羊水细胞X染色质检验操作改进

我们对羊水细胞 X 染色质检验的方法进行了简化和改进,取得了很好的效果,在25例预测中准确率为96%,简要报道如下:取羊水3毫升以上,1000转/分离心沉淀5分钟,去上清液,沉渣以0.075M 氯化钾溶液低渗处理37℃30分钟后,1000转/分离心沉淀5分钟,沉渣以丙酮、     

未培养的羊水细胞荧光原位杂交和标准核型分析的前瞻性对比研究

1996年11月～1997年12月,因超声发现异常,血清筛选异常或高龄孕妇到妇科遗传科进行侵入性产前诊断遗传咨询。904例羊膜穿刺后未培养的羊水细胞进行快速荧光原位杂交(FISH)和标准的核型分析。取2～5 ml清亮羊水于1000转/min,离心5 min进行FISH分析。去上清液后细胞团悬浮于0.56％ KCL 3 ml中,在37℃水浴中20min,加2 ml甲醇/冰醋酸(3:1)。轻轻旋转样本,在1 000转/min下离心悬液5 min。细胞团悬浮在0.5 ml的上述固定液中,此固定标本可在-20℃长期保存或离心调整容量后直接放在载玻片上,制成细胞悬浮液滴     

评价化学物质毒性的细菌脱水酶活性试验

本文作者提出用大肠杆菌脱水酶活性试验,衡量化学物质的毒性,并用以对敌百虫进行初步评价。[方法] 试验菌悬液的制备:自培养24小时试验菌的肉汤-蛋白胨琼脂斜面,刮取菌落制成浓生理悬液,于4,000转/分,离心20分钟沉淀菌体,弃上清液,再加自来水或生理溶液离心(4,000转/分)20分钟,反复沈菌体3～4次,最后用生理液配成一定浓度(绿色滤光片,5mm比色皿,光电比色计光密度值应为0.32～0.34)的菌悬液。反应:取清洁干试管,依次加1/15 M Na_2HPO_41.2ml,0.1 M 葡萄糖(水解基质)0.5ml,0.1 MMgSO_40.1ml,0.5%T. T. C 0.2ml,1ml菌悬液,受试毒物加     

140例健康人高铁血红蛋白的测定

根据中国医学科学院血液病研究所提供的高铁血红蛋白测定方法,通过实践,我们稍作改进,专人对上海地区140例城市健康成人采指血作了测定。现将测定方法、结果和体会分述如下。 测定方法 1.试剂 (1)pH6.6M/60p.B.液; (2)5％铁氰化钠(或钾)液; (3)6％氰化钠或氰化钾液。 2.操作步骤 取一试管,加入pH6.6M/60p.B.液10ml,加入新鲜全血0.1ml,充分混匀后经过离心10分钟(3000转/分。)用吸管吸取离心后的上清液5ml移入A管,另5ml移入B管。     

荧光原位杂交技术在产前染色体疾病诊断中的应用性研究

目的:优化荧光原位杂交技术(FISH)检测未经培养羊水细胞的方法学平台,规范操作程序,探讨荧光原位杂交技术在检测胎儿染色体数目异常的临床诊断中的临床应用价值。方法:收集适合进行产前诊断的羊水标本25 ml,取5 ml进行FISH(13、21、18、X、Y)检测;同时将20 ml羊水细胞进行细胞培养,收获后制片,常规进行染色体核型分析。结果:应用FISH检测技术,共检测90例标本。均获得诊断结果,检测出1例非整倍体,1例46,XX/46,XY嵌合体,FISH检测标本均能在24～48 h内出结果。FISH结果与核型分析结果一致。结论:FISH技术具有实验方法稳定,结果准确可靠,需用标本量少等特点,因此在临床上有很高的应用价值。     

用羊水定量荧光聚合酶链反应方法对13三体征行产前检测

为选择一种快速、价廉,甚至可从单个胎儿细胞产前诊断13三体征的方法,作者采用了多态小串联重复(STRs)荧光聚合酶链反应(PCR)方法。 脱氧核糖核酸(DNA)准备:采集1 ml羊水细胞离心15 000 rpm/min 10 min,除去上清液,从Ready Amp Genomic纯化系统取100μl树脂加入细胞团。作为以后提取过程备用,每个PCR从这些DNA溶液中取3μl供使用。荧光PCR:PCR扩增是在两个分开     

非染色法与细胞活体染色法光镜检验尿液红细胞形态对比

我院开展了光镜非染色法于血球计数池中同时观察红细胞形态计数的改良法,并取一组病例同一血尿标本分别进行细胞活体染色与非染色两种方法观察红细胞形态作一对比报告如下: 临床资料:本组30例中,男女各15例,按1985年9月南京会议的肾小球疾病临床分型,选择AGN(急性肾炎)10例,CGN(慢性肾炎普通型)10例,尿路结石10例,分别用下述两种方法镜检。方法:取清晨中段尿10ml离心(1500rpm×5’),去上清液留0.5ml混均,取一滴滴入一侧改良纽巴血球计数池中。将所剩沉淀物加入一滴细胞活体染色液(按Seelicolor染色程序)混匀,静置1分钟后再混匀,取一滴滴入另一侧改良纽巴血球计数池中,静置1分钟后用Olympus     

用混入羊水液中胎儿血的微量培养做产前细胞遗传学的研究

目前,染色体异常的产前诊断通常用培养的羊水(AF)细胞进行,这种技术仍存在下列主要问题:(1)获得结果延迟;(2)有细菌、真菌或支原体污染的危险;(3)AF中存在的红细胞妨碍AF细胞生长;(4)体外染色体突变的危险。胎儿淋巴细胞的细胞遗传学分析可以克服这些问题。这种技术以下列实事为基础:(1)通过Kleihauer试验容易将胎儿红细胞和母体红细胞区分开;(2)早在妊娠第12周,胎儿的淋巴细胞对PHA就有良好的反应,(3)通过性别和/或标记染色体能区分胎儿核型和母体核型。材料和方法:作者共对37例偶然的胎盘穿刺中获得的胎儿淋巴细菌进行了细胞遗传学研究。羊水穿刺均在妊娠第16～20周时进行。羊水中混有血液立即肝素化,并以300g离心10分钟。从离心的细胞团中取一滴用于Kleihaure试验,以估计胎儿红     

发酵罐中培养的蜡样芽胞杆菌肠毒素合成的限定条件

作者试图通过确定蜡样芽胞杆菌肠毒素实验性培养合成的最适条件,以阐明食品中肠毒素产生的条件。把蜡样芽胞杆菌纯培养液以不同的接种量(1%、5%和10%)接种于不同葡萄糖含量(0、1%、5%和25%)和不同pH(5.0,5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0和8.5)的CA液体培养基中,在不同温度(20、25、32、37和42℃)下,用不同的振速(200、400、600和800转/分)和通入不同流速(0、20、50、100、300和944 ml/分)的空气,培养4～9小时后,分别以5ml培养液置于离心机中,高速离心10分钟,     

FISH技术在诊断唐氏综合征及植入前遗传学诊断中的临床应用

目的:探讨优化现有荧光原位杂交(FISH)技术用于产前诊断唐氏综合征及其单细胞植入前遗传学诊断(PGD)的临床应用价值。方法:应用21号和X染色体特异性荧光素标记的双色混合探针对正常人体标本和25例唐氏综合征患儿外周血以及10例血清筛查阳性孕妇羊水进行FISH分析,同步进行羊水细胞培养,行常规细胞染色体核型分析,并以核型分析结果为金标准,建立一套稳定的FISH方法。在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术方法基础上,用该方法分别对13例未受精卵、卵裂球进行唐氏综合征遗传学诊断。结果:正常羊水间期细胞和拟诊唐氏综合征羊水间期细胞经FISH分析,结果与染色体核型分析的结果一致,符合率100%。结论:建立的FISH方法具有快速、简便、准确性高、特异性强的特点,是快速进行产前唐氏综合征筛查及扩大PGD技术应用的简易可靠技术,有很好的临床应用价值。     

用高压液相色谱测定鱼肝中的α-生育酚

本文叙述了一个用高压液相色谱测定鱼肝脏中维生素E的简便方法。此方法不需要皂化和薄层层析,这样就避免了在样品处理过程中α-生育酚受到破坏。从3～4条鱼的肝脏中每个取样约0.5 g,称重。样品在15 ml二(口恶)烷-异辛烷(20+80)混合液中匀浆1分钟。匀浆在每分钟10,000转的转速下离心5分钟。吸5 ml上清液于250 ml园底烧瓶中。弃去剩余上清液,沉淀物再用15 ml混合液匀浆,离心,取5 ml     

桂茸枸杞酒微生物限度检查试验及方法学验证资料

桂茸枸杞酒微生物限度检查法 一、细菌、霉菌及酵母菌数计数 取本品10ml,加入PH7．0无菌氯化钠一蛋白胨缓冲液90ml,混匀,取约10ml,离心20分钟,3000转／分钟,去上清液,剩约2ml加稀释剂至原刻度作为做为1：10供试液。依照《中国药典》2005年版一部附录XIIIC微生物限度检查法的培养基稀释法检验,每稀释级1ml供试液分注5个平皿,按平皿法记数规则报告菌数,测定细菌、霉菌及酵母菌数。     

多巴胺转复室上性心动过速伴低血压28例疗效观察

目的:观察多巴胺对阵发性室上性心动过速(PSVT)伴低血压的转复效果。方法:28例明确诊断PSVT伴低血压患者,给予多巴胺注射液20 mg加入生理盐水3ml中,配置成5ml溶液,10 s静脉匀速注射,观察转复成功率,转复后1 0min、1 h患者心率及血压变化变化情况。结果:转复成功率89.3%,其中有25例在静脉注射盐酸多巴胺注射液后10分钟内转复为窦性心律,3例失败。成功患者无血压大于160/90 mmHg者及心率小于55次/分者。终止PSVT时19例出现恶心、呕吐症状,9例无特殊不适,但所有出现恶心、呕吐症状患者均为一过性发作,10分钟内均自行缓解。结论:非常规的抗心律失常药物多巴胺可作为终止PSVT伴低血压患者的转复药物,转律效果可靠。     

污水中甲肝病毒的检测

<正> 所用样品为下水道中污水。病毒的分离:在样品中加入其1/10量的磷酸盐缓冲液(0.1克分子;PH—7.2),使其达到PH—7.2;再加入1/4量的氟利昂(halocarbon 113,B.D.H)。用 Sorvall混合器8,000转/分勾浆;10,000×g离心10分钟。所得上层水相物用于检测。水相样品直接接种于 BGM 细脆可检测肠病毒。     

人轮状病毒感染的诊断:电泳法、改良的补结试验与电镜法检出轮状病毒的比较

用补体结合试验和醋酸纤维膜对流免疫电泳检查了95份临床标本,并与电镜法相比较。其中,75份为急性胃肠炎病人粪标本,20份为非急性病毒感染儿童的粪标本。以PBS将粪便标本制成10%(w/v)悬液,先以3,000转/分在4℃下离心15分钟除去大颗粒,其上清液再以9,000转/分离心60分钟除去颗粒和细菌,最后以55,000转/分离心60分钟。将沉淀小团悬浮于0.2毫升水中,在显微载玻片上进行单纯补结试验。再将以     

高效液相色谱法测定血清中[邻(2,6-)二氯苯胺基)苯基]乙酸

作者用高效液相色谱法测定了血清中[邻2,6-二氯苯胺基)苯基]乙酸的浓度。实验用Pye Unicam Lc3×P液相色谱仪,配有进样器、恒温仪和带玻璃碳电机的电化学检测器。检测器的工作电压为 900 mV,灵敏度为5nA,流出物的温度为25℃。采用250×4mmLichrosorb氨基柱(10 μm),流动相为乙腈高氯酸(0.0025mol/L,35:65V/V),流速0.9ml/min。取0.5 ml样品,加入装有25 ng内标(氨基苯乙酸)的试管内,加2ml磷酸水溶液(25mol/l)和3 ml苯,振摇5分钟后于2000 g离心5分钟。苯层(2 ml)移入另一试管(含NaOH     

羊水过少与妊娠结局110例临床分析

目的:探讨羊水过少和妊娠结局的关系。方法:超声监测羊水指数,记录分娩时的羊水总量<300ml的病例110例,结合分娩情况进行临床分析。结果:羊水过少,发生于孕周>42周占34.48%(10/29),孕40～42周占8.32%(57/685),孕37～39+6周占2.75%(40/1455),<37周者占5.08%(3/59)。110例中有妊娠合并症者占48.18%(53/110),剖宫产率为46.36%(51/110)。结论:羊水过少提示胎儿宫内情况不良,适时采取适当的方式终止妊娠,取得良好的妊娠结局。     

利用脐血分离出胎儿细胞作性别和囊性纤维化症的诊断

荧光聚合酶链反应(PCR)是一相对价廉和敏感的诊断单基因缺陷和/或非整倍体的方法,包括种植前的诊断,但用于分离胎儿红细胞的诊断还较少。因此,作者提出了采用以脐血作为一种从母血中分离胎儿红细胞的一种模式。方法是在产房取10例已分娩的男性胎儿的脐带血。每例10 ml,经Ficoll密度梯度离心和磷酸缓冲液洗涤,获得有核细胞。将细胞离心到玻片上,确保细胞在玻片上很好地分散开,没有重叠。按血液学的BDH快速染色法,用苏木精与伊红对细胞染色,放大200倍下检查染色效果,细胞与胞核很容易     

2%利多卡因凝胶在经直肠前列腺穿刺活检中的应用

目的评价2%利多卡因凝胶在经直肠前列腺穿刺活检中的临床应用价值。方法100例接受经直肠超声引导13点前列腺系统穿刺活检术的患者随机分为A、B两组。A组患者50例,活检前5分钟直肠内灌注2%利多卡因凝胶10ml。B组患者50例,则应用同量开塞露作对照。采用视觉模拟评分(VAS)评估患者在穿刺活检中的疼痛程度。结果两组患者平均年龄分别为69岁、71岁(p>0.01),平均PSA水平为22ng/ml、19ng/ml(p>0.01),平均前列腺体积为46ml、48ml(p>0.01),平均疼痛评分(VAS)分别为2.5分、5分(p<0.01)。结论前列腺穿刺活检前直肠内应用2%利多卡因凝胶是一种简单、安全、有效的局麻方法,值得临床推广应用。     

肾小球性血尿的诊断思路

血尿是泌尿系统疾病的常见临床症状,系指尿内红细胞数异常增多。正常人新鲜尿液离心沉淀(10ml尿液,以1,800转/分离心5分钟)取沉渣涂片,每高倍视野不超过0～3个红细胞。12小时尿沉渣计数红细胞<50万,每小时尿沉渣计数红细胞<6万。轻型血尿仅光镜下可见红细胞增多,重症可呈肉眼血尿,通常每升尿液中含有1ml血液时,尿液呈淡红色(洗肉水样)为肉眼血尿。临床上血尿最常见于泌尿系统疾病约占98%。泌尿系统疾病引起的血尿可分为肾小球性血尿与非肾小球性血尿。肾小球性血尿是由原发性