滇南小耳猪生长激素基因多态性研究

目的 探讨滇南小耳猪生长激素基因多态性,为滇南小耳猪的选育提供分子标记辅助选择的依据.方法 采用PCR-RFLP方法对滇南小耳猪GH基因的Apa Ⅰ酶切位点多态性进行了分析.结果 检测到两种基因型AA和AB,AB型的频率高子AA型.没有检测到BB基因型个体.等位基因A的基因频率高于等位基因B,等位基因A在群体中占优势.结论 滇南小耳猪群生长激素基因具有较丰富的多态性.     

广西巴马小型猪体外循环建立

目的探讨广西巴马小型猪体外循环建立的方法。方法选用小型猪12头,随机分为两组（n=6）。实验组：在心包外过上腔静脉和下腔静脉的阻断带建立体外循环;对照组：在心包内过上腔静脉和下腔静脉的阻断带建立体外循环。结果两组建立体外循环所需的时间比较有统计学差异（P〈0.05）,实验组所用的时间短;两组的成功率比较无统计学差异。结论改进的广西巴马小型猪体外循环建立方法所需的时间更短,是一种更快捷和安全的方法。     

广西巴马小型猪的选育研究

广西大学王爱德等从1 987年至今历经1 7年,以广西巴马香猪作为原始材料,采用闭锁纯繁近交方式,选育出1 6世代适于实验用的、优异小型猪封闭群品系———广西巴马小型猪。1 987年底笔者从广西巴马县,将巴马香猪2头公、1 4头母作为零世代、原始基础群,引入原广西农学院牧试站内,进行“实验用小型猪的选育”的有关研究(国家自然科学基金和广西壮族自治区科委资助项目)。1 994年经项目鉴定专家组同意,将选育的实验用小型猪品系定名为“广西巴马小型猪”(GuangxiBA MAMini Pig) ,简称“巴马小型猪”。选育目标:体型尽量小;两头乌毛色整齐或白…     

广西巴马小型猪和贵州小型香猪的DNA指纹分析

目的　应用DNA指纹分析的方法研究广西巴马小型猪和贵州小型猪的遗传背景。方法　采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记JL 0 2多位点小卫星探针 ,对广西巴马小型猪和贵州小型猪基因组DNA的HinfⅠ或HaeⅢ酶切DNA片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图。结果　广西巴马小型猪大于 2kb的HinfⅠ和HaeⅢ酶切DNA指纹图带数为 11 7和 2 4 5 ;贵州小型猪大于 2kb的HinfⅠ和HaeⅢ酶切DNA指纹图带数则为 15 8和 17 6。另外 ,广西巴马小型猪HinfⅠ和HaeⅢ酶切产生的不同个体DNA指纹的相似系数分别为 0 5 4± 0 0 7和 0 5 5± 0 0 8;而贵州小型猪则分别为 0 5 3± 0 0 4和 0 5 3± 0 0 7。结论　该探针适用于这两种猪的DNA指纹分析 ,不同酶切产生的DNA指纹图带数不同 ,但不同个体间相似系数的分析结果一致。同时说明这两种猪具有相当程度的种质均质性 ,符合封闭群动物的要求     

滇南小耳猪与云南野猪SLA-DQA基因的多态性比较

目的 分析滇南小耳猪与云南野猪（S.s.silvianus） SLA-DQA基因不同酶切位点的基因型多态性以及等位基因的多态性,检验这些酶切位点上的基因频率是否达到Hardy-Weinberg平衡.方法 采用EcoRⅠ和AluⅠ两种限制性内切酶对滇南小耳猪和云南野猪SLA-DQA第1和第2内含子部分序列以及完整的外显子2进行PCR-RFLP分析.结果 在EcoRⅠ与AluⅠ酶切位点上均得到3种基因型,在这两个酶切位点上版纳系有9种组合基因型,明光系有8种组合基因型,而野猪仅发现4种组合基因型.经x2适合性检验表明：滇南小耳猪SLA-DQA外显子2在EcoRⅠ与Alu Ⅰ酶切位点上均未达到Hardy-Weinberg平衡状态（P＜0.05）,但明光系和云南野猪在两酶切位点均达到了平衡状态（P＞0.05）.结论 滇南小耳猪SLA-DQA在EcoRⅠ与AluⅠ酶切位点均表现为中度多态,云南野猪在EcoRⅠ为中度多态,在Alu Ⅰ酶切位点则为低度多态;滇南小耳猪的HardyWeinberg不平衡主要来自版纳系小耳猪.     

滇南小耳猪血液生理生化部分指标测定

目的测定正常3～6月龄和8～12月龄封闭群滇南小耳猪血液生理与生化各项指标.方法常规方法检测滇南小耳猪18项血液生理指标、30项血液生化指标,统计各指标间的性别差异及两年龄段同类指标的对比分析.结果性别间绝大多数血液生理与生化指标差异不显著.3～6月龄血液生理与生化雌雄间比较,各指标差异均无统计学意义（P〉0.05）;8～12月龄血液生理雌、雄间HGB、RBC、HCT、MONO%和MONO有差异（P〈0.05）,雌雄间血液生化ALT、TBA、CHO、TG、LDL-C、APOB和CL有差异（P〈0.05）;两个年龄组雌雄合并相比,血液生理WBC、PLT、MPV、LY、MCHC、NEUT%和NEUT等7项指标有差异（P〈0.05）,生化指标ALB、UREA、HDL-C、GLU、APOA和FE等6项指标差异有统计学意义（P〈0.05）.结论滇南小耳猪两个年龄段之间以及雌、雄之间部分血液生理生化指标存在明显差异可为滇南小耳猪的标准化研究和相关实验研究提供基础资料和数据.     

滇南小耳猪原位心肺联合移植过程的手术配合

目的探讨滇南小耳猪同种原位心肺联合移植的手术配合方法。方法 2009年1月至2010年3月对14只实验用封闭群滇南小耳猪进行心肺联合移植的实验研究。结果手术过程顺利,供体心肺保护良好,7例手术成功,6例成功复跳,获得短期存活,达到研究目的。结论各组人员进行积极有效的手术配合是成功进行小耳猪原位心肺联合移植手术的重要因素。     

滇南小耳猪精液的直接冷冻保存

目的建立滇南小耳猪精液冷冻保存方法,加速云南省特有小型猪种的小型化选育。方法利用脉冲电刺激模式诱导公猪输精管自助收缩排精。利用直接冷冻新技术(DFM)研究不同冷冻方案对精子的运动度、精子顶体完整性和体内授精胚胎发育能力的影响。结果在直接冷冻方法中,3%甘油防冻剂的作用下,60 s植冰时间和1.5 mm/s的冷冻降温参数对精子运动度保护良好,精子运动复苏率达到61.7%。但是,3%乙二醇虽然与甘油一样对精子的顶体完整性都有很好的保护作用,对精子运动度保护能力较差。此外,3%甘油、60 s植冰、1.5mm/s冷冻速度的直接冷冻的冻精解冻,移植到超数排卵的母猪子宫颈口实施人工授精,获得卵的受精和胚胎发育潜能尚可。结论玻璃管直接冷冻可以完成滇南小耳猪精子的冷冻保存。     

初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育的研究

目的对初情期前云南滇南小耳猪超数排卵和原核期胚胎体外发育进行研究．方法对8头初情期前云南滇南小耳猪注射1000IUPMSG和500IUhCG诱导超数排卵,以自然交配和人工授精技术、手术或离体冲卵技术回收原核期胚胎,并进行胚胎体外培养研究．结果超排的激素处理方法可成功诱导超生理数量的卵子发育和排卵及受精,最多可得到31枚受精卵．受精卵的囊胚率可达到87．5％．经过比较研究,人工授精可能优于自然交配的授精方式;雌激素可作为初情期前小母猪的超排成败的重要标志．但是,手术法冲卵的技术较离体冲卵的还很低．结论初情期云南滇南小耳猪可用于体内胚胎生产,其原核期胚胎体外发育具有比较高的的发育潜能．     

广西巴马小型猪无气管插管全身麻醉模型建立的初探

目的建立广西巴马小型猪无气管插管的全身麻醉动物模型。方法选用8头健康广西巴马小型猪,先耳后肌肉注射地西泮10mg和氯胺酮0．1g行基础麻醉,建立静脉通道后使用氯胺酮和地西泮间断静脉注射全身麻醉。行泌尿系统手术时根据心率、睫毛反射和疼痛反应调整麻醉深度。结果该方法麻醉效果理想,试验动物无一头死亡且恢复良好。结论使用氯胺酮和地西泮对腹部手术的广西巴马小型猪进行问断静脉麻醉的方法效果理想,且安全、简易,值得借鉴。     

西藏小型猪线粒体D-loop区及微卫星多态性的遗传学分析

目的通过分析西藏小型猪线粒体控制区(D-loop区)及微卫星位点的遗传多态性,检测西藏小型猪的遗传背景,从而为其作为实验动物提供分子生物学方面的可靠依据。方法利用特异性引物对西藏小型猪的线粒体D-loop区及10个具有多态性的微卫星位点进行扩增,割胶纯化并对线粒体D-loop区进行测序,另外采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法分离微卫星位点的等位基因。结果西藏小型猪线粒体D-loop区全序列没有多态性,微卫星位点则具有高度的遗传多态性和杂合度,分别为0.584和0.573。结论西藏小型猪线粒体基因组无多态性,证明其在母系进化和遗传上与其他猪种较为一致,本实验所用的西藏小型猪生长于一个封闭的环境,导致其微卫星位点遗传多态性的中低度水平。     

猪线粒体DNA D-loop PCR的建立

建立猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ５‘端和３’端ＰＣＲ扩增方法。方法：设计三对引物,应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪,广西巴马小型猪,贵州小型香猪,大约克夏猪,荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中ｍｔＮＤＡ Ｄ－ｌｏｏｐ,５‘端进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,结果：三对引物扩增带清晰,与已知片段长度一致。结论：引物设计合理,扩增方法可行,为进一步应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＰＲＬＰ,５’端ＳＳＰ     

AFLP技术用于巴马小型猪遗传多样性的研究

目的 评价巴马小型猪的遗传多样性。方法 用与接头对应的10条AFLP引物，扩增经PstⅠ酶切且与接头连接的17头巴马小型猪的基因组DNA，用从Internet网上下载的软件RAPD istance package version 1．04对结果进行分析。结果 共获得104个AFLP标记，单引物得到的标记数在3～20个之间，巴马小型猪群体内的相似系数为0．903(0．791～0．982)。其多态性位点的比率为29．8％；总的等位基因数为136个，平均每个位点的等位基因数为1．31个，基因型数为119，平均每个位点的基因型数为1．41。结论 该实验为评价巴马小型猪遗传多样性的多寡提供了相关的参数，准确评价尚待和普通猪对比研究后确定。     

6个近交系小鼠线粒体DNA D-Loop区PCR-RFLP分析

分析Ｔ７３９等６个近交系小鼠线粒体ＤＮＡＤ－Ｌｏｏｐ区的多态性,探讨近交系小鼠的遗传监测方法。方法：ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术,即ＰＣＲ技术结合限制性片段长度多态分析。结果Ｄ－Ｌｏｏｐ片段经ＨａｅⅢ、ＨｉｎｆⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＩＮＤⅢ、ＨｐａⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＡｐａⅠ、ＮｄｅⅡ、ＸｈｏⅠ、ＸｂａⅠ内切酶消化后,Ｔ７３９、ＴＡ２、６１５、ＢＡＬＢ／Ｃ、Ｃ３Ｈ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠表现出完全相同的酶切栈局,未发     

人类子宫内膜癌与mtDNA基因单倍群的相关性研究

目的探讨mtDNA单倍群与子宫内膜癌的相关性。方法选取2010年1月～2012年10月间于我院就诊的子宫内膜癌患者32例作为观察组,另外选取同期在我院进行健康体检与其匹配的本地女性居民32名作为对照组。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法确定mtDNA单倍群,通过聚合酶链式反应-高温连接酶检测反应（PCR-LDR）的方法检测基因型与子宫内膜癌的相关性。结果观察组中有16例39个基因位点发生突变,其中mtDNA基因多态性改变有5例,对照组则有4例13个基因位点发生突变,mtDNA基因多态性改变有1例。两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。并对位于mtDNA中D-loop区可能具有功能性的基因多态位点73 G/A、16126 C/T、16189 T/C、16391 G/A和14783 A/G等进行检测。结论为确定子宫内膜癌高危人群开辟新的途径,为子宫内膜癌的预防和诊断提供新的科学依据。     

Single Nucleotide Polymorphisms （SNPs） and Variable Number Tandem Repeats （VNTRs） in mtDNA D-loop and CO Ⅱ- tRNA^Lys Intergenic Region with PCOS

Objective To explore the relationships of variations in D-loop and COII-tRNA Lys intergenic region in mtDNA with PCOS. Methods A total of 77 PCOS and 45 non-PCOS patients were enrolled, whose D-loop and COII-tRNA Lys intergenic region in mtDNA were amplified and sequenced; sexual hormone assay, oral glucose tolerance test (OGTT) and insulin releasing test were carried out. Then variations found in mtDNA were compared between the two groups, the correlations between variations and clinical indexes were analyzed in all subjects. Results Nucleotide variations found in mtDNA were not different between the two groups, but the mutation of 16 094T/C was found associated with the serum levels of T and fasting insulin; (303-317)Cn TCn associated with the serum levels of A and LH; 195C/T with A level and 491T/C with LH level; (8 272-8 289)(ACCCCCTCT)n was associated with the serum level of 1 h glucose. Conclusion Noncoding region mutations in mtDNA perhaps associate with PCOS clinical symptoms and involve in PCOS development.     

洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄

目的研究洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄特点。方法以抗动脉粥样硬化药物洛伐他汀为模型药,选择健康6月龄雄性巴马香猪为实验对象,经灌胃途径给药(45 mg/kg或2.4 mg/kg),采用RP-HPLC方法测定各组织及体液中的药物浓度,并对其分布和排泄过程进行研究。血浆蛋白结合率通过透析法测定。结果给药后,洛伐他汀快速分布到贲门、胃、小肠、肝、大肠、胰、前列腺、肺、肾、心、肌肉、睾丸、肾上腺、膀胱、脑和脾。以胃、肠、肝组织中药物浓度较高。单次给药4h后,贲门、胃、小肠、肝、心、肾上腺、膀胱药物浓度同给药后1h相比略有下降,其余组织均高于1 h。血浆蛋白结合率为95%以上,同正常人血浆非常一致。96 h尿中累积排泄量为给药量的7.4%,原形药经胆汁及粪排泄量达到80%以上。结论洛伐他汀在巴马香猪体内同人的分布排泄和血浆蛋白结合率相似,均在组织中广泛分布,血浆结合率达到95%以上,主要经胆汁和粪排泄。     

洛伐他汀在巴马香猪体内的绝对生物利用度

遗传学控制在非人灵长类动物人工繁殖种群诸多管理环节具有至关重要的作用。本文紧密围绕遗传学控制的目标,从非人灵长类动物家系建立、家系确认,数量遗传性状及遗传多态性检测等方面综述了遗传学控制的实施要素。对非人灵长类动物种群实行遗传学控制,对于维持种群的遗传多样性,提高动物长期的生存力和繁殖率,满足医学生物学实验需要具有现实意义。     

制备广西巴马小型猪无气管插管模型麻醉用药的比较

目的 比较地西泮或咪达唑仑联合氯胺酮对广西巴马小型猪无气管插管模型麻醉效果及安全性.方法 将20头广西巴马小型猪随机分为地西泮组和咪达唑仑组各10头.地西泮组采用地西泮10 mg和氯胺酮0.1 g诱导麻醉,地西泮0.45 mg·kg-1·h-1、氯胺酮4.5 mg·kg-1·h-1静脉输入维持麻醉.咪达唑仑组采用咪达唑...