欧李优系试管苗增殖关键技术研究

以欧李优系试管苗为试材,采用单因素试验设计,研究了不同生长调节物质组合、基本培养基类型、附加物和蔗糖浓度对试管苗生长状态和增殖效率的影响。结果表明:在MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.05mg·L~(-1)培养基上,附加水解乳蛋白(LH)300mg·L~(-1)、蔗糖35g·L~(-1)、琼脂5.8g·L~(-1),为欧李优系试管苗增殖的最佳培养条件。     

“赤霞珠”葡萄组培快繁体系研究

以"赤霞珠"葡萄为试材,对组培快繁中的取材部位、消毒方法、不同激素用量、是否带叶继代培养等关键技术措施进行了研究探讨。结果表明:以半木质化,0.1%升汞溶液消毒8min的茎段接种,成活率高,污染率低;并且继代培养和生根培养最好的培养基为1/2MS+IBA0.2mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1)。     

无核葡萄胚挽救畸形苗发生及转变正常植株的研究

【目的】探究胚挽救无核葡萄畸形苗发生原因及转变成正常葡萄试管苗的方法,提高无核葡萄胚挽救育种效率。【方法】‘无核白’(‘Thompson seedless grape’)、‘火焰无核’(‘Flame seedless grape’)、‘赫什无核’(‘Heshi seedless grape’)及‘红宝石无核’(‘Ruby seedless grape’)自交以及和不同父本杂交后进行胚挽救,研究不同亲本基因型和不同胚萌发培养基对胚挽救畸形苗产生的影响。通过不同培养基及培养方式离体培养胚挽救畸形苗,进一步研究胚挽救畸形苗转变成正常葡萄试管苗的方法。【结果】‘无核白’和‘赫什无核’作母本,用MS培养基培养易产生胚挽救畸形苗。畸形胚萌发苗可总结为5大类:白化苗、玻璃化苗、徒长苗、子叶扭曲无根苗和无生长点的有根苗。转接在WPM+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+IAA 2.0 mg·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+活性炭2.0 g·L~(-1)培养基上培养,每隔14 d进行继代转接,将畸形苗转变成正常葡萄试管苗效果较好。【结论】无核葡萄胚挽救产生的畸形苗及时转接到不同培养基上或者采取合适方式进行继代培养,可以将胚挽救畸形苗转变成正常葡萄试管苗。     

铁皮石斛优质试管苗繁育技术研究

以野生铁皮石斛为试材,采用限根培养法,研究了铁皮石斛种子非共生萌发特性及优质试管苗繁育技术。结果表明:授粉120d的种子达到生理成熟,能够顺利萌发;授粉140d种子达到形态成熟,萌发率可达98.51%;低温黑暗限制保存原球茎可控制其生长;在特定容器中用限根培养基MS+0.10mg·L~(-1) 6-BA+0.3mg·L~(-1) NAA+香蕉泥80g·L~(-1)培养小苗可得到优质试管苗;把试管苗移栽到松树皮中,成活率可达97.62%,该研究为铁皮石斛产业化育苗提供了新方法。     

濒危植物羽叶丁香组织培养

以濒危植物羽叶丁香的芽和种子为外植体,采用植物组织培养法,研究了不同消毒方法对无菌体系建立、不同浓度的蔗糖和激素组合对种子初代培养、不同基本培养基和激素组合对增殖和生根的影响,以期为羽叶丁香的组培快繁、种质资源保护和开发利用提供依据。结果表明:新枝为较适宜的外植体,适宜的消毒方式为75%酒精消毒30s,0.1%升汞消毒7min,最适增殖培养基为MS+5.0mg·L~(-1) 6-BA+0.01mg·L~(-1) IBA;最适种子初代培养基为MS+20g·L~(-1)蔗糖汁+3.0mg·L~(-1) 6-BA+0.10mg·L~(-1) IBA,最适增殖培养基为MS+7.0mg·L~(-1) 6-BA+0.05mg·L~(-1) IBA;最适生根培养基为WPM+2.0mg·L~(-1) IBA。     

利用正交实验优选蓝莓“比洛克西”组织培养条件

以南方高丛蓝莓"比洛克西"半木质化茎段为外植体,利用正交实验方法,高效优选其组织培养最佳条件。结果表明:外植体的最佳处理方法为先用75%乙醇消毒45s,再用10%NaClO消毒10min,然后把茎段接种到含WPM+ZT 1.00mg·L~(-1)的初代诱导培养基中;增殖培养的最佳培养基为WPM+6-BA 1.00mg·L~(-1)+ZT 2.00mg·L~(-1)+IBA 0.25 mg·L~(-1),壮苗培养的最佳培养基为WPM+ZT 0.50 mg·L~(-1)+IBA0.50mg·L~(-1);生根诱导的最佳培养基质为WPM+蛭石∶椰糠(V 1∶1)+活性炭3.00g·L~(-1)+IBA 0.500mg·L~(-1)。     

金叶锦带组培技术

以金叶锦带的腋芽为外植体,采用组织培养法,通过在培养基中添加不同浓度激素,筛选最佳培养基,为金叶锦带的大面积推广提供技术支撑。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.6mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),诱导率达86.3%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) GA3+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),增殖系数7.250 6;最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg·L~(-1) IBA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),生根率100.0%。     

彩叶楝树组织培养技术

以彩叶楝树新品种‘美人’当年生幼嫩茎段为试材,采用组织培养方法,研究了不同浓度的6-BA、IBA及NAA对彩叶楝树组培快繁的影响,以期建立彩叶楝树的高效组培快繁体系。结果表明:外植体经1 g·L~(-1)的多菌灵消毒10 min和300 mg·L~(-1)的羧苄青霉素消毒5 min后,再用0.2%氯化汞消毒15 min,灭菌效果较好,污染率只有32%。不定芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L~(-1)+IBA 0.20mg·L~(-1),增殖系数为4.76;而1/2MS+IBA 0.10 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)为试管苗生根较理想的配方,生根率可达90.8%;试管苗移栽适宜的基质为草碳∶珍珠岩=2∶1,成活率可达90%。该研究建立了一套完善的彩叶楝树新品种组培快繁体系,对其种植资源保护、新品种繁育、推广及遗传改良有着重要的理论指导意义和实践应用价值。     

慈姑茎尖组织培养与快速繁殖

以慈姑茎尖为外植体,用不同培养基进行组织培养,以所获得的试管苗为材料进行快速繁殖技术研究。结果表明,慈姑茎尖培养的最适启动培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1);继代增殖的最适培养基为-S+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1),增殖系数为4.35。     

有髯鸢尾杂交种成熟胚培养成苗技术

以有髯鸢尾"白与蓝"×"印度首领"杂交种子成熟胚为试材,采用组织培养法,研究了消毒方式、生长调节剂的种类与浓度对有髯鸢尾种胚成苗影响,以期为鸢尾育种提供理论依据。结果表明:成熟胚诱导最适培养基为MS+2.0mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) IBA,萌发率达86.6%,成苗率达85.0%;丛生芽在MS+4.0mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) IBA的培养基上增殖系数最大,为5.76;适宜的生根培养基为MS+0.7mg·L~(-1) PP333,接种后7d开始生根,生根率达83.33%;组培苗生根后无需练苗便可移栽至蛭石中,移栽成活率89.53%。     

霍山石斛的组织培养研究

以霍山石斛种子为外植体,不同激素为变量,筛选出霍山石斛种子萌发、增殖培养、生根壮苗培养各阶段适宜的培养基配方。结果表明,霍山石斛种子萌发适宜的培养基配方为花宝一号1.5g·L~(~(-1))+花宝二号0.5g·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1)+香蕉100g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂4.75g·L~(-1)+碳粉0.5g·L~(-1)+肌醇100g·L~(-1)+牛肉蛋白胨1g·L~(-1),种子萌发状态好,颜色翠绿。继代增殖适宜的培养基配方为MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+碳粉0.5g/L+牛肉蛋白胨1g/L+琼脂4.8g/L+6-BA1.5mg/L+KT1.5mg/L,霍山石斛增殖倍数达到2.5,增殖苗生长势较好,6-BA对霍山石斛增殖实验增殖的影响显著,NAA、KT对霍山石斛增殖的影响不显著。适宜的生根壮苗培养培养基配方为MS+香蕉100g/L+蔗糖30g/L+碳粉0.5g/L+牛肉蛋白胨1g/L+琼脂4.8g/L+6-BA1.5mg/L+NAA0.5~(-1)mg/L+IBA1~(-1).5mg/L。霍山石斛试管苗长势较好,茎粗壮,平均生根数达到9根以上。6-BA对霍山石斛生根壮苗培养株高影响极显著,IBA对霍山石斛生根壮苗培养株高影响显著,6-BA对霍山石斛生根培养茎粗效果极显著。     

美国红枫的组织培养与快繁技术

以美国红枫腋芽茎段为外植体,采用组织培养方法,研究了不同激素配比对美国红枫无菌体系的建立、启动、增殖、壮苗培养、试管苗生根移栽的影响。结果表明:带腋芽茎段最佳消毒方式为以70%酒精浸泡30s,1%升汞消毒6min,成活率和抽芽率最高,分别达到75.22%和95.13%;NAA对启动培养的影响大于6-BA,接种于培养基MS+NAA 0.05mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)中的外植体诱导率最高,为62.80%,培养基及激素的最佳配比为NN69+2,4-D0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),诱导率达到80.21%;增殖培养阶段的最佳培养基为NN69+NAA 0.1mg·L~(-1)+TDZ 0.3mg·L~(-1),增殖系数为4.2;MS+2,4-D 0.1mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1)能有效促进小苗的生长;生根培养最适培养基MS+NAA 0.1mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1),生根率达99.8%,生根条数达7.9,根长达6.5cm;练苗后移栽到蛭石+珍珠岩(1∶1)基质中,移栽成活率为75.2%。     

无核君迁子离体叶片的植株再生

以"赞圆无核"君迁子组培苗叶片为试材,研究了基本培养基类型、植物生长调节物质浓度和暗期处理对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:最适宜的基本培养基为MS(1/2N),最佳的生长调节剂组合为5.0mg·L~(-1) ZT+0.10mg·L~(-1) IAA,其愈伤组织诱导率、不定芽形成率及平均出芽数分别达到99.1%、87.3%和5.4个;暗培养4周,再转为光下培养2周效果最佳;将叶片再生植物转入(1/2N)MS+0.5mg·L~(-1) ZT+0.01mg·L~(-1) IAA培养基中继代培养,以1/2MS+1.0mg·L~(-1) IAA+20g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)琼脂培养基诱导生根,生根率60.5%;生根苗大田移栽成活率63%。     

杜鹃兰原球茎增殖培养条件

以杜鹃兰种子萌发的原球茎为试材,研究不同培养基、不同植物生长调节物质(6-BA、NAA和IBA)、活性炭、温度及光照强度对杜鹃兰原球茎增殖的影响。结果表明:1/2MS培养基为适于原球茎增殖的基本培养基;添加一定浓度的6-BA、NAA和IBA均有利于原球茎的增殖,IBA的浓度为1.0mg·L~(-1)时,原球茎增殖率较高,40d可达170.07%;适量添加活性炭对原球茎增殖有促进作用;温度及光照强度的控制对原球茎增殖是必需的。杜鹃兰原球茎增殖的适宜培养条件为1/2MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) IBA+0.5g·L~(-1)活性炭,温度为15℃,光照强度为2 000lx。     

苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养及其叶片不定梢诱导

【目的】建立苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养快繁技术体系及其离体叶片不定梢再生技术体系,为工厂化生产优质苗木及利用生物技术手段改良品种奠定技术基础。【方法】以苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的半木质化新梢为试材,建立初代无菌试管苗。以试管苗为试材,研究了基本培养基、植物生长调节物质对试管苗继代生长及生根的影响。以离体叶片为外植体,研究了细胞分裂素种类和浓度及碳源对不定梢再生的影响。【结果】半木质化新梢在芽启动培养基上的腋芽萌发率达85%以上。在基本培养基MS和QL上,试管苗的增殖没有显著差异,但生长表现不同,QL培养基上的增殖苗表现出该品种田间生长的红色特征。当细胞分裂素为BA时,蔗糖比D-山梨醇易诱导出叶片不定梢;当细胞分裂素为TDZ并且浓度较高时,D-山梨醇比蔗糖易诱导出叶片不定梢。以添加3 mg·L-1BA和30 g·L-1蔗糖处理获得的不定梢再生率最高,为71.6%。生根诱导,基本培养基1/2MS比1/4MS有效,生长素IBA比NAA有利于提高生根率。【结论】苹果砧木‘BP-176’试管苗适宜的继代增殖培养基为添加1.0 mg·L-1BA和0.1 mg·L-1IBA的QL培养基;最佳不定梢再生培养基为:NM+3 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,最高生根率为69.8%。     

‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术研究

【目的】培育‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗木,初步建立‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系。【方法】采用MS为基本培养基,以植物生长调节剂6-BA、NAA和IBA为变量,接种后‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的生长状况为因变量;通过热处理结合茎尖培养技术,在32℃预热处理7 d,再逐渐升温至37℃热处理30 d后,剥取茎尖进行培养,待获得完整植株时,利用RT-PCR检测方法对‘阳光玫瑰’葡萄组培苗进行病毒检测。【结果】‘阳光玫瑰’葡萄嫩茎段外植体经75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min处理,外植体的污染率和褐化率最低;经消毒灭菌的外植体接种到添加含有6-BA和NAA的MS培养基上诱导萌发,在1.5 mg·L~(-1)6-BA和0.2 mg·L~(-1)NAA的培养基上萌芽率最高;将启动培养获得的无菌新芽,接种到含有6-BA和NAA的MS培养基中进行继代培养,在1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA的培养基中单芽增殖效果最明显;把继代培养中生长健壮的单芽切下,转入添加IBA和NAA的1/2 MS培养基中进行生根培养,在添加0.4 mg·L~(-1)IBA和0.2 mg·L~(-1)NAA的1/2 MS培养基上生根效果最佳;采用热处理结合茎尖培养进行‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的脱毒处理,热处理植株的成活率为78%,茎尖成活率为60%,经检测,再生植株不带葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄扇叶病毒(GFLV)。【结论】初步建立了‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系,为‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗的工厂化生产提供了技术支撑。     

“绿宝石”梨组培苗生根培养技术

以"绿宝石"梨试管苗为试材,探讨不同浓度的NAA(0.1、0.2、0.3mg/L)和IBA(0.5、1.0、1.5mg/L)、活性炭(0%、0.1%、0.3%、0.5%)以及培养方法对"绿宝石"梨生根的影响。结果表明:诱导"绿宝石"梨试管苗生根的最佳培养基是1/2MS+1.0mg/L IBA+0.3mg/L NAA+0.3%活性炭(AC)+30g/L蔗糖+5.5g/L琼脂;培养方式为先在含有生长素的培养基中培养7d,然后转入不含生长素的培养基中培养。     

不同倍性葡萄品种的快繁效率差异分析

以四倍体"玫瑰香"、四倍体"巨玫"、二倍体"玫瑰香"3种不同倍性的葡萄品种为试材,采用组培快繁技术,研究了采样时间、启动继代培养、生根诱导、练苗移栽等过程对快繁效率的影响,以期为优良葡萄品种的快速繁殖提供参考依据。结果表明:最适田间取样时间为5月中旬,诱导和继代最适培养基分别如下。改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1);改良MS+6-BA 1.1mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1),在相同培养条件下,四倍体"玫瑰香"和四倍体"巨玫"不定芽增殖倍数高于二倍体"玫瑰香",在生根培养过程中二倍体"玫瑰香"表现出优于四倍体"玫瑰香"及四倍体"巨玫"的生根能力,最适生根培养基分别为1/2MS+NAA0.30mg·L~(-1)、1/2MS+IAA 0.50mg·L~(-1)和1/2MS+IBA 0.10mg·L~(-1),练苗最适基质为蛭石∶泥炭(1∶1)的混合基质,成活率可达90%以上。     

大花蕙兰原球茎诱导、增殖与分化影响因素研究

以大花蕙兰试管组织为试材,MS为基本培养基,研究了不同添加物6-BA、NAA、IBA、活性炭,对大花蕙兰原球茎诱导、增殖和分化的影响。结果表明:适宜原球茎诱导、增殖的最佳培养基为MS+1.00mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA,适宜原球茎分化的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.2mg·L~(-1) NAA,在培养基中添加0.3%活性炭有利于原球茎的增殖和分化。     

毛棉杜鹃茎段组织培养技术的研究

以毛棉杜鹃嫩茎为试材,采用无菌培养方法,研究了外植体灭菌方法、基本培养基的筛选、增殖培养、伸长培养、生根培养、炼苗与移栽,以期建立毛棉杜鹃组织培养快速繁殖体系。结果表明:毛棉杜鹃嫩茎最佳灭菌方法是用70%酒精浸泡10 s,2%NaClO浸泡15 min,用无菌水冲洗5～6次;WPM培养基为最佳的基本培养基;增殖培养基为WPM+ZT 2.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),pH 5.0;伸长壮苗培养基为WPM+ZT 0.5 mg·L~(-1)+GA_3 2.0 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),pH 5.0;生根培养基为WPM+IAA 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖1 g·L~(-1),pH 5.0;移栽基质为珍珠岩:草炭土=1∶1配制的培养土,移栽成活率为90%以上。