高碘喂养小鼠室旁核一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察高碘对小鼠室旁核一氧化氮合酶阳性神经元的变化，探讨高碘对中枢神经系统的影响。方法：实验于2004-01／2004-10在河北医科大学完成。选择昆明种初断乳健康小鼠16只，随机分为适碘组与高碘组，每组8只。分别以含碘量为50μg/L，3000μg/L蒸馏水喂养小鼠6个月，于实验第180天断颈处死动物，摘取甲状腺，制作病理切片，苏木精-伊红染色，光镜下观察甲状腺的形态变化证实高碘甲状腺肿模型复制成功。采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学方法观察高碘对小鼠下丘脑室旁核一氧化氮合酶阳性神经元的影响。结果：在实验过程中各组动物无异常死亡，均进入结果分析。①光镜下可见适碘组甲状腺滤泡大小形态不一，滤泡腔内有中等量的粉红色胶质，滤泡为单层立方状或高柱状，核圆形或椭圆形位于细胞中央，细胞质中等．毛细血管丰富；还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元呈高尔基样分布于室旁核外围，细胞形态为多角形、梭形、椭圆形，胞浆饱满且呈兰色深染，突起明显，有较多深染的纤维。②光镜下高碘组甲状腺滤泡明显扩张，腔内充满大量染色的红色胶质滤泡上皮细胞、扁平，核呈梭形，滤泡间质减少；室旁核仅见零星散在的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元，细胞形态以梭形、椭圆形为主，胞浆淡染，胞核不染色，突起不明显，几乎见不到阳性纤维。③高碘组室旁核一氧化氮合酶阳性细胞密度较适碘组明显降低，差异有显著性[（24&;#177;2．7）．（81．5&;#177;3．5）个／0．01mm^2，t=2．306～3．355，P〈0．01）。结论：高碘可以引起小鼠室旁核细胞一氧化氮合酶染色阳性神经元密度明显降低且染色变浅，突起变短。高碘可能通过引起小鼠下丘脑室旁核细胞一氧化氮合酶阳性细胞的变化而影响一氧化氮合成，从而可能对中枢神经系统功能造成影响。     

自发性高血压大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察自发性高血压大鼠脑尾壳核内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化。 方法：实验于2003—05在暨南大学人体解剖教研室完成，取自发性高血压大鼠（实验组）和京都种威斯特大鼠（对照组）各30只，分别于3月龄，6月龄和12月龄测血压并处死，ABC免疫细胞化学方法观察大鼠脑内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元，实验组使用兔抗神经元型一氧化氮合酶多克隆抗体。阴性对照用0．01mol／L磷酸盐缓冲液替代-抗体。每只大鼠计数20～30片，取其均数计数尾壳核的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的数目，代表其密度。 结果：各组大鼠在实验过程中无死亡，全部进入结果分析。①对照组3，6，12月龄大鼠血压分别为[（97．5&;#177;12．0）、（107．3&;#177;9．8）、（113．3&;#177;12．8）mmHg（1mmHg=0．133kPa）]，差异无显著性意义；实验组3，6，12月龄自发性高血压大鼠血压逐渐升高，分别为[（116．3&;#177;13．5）、（151．5&;#177;8．3）、（177．0&;#177;9．0）mmHg]，差异有显著性意义（P〈0．05）；实验组大鼠血压均高于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。②大鼠尾壳核的神经元型一氧化氮合酶阳性神经元中等大小，突起较多较长，还可见阳性神经纤维呈网状分布。大鼠尾壳核内的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的密度改变：对照组和实验组3月龄无明显变化，实验组6月龄和12月龄明显减少。③对照组3，6和12月龄京都种威斯特大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元无明显变化[（9．41&;#177;0．77），（8．64&;#177;1．28），（8．51&;#177;0．77）个／mm^2]；实验组自发性高血压6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元呈逐渐减少的趋势，与3月龄比较，差异有显著性意义[6个月（6．59&;#177;0．70），12个月（7．30&;#177;0．96），3个月（8．90&;#177;1．09）个／mm^2, P〈0．05]，实验组6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元均低于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。 结论：自发性高血压大鼠为模拟人类原发性高血压的良好动物模型，自发性高血压大鼠的血压随月龄而有不同。自发性高血压大鼠尾壳核内神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的改变有可能是通过影响血压调节中枢的交感活性而间接调控高血压的发生。     

自发性高血压大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的:观察自发性高血压大鼠脑尾壳核内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化。方法:实验于2003-05在暨南大学人体解剖教研室完成,取自发性高血压大鼠(实验组)和京都种威斯特大鼠(对照组)各30只,分别于3月龄,6月龄和12月龄测血压并处死,ABC免疫细胞化学方法观察大鼠脑内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元,实验组使用兔抗神经元型一氧化氮合酶多克隆抗体。阴性对照用0.01mol/L磷酸盐缓冲液替代一抗体。每只大鼠计数20～30片,取其均数计数尾壳核的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的数目,代表其密度。结果:各组大鼠在实验过程中无死亡,全部进入结果分析。①对照组3,6,12月龄大鼠血压分别为(97.5±12.0)、(107.3±9.8)、(113.3±12.8)mmHg(1mmHg=0.133kPa),差异无显著性意义;实验组3,6,12月龄自发性高血压大鼠血压逐渐升高,分别为(116.3±13.5)、(151.5±8.3)、(177.0±9.0)mmHg,差异有显著性意义(P<0.05);实验组大鼠血压均高于同鼠龄对照组大鼠,差异均有显著性意义(P<0.05)。②大鼠尾壳核的神经元型一氧化氮合酶阳性神经元中等大小,突起较多较长,还可见阳性神经纤维呈网状分布。大鼠尾壳核内的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的密度改变:对照组和实验组3月龄无明显变化,实验组6月龄和12月龄明显减少。③对照组3,6和12月龄京都种威斯特大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元无明显变化(9.41±0.77),(8.64±1.28),(8.51±0.77)个/mm2;实验组自发性高血压6,12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元呈逐渐减少的趋势,与3月龄比较,差异有显著性意义6个月(6.59±0.70),12个月(7.30±0.96),3个月(8.90±1.09)个/mm2,P<0.05,实验组6,12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元均低于同鼠龄对照组大鼠,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:自发性高血压大鼠为模拟人类原发性高血压的良好动物模型,自发性高血压大鼠的血压随月龄而有不同。自发性高血压大鼠尾壳核内神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的改变有可能是通过影响血压调节中枢的交感活性而间接调控高血压的发生。     

雌性大鼠去势后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元的表达

目的：观察雌性大鼠行卵巢切除术后下丘脑视上区反映动物功能状态的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数量的变化。方法：实验于2003-07／2004-01在山西医科大学神经解剖学科研室进行。将20只Wistar雌性大鼠随机分为两组：对照组和卵巢切除术后组，每组10只。将大鼠麻醉后取完整脑组织，制备冰冻切片，在光学显微镜下对两组大鼠下丘脑视上核的一氧化氮合酶阳性神经元进行形态观察和细胞计数，采用图像分析系统测定一氧化氮合酶阳性神经元免疫反应产物的平均灰度值。结果：20只大鼠均进入结果分析。①大鼠下丘脑视上区的一氧化氮合酶阳性神经元分布和形态观察：对照组分布广泛，以视上核的一氧化氮合酶阳性神经元表达较强，大量胞体呈椭圆形，密集成簇。卵巢切除术后组视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目显著增多，胞体的截面积显著增大，轮廓很清晰；胞体上发出的突起粗且长，有个别纤维可见到明显的髓鞘。②下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目：卵巢切除术后组明显多于对照组[（18．00&;#177;4．09）个／视野，（9．00&;#177;3．15）个／视野。t=5．514，P〈0．0001]。③下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性产物的平均灰度值：卵巢切除术后组与对照组基本接近[82．00&;#177;10．48，90．00&;#177;3．15，（t=0．985，P〉0．5）]。结论：雌性大鼠卵巢切除术后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目反应性增多。     

一氧化氮合酶阳性神经元与小鼠学习记忆障碍的关系

背景：通过竞争性抑制一氧化氮合酶(mitric oxide synthase，NOS)，可损害大鼠的学习记忆行为，表明NO／NOS对维持正常的学习记忆功能是必需的，但有关学习记忆障碍时NOS神经元的变化尚不十分清楚。目的：探讨NOS神经元与学习记忆障碍的关系。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点和材料：本研究地点为中南大学湘雅医学院人体解剖学和神经生物学系，材料为健康昆明雄性小鼠32只，6～8周龄，体质量20—25g，购于湖南医科大学动物学部。干预：32只小鼠随机分为模型组和对照组，每组各取7d和14d两个时间点，每个时间点各8只小鼠。采用辐射式三等份Y型迷宫测试装置，检测动物的空间辨别性学习记忆能力。应用免疫组化结合组织化学方法显示学习记忆障碍小鼠脑中NOS神经元的变化。主要观察指标：检测动物的空间辨别性学习记忆能力，观察切片NOS神经元形态并计数。结果：随训练次数的增加，对照组小鼠在Y型迷宫中的正确次数逐渐增加(术前第1天8．3&;#177;1．2，术后第7天10．1&;#177;1．0)，而模型组小鼠术后在Y型迷宫测试中的正确次数较术前(8．3&;#177;1．2)明显减少(术后第7天4．7&;#177;2．4，P&;lt;0．05)，与对照组同时间点相比，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；但术后14d模型组小鼠在迷宫测试中的正确次数渐有增加(9．3&;#177;0．7)。学习记忆障碍小鼠海马CA1-4区NOS神经元数目显著减少，齿状回颗粒细胞层和梨状区皮质外颗粒细胞层内出现大量新的NOS神经元。结论：海马内NOS神经元与小鼠学习记忆有重要关系；梨状区皮质和齿状回颗粒细胞层内出现新的NOS神经元可能是学习记忆障碍后的代偿性反应。它们可能在随后的学习记忆功能恢复中发挥了重要作用。     

一氧化氮合酶阳性神经元与小鼠学习记忆障碍的关系

背景通过竞争性抑制一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS),可损害大鼠的学习记忆行为,表明NO/NOS对维持正常的学习记忆功能是必需的,但有关学习记忆障碍时NOS神经元的变化尚不十分清楚.目的探讨NOS神经元与学习记忆障碍的关系.设计完全随机设计,对照实验研究.地点和材料本研究地点为中南大学湘雅医学院人体解剖学和神经生物学系,材料为健康昆明雄性小鼠32只,6～8周龄,体质量20～25 g,购于湖南医科大学动物学部.干预32只小鼠随机分为模型组和对照组,每组各取7 d和14 d两个时间点,每个时间点各8只小鼠.采用辐射式三等份Y型迷宫测试装置,检测动物的空间辨别性学习记忆能力.应用免疫组化结合组织化学方法显示学习记忆障碍小鼠脑中NOS神经元的变化.主要观察指标检测动物的空间辨别性学习记忆能力,观察切片NOS神经元形态并计数.结果随训练次数的增加,对照组小鼠在Y型迷宫中的正确次数逐渐增加(术前第1天8.3±1.2,术后第7天10.1±1.0),而模型组小鼠术后在Y型迷宫测试中的正确次数较术前(8.3±1.2)明显减少(术后第7天4.7±2.4,P＜0.05),与对照组同时间点相比,差异有显著性意义(P＜0.01).但术后14 d模型组小鼠在迷宫测试中的正确次数渐有增加(9.3±0.7).学习记忆障碍小鼠海马CA1-4区NOS神经元数目显著减少,齿状回颗粒细胞层和梨状区皮质外颗粒细胞层内出现大量新的NOS神经元.结论海马内NOS神经元与小鼠学习记忆有重要关系;梨状区皮质和齿状回颗粒细胞层内出现新的NOS神经元可能是学习记忆障碍后的代偿性反应.它们可能在随后的学习记忆功能恢复中发挥了重要作用.     

雌性大鼠去势后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元的表达

目的:观察雌性大鼠行卵巢切除术后下丘脑视上区反映动物功能状态的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数量的变化。方法:实验于2003-07/2004-01在山西医科大学神经解剖学科研室进行。将20只Wistar雌性大鼠随机分为两组:对照组和卵巢切除术后组,每组10只。将大鼠麻醉后取完整脑组织,制备冰冻切片,在光学显微镜下对两组大鼠下丘脑视上核的一氧化氮合酶阳性神经元进行形态观察和细胞计数,采用图像分析系统测定一氧化氮合酶阳性神经元免疫反应产物的平均灰度值。结果:20只大鼠均进入结果分析。①大鼠下丘脑视上区的一氧化氮合酶阳性神经元分布和形态观察:对照组分布广泛,以视上核的一氧化氮合酶阳性神经元表达较强,大量胞体呈椭圆形,密集成簇。卵巢切除术后组视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目显著增多,胞体的截面积显著增大,轮廓很清晰;胞体上发出的突起粗且长,有个别纤维可见到明显的髓鞘。②下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目:卵巢切除术后组明显多于对照组犤(18.00±4.09)个/视野,(9.00±3.15)个/视野,t=5.514,P<0.0001犦。③下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性产物的平均灰度值:卵巢切除术后组与对照组基本接近犤82.00±10.48,90.00±3.15,(t=0.985,P>0.5)犦。结论:雌性大鼠卵巢切除术后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目反应性增多。     

脑缺血大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的细胞构筑

目的：观察大鼠尾壳核一氧化氮合酶神经元的分布，以及脑缺血后其免疫阳性神经元细胞构筑学的变化。 方法：实验于2004／2005在南方医科大学和暨南大学进行。取36只SD大鼠随机分为对照组和脑缺血组，每组18只。脑缺血组用双侧颈总动脉阻塞法建立脑缺血模型，对照组行假手术，不结扎颈总动脉。分别于造模后3，7，30d处死动物取材，每个时间点6只。ABC法显示神经元型一氧化氮合酶神经元，图像分析系统测尾壳核阳性神经元数目和大小（神经元以〉25μm为大型，25～15μm为中型，〈15μm为小型）。 结果：经补充后36只大鼠进入结果分析。④神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小和分布不均一，尾壳核背外侧胞体相对较小，数目较多，而腹内侧体积虽大，但较稀疏。②神经元型一氧化氮合酶阳性神经元数目：对照组各时间点无明显变化，脑缺血组缺血后7，30d显著低于对照组（P〈0．01）。③神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小：对照组以中型细胞为主，其次为小型神经元，大型细胞少，三类神经元在不同的时期比例恒定。脑缺血组在缺血后3和7d，中小型神经元变化较明显，其中大型和中型神经元逐渐下降，在缺血30d时中型神经元比例显著低于对照组和缺血后3，7d（P〈0．01），而小型神经元比例显著高于对照组和缺血后3，7d（P〈0．01）。 结论：脑缺血后尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元减少，而且中型细胞减少为主，小型细胞所占比例相对增多。     

肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

背景：肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响。目的：应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况。．设计：完全随机对照实验。单位：首都医科大学解剖教研室。材料：实验于2002—03／2003—12在首都医科大学解剖教研室完成。20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组，每组10只。方法：肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，正常大鼠组不作任何处理。于模型制备后3个月，各组大鼠在麻醉状态下开胸，灌注，固定，取脊髓组织，制备切片，采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及Leica Q500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓一氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定。主要观察指标：①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值。②两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况。结果：20只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60（P〉0．05）。②在脊髓灰质区，一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第X层和中间外侧核。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性，细胞形态多为三角形和梭形，胞核不着色，胞质色深。细胞中等大小，以25μm为主。在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等，没有特异性变化。结论：肝硬化大鼠与正常大鼠一氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同。一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异。     

脑缺血大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的细胞构筑

目的:观察大鼠尾壳核一氧化氮合酶神经元的分布,以及脑缺血后其免疫阳性神经元细胞构筑学的变化。方法:实验于2004/2005在南方医科大学和暨南大学进行。取36只SD大鼠随机分为对照组和脑缺血组,每组18只。脑缺血组用双侧颈总动脉阻塞法建立脑缺血模型,对照组行假手术,不结扎颈总动脉。分别于造模后3,7,30d处死动物取材,每个时间点6只。ABC法显示神经元型一氧化氮合酶神经元,图像分析系统测尾壳核阳性神经元数目和大小(神经元以>25μm为大型,25～15μm为中型,<15μm为小型)。结果:经补充后36只大鼠进入结果分析。①神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小和分布不均一,尾壳核背外侧胞体相对较小,数目较多,而腹内侧体积虽大,但较稀疏。②神经元型一氧化氮合酶阳性神经元数目:对照组各时间点无明显变化,脑缺血组缺血后7,30d显著低于对照组(P<0.01)。③神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小:对照组以中型细胞为主,其次为小型神经元,大型细胞少,三类神经元在不同的时期比例恒定。脑缺血组在缺血后3和7d,中小型神经元变化较明显,其中大型和中型神经元逐渐下降,在缺血30d时中型神经元比例显著低于对照组和缺血后3,7d(P<0.01),而小型神经元比例显著高于对照组和缺血后3,7d(P<0.01)。结论:脑缺血后尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元减少,而且中型细胞减少为主,小型细胞所占比例相对增多。     

辣椒素对大鼠三叉神经节一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的:研究辣椒素对大鼠三叉神经节内一氧化氮合酶(nitricoxidesyn-thase,NOS)阳性神经元的影响,探讨辣椒素治疗三叉神经痛的镇痛机制。方法:把辣椒素配成浓度为30mmol/L溶液备用,按用量分成4组(20,30,50和100μL组),各5只。分别皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支,24h后取材,切片,免疫组化染色,镜检,计算机图像分析。结果:正常侧半月节内NOS阳性神经元染色、分布、形态均正常,各组随辣椒素用量增多,着色神经元及神经纤维较浠散而浅淡,真至未见或仅见极少着色的神经元及神经纤维。各组大鼠三叉神经节NOS平均吸光度比较经方差分析,差异有非常显著性意义(F=149.136,P<0.01),并且随着用药量的增加其差值也更大。结论:辣椒素对大鼠三叉神经节内NOS阳性神经元有明显的影响,NOS参与口面部的痛与镇痛。     

金雀异黄酮对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶神经元的影响

目的:研究去卵巢及金雀异黄酮(genistein,GS)治疗后基底前脑一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)阳性神经元数目变化,探讨GS改善去卵巢大鼠学习记忆能力的可能机制,为使用GS防治绝经后老年性痴呆提供理论依据。方法:实验于2003-03/2004-01在中山大学人体解剖学教研室脑研究室进行。将36只3月龄雌性SD大鼠分为假手术组、去卵巢对照组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组,每组9只,分别进行干预。术后8周取脑切片,进行NADPH-d组化方法染色,计数分析基底前脑各区NOS阳性神经元数目。结果:各组大鼠基底前脑内侧隔核NOS阳性神经元数目差异无显著性意义(P>0.05);去卵巢对照组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目分别为(33.13±9.80)个和(48.55±6.60)个,均高于假手术组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组(P<0.01),金雀异黄酮组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目与假手术组、苯甲酸雌二醇组相比差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:去卵巢之后大鼠基底前脑一氧化氮增加,产生神经元的毒性作用,使中枢神经系统退行性变导致大鼠学习记能力下降;GS能减少基底前脑一氧化氮水平,有望替代雌激素用于防治疗女性绝经期后中枢神经系统退行性疾病。     

肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

背景肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响.目的应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况.设计完全随机对照实验.单位首都医科大学解剖教研室.材料实验于2002-03/2003-12在首都医科大学解剖教研室完成.20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组,每组10只.方法肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,正常大鼠组不作任何处理.于模型制备后3个月,各组大鼠在麻醉状态下开胸,灌注,固定,取脊髓组织,制备切片,采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及Leica Q500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓一氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定.主要观察指标[1]两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值.[2]两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况.结果20只大鼠均进入结果分析.[1]两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60(P＞0.05).[2]在脊髓灰质区,一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第Ⅹ层和中间外侧核.还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性,细胞形态多为三角形和梭形,胞核不着色,胞质色深.细胞中等大小,以25 μm为主.在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等,没有特异性变化.结论肝硬化大鼠与正常大鼠-氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同.一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异.     

吗啡依赖小鼠前脑皮质神经元一氧化氮合酶的表达

目的:探讨吗啡依赖小鼠前脑皮质神经元一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性的变化及脑型一氧化氮合酶(nNOS)是否参与了吗啡依赖过程。方法:以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,采用还原型辅酶II-黄递酶(NADPH-d)组织化学法和ABC免疫组化法分别显示吗啡依赖组、纳洛酮催促戒断组和正常对照组小鼠前脑皮质NOS阳性神经元和nNOS阳性神经元数目。结果:与对照组前脑皮质NOS阳性神经元犤(116.00±4.24)个/切片犦相比,吗啡依赖组犤(104.88±11.46)个/切片犦和纳洛酮催促戒断组犤(88.64±3.74)个/切片犦阳性神经元的数目减少(F=27.864,P=0.000);而nNOS阳性神经元的数目与对照组犤(149.93±19.15)个/切片犦相比,仅在纳洛酮催促戒断组明显减少犤(87.92±5.71)个/切片犦(F=64.61,P=0.000)。结论:吗啡依赖期和戒断期小鼠前脑皮质神经元NOS的活性明显降低,且戒断期内nNOS参与了NOS活性的变化。     

银杏叶片对高原人体运动后一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:缺氧会对机体造成多种损伤,探讨银杏叶片、酪氨酸冲剂和红景天对高原人体力竭运动一氧化氮及一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)的影响,以减轻和预防缺氧对机体的损伤。方法:对进驻海拔3700m高原半年的30名健康青年随机分为银杏叶片组、红景天组和酪氨酸组,每组10人。在未服药时、服药后第15天分别采用功率自行车进行渐增负荷运动至力竭,测定血清中一氧化氮、NOS含量。结果:各组受试者运动后较安静时一氧化氮犤银杏叶片组(101.4±13.7)μmol/L,(67.4±12.2)μmol/L;红景天组(98.8±13.4)μmol/L,(66.7±13.0)μmol/L;酪氨酸组(95.1±13.5)μmol/L,(66.9±12.5)μmol/L犦及NOS犤银杏叶片组(69.9±10.7)U/mL,(43.2±3.8)U/mL;红景天组(67.6±11.0)U/mL,(43.5±4.63)U/mL;酪氨酸组(65.7±10.2)U/mL,(42.9±3.98)U/mL犦均增高,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。服药后较服药前一氧化氮增高,差异有非常显著性意义(P<0.01),NOS增高,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:银杏叶片、酪氨酸冲剂和红景天均能增强高原运动时NOS活性,使一氧化氮合成增加,可减轻和预防缺氧会对机体造成多种损伤。     

不同剂量骨保护素对破骨细胞内一氧化氮生成及内皮型一氧化氮合酶的影响

背景：骨保护素和一氧化氮在防治骨质疏松方面有重要作用,但目前关于两者在抑制破骨细胞增殖分化方面的关系研究较少。
　　目的：验证不同剂量的骨保护素对破骨细胞内生成一氧化氮量及内皮型一氧化氮合酶活性的影响。
　　方法：用抗酒石酸酸性磷酸酶染色验证诱导生成的破骨细胞;将诱导生成的破骨细胞分成6个组,空白对照组不加任何试剂;阴性对照组培养液中加入培养液;骨保护素组分为4组分别加入10,25,50,75μg/L不同剂量的骨保护素试剂。采用Annexinv-FITC细胞凋亡检测试剂盒,利用流式细胞仪测定破骨细胞凋亡率;荧光定量PCR检测破骨细胞标志基因抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA及蛋白激酶K mRNA 的表达量变化;一氧化氮检测试剂盒检测破骨细胞中内一氧化氮浓度;内皮型一氧化氮合成酶活力试剂盒检测破骨细胞内一氧化氮合酶的活力;骨保护素各组加入内皮细胞型一氧化氮合酶抑制剂;荧光定量PCR检测破骨细胞特异性酶抗酒石酸酸性磷酸酶 mRNA及蛋白激酶K mRNA表达量的变化。
　　结果与结论：①骨保护素可以抑制破骨细胞的分化生成并诱导其凋亡。②骨保护素的质量浓度与诱导生成的破骨细胞数量及其标志酶mRNA的表达量呈负相关,与破骨细胞凋亡率呈正相关。③骨保护素可以增加破骨细胞内一氧化氮的生成以及内皮型一氧化氮合酶活性的升高;骨保护素的质量浓度与破骨细胞生成的一氧化氮浓度及内皮型一氧化氮合酶活性呈正相关。④Raw264.7细胞在体外培养条件下,骨保护素与一氧化氮在抑制破骨细胞生成及促进其凋亡方面有协同作用,推测两者之间可能存在骨保护素/内皮型一氧化氮合酶/一氧化氮信号通路。