骨髓间充质干细胞移植和动员对重症急性胰腺炎大鼠肝肾细胞凋亡的保护作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植和干细胞动员对重症急性胰腺炎大鼠肝肾细胞凋亡的保护作用。方法腹腔注射L-精氨酸制备大鼠SAP模型,随机分为假手术组、模型组、骨髓干细胞移植(mesenchymal stem cells,MSC)组、重组人粒细胞集落刺激因子组(G-CSF)及MSC+G-CSF组(n=48),各组再按术后不同观察时间段分为12、24、48、72h亚组(n=12)。MSC组造模后6h经股静脉注入自体骨髓间充质干细胞1.2ml,G-CSF组造模前连续3天皮下注入G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组则联合应用,假手术组仅腹腔注射等体积生理盐水。在术后相应时间点观察各组大鼠的死亡率,肝肾脏组织的病理变化,比较Bax、Bcl-2蛋白水平和细胞凋亡指数差异。结果各治疗组48h前未见死亡,72h死亡率与模型组比较无显著差异(P>0.05);肝脏、肾脏病理变化均较模型组减轻;治疗组各时间点肝肾细胞Bax表达较模型组下调,Bcl-2蛋白上调,凋亡指数较模型组有明显下降。MSC+G-CSF组24h点后Bax含量,48h、72h点Bcl-2含量,24h/48h点后细胞凋亡指数与MSC组和G-CSF组比较差异显著(P<0.05),MSC组和G-CSF组各时间比较无显著差异(P>0.05)。结论联合自体骨髓MSC移植与动员能有效抑制重症急性胰腺炎时肝脏和肾脏的细胞凋亡。     

地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠多脏器损伤的保护作用

目的观察地塞米松对重症急性胰腺炎多脏器（胰腺、肺、肾、肝）损伤大鼠的保护作用。方法采用改良Aho法制备SAP大鼠模型,设模型组、地塞米松治疗组、假手术组。各组分别于术后3h,6h,12h观察存活率,多脏器大体及光镜下病理变化。结果模型组和地塞米松治疗组在各时点存活率无明显差异（P〉0．05）。多脏器病理评分不同时间点模型组和治疗组均明显大于假手术组（P〈0.001,P〈0．05）,治疗组不同程度小于模型组（P〈0.05,P〈0．01）。结论地塞米松能够减轻SAP大鼠胰腺、肺、肾及肝脏的损伤,对SAP大鼠多脏器损伤具有保护作用。     

骨髓干细胞移植加动员在重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜细胞凋亡中的调节作用

目的探讨骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜细胞凋亡的保护机制。方法 240只SAP大鼠分为对照组、SAP组、干细胞组、动员组及联合组,各组再平分为术后12、24、48、72h组。干细胞动员组用G-CSF液动员3天,干细胞组一次性静脉注射MSC液,联合组动员加注射MSC。记录大鼠的病死率,肠黏膜上皮细胞的Chiu评分,凋亡蛋白Bax、Bcl-2基因水平,细胞凋亡指数AI,比较联合治疗效果。结果各组72h病死率差异不显著(P>0.05);治疗组肠黏膜上皮损伤程度较轻,联合组48h后Chiu病理评分与单独治疗组比较差异显著(P<0.05);治疗组AI及Bax蛋白水平随时间延长较SAP组下调,Bcl-2蛋白水平上调,联合组与干细胞组、动员组比较差异显著(P<0.05),而动员组与干细胞组之间并无显著差异(P>0.05)。结论 MSC静脉移植与动员能抑制肠黏膜上皮细胞过度凋亡,维持肠黏膜屏障完整性,能有效减轻重症急性胰腺炎小肠黏膜的损伤,联合治疗效果优于单独治疗。     

自体骨髓间充质干细胞移植加动员在重症急性胰腺炎大鼠胰腺保护中的作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植和干细胞动员对重症急性胰腺炎大鼠胰腺的保护作用。方法腹腔注射L-精氨酸制备大鼠SAP模型,随机分为假手术组、模型组、骨髓干细胞移植组(MSC)、重组人粒细胞集落刺激因子组(G-CSF)及MSC+G-CSF组(n=48),各组再按术后不同观察时间段分为12、24、48、72h亚组(n=12)。MSC组造模后6h经股静脉注入自体骨髓间充质干细胞1.2ml,G-CSF组造模前连续3天皮下注入G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组则联合应用,假手术组仅腹腔注射等体积生理盐水。在术后相应时间点观察各组大鼠的死亡率,观察胰腺病理改变并评分,测定Bax蛋白水平和细胞凋亡指数,检测血清中TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量,用方差分析比较各治疗组间的指标差异。结果各治疗组48h前未见死亡,72h死亡率与模型组比较无显著差异(P>0.05);胰腺病理变化较模型组减轻;治疗组各时间点Bax蛋白水平和凋亡指数均较模型组增高(P<0.05),MSC+G-CSF组48、72h凋亡指数及24、48,72h Bax蛋白含量与MSC和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);各治疗组血清TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量24h/48h后较模型组明显降低(P<0.05),MSC+G-CSF组48h/72h各指标与MSC组和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);MSC组与G-CSF组各项指标比较均无显著性差异(P>0.05)。结论联合自体骨髓MSC移植与动员能有效保护重症急性胰腺炎早期大鼠胰腺的损伤,可能与MSC的抗炎症及促进胰腺腺泡细胞凋亡等机制有关。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑梗死的治疗作用

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血性脑损伤的保护和修复作用,探讨不同时间点移植BMSCs对大鼠脑梗死治疗效果的差异. 方法 建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,在MCAO术后3、6、12、24、72 h这5个时间点经尾静脉移植BMSCs到脑梗死大鼠,并与PBS移植组和空白对照组进行脑梗死体积和神经损伤严重程度评分(NSS)比较. 结果 MCAO术后28 d,TTC染色显示:与PBS移植组和空白对照组比较,BMSCs移植组的脑梗死体积明显减小(P＜0.05);随着细胞移植时间推后,梗死体积逐渐增大,BMSCs 3、6、12、24、72 h移植组脑梗死体积分别为(40±27)、(80±25) 、(123±21)、(161±19)和(202±27) mm3.BMSCs移植组大鼠NSS明显低于PBS移植组和空白对照组(P＜0.05),并且BMSCs移植越早,NSS越低. 结论 在MCAO术后3～72 h移植BMSCs对大鼠脑梗死都有治疗效果,并且移植越早,治疗效果越好.     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑出血实验研究

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植后,对大鼠脑出血模型脑组织损伤的修复作用.方法 制备大鼠脑出血模型,随机分为两组,实验组在脑出血部位附近注入MSCs,对照组注入生理盐水.采用Menzies量表进行神经功能缺损评分.应用组织学检查,观察脑损伤部位的病理变化.结果...     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑梗死的治疗作用

目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血性脑损伤的保护和修复作用,探讨不同时间点移植BMSCs对大鼠脑梗死治疗效果的差异。方法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,在MCAO术后3、6、12、24、72 h这5个时间点经尾静脉移植BMSCs到脑梗死大鼠,并与PBS移植组和空白对照组进行脑梗死体积和神经损伤严重程度评分(NSS)比较。结果MCAO术后28 d,TTC染色显示:与PBS移植组和空白对照组比较,BMSCs移植组的脑梗死体积明显减小(P<0.05);随着细胞移植时间推后,梗死体积逐渐增大,BMSCs 3、6、12、24、72 h移植组脑梗死体积分别为(40±27)、(80±25)、(123±21)、(161±19)和(202±27)mm3。BMSCs移植组大鼠NSS明显低于PBS移植组和空白对照组(P<0.05),并且BMSCs移植越早,NSS越低。结论在MCAO术后3~72 h移植BMSCs对大鼠脑梗死都有治疗效果,并且移植越早,治疗效果越好。     

不同途径羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑外伤

目的:通过不同途径移植羊膜间充质干细胞治疗脑损伤大鼠,比较脑损伤大鼠行为学的改善,为脑损伤治疗选择有效的移植途径.方法:制作80只Wistar大鼠脑损伤模型,分为对照组与治疗组.对照组为单纯脑损伤大鼠,共20只;治疗组分为尾静脉移植组(A组)、侧脑室移植组(B组)、脑损伤区移植组(C组),每组20只,均给与植入人羊膜间充质干细胞,采用NSS评分法评定治疗效果.结果:脑损伤区移植组大鼠行为学改善与其他各组相比,差异有统计学意义(P<0.05);侧脑室移植组分别与尾静脉移植组及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);而尾静脉移植组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:脑损伤区移植羊膜间充质干细胞是治疗脑损伤大鼠的有效途径.     

骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠胰腺氧化应激损伤的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）大鼠胰腺氧化应激损伤的影响。方法 应用4～6周龄雄性SD大鼠常规方法提取、培养、鉴定BMSCs。6～8周龄SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、移植组、每组20只。模型组逆行胆管注射牛磺胆酸钠制备SAP动物模型,移植组在造模成功后6h尾静脉注射BMSCs,对照组注射等量PBS。3d后提取胰腺组织和血清,检测胰腺组织丙二醛、超氧化物岐化酶、过氧化氢酶和活性氧簇水平,分别检测血中炎症因子水平和淀粉酶活性,通过病理评分评估胰腺的损伤。结果 与对照组和假手术组相比,模型组的病理评分、血淀粉酶、MDA和ROS水平明显增高（P＜0.01）,CAT和SOD活性降低（均P＜0.01）。经BMSCs治疗后,病理评分、血清淀粉酶、MDA和ROS水平均较SAP模型组降低（均P＜0.05）,SOD和CAT活性明显增高（均P＜0.05）。结论 BMSC能明显改善SAP大鼠胰腺氧化应激损伤。     

体外诱导骨髓间充质干细胞分化移植治疗脱髓鞘大鼠的实验研究

目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化移植治疗脱髓鞘大鼠疗效.方法:选择50只成年雄性大鼠,随机分五组,每组10只,分别为对照组、模型组、治疗组A(0.02μl/g),组B(0.04μl/g),组C(0.08μl/g).除对照组外,其余四组按脊髓匀浆与弗氏完全佐剂混合为抗原致敏DA大鼠EAE动物模型造模.骨髓间充质干细胞在体外诱导分化为少突胶质细胞,按不同剂量注射治疗,模型组注射生理盐水.移植后,大鼠培养1、4周后每组观察BBB评分和电生理传导功能.结果:与对照组比较,模型组BBB评分降低,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组比较,治疗组各组BBB评分有提高,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组电生理评分(SSEPsN1、MEPs N1波峰潜时、SSEPsN1、MEPs N1波幅)比较,3个治疗组SSEPsN1、MEPs N1波峰潜时下降,SSEPsN1、MEPs N1波幅升高,差异有统计学意义(P<0.05),并体现出剂量依赖性.结论:体外诱导骨髓间充质干细胞分化移植治疗脱髓鞘大鼠效果较好,为临床研究提供科学依据.     

静脉移植和动员骨髓间充质干细胞对胰腺炎肝肾功能损害的保护作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞静脉移植和骨髓干细胞动员在重症急性胰腺炎肝肾功能损害中的作用及可能机制。方法制备SAP大鼠模型240只,随机平分为对照组、SAP模型组、MSC组、G-CSF组和MSC+G-CSF组,各组术后再平分为12、24、48、72h组。MSC组在SAP模型6h后注射MSC 1.2ml,G-CSF组在SAP前3天每天预注射G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组联合使用G-CSF和MSC方法,对照组注射等量NS。比较各组病死率,观察肝脏和肾脏大体及镜下病理改变,比较血清肝肾功能指标ALT、AST、Bun、Cr、LDH和炎症因子TNF-α、IL-6、CRP含量,比较肝肾组织细胞凋亡指数。结果各组大鼠均存活超过48、72h病死率与SAP组比较差异无显著;肝、肾组织大体及镜下病理变化均轻于SAP模型组;治疗组血清肝肾功能指标,炎症细胞因子含量较SAP模型组不同程度减低,其中MSC+G-CSF组部分指标与单独治疗组比较有显著差异(P<0.05),细胞凋亡指数与单独治疗组比较有显著差异(P<0.05),但MSC与G-CSF组比较差异无统计学意义。结论静脉移植MSC和G-CSF骨髓动员均能有效保护重症急性胰腺炎时肝肾损害,其中联合治疗效果最佳,其中对炎症反应及细胞凋亡的调控机制存在。     

基因联合骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭

各种心脏疾病发生后,因为心肌细胞增殖能力极低,坏死心肌有纤维组织替代,最终导致心力衰竭。细胞移植或基因治疗是指通过某种方式,使具有高度复制和高度分化能力的细胞群体或基因到达病变的心肌,在适宜的条件下,再生出新的心肌和血管,改善心肌血液供应和心功能。细胞移植合并基因治疗可能是此领域的革命性进展。尽管机制不详且仍有许多问题尚待解决,但仍然是一种很有前景的治疗手段。     

骨髓间充质干细胞移植对心衰大鼠心脏功能的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心力衰竭大鼠心功能的影响。方法建立心衰大鼠模型,获取大鼠骨髓,随机分为两组:细胞移植组心肌内注射MSCs,培养液组心肌内注射细胞培养液,另取正常大鼠10只作为对照组。对3组大鼠移植前及移植后4周进行心功能测定。处死动物,心脏切片进行组织病理学检查。结果移植4周后,细胞移植组的心功能明显改善(P<0.05)。细胞移植组心肌组织内可见MSCs,与培养液组比较细胞移植组心肌纤维化明显改善。结论 MSCs移植可以改善心衰大鼠的心脏功能,其机制可能为改善心肌纤维化。     

细胞移植治疗多发性硬化的研究进展

多发性硬化(MS)是以中枢神经系统白质脱髓鞘病变为特点,导致神经系统功能缺失的疾病,发病年龄多在20～40岁,女性多见,具有高致残率、高复发性的特点。动物实验中,将神经系统参与髓鞘形成的细胞植入脱髓鞘部位,取得了一定的治疗效果。用于移植的细胞主要有少突胶质前体细胞、神经膜细胞、嗅鞘细胞、骨髓基质细胞等。目前,应用细胞移植治疗脱髓鞘疾病仍存在诸多不足。     

大承气汤加味治疗急性重症胰腺炎的临床观察

目的:观察大承气汤加味治疗急性重症胰腺炎(SAP)的治疗效果。方法:将90例SAP患者按完全随机法分成大承气汤加味组47例,对照组43例,对照组给予禁食、胃肠减压、应用抑制胰腺外分泌及抑制胰酶活性制剂、广谱抗生素和支持对症处理等常规治疗,大承气汤加味组在常规治疗的基础上加用大承气汤加味治疗。观察两组患者的胃肠减压、血淀粉酶恢复正常和住院时间、并发症发生率及病死率。结果:大承气汤加味组患者在胃肠减压、血淀粉酶恢复正常和住院时间方面均短于对照组(P<0.05或<0.01)。结论:SAP患者在进行常规治疗的同时应用大承气汤加味可改善肠道功能,缩短病程,减少并发症发生率,改善患者的预后。     

川芎嗪对重症急性胰腺炎大鼠腹腔器官血流的影响

目的 研究川芎嗪(telramethylpyrazine,TMP)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠腹腔器官血流,特别是胰腺血流的影响及其作用机制.方法 将大鼠随机分成川芎嗪治疗组(TMP),重症急性胰腺炎组(SAP)和正常对照组.各组分别有数只大鼠于术后12h、24 h处死,观察血浆淀粉酶的变化.另外,运用多普勒超卢测定胰腺局部动脉(相当于胰头、体交界处)、门静脉血流、脾动脉及肠系膜上动脉血流.结果 TMP组的血浆淀粉酶明显低于SAP组(P<0.01).SAP时,大鼠胰腺局动动脉血流明显下降.且于术后12h时已呈明显下降(与对照组比较P<0.01).随胰腺炎的病程进展,胰腺局部血流的下降也更趋严重(24h与12h比较,P<0.05).与此同时,门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流量也行下降(与对照组比较,P<0.01).应用海风藤酮能改善胰腺、门静脉、脾动脉及肠系膜上动脉的血流量(与SAP组比较,P<0.01).结论 TMP能促使SAP大鼠胰腺血流量增加.