫功能具有调节作用.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑NF-κB免疫反应性影响及行为学观测

目的观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑核转录因子-κB(NF-κB)免疫反应性的影响并进行行为学观测。方法用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型,用药组以灵芝孢子粉灌胃,记录癫痫发作的潜伏期及持续时间,采用免疫组织化学法检测脑NF-κB/P65的蛋白表达。结果大鼠海马和皮质区每高倍视野(×400)下NF-κB/65蛋白表达模型组明显高于对照组(P<0.01);在造模第17、21、25天时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长(P<0.05或P<0.01),海马和皮质区NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论NF-κB可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白表达,抑制免疫炎症反应,降低神经系统兴奋性,对神经细胞具有保护作用。     

灵芝多糖口服液对小鼠免疫功能影响的研究

目的　观察灵芝多糖口服液对小鼠免疫功能的影响。方法　①制备S180 瘤小鼠模型 ;②皮下注射环磷酰胺 (cytoxan ,CY) 5 0mg·kg·d-1,制备免疫抑制鼠模型。灵芝多糖口服液 15 0mg·kg·d-1、30 0mg·kg·d-1经灌胃给药 ,连续 10d ,分别观察抑瘤效应 ;用MTT方法检测NK细胞杀伤活性 ;对CY免疫抑制小鼠 ,检测腹腔Mφ细胞吞噬功能、脾细胞增殖指数 ,计算给药后各组小鼠脾脏和胸腺指数。结果　灵芝多糖口服液 15 0mg·kg-1、30 0mg·kg-1对小鼠S180 瘤有明显的抑制作用 (P <0. 0 1) ,能够对抗CY所致的小鼠脾和胸腺指数减少 ,明显增加免疫系统吞噬功能及脾细胞增殖数 ,灵芝多糖口服液能明显增加NK细胞的杀伤活性。结论　灵芝多糖口服液抑制小鼠S180 瘤生长 ,增强免疫功能。     

破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫损伤小鼠的血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度的影响

[目的]探讨破壁灵芝孢子粉对ConA诱导免疫损伤小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度的影响。[方法] 雄性Balb/ c小鼠随机分成4组,正常组、模型组、低剂量破壁灵芝孢子粉组(低灵组)、高剂量破壁灵芝孢子粉组(高灵组),除正常组外,用ConA 5 mg/kg尾静脉注射,隔天1次,共2 周,建立免疫性肝损伤模型。正常组和模型组分别用生理盐水灌胃,低灵组及高灵组分别用破壁灵芝孢子粉1.0g/kg、2.0 g/kg灌胃。4周后观察血ALT、AST水平及肝组织炎症程度。 [结果]与模型组比较,低灵组及高灵组血ALT、AST水平降低、肝组织炎症程度改善,差异有统计学意义。[结论]破壁灵芝孢子粉能改善ConA诱导免疫损伤小鼠血清ALT、AST水平及肝组织炎症程度。     

灵芝酸A对人炎性乳腺癌细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：探讨灵芝酸A在体外对人炎性乳腺癌SUM149细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能机制。方法：人炎性乳腺癌SUM149细胞分为对照组和不同浓度（0.1、0.5、1.0、5.0和10.0 μmol·L^-1）灵芝酸A组,每组设4个复孔,分别于培养24、48和72h取样本。MTT法检测各组SUM149细胞增殖抑制率,流式细胞术检测各组SUM149细胞凋亡率和细胞周期,免疫细胞化学染色法检测各组SUM149细胞Ki67和Livin蛋白表达水平。结果：MTT法检测,与0.1μmol·L^-1灵芝酸A组比较,其他浓度灵芝酸A组SUM149细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）,并呈浓度和时间依赖性。流式细胞术检测,与对照组比较,不同浓度灵芝酸A组SUM149细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）,并呈浓度和时间依赖性;同时细胞周期发生明显变化,与对照组比较,随着灵芝酸A浓度的增加和作用时间的延长,不同浓度灵芝酸A组G₁期细胞百分率明显增加（P<0.05）,S期细胞百分率减少（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较,不同浓度灵芝酸A组细胞中Ki67和Livin蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。结论：灵芝酸A通过诱导细胞凋亡抑制人炎性乳腺癌SUM149细胞增殖。     

灵芝孢子粉提取物对甲醛所致小鼠遗传毒性干预研究

目的:探讨灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性的干预作用。方法:将昆明种小鼠随机分成4组,每组10只,分别为阳性对照组,高剂量、中剂量和低剂量灵芝液组,各组小鼠每天以10 mg/m3甲醛溶液静态染毒2h后,实验组分别以150、30和15 mg/(kg·d)剂量灵芝孢子粉提取液灌胃,阳性对照组以同等体积蒸馏水灌胃,染毒和灌胃过程持续14 d。14 d后,处死小鼠,检测各组小鼠的睾丸系数、精子畸形率和骨髓细胞微核率。结果:与阳性对照组比较,高、中、低剂量实验组小鼠的睾丸脏器系数均升高(P<0.01),以高、中剂量组显著;小鼠精子畸形率与骨髓微核率不同程度降低(P<0.01),而且存在明显的剂量效应关系。结论:灵芝孢子粉提取液对甲醛所致小鼠遗传毒性具有一定的保护作用。     

地塞米松对肺癌细胞株A549生长及化疗作用

【目的】观察地塞米松对肺腺癌细胞生长及与化疗作用的影响并探讨其与凋亡相关基因突变型p53及耐药P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达相关性。【方法】将不同浓度的地塞米松单独或与长春新碱（VCR）联合作用于肺腺癌细胞株A549。四唑盐（MTT）试验测定药物对肺腺癌细胞A549的抑制率,筛选出药物的IC50浓度。免疫组化法测定IC50浓度各药物应用对p53、P糖蛋白（P-gp）表达的影响,比较二者的相关性。【结果】不同浓度的地塞米松对肿瘤的生长及化疗有影响,且上述药物与IC50浓度的VCR联合应用时能增加VCR的抑制率,用药后各组p53、P-gp表达均减少（P〈0．01）,且二者表达呈正相关。【结论】地塞米松对A549细胞的生长及化疗有影响,其机制可能与凋亡相关基因p53及P-gp介导的肺癌耐药机制有关。     

宫颈癌术前联合重组人p53腺病毒注射液及放射治疗的有效性

目的 评价宫颈癌术前联合重组人p53腺病毒注射液(rhAd-p53注射液)及放射治疗的有效性。 方法 宫颈癌患者50例分为GTRT组(n=20)和RT组(n=30),GTRT组采用rhAd-p53注射液+后装照射+手术治疗,RT组采用后装照射+手术治疗。观察两组患者非手术治疗前后局部肿瘤消退情况、术后累积生存率及无瘤生存率。采用TUNEL法检测两组术后宫颈癌组织细胞凋亡情况,免疫组织化学检测凋亡相关蛋白P53,BCl-2,Bax及Caspase-3的表达情况。 结果 治疗后两组肿瘤面积均明显缩小(P<0.01),组间比较差别无统计学意义(P>0.05); 两组术后1年内生存率无差异,术后2,5年及5年以上生存率,GTRT组明显高于RT组; GTRT组的凋亡指数及Caspase-3染色均高于RT组(P<0.01),P53蛋白则低于RT组(P<0.01)。两组的Bcl-2及Bax蛋白表达量差别无统计学意义(P>0.05)。 结论 宫颈癌患者瘤内注射rhAd-p53注射液治疗有效,与后装照射有协同作用。     

8-氯-环腺苷酸对人膀胱癌细胞中野生型p53、突变型p53 mRNA表达的影响

目的探讨cAMP类似物8-氯-环腺苷酸（8-Cl-cAMP）对人原代培养的膀胱癌细胞中野生型p53（wtp53）、突变型p53（mtp53）mRNA表达的影响。方法原代培养膀胱癌细胞,运用免疫组化及原位杂交方法检测膀胱癌细胞中wtp53、mtp53 mRNA的表达。结果8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中mtp53 mRNA表达水平明显低于未处理组,而经8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中wtp53 mRNA表达水平则明显高于未处理组,两组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论8-Cl-cAMP可抑制膀胱癌细胞中mtp53 mRNA,上调wtp53mRNA表达水平,进而抑制肿瘤细胞的分裂和增殖。