复合应用紫杉醇和顺铂对胃癌细胞SGC放疗的增敏作用

目的观察紫杉醇、顺铂及两者联合应用加放疗对胃癌细胞株SGC的细胞增殖与细胞周期的影响。方法将体外培养的胃癌细胞株SGC种于96孔板。实验分为P1组(紫杉醇0.1μg/ml)、P2组(紫杉醇0.01μg/ml)、C1组(顺铂0.1μg/ml)、C2组(顺铂0.01μg/ml)、PC1组(紫杉醇0.1μg/ml+顺铂0.1μg/ml)、PC2组(紫杉醇0.01μg/ml+顺铂0.01μg/ml)。无菌环境下实施4Gy照射。采用MTT法观察SGC细胞增殖抑制率;以流式细胞技术检测细胞凋亡及周期变化。结果 PC1组和PC2组胃癌SGC细胞抑制率分别为(76.6±7.7)%和(68.3±2.6)%,明显高于P1组的(46.7±4.5)%、P2组的(39.2±5.3)%、C1组的(41.4±0.2)%和C2组的(25.6±1.3)%(P<0.01)。联合应用紫杉醇和顺铂加放疗组的胃癌SGC细胞主要阻滞在G2/M期;而对照组的多数细胞处于G1期(P<0.05)。结论紫杉醇复合顺铂密集化疗对离体胃癌细胞放疗有明显增敏作用。     

4-HPR、顺铂对宫颈癌HeLa细胞系凋亡的影响

目的探讨4-羟苯基维胺脂（N-4-hydroxyphenyl retinode，4-HPR），顺铂联合对HeLa细胞系凋亡的影响。方法用四甲基偶氮唑蓝比色法（measurement of trititaed thymidine incorporation，MTT）观察4-HPR、顺铂对HeLa细胞的生长抑制情况；电镜观察4-HPR、顺铂对HeLa细胞超微结构的影响；流式细胞仪检测单用4-HPR、顺铂以及两者联合使用时HeLa细胞凋亡率和细胞周期变化。结果4-HPR，顺铂均可引起HeLa细胞凋亡；二者联合作用时细胞凋亡率增加。结论4-HPR，顺铂均可诱导肿瘤细胞凋亡，二者联合作用时细胞的凋亡率高。     

三氧化二砷与顺铂联合诱导人卵巢癌HO8910细胞凋亡的初步研究

目的探讨三氧化二砷与顺铂联合对体外培养卵巢癌细胞株HO8910细胞增殖、细胞周期调控及细胞凋亡影响。方法用三氧化二砷与顺铂联合处理HO8910细胞,采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解,以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化。结果在三氧化二砷与顺铂联合作用下,HO8910细胞呈凋亡改变,DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征。细胞凋亡的同时,细胞周期发生特定的改变。结论三氧化二砷与顺铂联合能抑制卵巢癌细胞增殖,能诱导卵巢癌细胞凋亡。     

顺铂联合姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的：研究应用顺铂联合姜黄素对诱导胃癌细胞HGC27凋亡的影响及机制。方法：用CCK8法检测单独或联合使用不同剂量顺铂或/和姜黄素对胃癌细胞HGC27增殖的影响;用Hochest33258染色检测联合应用顺铂和姜黄素诱导胃癌细胞HGC27凋亡的发生率。用Western blot检测细胞凋亡相关分子PARP1蛋白剪切体和DNA损伤蛋白p-γH2AX的表达变化。结果：单用顺铂可以呈剂量依赖性地促进HGC27细胞凋亡。5μmol·L-1姜黄素对HGC27细胞增殖无明显作用,10μmol·L-1姜黄素反而轻微促进HGC27细胞增殖。20、40、80μmol·L-1姜黄素对HGC27细胞的增殖抑制率分别为10.97%、15.15%、32.93%。分析联合用药组：5μmol·L-1姜黄素联合顺铂组反而促进HGC27细胞生长;10μmol·L-1姜黄素联合不同剂量顺铂和单用顺铂组比较,组间抑制率没有统计学差异（P>0.05）。20μmol·L-1姜黄素联合4、6μmol·L-1顺铂有明显的促进细胞的凋亡作用,抑制率分别为70.68%、87.30%。 Hochest33258染色结果显示,联合用药组细胞凋亡小体和坏死细胞明显增多。 Western blot结果显示,在联合用药组HGC27细胞PARP1剪切体蛋白和p-γH2AX蛋白表达明显增加。结论：顺铂联合姜黄素可以促进胃癌细胞HGC27的凋亡,机制是姜黄素可以加重顺铂引起的细胞DNA双链损伤。     

MiR-182对乳腺癌细胞顺铂耐药的相关性研究

目的 探讨miR-182与乳腺癌细胞顺铂耐药性的关系。方法 MTT法检测miR-182对顺铂杀伤乳腺癌细胞能力的影响。利用生物信息学、定量PCR及western blot法验证miR-182是否能调节乳腺癌细胞BNIP3的表达。运用JC-1染色、Annexin V染色及western blot法研究miR-182影响顺铂疗效的信号通路。结果 miR-182模拟物可减弱顺铂对MCF-7细胞的杀伤活性,而miR-182抑制剂则增强顺铂对MCF-7细胞的杀伤活性。定量PCR及western blot实验表明miR-182的靶基因可能为BNIP3。miR-182抑制剂联合顺铂可引起MCF-7细胞线粒体膜电位显著下降并诱导caspase-3的活化和凋亡的发生,转染BNIP3 siRNA后miR-182抑制剂联合顺铂对MCF-7细胞的凋亡诱导效应显著降低。结论 MiR-182在乳腺癌中通过下调BNIP3的表达影响顺铂对乳腺癌细胞的杀伤活性。     

透骨草提取物通过Bcl-2和Bax蛋白诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡

目的探讨Bax和Bcl-2蛋白在透骨草提取物诱导人乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡过程中的作用,为透骨草提取物治疗乳腺癌提供实验依据。方法采用吖啶橙染色方法透骨草提取物对MCF-7细胞形态的影响;采用流式细胞术检测透骨草提取物对MCF-7细胞凋亡率的影响;采用蛋白印迹法检测MCF-7细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 30.5μg/ml透骨草提取物可诱导MCF-7细胞胞体皱缩,胞核固缩、呈新月状且边集,出现凋亡小体。30.5μg/ml透骨草提取物处理的MCF-7细胞凋亡率（22.3±1.2）%明显高于对照组（3.2±1.0）%（P〈0.05）。30.5μg/ml透骨草提取物可使MCF-7细胞Bcl-2蛋白表达明显低于对照组（P〈0.05）,而Bax蛋白表达明显高于对照组（P〈0.05）。结论透骨草提取物对MCF-7细胞有诱导凋亡作用,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达有关。     

马蔺子素联合化疗药对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的研究马蔺子素联合化疗药对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法测定马蔺子素及其联合顺铂、多柔比星、5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞SMMC-7721、人结肠癌细胞LOVO、人肺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-823和人乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用。流式细胞仪检测马蔺子素(0.5μg/mL)组、顺铂(5μg/m L)组、多柔比星(0.5μg/mL)组、5-氟尿嘧啶(500μg/mL)组、联合用药组(0.5μg/mL马蔺子素+5μg/mL顺铂组、0.5μg/mL马蔺子素+0.5μg/mL多柔比星组、0.5μg/mL马蔺子素+500μg/mL 5-氟尿嘧啶组)对A549细胞凋亡和周期变化情况的影响。结果马蔺子素对肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,IC_(50)值分别为10.43、1.94、8.73、3.37、4.89μg/mL。马蔺子素与顺铂、多柔比星、5-氟尿嘧啶联合作用后,均能明显增加后者对A549细胞增殖的抑制作用,二者有明显的协同作用。单用5-氟尿嘧啶、顺铂和多柔比星,A549细胞比例分别在G_0/G_1、S和G_2/M期均显著增加,且与马蔺子素合用后A549细胞比例在相应周期均显著增加(P0.05)。合用组肿瘤细胞凋亡率也显著升高(P0.05)。与对照组比较,顺铂、多柔比星和5-氟尿嘧啶单用及与马蔺子素合用均可显著升高细胞的凋亡率(P0.05),且马蔺子素与顺铂或多柔比星联合用药时,细胞凋亡率显著高于单独使用相应的化疗药(P0.05)。结论马蔺子素联合化疗药能明显抑制肿瘤细胞的增殖,其机制与影响细胞周期调控和诱导细胞凋亡有关。     

大蒜油联合顺铂诱导人腺样囊性癌细胞株ACC-M凋亡

目的探讨大蒜油联合顺铂对人腺样囊性癌细胞株ACC—M细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法采用不同浓度大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂分别处理人腺样囊性癌细胞株ACC—M细胞24、48、72h后,MTT法检测肿瘤细胞体外增殖抑制情况;选取2、8、32μg/mL的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂处理肿瘤细胞4、8h后,流式细胞术分析肿瘤细胞周期分布和凋亡率。结果8、16、32μg／mL大蒜油及2、4、8、16、32μg／mL顺铂、大蒜油联合顺铂作用24、韶、72h对ACC-M细胞均有明显抑制作用,随浓度及时间增加,抑制率呈上升趋势。联合组用药肿瘤细胞抑制率明显高于单一用药组。流式细胞术结果显示,不同浓度的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂作用能使ACC．M细胞发生G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,随浓度增高及作用时间延长,周期分布越明显,凋亡率增高,联合组用药细胞周期阻滞和促凋亡作用明显强于单一用药组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论不同浓度的大蒜油、顺铂、大蒜油联合顺铂均能有效抑制ACC-M细胞生长．阻滞细胞于G2／M期并诱导肿瘤细胞凋亡,大蒜油联合顺铂对ACC—M细胞生长抑制作用明显强于大蒜油、顺铂单独应用。     

化疗药物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的研究

目的观察顺铂(CDDP)、长春新碱(VCR)、平阳霉素(BLM)、顺铂+平阳霉素、顺铂+长春新碱在体外对人宫颈肿瘤细胞的作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法观察药物对Hela细胞的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡变化。结果CDDP、VCR、BLM单用对Hela细胞抑制率和凋亡率均高于联合用药组。各用药组对细胞抑制率均高于凋亡率,仅CDDP组两作用相近。结论CDDP、VCR、BLM能有效抑制Hela细胞生长,联合应用出现拮抗作用。     

脂多糖通过调节iNOS表达影响人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的研究

目的观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制。方法体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组共4组,对照组给予常规不加血清培养基,顺铂组给予10μg/ml顺铂,LPS组给予浓度为1μg/ml的LPS,联合用药组给予10μg/ml顺铂和1μg/ml LPS,均作用24 h。MTT法检测各组细胞活力;蛋白免疫印迹法观察各组iNOS表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;间接免疫荧光法观察各组细胞激活型Caspase-3表达。结果联合用药组细胞活力明显低于顺铂组(P0.05);顺铂组与对照组iNOS表达差异无统计学意义(P0.05),LPS组和联合用药组iNOS表达水平明显高于对照组(P0.05),且联合用药组高于LPS组(P0.05);流式细胞术结果显示联合用药组细胞凋亡率明显高于顺铂组(P0.05),且通过间接免疫荧光法显示联合用药组细胞激活型Caspase-3表达高于顺铂组(P0.05)。结论 LPS能够降低人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性,这可能与其提高SKOV3/DDP细胞内iNOS表达水平有关。     

顺铂诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡作用及其对线粒体膜电位变化的研究

目的研究线粒体膜电位在顺铂诱导胃癌细胞凋亡中的作用机制。方法采用MTT比色法测定顺铂对胃癌SGC7901细胞的生长抑制曲线;将胃癌SGC7901细胞分成对照组及10μg/ml顺铂组处理,用流式细胞仪（FCS）分别检测线粒体膜电位（Δψm）和分析细胞周期变化情况。结果顺铂可明显抑制胃癌细胞增殖。在24h后可见细胞大部分受阻于G1期,且出现了典型的凋亡峰;在10h后线粒体膜电位明显降低。结论顺铂诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的途径可能是通过使线粒体膜通透性的改变,膜电位的下降来而实现的。     

抗肿瘤化合物CENPOANU的体外抗肿瘤活性研究

目的：研究抗肿瘤化合物1-（2-氯乙基）．3．[2．（2-硝基苯氧）乙酰基]-1-亚硝基脲（CENPOANU）的体外抗肿瘤活性及其机制。方法：考察对人乳腺癌细胞（McF-7）、人宫颈癌细胞（HeLa）、小鼠红白血病细胞（MEL）、人恶性胶质瘤细胞（u251）,CEN—POANU和卡莫司汀（BCNU）的半数抑菌浓度（IC。。）;检测0、0．5、1．O、1．5、2．O、4．O倍IC。的CENPOANU作用24、36、48h后MCF．7的增殖抑制率,0、0．5、1．0、1．5、2．O、4．0倍IC50的CENPOANU、BCNU作用48h后MCF．7的增殖抑制率;测定0、10．5、14．O、28．Oramol／LCENPOANU对MCF-7的克隆形成率;观察14．0gmoFLCENPOANU作用O、24、48h后MCF-7的细胞形态变化和凋亡形态,以及作用48h后空白对照组和CENPOANtJ（14．0p．mol／L）组MCF-7的细胞周期分布、增殖指数和凋亡指数（A）。结果：在MCF．7、HeLa、MEL、U251上的ICmCENPOANU分别为（6．9±2．2）、（14．7±3．5）、（7．8±1．2）、（9．6±2．1）gm01／L,BCNU分别为（14．5±2．6）、（12．4±1．5）、（8．8±1．3）、（11．2±1．4）p．mol／L;CENPOANU对MCF一7的生长具有抑制作用,且与浓度和时间呈正相关。与BCNU比较,CENPOANU对MCF．7的生长抑制作用明显增强（P〈0．01）。CENPOANU能明显降低MCF-7的克隆形成率,且与浓度呈正相关（P〈0．05）。与作用0h比较,MCF．7随作用时间延长,可见体积缩小、空泡等凋亡细胞,且细胞数量减少,发生皱缩、脱落等,其中GJM、S期细胞明显减少（P〈0．01）,空白对照组和CENPOANU组MCF-7的增殖指数分剐为92．05％、42．70％,A分别为（1．5±0．1）％、（13．1±1．3）％。结论：CENPOANU主要通过阻滞细胞周期G2／M、S进程干预细胞增殖,并诱导细胞凋亡,且体外抗肿瘤活性优于BCNU。     

Inhibition of mitogen-activated protein kinase kinase enhances apoptosis induced by arsenic trioxide in human breast cancer MCF-7 cells

Arsenic trioxide (As2O3) has recently been used to treat acute promyelocytic leukaemia and has activity in vitro against several solid tumour cell lines where the induction of differentiation and apoptosis are the prime effects. The mechanism of As2O3-induced cell death has yet to be clarified, especially in solid cancers. In the present study, the human breast cancer cell line MCF-7 was examined as a cellular model for As2O3 treatment. The involvement of extracellular signal-regulated kinase (ERK), p38 and c-Jun N-terminal kinase (JNK) was investigated in As2O3-induced cell death. 3. It was found that As2O3 activates the prosurvival mitogen-activated protein kinase kinase (MEK)/ERK pathway in MCF-7 cells, which, conversely, may compromise the efficacy of As2O3. Hence, a combination treatment of As2O3 and MEK inhibitors was investigated to determine whether this treatment could lead to enhanced growth inhibition and apoptosis in MCF-7 cells. 4. Inhibition of MEK/ERK with the pharmacological inhibitors U0126 (10 micromol/L) or PD98059 (20 micromol/L) together with As2O3 (2 and 5 micromol/L) resulted in a significant enhancement of growth inhibition in breast cancer MCF-7 cells as determined by the 3-(4,5-dimethyl-2 thiazoyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay and [Methyl-3H]-thymidine incorporation. Furthermore, the results demonstrated that combined treatment with As2O3 and the MEK1/2 inhibitor U0126 could augment breast cancer MCF-7 cell apoptosis approximately twofold compared with the effects of the two drugs alone, as determined by Hoechst 33258 or annexin V/propidium iodide (PI) staining and flow cytometry. 5. In addition, As2O3 activated p38 in a dose-dependent manner, but had no effect on JNK1/2. Treatment with a p38 inhibitor did not prevent As2O3-induced apoptosis. 6. In conclusion, the results of the present study showed that enhanced apoptosis is detected in breast cancer MCF-7 cells in the presence of As2O3 and an MEK inhibitor, which may be a new promising adjuvant to current breast cancer treatments.     

蛇毒心脏毒素诱导肺癌A549细胞的凋亡机制研究

目的:研究眼镜蛇心脏毒素(CTX)诱导肺癌A549细胞凋亡的机制。方法:MTT法测定CTX体外细胞毒性作用;吉姆萨染色法观察CTX对A549细胞形态学的影响;线粒体膜电位(JC-1)法检测CTX诱导A549细胞后细胞JC-1的变化;流式细胞仪检测CTX对A549细胞凋亡的影响;Western blot法测定细胞色素C、凋亡蛋白酶前体(Procaspase)-3、Procaspase-9的表达;通过S180小鼠肉瘤模型检测CTX体内抗肿瘤活性。结果:CTX作用于A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为0.770μg/ml;0.5、1.0、2.0μg/ml CTX可引起A549细胞明显缩小,在高倍镜下可观察到胞核皱缩,形成染色质边集等形态学改变;流式细胞仪检测到CTX使A549细胞出现凋亡,并且具有量效关系;5μg/ml CTX作用于A549细胞0.5 h可使细胞JC-1降低;胞浆中检测到细胞色素C时,Procaspase-9的含量没有明显变化,随后逐渐减少,CTX诱导细胞凋亡具有时效关系;体内抑瘤实验显示在剂量为0.5、1.0、2.0 mg/kg时CTX对A549细胞有明显的抑制作用。结论:CTX对A549细胞有细胞毒性,可以使线粒体内细胞色素C释放,并激活Procaspase-9和Procaspase-3诱导A549细胞的凋亡。     

托瑞米芬联合顺铂对p53缺失型肺癌细胞株H1299生长抑制作用的研究

目的 探讨托瑞米芬联合顺铂对人肺癌细胞株H1299细胞生长抑制作用及其机制,了解P糖蛋白在H1299细胞中的表达情况.方法 本研究设空白组、对照组(单细胞悬液100μl)、实验组(单细胞悬液100μl+不同药物及浓度),实验组又分为托瑞米芬、顺铂和该2种药物联合组.用四甲基偶氮唑兰比色法检测托瑞米芬及与顺铂联用后H1299细胞的细胞增殖抑制率,分析其细胞周期的变化,检测P糖蛋白在H1299中的表达.结果 托瑞米芬的浓度为20和40 μmol/L时的细胞增殖抑制率分别为(0.307±0.011)％和(0.634±0.007)％,与对照组(0.068 ±0.031)％比较,组间差异均有统计学意义(P＜0.01).低剂量的托瑞米芬(5、10 μmol/L)联合不同浓度顺铂后的细胞增殖抑制率均高于单用顺铂组,并呈现浓度依赖性,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).托瑞米芬与顺铂联用促进H1299细胞凋亡,呈现浓度依赖性.托瑞米芬与顺铂联用后,与单用顺铂组相比,H1299细胞周期发生明显变化,G0/G1期比例增加,S期细胞比例下降,检测出44.9％的H1299细胞有P糖蛋白的存在.结论 低浓度的托瑞米芬(5、10μmol/L)与顺铂联用对H1299细胞有明显的协同抗肿瘤效应,其机制可能与抑制细胞增殖、改变细胞周期分布、促进细胞凋亡有关,且这种作用不依赖于p53基因和雌激素受体.     

PTEN 在乳腺癌对顺铂化疗敏感性中的作用及其机制研究

目的：探讨PTEN在乳腺癌对顺铂化疗敏感性中的作用及其可能的机制。方法应用脂质体转染技术建立PTEN沉默的乳腺癌细胞系MCF-7/PTENi,通过MTT实验检测其对顺铂的敏感性,并通过Western印迹法检测细胞中Bcl-2的表达水平;应用小分子抑制剂ABT-737抑制Bcl-2表达后,再次检测MCF-7/PTENi对顺铂的敏感性。结果 MCF-7/PTENi和阴性对照细胞（MCF-7/NC）对顺铂的IC50值分别为（16.01±3.03）和（7.86±0.85）μM,两者差异有统计学意义（P=0.003）。MCF-7/PTENi细胞中Bcl-2的表达水平明显高于MCF-7/NC细胞（P=0.015）。2μM ABT-737处理的MCF-7/PTENi和MCF-7/NC细胞对顺铂的IC50值比较无显著性差异（P=0.087）。结论PTEN沉默可降低乳腺癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与其增加Bcl-2的表达有关。     

塞来昔布联合多柔比星对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的研究COX-2选择性抑制剂塞来昔布与多柔比星(doxorubicin,ADM)联合应用对乳腺癌MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞的抗肿瘤作用,探讨塞来昔布是否对多柔比星具有减毒增效作用。方法实验分为对照组,塞来昔布组,多柔比星组和联合用药组。用MTT法检测药物对MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞的生长抑制效应;Western blot测定MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞bcl-2的表达;PI染色检测细胞凋亡;克隆形成法测定药物对MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞系的细胞毒作用。结果 MTT结果显示,30μmol·L-1塞来昔布与0.625mg·L-1多柔比星联合作用于MCF-7细胞的72 h存活率为68.53%,作用于Sk-Br-3细胞的72 h存活率为32.66%,较多柔比星单用能明显降低乳腺癌细胞的存活率,且具有时间和剂量依赖性。流式细胞仪PI染色结果显示,联合用药诱导的细胞凋亡率分别为MCF-7细胞59.7%,Sk-Br-3细胞65.8%,较单用多柔比星诱导的凋亡率(MCF-7细胞25.9%,Sk-Br-3细胞28.7%)明显提高。Western blot结果显示单用多柔比星可以使蛋白bcl-2表达下调,合用后较单用下调更加明显。两者联合处理乳腺癌细胞后,caspases-3的活性明显增强。结论塞来昔布和多柔比星对乳腺癌MCF-7细胞和Sk-Br-3细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用。     

重组人血管内皮抑素心脏毒性作用的靶标及作用机制研究

目的探讨重组人血管内皮抑素（恩度）心脏毒性作用的靶标及作用机制。方法以H9c2心肌细胞为观察对象,进行以下实验：（1）将H9c2细胞分为对照组（不给予药物干预）和恩度100、200、400μ/ml组（加入相应浓度药物培养24、48h）,用流式细胞术检测各组各时点细胞凋亡率;（2）将H9c2细胞分为对照组和恩度400μg/ml干预24h实验组,用透射电镜观察细胞超微结构改变;（3）将H9c2细胞分为对照组和恩度100、200、400μ/ml组（加入相应浓度药物培养18h）,应用JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位;（4）将H9c2细胞分为对照组和恩度400μg／ml干预24h实验组,用细胞免疫化学方法观察细胞色素C（Cyt-C）释放情况;（5）将H9c2细胞分为对照组和恩度100、200、400μml组（加入相应浓度药物培养24h）,用化学发光法检测各组细胞的ADP／ATP比值。结果（1）恩度200μg／ml组在药物干预24h、恩度400斗g／ml组在药物干预24、48h后,细胞凋亡率均明显高于对照组[24h：（16．34±3．72）％、（27．03±3．91）％比（6．99±1．72）％;48h：（24．89-4-4．77）％比（6．44±1．81）％,均P〈0．01];恩度200μg／ml组药物干预24h后的细胞凋亡率高于药物干预48h[（16．34＋3．72％）比（11．34±3．09）％,P〈0．01]。（2）对照组细胞超微结构正常;恩度400μg/ml干预24h实验组细胞核固缩碎裂、染色质块聚,细胞内空泡增多,内质网扩张,线粒体肿胀,出现凋亡小体。（3）与对照组相比,不同剂量恩度干预组细胞线粒体跨膜电位去极化程度随恩度浓度增加而下降。（4）对照组细胞Cyt-C主要分布于线粒体,恩度400μg/ml干预24h实验组细胞Cyt-C从线粒体释放至胞质。（5）恩度200、400μg/ml组细胞的ADP／ATP比值明显高于对照组（1．14±0．11、1．31±0．18比0．98±0．09,均P〈0．01）。结论心肌细胞线粒体可能是恩度心脏毒性作用的靶标,经线粒体依赖性途径诱导的心肌细胞凋亡是恩度致心肌损伤的机制之一。