内源性超氧阴离子自由基对食管癌Eca—109细胞癌基因表达？…

目的：观察内源性超氧阴离子自由基对癌基因表达的影响。方法：构建正、反义人ｎＳＯＤ（ＳＯＤ２）真核表达载体，转入食管癌细胞Ｅｃａ－１０９；通过升高或降低细胞内ＳＯＤ２的水平来增加或减少细胞内Ｏ２＾－的清除从而改变细胞内Ｏ２＾－的水平；以ＲＮＡ斑点杂交和免疫细胞化学方法检测癌基因表达的变化，以流式细胞仪检测细胞周期变化。     

内源性超氧阴离子自由基对食管癌Eca-109细胞癌基因表达的影响

观察内源性超氧阴离子自由基对癌基因表达的影响．方法：构建正、反义人MnSOD（SOD2）真核表达载体，转入食管瘤细胞Eca-109；通过升高或降低细胞内SOD2的水平来增加或减少细胞内O2-的清除从而改变细胞内O2-的水平；以RNA斑点杂交和免疫细胞化学方法检测癌基因表达的变化，以流式细胞仪检测细胞周期变化．结果：基因转入细胞并表达．转染SOD2基因细胞内SOD2水平升高，Cu，Zn-SOD（SOD1）水平未变，细胞内O2-水平下降49％以上；bcl-2表达下调，p53，c-Ha-ras表达轻度上调；流式细胞仪检测S期细胞减少．转染反义SOD2细胞SOD2水平降低，但SOD1活力水平却升高，因而总SOD水平增加，细胞内O2-水平也降低32％以上；bcl-2，p53，ras表达均上调，S期细胞数变化不明显．结论：①通过转SOD2基因改变细胞内O2-水平的方法是可行的，但仍需改进；②细胞内O2-水平的变化可影响癌基因的表达，而且由转染SOD2基因引起细胞内O2-水平降低对Eca-109食管癌细胞的增殖表现出抑制作用．     

超氧阴离子自由基与皮瓣坏死

1983年Manson等首次提出了皮瓣缺血——再灌流损伤的自由基假说,认为皮瓣的坏死与缺血——再灌流过程中产生的自由基有关.根据这一新理论,人们对自由基引起皮瓣损伤的病理机制进行了大量研究,发     

芦荟对超氧阴离子自由基链式反应的影响

为探讨芦荟对氧自由基的作用,该研究选择产生超氧阴离子自由基（Ｏ２）的邻苯三酚自氧化反应,观察芦荟对该反应系统吸收光谱变化情况的影响,并采用总抗氧化能力试剂盒对芦荟水溶液进行测试。结果显示,芦荟确有较强的抗氧化能力,同时它能使邻苯三酚自氧化反应系统的光谱曲线随时间变化的速度加快,而特征吸收波长处Ａ值升降幅度减小,上述能力和影响均有明显的浓度依赖关系。表明芦荟能加快Ｏ２参加的反应,使反应提前终止,并抑制了反应物→中间产物及中间产物→后续产物的转化率。提示该体系Ｏ２自由基的链式反应可能被芦荟阻断,从而达到抗氧化的效果。     

苋菜红色素对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用

目的 研究从苋菜中提取的红色素对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用. 方法 采用超声波法从苋菜中提取红色素,以Fenton反应产生羟自由基模型、邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基模型,用紫外和可见分光光度法测定苋菜红色素对模型中产生的*OH和O-2*的清除作用. 结果苋菜红色素对羟基自由基和超氧阴离子均具有清除作用. 结论 苋菜红色素是一种良好的氧自由基清除剂.     

肿节风、玄参对超氧阴离子自由基清除率影响的实验研究

目的研究肿节风、玄参在体外对超氧阴离子自由基（0动的清除率影响，进一步探讨其药理作用机理。方法利用AP—TEM印系统产生超氧阴离子自由基及比色测定法，在分别加进肿节风、玄参水提取液后．计算清除率的变化。结果0．1g生药肿节风水提取液对O2清除率回为（43．62±3．90）％，0．1g玄参水提取液清除事回为（43．03±4．00）％；0．05g肿节风加0．05g玄参水提取液清除率回为（42．67±2.94）％．三者比较无显著性差异（P〉0．05）；0．1g肿节风加0．1g玄参水提取液清除率回为（75．48±0．96）％．明显高于前三者伊〈0．01）。0．1、0．05、0．025、0．0125g肿节风的清除率分别为50．85％、28．81％、22．88％、16．10％，r=0．9944；玄参为47．46％、35．59％、22．88％、12．29％，r=0．9643。结论肿节风、玄参对超氧阴离子自由基有较好的清除作用，合用后作用明显增强，可能与它们的药理作用有关。     

玉郎伞提取物对超氧阴离子自由基和羟自由基的抑制和清除作用

目的 :探讨玉郎伞提取物 (YL S)对氧自由基的抑制和清除作用。方法 :采用分光光度法检测 YL S对超氧阴离子自由基(O2 · - )和羟自由基 (· OH )的清除及抑制作用。结果 :YL S浓度为 0 .15、0 .30、0 .6 0 g/ ml在体外对· OH的清除率分别为7.1%、2 9.1%、6 8.5 % ,对 O2 · -的清除率分别为 4 0 .5 %、4 9.9%和 6 4 .5 % ,对 O2 · -生成的抑制率分别为 4 8.0 %、6 0 .3%和6 8.8%。结论 :YL S对 O2 · - 具有明显的抑制及清除作用 ,对· OH也有一定的清除作用。     

PMA诱导节律基因表达对细胞紫外线损伤的影响

目的研究诱导NIH3T3细胞节律基因表达对细胞紫外线损伤的影响。方法用体外节律诱导剂乙酰肉豆蔻佛波酯诱导NIH-3T3细胞节律基因表达。分别选择mPer2基因表达的谷值和峰值时刻对细胞进行紫外线照射,以非诱导节律的单纯照射组为对照,通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,平板克隆形成试验检测细胞增殖情况。结果mPer2基因表达峰值时进行紫外线照射的细胞,与mPer2基因表达谷值时和非诱导节律紫外线照射细胞比较,增殖能力强、凋亡率低、G1期阻滞明显。结论节律基因诱导的NIH3T3细胞的紫外线损伤减小,并与mPer2的基因表达相关,其保护作用可能与mPer2基因过表达有关。     

The effect of intracellular superoxide anion radical on the expression of hcl-2, p53 and c-Ha-ras in Eca-109 esophageal carcinoma cells

Oxygenfreeradicalsarenormalintracellularby--productofcellaerobicmetabolism,whichhavemanybiologicaleffects,andareassociatedwithmanyphysiologicalorpathologicalprocessinorganism['j.Oncogeneareimportantgenesincellproliferation,differentiation,andapoptosis.Theexpressionofoncogenestakespartintheregulationoftheprocessesabove.Inordertodisposethemolecularmechanismofoxygenfreeradicals'biologicaleffects,wehaveobservedtheinfluenceofOiontheexpressionofhcf--2.p53andc--Haarraswhichisassociatedwithapoptosisa…     

慢性应激对大鼠淋巴细胞DNA损伤机制的研究

目的:研究慢性应激对大鼠淋巴细胞DNA损伤机制.方法:选择Wistar成年雄性大鼠18只,建立慢性应激动物模型(实验组).测定大鼠血清皮质醇的含量;电镜观察海马超微结构改变;黄嘌啉氧化酶法测定大鼠血清和脏器中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性;TBA法测定脂质过氧化物(Malondiasldehyde,MDA)含量;彗星实验评价大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤情况.结果:实验组海马超微结构异常;血清SOD活性为(56.70±15.65)U/ml,低于对照组(P＜0.05),MDA含量为(9.21±2.75)nmol/ml,高于对照组(P＜0.05);SOD活性与皮质醇呈负相关(r=0.52,P＜0.05),MDA含量与皮质醇呈正相关(r=0.54,P＜0.05),彗星细胞发生率56.5%,高于对照组(P＜0.05);实验组淋巴细胞DNA损伤率较对照组明显增加(P＜0.05);DNA损伤与MDA含量呈正相关(r=0.53,P＜0.05).结论:慢性应激可损伤海马超微结构,可诱导机体产生过量的自由基,促进脂质过氧化,进而损伤外周血淋巴细胞DNA.     

六价铬暴露人支气管上皮细胞致DNA损伤相关差异表达基因筛选

目的 建立六价铬Cr（Ⅵ）暴露人支气管上皮细胞（16HBE）的基因差异表达谱,并分析其致DNA损伤修复相关差异基因表达改变,筛选该毒性作用产生过程中的关键基因,为研究六价铬毒性机制提供新的思路和理论依据。方法 采用Affymetrix 3′IVT基因芯片检测Cr（Ⅵ）急性暴露16HBE细胞诱导的差异基因表达谱,运用生物信息学方法分析差异基因的相关生物学功能;进一步用Western blot蛋白电泳技术验证差异基因的蛋白表达水平。结果 Affymetrix 3′IVT基因芯片结果显示约200个基因表达变化大于2倍以上;生物信息学分析提示差异基因主要富集在DNA损伤与修复、转录与翻译等通路;DNA损伤修复通路中,FEN1、PCNA和APX1的mRNA表达水平均呈上升趋势,其中FEN1和PCNA基因的表达量均增加了约100%,差异有统计学意义（P<0.01）;Western blot结果显示FEN1、PCNA和APX1表达水平均呈上升趋势,与基因表达变化一致,其中FEN1的表达变化差异有统计学意义（P<0.05）。结论 Cr（Ⅵ）急性暴露人支气管上皮细胞可激活DNA损伤修复信号通路,使DNA损伤修复基因FEN1表达上调,DNA损伤修复通路可能在Cr（VI）诱导16HBE细胞毒性中发挥重要作用。     

德氮吡格对人肝癌细胞株QGY-7701基因表达的影响

目的研究德氮吡格(TNBG)对人肝癌细胞株QGY-7701基因表达的影响,探讨其抗肿瘤作用的分子机制.方法采用基因芯片检测德氮吡格处理人肝癌细胞株QGY-7701前后mRNA的改变情况.结果基因芯片筛选出差异表达基因共1 200条,尤以脂代谢相关基因变化最显著:脂肪合成有关的10条基因表达上调,脂肪分解有关的3条基因和脂肪转移有关的1条基因表达下调.结论德氮吡格的抗肿瘤效应可能是通过干扰细胞的脂代谢来实现的.     

重组Nox1在NIH3T3细胞中的表达及其对活性氧的影响

目的构建Nox1的真核表达载体，探讨其在NIH3T3细胞中表达后对活性氧水平和药物细胞毒易感性的影响。方法构建携带Nox1基因的真核表达载体pcDNA3-Nox1，并将其转染NIH3T3细胞，采用RT-PCR方法检测Nox1在mRNA水平上的表达，检测细胞活性氧和细胞活力。结果RT-PCR显示转染后的NIH3T3细胞可以有效地转录Nox1 mRNA，细胞中的活性氧水平明显升高，同时对As2O3细胞毒作用更加敏感。结论含有Nox1 cDNA的重组质粒pcDNA3-Nox1转染细胞后可有效表达Nox1，使活性氧水平升高，并因此增加细胞对药物细胞毒的敏感性。     

苯引起鼠胸腺细胞DNA的损伤及其机制的研究

目的研究苯对小鼠胸腺细胞DNA的损伤及其机制. 方法运用单细胞凝胶电泳技术,将苯分为3个浓度组染毒胸腺细胞,测定胸腺细胞DNA的彗星尾长.结果在有代谢活化系统存在下,苯对小鼠胸腺细胞DNA产生损伤,且呈浓度依赖.但加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸后,可抑制苯对胸腺细胞DNA的损伤.结论苯能引起胸腺细胞DNA损伤,可能与其代谢物有关.