染料木黄酮的抗巨噬细胞泡沫化效应及其分子机制研究

目的 研究染料木黄酮对动脉粥样硬化过程中巨噬细胞泡沫化的抑制作用,并探讨其抗泡沫化的分子作用机制.方法 采用体外ox-LDL诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生泡沫化,通过油红O染色观察细胞内脂质聚集程度判定细胞的泡沫化程度以及药物效应;利用报告基因细胞检测方法评价染料木黄酮对代谢性核受体过氧化物酶体增殖物激活受体PPAR和肝X受体LXR的转录调控功能的激动作用;利用实时定量PCR检测染料木黄酮对巨噬细胞中ox-LDL摄取以及胆固醇逆转运相关基因的mRNA水平.结果 ox-LDL处理的空白组小鼠RAW264.7单核巨噬细胞内聚积大量的脂质,而经过10 ug/ml染料木黄酮处理后的RAW264.7细胞内脂滴量明显减少,细胞泡沫化程度被大幅度降低.瞬时转染的细胞报告基因的转录激活效应研究结果说明,染料木黄酮对核受体PPAR和LXR均有较高的转录激活效应,其EC50值分别为3.5～9.2 μg/ml和1.6 ～ 3.3 μg/ml.定量PCR研究结果显示,染料木黄酮可以有效地使巨噬细胞中的胆固醇逆转运基因LXRα、LXRβ、ABCA1、ABCGl、和SR-B1的表达上调,而作为主要摄取ox-LDL受体的CD36基因的表达无明显变化.结论 染料木黄酮可以有效抑制动脉粥样硬化过程中巨噬细胞的泡沫化,而该作用机制可能是通过激活PPAR和LXR通路,上调胆固醇逆转运蛋白的ABCA1、ABCG1、LXRα、LXRβ、SR-B1基因的表达,增强了巨噬细胞的胆固醇外排,从而防止动脉粥样硬化的发生和发展.     

染料木黄酮抑制生长板软骨细胞的增殖与基质合成

目的： 探讨染料木黄酮对大鼠肋生长板软骨细胞（RGC）的形态、增殖和胞外基质成分合成的影响。方法： 原代培养RGC，1×10^－6 μmol/L-1×10^－4 μmol/L染料木黄酮处理第1代RGC 24 h，观察RGC形态，同位素掺入检测RGC增殖、胶原和蛋白多糖合成，RT-PCR检测collagen Ⅱ和aggrecan基因表达。结果： 染料木黄酮改变了RGC的形态，随着浓度的升高，突起和漂浮细胞的数量增加。染料木黄酮剂量依赖性地抑制RGC的增殖、胶原和蛋白多糖的合成（P<0.05），以及collagenⅡ和aggrecan mRNA的转录。结论： 染料木黄酮抑制RGC的增殖和胞外基质的合成。     

染料木黄酮对氨诱导的星形胶质细胞NF-κB活化的影响

目的:探讨染料木黄酮对氨所致星形胶质细胞NF-κB活化的影响及其机制。方法:以氯化铵刺激原代培养的星形胶质细胞,建立高血氨模型,Western blot检测星形胶质细胞中ERK、Akt及核因子κB(NF-κB)的活化。结果:AG1478及染料木黄酮可显著抑制氨诱导的星形胶质细胞ERK及Akt的活化。LY294002、染料木黄酮及AG1478可显著抑制氨诱导的星形胶质细胞NF-κB核转位。结论:染料木黄酮可显著抑制氨诱导的星形胶质细胞ERK活化和Akt介导的NF-κB活化,这可能是该天然物质抑制星形胶质细胞水肿的重要机制。     

染料木黄酮对小鼠T细胞体外活化及增殖的影响

目的:研究染料木黄酮(Gen)对T细胞体外活化及增殖的影响,并探讨其机制。方法:利用荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术,检测多克隆刺激剂佛波醇酯(PDB)或刀豆蛋白(ConA)刺激下小鼠T细胞表达活化抗原CD69、CD25的百分率;以羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记技术结合流式细胞术,分析PDB＋Ion(Ionomycin)或ConA刺激下T细胞增殖相关指数。结果:Gen对ConA刺激组T细胞CD69、CD25表达有明显抑制作用(P＜0.05),且呈剂量依赖关系,而对PDB刺激组T细胞CD69及CD25表达的抑制需要较高浓度(＞50μmol/L);Gen无论对ConA或PDB＋Ion刺激组T细胞增殖均有显著抑制作用(P＜0.01),且均呈剂量依赖关系。结论:Gen可明显抑制多克隆刺激剂诱导的T细胞体外活化及增殖,其作用机制可能是抑制早期活化相关蛋白酪氨酸激酶活性。     

染料木黄酮通过抑制VEGF表达抑制人口腔癌TCA8113细胞增殖

 目的: 观察染料木黄酮对人口腔癌TCA8113细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法: MTT法、细胞计数法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测血管内皮生长因子(VEGF)、细胞外信号调节激酶(ERK)及p-ERK的蛋白水平。结果: 染料木黄酮能显著抑制TCA8113细胞的增殖,其抗增殖活性具有浓度依赖性;染料木黄酮还可剂量依赖性地降低VEGF、ERK及p-ERK的蛋白水平;VEGF的表达可被ERK特异性抑制剂U0126所抑制;VEGF受体拮抗剂阿西替尼及U0126均显著抑制TCA8113细胞的增殖。结论: 染料木黄酮可抑制人口腔癌TCA8113细胞的增殖,其机制可能与其抑制ERK表达及活化,进而抑制VEGF的表达有关。     

IL—2受体介导的免疫抑制疗法在器官移植中的应用

抗ＩＬ－２Ｒ单抗和ＩＬ－２毒素融合蛋白作为免疫抑制剂，为预防器官移植排斥提供了一条新途径。它们能特异性识别活性化性Ｔ细胞表达的ＩＬ－２受体，前者表现为抑制混合淋巴细胞反应和细胞毒Ｔ细胞的产生，后者发挥“生物导弹”作用，特异地损伤靶细胞，从而抑制同种移植物排斥或移植物抗宿主反应。延长同种器官移植的存活期。     

PI3K/Akt与染料木黄酮增敏阿霉素体外化疗人乳腺癌 MDA-MB-453 细胞的关系研究

目的观察染料木黄酮（GEN）对HER2／neu高表达人乳腺癌MDA-MB-453细胞P13K／Akt信号途径的抑制作用，探讨其在GEN增敏阿霉素（DOX）体外化疗乳腺癌MDA-MB-453细胞中的作用。方法GEN、P13K特异性抑制剂渥曼青霉素（WT）和DOX单独或联合处理体外培养的MDA-MB-453细胞，免疫细胞化学法检测HER-2／neu蛋白表达，免疫印迹法检测总Akt和磷酸化Akt蛋白（p-Akt）表达。结果GEN对MDA-MB-453．细胞HER2／neu和总Akt蛋白没有明显影响，但可明显降低p-Akt蛋白水平；同时WT也能明显降低p-Akt蛋白，并显著增强DOX抑制MDA-MB-453细胞生长的作用。结论GEN增敏DOX体外化疗乳腺癌MDA-MB-453细胞株可能与其抑制P13K／Akt信号途径有关。     

IL－2受体介导的免疫抑制疗法在器官移植中的应用

抗ＩＬ－２Ｒ单抗和ＩＬ－２毒素融合蛋白作为免疫抑制剂，为预防器官移植排斥提供了一条新途径。它们均能特异性识别活化性Ｔ细胞表达的ＩＬ－２受体，前者表现为抑制混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）和细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）的产生，后者发挥“生物导弹”作用，特异地损伤靶细胞，从而抑制同种移植物排斥反应或移植物抗宿主反应（ＧＶＨＤ）。延长同种器官移植的存活期。     

染料木素抗肿瘤机制的研究进展

染料木素是大豆的主要代谢产物之一,是一种天然的异黄酮.体内外研究发现染料木素能抑制多种肿瘤细胞生长,它可以调节与细胞增殖和细胞凋亡相关的基因;抑制NF.KB和Akt信号转导途径;潜在地抑制血管发生和病灶转移以及对放疗、化疗有增敏作用.本文综述了染料木素在抗肿瘤及其机制方面的研究进展.     

Th17细胞及其在器官移植排斥反应中的作用

最近发现的辅助T细胞17(T helper cell 17,Th-17)是不同于辅助T细胞1型(T helper cell 1,Th-1),辅助T细胞2 型(T helper cell 2,Th-2)及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的T细胞亚群,有其独立的分化和发育调节,且互相影响.它由初...     

细胞粘附分子在器官移植排斥诊断中的作用

细胞粘附分子（ＣＡＭ）在器官移植排斥反应中起重要作用，观察ＣＡＭ变化有助于早期诊断排斥。本文复习免疫组化法，免疫细胞学法，酶联免疫学法，闪烁照相术法和分子生物学法在排斥诊断中的应用意义及其优缺点评估。     

低剂量木黄酮降低缺血后神经元损伤并改善学习记忆功能

目的探讨染料木黄酮(GEN)对全脑缺血(GCI)大鼠海马CA1区神经元的神经保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠4动脉结扎全脑缺血模型,实验动物随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)、GEN处理组、ICI 182,780组和溶剂对照组。采用Fluoro-Jade B和神经元特异性核蛋白(NeuN)染色观察海马CA1区神经元存活情况,TUNEL技术观察海马CA1区神经元的凋亡。Morris水迷宫观察大鼠的空间学习和记忆功能。结果 GEN发挥神经保护作用的最佳剂量为1.0 mg/kg;与sham组相比,I/R组和溶剂对照组海马CA1区TUNEL阳性神经元数量显著增多(P0.01),而1.0 mg/kg GEN可显著降低缺血后TUNEL阳性神经元数量(P0.01);与I/R组相比,GEN能明显改善缺血后大鼠的空间学习和记忆能力。缺血前侧脑室给予ICI 182,780可显著降低GEN的神经保护作用(P0.01)。结论低剂量(1.0mg/kg)GEN可显著降低缺血后大鼠海马CA1区神经元损伤,改善认知功能,其分子机制可能与雌激素受体活性密切相关。     

补体系统在器官移植中的作用研究进展

临床器官移植是许多系统终末期疾病的有效治疗方法,而免疫系统的激活在器官移植中也起到了很重要作用.补体是机体固有免疫系统的重要组成部分,其参与了器官移植缺血再灌注损伤及免疫系统激活的调控,因而对补体在器官移植中的损伤机制及防治的研究具有重要意义.     

细胞粘附分子在器官移植中的应用

细胞粘附分子（ＣＡＭ）参与器官移植的排斥反应，通过测定血清或组织中粘附分子的数量及表达，有助于早期诊断排斥反应，将细胞粘附分子的单克隆抗体应用于肝脏、心脏、肾脏、胰腺及小肠等器官移植，可以有效的抑制排斥。     

粘附分子单克隆抗体在器官移植排斥治疗中的应用

本文复习了抗细胞粘附分子的单克隆抗体在器官移植排斥反应治疗中的应用研究进展，抗细胞粘膜分子的单克隆抗体用于各种器官移植的同种异体和异种移植抗排斥反应作用显著，其免疫抑制作用于强于环孢素Ａ和ＦＫ５０６等免疫抑制剂。     

染料木素对对氧磷损伤大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能的保护作用

目的:探讨染料木素( genistein,GST)对对氧磷(paraoxon,PO)损伤血管功能的保护作用.方法:取雄性SD大鼠胸主动脉制备离体血管环,测量并记录血管环张力.实验分组如下:1)溶媒对照组,用0.1％的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)预孵育血管环30 min后,检测大鼠胸主动脉...     

糖尿病大鼠的骨膜反应及染料木素的保护作用

目的　探讨糖尿病大鼠骨膜反应的动态演变及染料木素(Gen)的保护作用。 方法　建立速发型链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）糖尿病大鼠模型, 随机分为正常组(CON); 糖尿病组（DM）; Gen低剂量干预组（GenLow）; Gen高剂量干预组（GenHigh）(30 mg·kg-1·d-1)。每天1次, 灌胃给药（4.0 mg/kg）10周,每组20只。对各组大鼠骨膜作组织病理学分析及组织计量学测定; 利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化; 墨汁灌注行边缘微血管密度测定。 结果　DM组骨膜厚度等均明显小于CON组(P<0.01); 微血管密度增大, 但渗透性大。GenHigh骨膜厚度明显减少（P<0.01）。 结论　糖尿病先后出现骨膜水肿、 增生、 退化等骨膜反应。Gen对糖尿病的骨膜反应具有改善保护作用。     

人绒毛膜促性腺激素的免疫调节作用及其机理的探讨

本文报道了一定剂量的hCG可抑制PHA诱导的人外周血单个核细胞产生IL-2。进一步用hCG分别预先处理粘附细胞(作为单核巨噬细胞;或非粘附细胞(作为T细胞),而后再作IL~-2产生试验,结果证明粘附细胞受抑制最明显。将hCG经抗hCG单克隆抗体中和后再分别作上述试验,结果,表明抗hCG—β及抗完整hCG两个单抗可明显阻断上述免疫抑制作用。综上似可说明hCG对IL-2产生的抑制作用主要发生在单核巨噬细胞水平.而hCG分子上与此抑制作用有关的表位则可能存在于包括β亚单位及完整hCG在内的部份。     

器官移植免疫抑制剂应用现状及其发展趋势

器官移植的发展取得了令人瞩目的成绩,除了外科技术的日臻成熟外,更为有效、安全的新型免疫抑制剂的不断推出及临床应用起了重要作用。由于移植免疫耐受机制未能弄清,器官克隆,干细胞移植(从细胞→组织→器官→临床应用)到移植临床实际应用尚需经历漫长的道路,因此,21世纪最初的10～15年,器官移植领域依然是免疫抑制为主的时代,但免疫抑制的发展引入了新概念,新趋势。新一代免疫抑制剂使早期移植器官失功的危险性降到最低限度,但同种肾移植长期存活的改善并不乐观。慢性移植肾失功已经成为影响肾脏移植长期存活的最主要因素。此外,移植受者的感染,心血管疾病,免疫抑制剂尤其是calcineurin抑制剂长期应用造成的肝,肾毒性,移植肾血移植肾血管病变及肝功能严重受损,移植后恶性肿瘤的发生等诸多问题,给免疫抑制剂的调控提出了新的课题及要求。未来免疫抑制剂研究与应用的趋势:(1)免疫抑制须建立在对免疫应答的充分理解基础上;(2)尽管许多新型免疫抑制剂在细胞内靶分子作用点的不断完善能产生淋巴细胞特异性免疫抑制作用,而无特异的毒副作用,但免疫抑制的最终目的依然是应当诱导产生/建立供者特异性耐受状态;(3)新型免疫抑制剂应同时保留宿主对病毒、真菌、肿瘤等抗原的免疫反应功能。皮质激素撤除,CNIs的减?