低氧诱导因子-1、促红细胞生成素在血管性痴呆大鼠海马的表达

目的观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和促红细胞生成素(EPO)在大鼠血管性痴呆(VD)形成过程中的动态表达规律,探讨VD发生的可能机制。方法采用大鼠双侧颈总动脉永久性阻断法(2-VO)建立VD动物模型,应用Y型水迷宫实验测定动物的学习记忆能力,采用免疫组化法检测大鼠海马CA1区HIF-1α和EPO蛋白的表达。结果1随缺血时间的延长,痴呆组大鼠学习记忆能力进行性下降(P<0.05);2痴呆组大鼠海马CA1区HIF-1α、EPO的表达于缺血1周时最明显,此后缓慢下降,但与假手术组比较仍处于较高水平(P<0.01);3痴呆组大鼠两蛋白表达与学习记忆能力呈高度正相关(P<0.01)。结论HIF-1α和EPO参与了VD的发生发展过程,并可能在此过程中通过HIF-1/EPO缺氧信号转导途径发挥了保护作用。     

脑出血灶周缺氧诱导因子-1α和血清促红细胞生成素表达的相关研究

目的探讨脑出血灶周缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血清促红细胞生成素(EPO)的表达及意义。方法采用免疫组化法、放射免疫法分别检测观察组患者31例脑出血灶周脑组织中HIF-1α及血清EPO的表达,并与正常对照组17例比较。结果观察组患者脑出血灶周HIF-1α表达率(41.94%)与对照组(0%)比较差异有统计学意义(P<0.01);HIF-1α随出血量增加表达随之升高,大、中量组与对照组及大量组与小量组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。EPO随出血量增加表达随之降低,但均高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);大、中量组与小量组比较差异有统计学意义(P<0.01)。HIF-1α随手术时间推迟表达升高,而EPO表达和病程无相关性。HIF-1α和EPO呈负相关(r=-0.432,P<0.05)。结论脑出血后HIF-1α、EPO的表达有明显改变,在灶周低氧所致血管新生过程中可能起重要作用,可作为判断缺血半暗带存在的重要指标。     

血清低氧诱导因子1α和促红细胞生成素水平与老年慢性肾脏病患者发生贫血的关系

目的 探讨血清低氧诱导因子1α(HIF-1α)、促红细胞生成素(EPO)水平与老年慢性肾脏病患者发生贫血的关系。方法 选取200例老年慢性肾脏病患者,根据有无贫血将其分为贫血组(120例)和无贫血组(80例)。比较两组患者的一般临床指标及血清HIF-1α、EPO水平。分析贫血组患者血清HIF-1α和EPO水平与血红蛋白、血清铁蛋白水平的相关性。采用Logistic回归模型分析老年慢性肾脏病患者发生贫血的影响因素。结果 贫血组血清肌酐、尿素氮、尿酸、HIF-1α水平高于无贫血组,血清铁蛋白和EPO水平、血红蛋白水平、估算肾小球滤过率低于无贫血组(均P<0.05)。贫血组患者血清HIF-1α水平与血清铁蛋白水平、血红蛋白水平均呈负相关(均P<0.05);血清EPO水平与血清铁蛋白水平、血红蛋白水平均呈正相关(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清HIF-1α水平是老年慢性肾脏病患者发生贫血的独立危险因素,血清EPO水平是保护因素(均P<0.05)。结论 合并贫血的老年慢性肾脏病患者血清HIF-1α水平升高,血清EPO水平降低,HIF-1α和EPO可...     

缺氧诱导因子-1α在血管性痴呆发病机制中的研究进展

血管性痴呆主要是由于脑区低灌注损伤所致的,以严重认知功能障碍为主的一组临床综合征.近年来随着分子生物学研究的快速发展,血管性痴呆病理发病机制的研究逐渐向分子水平转变.缺氧诱导因子-1α作为细胞对缺氧环境适应的重要调节因子,通过直接影响靶定位基因及其蛋白质的表达,介导细胞能量代谢及维持机体细胞功能特性等途径,参与血管性痴...     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠神经保护作用的研究进展

促红细胞生成素主要是由成人肾脏产生的一种造血生长因子,能刺激骨髓造血干细胞增殖、分化为红细胞,临床上多用于肾性贫血的治疗。近些年来,随着研究的深入,发现内外源性的促红细胞生成素在血管性痴呆大鼠中有着显著的神经保护作用。其具体作用机制可能包括减轻脑水肿、抑制炎性反应、清除自由基、减少神经细胞凋亡、改善脑组织血流量、促进神经干细胞增殖、保护血脑屏障等。相信随着研究的进一步发展,促红细胞生成素有可能成为临床治疗血管性痴呆新兴药物。     

大鼠海马HIF-1α和EPO在衰老过程中的表达

目的:探讨大鼠海马组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和促红细胞生长素(EPO)在衰老过程中的表达规律及二者在神经系统衰老过程中的作用.方法:应用尼氏染色和免疫组织化学技术观察不同月龄组(3,18,24,30月)大鼠海马CA1区神经细胞尼氏体及HIF-1α和EPO的表达情况.结果:随大鼠月龄的增大,海马CA1区神经细胞体积变大,排列稀疏,胞浆内尼氏体减少.随月龄增加海马CA1区HIF-1α阳性细胞数增加,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠海马CA1区EPO表达随月龄增加呈抛物线变化,由3月龄到18月龄,阳性细胞个数的增加有统计学意义(P＜0.05),由18月龄到30月龄,阳性细胞个数减少有统计学意义(P＜0.05).结论: HIF-1α与EPO在大鼠海马的表达在中年期之前,呈平行递增变化,在中年期之后,二者呈分离变化,提示HIF-1α活性下降和蛋白质合成功能的减退是衰老过程中EPO表达减少的主要原因,通过加强内源性HIF-1α的活性和补充外源性EPO有可能减缓神经系统的衰老.     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的 探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖、分化及认知功能的影响.方法 SD大鼠45只,按随机数字表法分为对照组、VD组和治疗组;改良2-VO+硝普钠法建立VD大鼠模型;治疗组腹腔注射EPO;采用穿梭箱系统检测大鼠认知功能;免疫组化法检测神经干细胞增殖分化情况.结果 行为学测试:VD组大鼠AAR比率显著低于对照组(P<0.01);治疗组大鼠AAR比率显著高于VD组(P<0.01),但仍显著低于对照组(P<0.01).免疫组化结果:BrdU(5-Bromodeoxyuridine)标记阳性细胞随时间推移从海马颗粒下层(the subgranular zone,SGZ)向颗粒细胞层(granule cell layer,GCL)迁移.造模后1周,VD组BrdU标记阳性细胞数明显高于对照组(P<0.01),低于治疗组(P<0.01);治疗组大鼠BrdU+DCX(doublecortin)双标阳性细胞数明显高于VD组(P<0.01).造模后4周,各组BrdU标记阳性细胞数与造模后1周相比均有明显下降,其中VD组下降最明显.治疗组BrdU+NSE(neuron-specific-enolase)双标阳性细胞数明显多于VD组(P<0.01).各组大鼠各时相点BrdU标记阳性细胞数中神经元所占比例无统计学差异(P>0.05).结论 腹腔注射EPO可促进VD大鼠脑内NSC增殖,显著改善大鼠认知功能,但对NSC分化无明显影响.     

低氧诱导因子-1α在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α).在不同病理级别人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其与病理级别问的关系.方法 收集67例人脑胶质瘤标本以及10例行内减压术切除的正常脑组织标本,采用免疫组织化学方法研究HIF-1α在不同病理级别胶质瘤及正常脑组织中的表达情况.结果 HIF-1α阳性表达率在Ⅲ、Ⅳ胶质瘤中显著高于Ⅱ级胶质瘤,分别为72.7%、80.0%、36.0%,在正常脑组织中未见阳性表达,随着病理级别的增高,HIF-1α的表达阳性强度也相应增加(r=0.518).结论 HIF-1α在人脑胶质瘤中存在高度表达,其阳性表达率及表达阳性强度随着病理级别增加而上升.     

低氧诱导因子-1α的基因克隆

目的克隆低氧诱导因子-lα(HIF-1α)cDNA,为进一步研究HIF-1α基因在肿瘤基因治疗中的作用提供依据。方法从健康成人外周血液中提取总的RNA,利用特异性引物,用两步法进行RT-PCR扩增出约2500 bp的HIF-1αcDNA,与T载体连接后转化感受态细胞DH5α,建立HIF-1α的cDNA克隆。结果RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,可见一条清晰特异扩增带,长2500 bp;cDNA经酶切鉴定证实为人低氧诱导因子1α基因。结论成功克隆HIF-lαcDNA,为进一步研究HIF-1α奠定了基础。     

重组人促红细胞生成素对急性高眼压兔眼视网膜缺氧诱导因子1α表达的影响

目的 观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对急性高眼压兔跟视网膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨国产rhEPO保护视网膜神经功能的机制.方法 在设立正常对照、模犁对照的情况下,日本大耳白兔皮下注射国产rhEPO,分别于缺血再灌注(生理盐水前房灌注法造成急性高眼压)后第1、3、7、14天免疫组化法观察视网膜HIF-1α基因表达.结果 正常兔眼视网膜无HIF-1α表达.模型组兔眼视网膜HIF-1α表达阳性细胞数较正常对照组明显增加(P<0.01),EPO组兔眼视网膜HIF-1α表达阳性细胞数变化与模型组相似,但较模型组显著减少(P<0.01).结论 国产rhEPO能够下调视网膜HIF-1α的表达.下调视网膜HIF-1α的表达可能是rhEPO对视网膜缺血冉灌注损伤的保护机制之一.     

低氧诱导因子-1α在溃疡性结肠炎中的表达

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在溃疡性结肠炎(UC)组织中的表达及与疾病活动性的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测47例UC患者(活动期35例、缓解期12例)和20例正常对照组中HIF-1α的表达.结果 溃疡性结肠炎患者活动期HIF-1α表达显著高于正常人,差异有显著性(152.27±16.26)vs(193.28±16.65)(P＜0.01),缓解期HIF-1α表达与正常人差异无显著性(185.93±11.80)vs(193.28±16.65)(P＞0.05),溃疡性结肠炎中HIF-1α的表达与Walmsley评分标准有相关性,且呈正相关.结论 HIF-1α作为一种转录因子可能参与了UC的发病过程并与疾病的活动性有关.     

低氧对人肺腺癌细胞SPCA-1低氧诱导因子-1α和低氧诱导因子-2α的差异性调控作用

目的探讨低氧对肺腺癌细胞SPCA-1低氧诱导因子-lα(HIF-lα)和低氧诱导因子-2α(HIF-2α)的差异性调控作用及其原因。方法体外培养肺腺癌细胞系SPCA-1细胞在常氧、低氧条件下培养不同时间,采用RT-PCR和Western blot检测低氧对HIF-2α和HIF-lα基因的激活作用。通过加入线粒体活性氧族阻断剂观察低氧对HIF-2α和HIF-lα蛋白表达的影响,探讨其表达调控的机制。结果正常氧条件下,SPCA-1整细胞提取物和细胞核提取物中,HIF-1α几乎不表达,HIF-2α在整细胞提取物中有少量表达,但在细胞核提取物中无明显表达。经低氧(0.5%O2)处理4 h后,HIF-2α和HIF-1α蛋白均明显增多;HIF-2α和HIF-1α蛋白与细胞浓度、氧浓度有关;HIF-1α蛋白在低氧4 h后增加,6 h后显著降低,而HIF-2α蛋白低氧4 h增加后并保持于此水平。HIF-1αmRNA水平在低氧6～12 h时降低,而HIF-2αmRNA表达持续升高;经线粒体活性氧族阻断剂鱼藤酮、二亚苯基碘鎓和粘噻唑菌醇处理4 h后,HIF-2α和HIF-lα蛋白水平明显降低。结论低氧可在肺腺癌细胞诱导HIF-1...     

低氧预处理大鼠缺血再灌注脑组织缺氧诱导因子-1α的表达

目的 :探讨低氧预处理对脑缺血再灌注组织缺氧诱导因子 - 1α表达的影响。方法 :SD大鼠 80只随机分为 3组 ,即假手术组 10只 ,缺血再灌注组 35只 ,低氧预处理组 35只。低氧预处理组连续吸入V(O2 ) :V(N2 ) =8:923h作低氧预处理 ,12h后再经插线左大脑中动脉栓塞 (MCAO)作缺血再灌注模型 ,缺血再灌注组不行低氧预处理 ,在大鼠大脑中动脉缺血 3h再灌注后 2h ,6h ,12h ,2 4h ,4 8hTTC法测定脑梗死体积 ,同时采用免疫组织化学方法观察低氧预处理对缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子 - 1α蛋白表达的影响。结果 :与缺血再灌组相比 ,低氧预处理组大鼠的脑梗死体积明显降低 ,缺氧诱导因子 - 1α蛋白的表达增加 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :低氧预处理对脑缺血再灌注有明显的保护作用 ,缺氧诱导因子 - 1α表达增加可能是其机制之一     

低氧诱导因子-1α对成骨细胞功能的调控作用

目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响。方法分别在21%和2%O2浓度下培养成骨细胞,21%O2培养24 h和2%O2培养6、12、24 h后分别检测成骨细胞表达HIF-1α、血管内皮生长因子、核结合因子a1、骨钙素的水平,检测成骨细胞增殖率、分泌碱性磷酸酶情况以及钙结节形成情况。结果与21%O2培养相比,2%O2浓度下,成骨细胞在mRNA和蛋白水平HIF-1α表达均上升,同时成骨细胞表达血管内皮生长因子、核结合因子a1、骨钙素的水平逐渐升高;成骨细胞增殖率增加,分泌碱性磷酸酶的能力以及钙结节形成能力也逐渐增强。结论在2%O2浓度下24 h内,HIF-1α能促进成骨细胞增殖、分化和矿化,从而促进成骨细胞的成骨功能。     

低氧诱导因子-1α对成骨细胞功能的调控作用

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响. 方法 分别在21%和2%O2浓度下培养成骨细胞,21%O2 培养24 h和2%O2培养6、12、24 h后分别检测成骨细胞表达HIF-1α、血管内皮生长因子、核结合因子a1、骨钙素的水平,检测成骨细胞增殖率、分泌碱性磷酸酶情况以及钙结节形成情况. 结果 与21%O2培养相比,2%O2浓度下,成骨细胞在mRNA和蛋白水平HIF-1α表达均上升,同时成骨细胞表达血管内皮生长因子、核结合因子a1、骨钙素的水平逐渐升高;成骨细胞增殖率增加,分泌碱性磷酸酶的能力以及钙结节形成能力也逐渐增强. 结论 在2%O2浓度下24 h内,HIF-1α能促进成骨细胞增殖、分化和矿化,从而促进成骨细胞的成骨功能.     

低氧诱导因子-1α对毛囊细胞的作用

目的探讨外源性人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在成纤维细胞中表达的可行性及其对毛囊周围细胞活性的影响。方法通过脂质体将含有HIF-1αcDNA的真核表达载体pcDNA3.0稳定转染成纤维细胞,应用RT-PCR及Westernblot方法检测HIF-1α在成纤维细胞中的表达,ELISA法检测转染细胞上清液中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达,RT-PCR方法检测转染后细胞中成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。将该上清加入成纤维细胞及真皮鞘细胞中,MTT法检测加入上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。结果RT-PCR及Westernblot可检测出转染后细胞中HIF-1α的表达,MTT检测加入转染上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性增强（P〈0.05）,并且该上清液VEGF的表达显著高于未转染组（P〈0.01）。转染后成纤维细胞的bFGF的mRNA表达显著高于未转染组（P〈0.01）。结论应用脂质体能够成功地将外源性人HIF-1α基因转染成纤维细胞,并进行有效表达,其表达的HIF-1α可增强细胞活性且可诱导转染细胞上清液中VEGF的表达,并增加bFGF的mRNA表达,且转染细胞上清可增强成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。推测HIF-1α通过其下游因子VEGF及bFGF促进毛囊相关细胞的活性,为HIF-1α对毛囊作用的进一步研究打下了基础。     

低氧诱导因子-1α在小鼠次级骨化中心形成中的表达

目的研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在小鼠肢体次级骨化中心形成阶段的时空表达规律,并探讨其在长骨次级骨化中心发生和发育过程中的作用。方法解剖镜下整体观察股骨次级骨化中心的发生、发展过程;以地高辛标记的HIF-1αcRNA为探针,采用组织切片原位杂交技术,观察HIF-1αmRNA在次级骨化中心形成阶段的时空表达规律;通过免疫组织化学法观察HIF-1α蛋白在次级骨化中心形成中的表达及分布。结果出生6d,在股骨髁部见到不透光的骨化影,提示次级骨化中心开始出现;其后不透光影在股骨髁内不断膨大。原位杂交显示,出生6d时股骨髁中心出现小片状荧光增强区,出生8d时荧光增强区呈放射样扩大,表示HIF-1αmRNA有大量表达。免疫组织化学法显示,出生6d时股骨髁中心少量HIF-1α蛋白表达,出生8d时次级骨化中心的细胞核内出现大量HIF-1α蛋白表达,之后很快消失。结论HIF-1α在次级骨化中心发育中呈规律性的时空表达,提示其可能参与小鼠长骨次级骨化中心形成的骨发育过程。     

低氧诱导因子-1α在糖尿病肾病中的表达及其意义

目的 探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在实验性糖尿病肾病中的表达.方法 将30只健康Wister大鼠适应性喂养1周后随机分为模型组和对照组各15只,其中模型组于左下腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型,对照组腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液.两组均自心脏取血,采用全自动生化分析仪测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,并计算内生肌酐清除率（Ccr）;采用免疫组化及westerblot分析法测定肾脏组织中HIF-1α表达.结果 模型组血清BUN显著高于对照组,Ccr显著低于对照组,HIF-1α表达显著高于对照组.结论 HIF-1α在糖尿病肾病发生、发展中起重要作用,此为糖尿病肾病防治及预后判定提供了依据.     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠胆碱能神经纤维保护作用的研究

目的：研究促红细胞生成素（Epo）对血管性痴呆（VD）大鼠胆碱能神经纤维的保护作用,探讨EPO对脑缺血后损伤的保护作用及其机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、用药组和模型组,每组12只。用药组和模型组按“两血管阻断＋硝普钠降压”法建立VD大鼠模型,并给予Epo治疗,采用Morris水迷宫实验、Nissl染色、乙酰胆碱酯酶（AchE）组化染色和AchE活性测定法检测Epo对学习记忆、细胞形态和AchE表达和活性的作用。结果：与假手术组和用药组相比,Epo明显缩短VD模型组大鼠Morris水迷宫中的逃避潜伏期,显著增加了海马CA1区锥体细胞及尼氏小体数量,并且显著提高了AchE免疫阳性细胞数量和AchE活性（P＜0.01, P＜0.05）。结论：EPO可改善VD大鼠行为学表现和病理损害,其机制可能与保护胆碱能神经纤维有关。     

低氧诱导因子-1α对大肠癌作用的研究进展

研究表明,多数恶性肿瘤中存在显著的缺氧区域,而缺氧可促使低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha ,HIF-1α)的表达,其表达可使肿瘤细胞适应缺氧环境,并促进新生血管的生成,为肿瘤的侵袭和转移创造条件[1].