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影响基因枪转化小麦的几个因素 总被引:6,自引:0,他引:6
对影响基因枪转化小麦的主要参数进行优化,结果表明,包裹子弹的沉淀利用PEG4000和Ga(NO3)2分别代替亚精胺和CaCl2,可显著地提高GUS基因的瞬时表达,幼穗的最佳预培养时间为1d,轰击距离为9cm,而幼胚分别为14d和12cm。对预培养14d的幼胚,采用0.25μgDNA和125μg金粉能取得较好的效果。 相似文献
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以籼稻品种特青的幼胚作为外植体,对影响植株再生的几个因素包括诱导培养基、预分化培养、干燥处理、通气状况和蔗糖浓度进行了研究,结果表明,MS+2, 4-D 2mg/L是较为合适的诱导培养基,预分化培养,干燥处理,良好的通气环境以及降低分化培养时的蔗糖浓度均有助于愈伤组织的分化. 相似文献
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以籼稻品种特青的幼胚作为外植体,对影响植株再生的几个因素包括诱导培养基、预分化培养、干燥处理、通气状况和蔗糖浓度进行了研究.结果表明,MS+2,4-D2mg/L是较为合适的诱导培养基,预分化培养,干燥处理,良好的通气环境以及降低分化培养时的蔗糖浓度均有助于意伤组织的分化. 相似文献
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利用电击法转化玉米胚性愈伤组织获得GUS基因瞬时表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
作者以成单玉米幼胚经诱导、继代、筛选,获得了可分化的胚性愈伤组织,采用电击转化法,将质粒PBI121导入成单玉米的胚性愈伤组织中,通过组织化学染色法,观察到了GUS基因的瞬时表达,并筛选出对愈伤组织损害轻、GUS表达较强的最适电击条件为:960μF,375V/cm,61ms。 相似文献
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以籼稻“11402”为主要研究对象,NB为基本培养基进行组织培养试验,统计其出愈率情况,分析不同浓度单糖、双糖和多糖对水稻成熟胚出愈率的影响,得到葡萄糖、蔗糖和淀粉作为单一碳源的最佳浓度和两种碳源的最佳混合配比浓度,使得水稻成熟胚出愈率和愈伤组织质量得到较大提高。试验结果表明:在单一碳源中浓度为40g·L-1最好,单糖(葡萄糖)对水稻成熟胚的出愈率影响最小,二糖(蔗糖)对水稻成熟胚的出愈率影响最大,多糖(淀粉)次之,糖类的混合配比比单一的糖类出愈率更高,其最佳混合配比是在蔗糖与淀粉总量为40g·-1下,且蔗糖与淀粉浓度比为3:1时为最佳,出愈率最高.质量较好。 相似文献
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建立了几个云南水稻品种的长期胚性愈伤组织培养系。发现在所选用水稻品种中,H42的愈伤组织诱导频率和绿苗分化频率为最高,分别达到77%和89%。为基因转化准备了受体材料。 相似文献
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以3种籼稻成熟胚为外植体,接种于愈伤组织诱导培养基(M8+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 2,4-D+2 mg/L 6-BA+1 mg/L ABA+0.5 mg/L KT+1 mg/L NAA),记录其愈伤的出愈率,统计分析表明其出愈率有显著差异,并分别取接种9 d、15 d时不同材料的愈伤组织观察其不同诱导天数下超微结构的变化,并记录其愈伤过程中的褐化率.结果显示,3种水稻材料在相同的诱导时间下细胞的发育阶段不同:扬辐籼6号的愈伤组织细胞发育较快,较早地进入了成熟阶段;而恢76愈伤组织细胞则发育较慢,较长时间仍然处于分生阶段;黄华占则发育更慢.可见,不同籼稻出愈率和分化的高低主要与愈伤组织细胞发育速度的快慢、生理功能的强弱、以及其衰老的程度有密切关系.而褐化,不仅与黑色物质聚集早晚有关系,而且与愈伤组织细胞中液泡的发育有着密切关系.通过调高培养基中细胞分裂素类的含量,有利于提高其出愈率. 相似文献
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葡萄的基因转化效率及其影响因素 总被引:4,自引:0,他引:4
于惠敏 《曲阜师范大学学报》1998,24(3):62-64
经农杆菌介导转化葡萄的胚性愈伤组织,研究了影响转化效率的几个因素。结果表明,愈伤组织经14天预培养,菌液经6-8倍稀释,共培养时保持PH6.0以及在农杆菌对数期之前8小时加入乙酰丁香酮都显著提高了转化效率。 相似文献
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以密蒙花(Buddlija officinalis Maxim)芽、叶、茎段为外植体,在B5,MS,White培养基上获得愈伤组织。结果表明:芽、幼叶脱分化能力差异不大;不同时期的叶片差异较大,以幼叶诱导为佳;作者筛选出的愈伤组织最佳培养基为B5 6-BA0.5mg/L 2,4-D0.5mg/L。在继代培养阶段,B5比MS和White更适合细胞的快速生长和繁殖;并且以叶片的愈伤组织生长较快,芽、茎段次之,最佳继代培养基为B5 6-BA0.5mg/L NAA0.5mg/L,继代的愈伤组织可在B5 6.BAlmg/L NAA0.1mg/L GA0.1mg/L培养基中分化出幼苗,在生根培养基1/2MS NAA0.2mg/L或1/2MS NAA0.6mg/L中分化出根且获得再生植株,将长4~6cm的再生小苗练苗3d后移植,幼苗成活率达100%,并于当年开花。 相似文献
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Studies of Improving the Frequency of Indica Rice Transformation by Biolistic Bombardment 总被引:1,自引:0,他引:1
易自力 Wang Li Cao Shouyun Yuan Longping Guan Chunyun Zhau Puhan Tian Wenzhang Chu Chengcai 《高技术通讯(英文版)》2003,9(1):6-10
In order to improve the frequency of indica rice transformation by biolistic bombardment,suitable culture conditions for embryonic calli,an optimal selection scheme for resistant calli and seedling,and optimum bombardment parameters a investigated by using 14 commercially important indica rice cultivars.The main results show that the CC medium with 36g/L mannitol is a scheme subculture medium in which the browning of indica rice calli can be mitigated significantly;The concentration of 30-40mg/L Hyg or 150-200mg/L G418 or 10-20mg/L Basta is suitable for selection of resistant calli;The transformation parameters of 100μg gold powder absorbing 0.2μg DNA per shot and 900 psi helium pressure and 6 cm bombardment distance and bombarded twice for each plate give the best result;Keeping the target calli on osmotic medium containing 60g/L mannitol from 12-24h before bombardment to 24-48h after it can increase the efficiencies of transformation.Furthermore,some transgenic indica rice plants are obtained using this optimized transformation system. 相似文献
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以水稻(丹粳-5号)愈伤组织为受体材料,采用基因枪法将含有GUS和HPT基因的CM2质粒导入水稻细胞.经过50mg/L的潮霉素筛选,获得抗性愈伤组织,并在同样筛选压力下诱导分化成苗,获得抗性苗.共获得17个抗性克隆.GUS组织化学检测表明,有12个克隆为GUS阳性,GUS和HPT基因共表达率为70%左右.Southern分子检测证明HPT基因已整合到水稻基因组中. 相似文献
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实验对蜀恢881、蜀恢527、中花9号等7个水稻品种的成熟胚为受体材料,研究了影响农杆菌转化水稻频率的几个重要因素,实验结果表明:CC培养基是籼稻成熟胚愈伤组织的最适诱导培养基,而NB培养基是粳稻品种成熟胚的最适诱导培养基;诱导培养基中添加ABA并不能显著提高籼稻和粳稻成熟胚愈伤组织的诱导率,但在ABA为3mg/LN可以明显改善愈伤质量;适当的低温预处理可以不同程度提高诱导率;农杆菌菌株EHA105对水稻愈伤组织的转化能力优于LBA4404和AGL1;在分化时,采用适宜的激素配比有利于提高分化率。 相似文献
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用基因枪法转化水稻获得转基因植株 总被引:13,自引:2,他引:13
从水稻成熟胚诱导的愈伤组织经继代培养后可以产生大量胚性愈伤组织.将分别含有苏云金杆菌δ-内毒素基因[CryⅠA(b)]、潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)的质粒混合包裹在金粉上轰击上述胚性愈伤组织.经过筛选和再生培养,得到92个系的潮霉素抗性再生植株.点杂交结果表明97.8%的抗性植株含有hpt基因,73.9%的植株同时含有CryⅠA(b)基因和hpt基因.Southernblot杂交分析进一步证实外源CryⅠA(b)基因已经整合到水稻基因组中. 相似文献
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稻粒黑粉病菌孢子萌发的影响因素试验 总被引:1,自引:0,他引:1
对影响稻粒黑粉病菌(Neovossia horrida)孢子萌发的主要因素进行了试验研究,结果表明:厚垣孢子在室内干燥条件下贮存3年左右即丧失活力;度过休眠期的厚垣孢子在吸湿、感光、适宜的温度及充足的氧气条件下即可萌发;萌发的适宜温度为25~30℃;水层厚度小于0.5mm较为适宜;荧光、紫外光或散射光处理均可促进萌发,光照强度以6000lx为宜;每天光照时间为10~12h,5d后厚垣孢子大量萌发;先连续黑暗水培3~4d,再间歇光照3d,也可大量萌发;体积分数为(50~200)×10-6的赤霉素对其萌发具有一定的刺激作用;供试的几种营养物质对其萌发影响甚微。 相似文献
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灌区节水改造工程的质量控制问题是工程的关键和核心。文章阐述了工程项目施工质量优劣的重要性,主要从材料、施工工艺、机械工具、工作人员和环境5个方面分析并探讨如何采取有效措施,通过施工过程的质量管理、施工过程的质量控制,提高灌区节水改造工程的施工质量。 相似文献
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抗除草剂旱稻转基因植株的获得 总被引:10,自引:0,他引:10
以旱稻丹粳旱5-55、6-24、6-37的悬浮细胞及未成熟胚为受体材料,采用基因枪法将含BAR基因的pDM302质粒DNA导入旱稻细胞中,经PPT筛选获得抗性愈伤组织,筛选出的愈伤组织在分化培养基上再生出完整的旱稻转基因植株。Southern分子杂交分析表明,外源BAR基因已整合到水稻基因组内,抗除草剂试验结果表明,转化植株对0.01%Basta(有效成分为PPT)有一定程度的抗性,说明外源BAR 相似文献
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连作晚稻田中的秋籼,对连晚直播粳稻的产量影响很大。含籼1%减产2.5%,但未选显著标点;含籼5%减产17.0%;含籼10%减产22.1%;含籼超过15%减产32.6%以上,均达到极显著标点。所以,连晚直播稻的含籼率临界值为1%。减产的主要原因是有效穗和每穗实粒锐减。 相似文献
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目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者静脉溶栓后出血性转化(HT)的预后危险因素.方法 回顾性分析150例急性脑梗死(ACI)患者资料,患者入院后均接受静脉溶栓治疗,且治疗后发生HT,依据改良Rankin量表评估患者预后(3个月)情况.收集患者各项资料,分析患者预后危险因素,并应用ROC曲线分析危险因素对患者预后的预测价值... 相似文献
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经过30多年的研究,建立了以成熟花粉辐照诱变为主的水稻优质新种质技术;采用自创的优质早籼稻新品种选育新途径,积累了一大批长大粒低垩白为主要特点的优质籼稻新材料;应用SSR标记技术定位出多个籼稻品质性状的QTLs,并初步建立了实用的分子标记辅助育种技术;选育出优质、高产、抗病的早籼稻"佳禾早占"、"佳辐占"等6个水稻新品种,其品质符合部颁优质食用米三级以上标准."佳辐占"等品种在福建省累计推广了66.67×104hm2,为农民增收20多亿元.这些优质品种的育成,基本解决了水稻育种中长期存在的大粒不优质,早籼稻难优质,优质不高产,优质不抗病等难题,为未来水稻优质高产育种积累有益的经验. 相似文献