系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞PD-L1的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血B淋巴细胞PD-L1的表达及其在SLE发病中的意义.方法 应用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测SLE患者外周血B淋巴细胞上PD-L1的表达水平.结果 活动期SLE患者外周血B淋巴细胞CD19 、CD19 /PD-L1 的表达水平明显高于SLE非活动期患者(P＜0.05)和正常对照组(P＜0.05).结论 活动期SLE患者B淋巴细胞的PD-L1表达异常增加,其可能在SLE发病机制中起重要作用.     

冠心病患者外周血T淋巴细胞PD-L1的表达及意义

目的研究程序性死亡配体-1（PD-L1）在冠心病患者外周血中T淋巴细胞上的表达及意义。方法按照WHO关于冠心病诊断标准,将实验分为稳定型心绞痛（SA）组（n=23）、急性冠脉综合征（ACS）组（n=21）和正常对照组（n=18）,三组均经冠状动脉造影证实。采集三组人群的外周血,用流式细胞技术及RT-PCR技术测定T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达情况。结果与正常对照组比较,SA组和ACS组外周血T淋巴细胞PD-L1蛋白及mRNA表达水平均显著升高（P〈0.01）;但SA组与ACS组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论冠心病患者外周血T淋巴细胞PD-L1表达上调,其可能在动脉粥样硬化斑块形成过程中起作用。     

PD-L1和PD-L2在树突状细胞上的表达及其生物学意义

探讨小鼠髓系DC (CD8α )中PD L1和PD L2的表达及其在T淋巴细胞活化中的作用。采用mCD4 0L CHO和TNF α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载DC 4 8h ;免疫荧光标记检测DC表型 ;RT PCR和realtime PCR检测PD L1和PD L2mRNA转录水平 ;ELISA测定IL 2的分泌水平 ;3 H TdR掺入试验和51Cr释放试验测定DC体外激发T细胞的增殖和细胞毒杀伤率。结果显示 :PD L1和PD L2随着DC的成熟呈上调表达 ,CD4 0配基化DC的PD L1和PD L2均为中度表达 ,TNF α激发的DC为高度表达 ,二者呈现差异性表达 (P <0 0 5 ) ;CD4 0配基化髓系DC分泌IL 2的量明显高于TNF α组 (P <0 0 5 ) ,体外刺激T增殖和激活CTL能力在CD4 0配基化DC组最高 (P <0 0 5 )。提示CD4 0配基化的小鼠髓系DC呈现PD L1和PD L2的中度表达 ,IL 2大量分泌 ,这些均有助于激发有效的特异性免疫应答     

系统性红斑狼疮患者外周血CD14~+单核细胞表达PD-L1的分析和意义

目的:探讨PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞(Mo)上的表达及临床意义。方法:应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血CD14+Mo表面PD-L1表达水平,比较SLE不活动组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮肾炎组之间CD14+Mo表面PD-L1表达的百分比,并分析其与临床表现及实验室检查数据的相关性。结果:SLE活动组和稳定组CD14+PD-L1+Mo百分率均高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。狼疮肾炎患者CD14+PD-L1+Mo百分率高于无狼疮肾炎患者(P<0.05)。SLE患者CD14+PD-L1+Mo百分率与SLEDAI评分、尿蛋白定量呈正相关。SLE患者中抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗U1snRNP抗体、抗核小体抗体阳性组外周血CD14+PD-L1+单核细胞百分率均高于对应阴性组,且均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SLE患者外周血CD14+Mo细胞表达PD-L1异常,与病情活动性和抗体产生有关。     

人外周血淋巴细胞及单核细胞表达PD-L1和PD-L2的动力学研究

目的： 探讨PD-L1和PD-L2在正常人外周血静息和活化的B细胞、T细胞及单核细胞表面的表达规律。 方法： 利用荧光抗体染色和流式细胞术分析静息状态及经多克隆刺激剂脂多糖（LPS）和美洲商陆丝裂原（PWM）刺激6、24、48和72 h后表达PD-L1和PD-L2的B细胞和T细胞百分率，同时分析静息状态及经IFN-γ和LPS共同刺激24、48、72 和96 h后表达PD-L2的单核细胞百分率。 结果： 静息B细胞和T细胞表面不表达PD-L1，LPS和PWM刺激6 h后表达PD-L1的B细胞百分率均显著高于静息B细胞，24 h达到最高，分别为(46.26±10.71)%和(43.67±6.14)%，之后随时间延长而降低；表达PD-L1的T细胞百分率在LPS刺激下无显著变化，但PWM刺激6 h后百分率明显高于静息条件，24 h达到最高，为(25.42±9.23)%，之后下降。静息B细胞和T细胞不表达PD-L2，活化后PD-L2表达也无明显上调。另外，静息状态单核细胞表面不表达PD-L2，体外活化24 h后表达PD-L2的单核细胞百分率显著上调，48 h达到最高为(28.70±14.22)%，之后随时间而降低。 结论： 活化的淋巴细胞表达PD-L1，但不表达PD-L2，后者在活化的单核细胞表面表达，并且后者达到高峰的时间迟于前者。     

PD-L1 表达与胃癌发生发展的相关性Meta 分析

目的:采用Meta 分析评价方法,探讨PD-L1 表达与胃癌发生发展的相关性。方法:计算机检索Medline、PubMed、EMBASE 及中国知网等数据库,检索时间截止2017 年8 月1 日公开发表关于PD-L1 表达与胃癌的发生发展相关性的回顾性队列研究。采用STATA 统计软件进行Meta 分析,New castle-Ottawa Scale(NOS)量表进行文献质量评价,漏斗图评估文献的发表偏移。采用比值比(OR)及95%可信区间(CI)评价关联强度。结果:共纳入17 篇文献(4 618 例患者)进行Meta 分析。PD-L1 表达差异与EB 病毒感染(OR = 5.312,95% CI:2.106 ~ 13.401,P <0.05)、肿瘤浸润深度(OR = 2.582,95% CI:1.316 ~5.065,P<0.05)、淋巴浸润(OR=1.317,95%CI:1.122 ~ 1.757,P<0.05)有关,而与TNM 分期、肿瘤生长部位、淋巴结转移等无关。结论:PD-L1 过表达在EB 病毒感染、肿瘤浸润阳性、淋巴浸润阳性的胃癌患者中常发生。     

树突状细胞表达的PD-L1的研究进展

树突状细胞（DC）是专职的抗原提呈细胞,通过表达多种免疫调节分子在调节T细胞免疫反应中起关键作用。其表达的PD-L1是近年来新发现的B7家族的负性共刺激分子,与其相应受体结合,能够传递负性刺激信号导致T细胞反应无力,抑制细胞因子的分泌,诱导活化T细胞凋亡,最终诱导免疫耐受,介导肿瘤免疫逃逸,并在自身免疫性疾病,病毒,细菌感染等免疫反应中起重要作用。     

晚期胃癌中PD-1/PD-L1的表达及其单抗治疗的临床现状

随着对肿瘤免疫逃逸机制研究的不断深入,PD-1及其配体PD-L1构成的PD-1/PD-L1通路被证实与晚期胃癌患者生存期相关,且PD-L1作为疗效预测标志物具有一定临床价值。在晚期胃癌的局部维持治疗、二线治疗及部分一线治疗的临床试验中,PD-1/PD-L1抑制剂均获得了较好的治疗效果。PD-1/PD-L1抑制剂联合放化疗、细胞因子与其他免疫抑制剂及JAK2/STAT1/IRF-1信号通路靶向治疗也有一定成效。文章就PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂用于晚期胃癌治疗的现状进行回顾,并对其假定的生物标志物,正在进行的试验以及今后的发展进行讨论。     

肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群的变化

肺癌是我国常见的恶性肿瘤,是严重危害人类生命健康的主要疾病之一。目前肺癌的治疗手段仍以手术为主,因而研究肺癌患者手术前后机体细胞免疫功能的变化有着重要的临床意义。目前有研究发现,恶性肿瘤的形成和发展与宿主的细胞免疫功能密切相关。恶性肿瘤患者常存在机体免疫平衡失调,且以细胞免疫功能为主,表现为外周血T淋巴细胞的抑     

共刺激分子PD-L1在鼻咽癌组织中的表达和意义

目的探讨共刺激分子PD-L1在鼻咽癌组织的表达和临床意义,以及PD-L1的表达和鼻咽癌Foxp3＋淋巴细胞增多的相关性。方法采用免疫组化方法检测共刺激分子PD-L1在64例鼻咽癌的肿瘤组织和20例慢性鼻咽炎组织的表达情况及Foxp3＋淋巴细胞的分布。结果 PD-L1在鼻咽癌组织中阳性表达率为67.2%,明显高于其在慢性鼻咽炎组织中的表达,差异具有统计学意义（P〈0.05）。PD-L1的阳性表达与鼻咽癌病人性别、年龄、临床分期及是否转移等指标均无显著相关性（P〉0.05）,但与鼻咽癌组织中Foxp3＋淋巴细胞增加有关,差异有统计学意义（P〈0.05）,并且鼻咽癌PD-L1的表达也与Foxp3＋/CD8＋淋巴细胞比率增加正相关（P〈0.05）。结论鼻咽癌组织PD-L1在鼻咽癌组织中高表达,并与瘤内的调节性T细胞升高及CD8＋细胞下降有关,其可能在鼻咽癌的发展中起到一定作用,有望成为免疫治疗的一个新靶点。     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD L2分子的表达及其临床意义

目的：分析系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其与疾病活动程度的相关性。方法：收集26例系统性红斑狼疮患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后,TRIZOL抽提总RNA,定量PCR分析PD-L2基因的表达,流式细胞仪检测CD14、PD-L2分子的表达。统计学分析其相关性及与疾病活动程度之间的关联。结果：定量PCR结果提示系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2基因表达高于健康对照组(P<0.05),流式发现单核细胞上PD-L2高表达(P<0.05),且活动期患者表达高于稳定期,并且与疾病的评分(SLEDAI)呈正相关(P<0.05)。结论：免疫分子PD-L2可能参与系统性红斑狼疮疾病的进程并可能成为疾病预防及治疗的潜在分子。     

胃癌组织中TSLC1的表达及临床意义

目的：探讨肺癌肿瘤抑制物1(tumor suppressor in lung cancer 1, TSLC1)蛋白表达与胃癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化法检测TSLC1蛋白在20例正常胃黏膜、30例胃上皮内瘤变和50例胃癌组织中的表达,并复习相关文献。结果TSLC1在胃癌中的阳性率为14．00%,低于胃上皮内瘤变(46．67%)及正常胃黏膜(95．00%)( P<0．05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变中的表达低于低级别上皮内瘤变及正常胃黏膜( P<0．05)。 TSLC1在高级别上皮内瘤变及胃癌组织中的表达差异无显著性(P>0．05)。胃癌中 TSLC1表达与淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0．05)。结论 TSLC1表达与胃癌的发生、发展有关,可能为胃癌的防治提供新方向。     

胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及临床意义

目的研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞频数的变化,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤的病理类型及临床分期的相关性.方法应用流式细胞仪分析胃癌患者和健康对照组外周血中单个核细胞(pBMCs)的CD4+CD25+调节性T细胞频数,并探讨该种细胞频数的变化与胃癌的相关性.结果32例胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞19.40%±8.76%,高于25例健康对照组的10.68%±3.57%(P＜0.01).分化较好的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞16.79%±4.21%,低分化胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞20.02%±10.42%,两者之间差异显著(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期的胃癌患者CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞22.43%±8.36%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期的胃癌患者(CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的15.27%±6.85%,P＜0.05).结论CD4+CD25+T细胞在胃癌患者中比例升高,可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25+T细胞的高表达可作为胃癌患者肿瘤进展的重要标志.     

过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155的表达及临床意义

目的:探讨过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155及其前体基因BIC的表达及临床意义.方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测不同严重程度哮喘患者50例及健康对照20例外周血CD4+T细胞中BIC及miR-155的表达水平,并且与哮喘患者临床指标进行相关性分析;运用过表达或抑制,探讨miR-155在CD4+T细胞体外分化中的作用.结果:哮喘患者组BIC及miR-155的表达较对照组显著降低(P＜0.01),中、重度哮喘患者的BIC表达均低于对照组(P＜0.05),轻、中、重度哮喘患者的miR-155表达显著低于对照组(P＜0.01);组间比较发现,轻、中、重度哮喘患者的BIC表达无统计学意义,而重度哮喘患者miR-155的表达较轻度哮喘组有明显下降(P ＜0.05);miR-155的表达与用力呼气第1秒量之间呈正相关(P＜0.01);miR-155过表达促进CD4+T细胞向Th1分化,而抑制miR-155的表达则促进CD4+T细胞向Th2分化.结论:过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155表达下调,其表达水平与哮喘严重程度相关,提示miR-155调控CD4+T细胞分化在哮喘中发挥重要作用.     

精氨酸酶1在食管癌患者外周血的表达及其临床意义

目的检测精氨酸酶1(arginase1,Arg1)在食管癌中的表达,分析其与髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressorcells,MDSCs)消长的关系,探讨癌症患者机体免疫抑制状态的可能机制。方法应用流式细胞术检测30例食管癌患者PBMC中的MDSCs比例;实时荧光定量PCR检测PBMC中Arg1、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆Arg1,IL-6和TNF-α含量。结果食管癌患者外周血PBMC中MDSCs比例及Arg1的mRNA水平均明显高于健康对照组(P<0.05),而IL-6和TNF-α的mRNA水平均低于健康对照组(P<0.05)。食管癌患者血浆Arg1含量高于健康对照组(P<0.05),而IL-6和TNF-a含量与健康对照组相比无明显差异(P>0.05)。此外,食管癌患者Arg1 mRNA水平和蛋白水平均与MDSC含量呈正相关(P<0.01)。结论 Arg1在食管癌患者外周血中的高表达与MDSCs水平和食管癌的发生、发展有着密切的关系,其检测将有助于临床食管癌的辅助诊断和预后判断。     

胃癌组织中SIRT-1、VEGF的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中沉默信息调节因子1(SIRT-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及临床意义。方法选取2016年6月至2018年6月本院胃癌患者120例,均接受胃癌手术切除术。采用免疫组化检测胃癌组织及其癌旁正常组织中SIRT-1、VEGF的表达。结果胃癌组织SIRT-1、VEGF表达阳性率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织SIRT-1、VEGF的表达与TNM分期、浸润深度、浆膜受侵、淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、肿瘤直径无关(P>0.05);胃癌组织SIRT-1与VEGF表达呈正相关(P<0.05)。结论胃癌组织中SIRT-1、VEGF呈高表达状态,且与胃癌的发生发展有关,可能共同促进了胃癌的生长、侵袭、转移等生物学行为。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Tim-3表达的检测及意义

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)的表达及对其炎症因子生成的影响.方法 利用多色流式技术和荧光实时定量PCR(qRT-PCR),分别检测不同状态的CHB患者外周血单核细胞亚群表面Tim-3分子和Tim-3 mRNA表达水平.给予重组人galectin-9和脂多糖(LPS)共刺激CHB活动期患者外周血单核细胞,用ELISA检测培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平.结果 慢乙肝免疫耐受期患者(IT)外周血单核细胞表面Tim-3表达水平显著高于健康对照组(HC)和免疫活动期患者(IA)(P＜0.01),其中IT患者CD14+ CD16-和CD14+ CD16+单核细胞亚群中Tim-3的表达均高于IA患者,差异均有统计学意义.qRT-PCR结果进一步证实IA患者外周血单核细胞中Tim-3 mRNA的表达高于HC (P =0.040).IA患者CD14+单核细胞上Tim-3的表达与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈正相关(r=0.362,P=0.028).重组人galectin-9和LPS共刺激IA患者外周血单核细胞比单独使用LPS刺激分泌更高水平的TNF-α,IL-1,IL-6.结论 CHB患者外周血单核细胞Tim-3表达上调,与血清ALT水平呈正相关,Tim-3/galeetin-9通路能够促进LPS诱导的单核细胞的炎症因子的分泌.     

Toll样受体4在多发性骨髓瘤患者外周血白细胞的表达及临床意义初探

为了探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在外周血白细胞上的表达及其在多发性骨髓瘤中的意义。采用流式细胞术检测50例多发性骨髓瘤患者及35名健康对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上TLR4的表达。结果TLR4在患者外周血淋巴细胞和中性粒细胞中的表达率较低;单核细胞TLR4阳性表达率在多发性骨髓瘤患者组为(24.71%±7.83%),显著低于健康对照组阳性率(43.14%±15.20%),差异有统计学意义(P<0.01),而TLR4在各型多发性骨髓瘤患者组的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。TLR4主要表达于外周血单核细胞,在多发性骨髓瘤患者中其阳性率降低,而且TLR4的阳性率高低与多发性骨髓瘤分型无关。表明TLR4及其介导的天然免疫应答与多发性骨髓瘤的发病存在一定的相关性。     

自身免疫性脑炎患者外周血Tfh 细胞的检测及其临床意义

目的:研究滤泡辅助性T 细胞(Tfh)在自身免疫性脑炎(AE)患者外周血中的百分比及临床意义。方法: 采用自身免疫性脑炎相关抗体检测阳性的患者脑脊液与大鼠脑组织冰冻切片共孵育并进行免疫荧光染色,观察结果;于收集血清和/ 或脑脊液(CSF)检查自身免疫性脑炎相关抗体阳性的患者17 例(其中,3 例为抗LGI1 抗体阳性患者,3 例为抗GABAR抗体阳性患者,10 例为抗NMDAR 抗体阳性患者,1 例为抗NMDAR 抗体、抗GABAR 抗体及抗AMPA2 抗体合并阳性患者),收集外周血样本共计21 例次:未治疗组6 例次,治疗组15 例次(其中,治疗后缓解组8 例次,治疗后未缓解组7 例次),健康对照者(对照组)外周血15 例。采用流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD3+ CD4+ CXCR5+ PD1+(即Tfh 细胞)的比例,并分析Tfh 细胞比例与患者疾病恢复程度的相关性。结果:淤自身免疫性脑炎相关抗体检测阳性患者脑脊液与大鼠脑组织冰冻切片共孵育免疫荧光染色结果呈现明显阳性反应; 流式细胞术检测结果显示未治疗组患者外周血Tfh 比例明显高于对照组(P<0.001),且治疗未缓解组患者Tfh 比例高于治疗缓解组(P<0.05),而治疗缓解组患者Tfh 比例与对照组比较,差异无统计学意义(P =0.107)。结论:自身免疫性脑炎患者外周血Tfh 比例升高可能与疾病的发生发展相关。