微量元素水平对体外人宫颈癌细胞药物敏感性的影响

目的:探讨不同微量元素水平对体外人宫颈癌细胞药物敏感性的影响。方法:对人宫颈癌细胞(Hela)进行体外有药培养,同时将不同水平的微量元素水平组合加入有药培养液中,72 h后用MTT法检验化疗药物的敏感性。结果:人宫颈癌细胞在不同微量元素水平体外有药培养后出现不同变化。结论:不同微量元素水平对体外人宫颈癌细胞药物敏感性不同。     

顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其对细胞周期影响的研究

目的:观察顺铂对人宫颈癌Hela细胞凋亡及细胞周期的影响,以揭示顺铂治疗宫颈癌的机理。方法:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的顺铂作用于培养的人Hela细胞72 h,用流式细胞仪分析其凋亡率及细胞周期。结果:顺铂能以浓度依赖的方式诱导Hela细胞凋亡,并呈现出G0/G1期阻滞作用。结论:顺铂能诱导Hela细胞凋亡并改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期,这可能是顺铂抗宫颈癌作用的重要机制之一。     

MTT法体外测定脑胶质细胞瘤对化疗药物的敏感性

目的 探讨运用MTT法测定脑胶质细胞瘤体外对化疗药物的敏感性。方法 采用改良的MTT法测定50例胶质细胞瘤标本对8种化疗药物的体外敏感性。结果 50例胶质细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性从高到低依次为威猛、二氯乙基亚硝脲、顺铂、长春新碱、环磷酰氨、甲氨喋呤、5-氟脲嘧啶、阿霉素。结论 MTT法检测脑胶质细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性有助于指导临床选择肿瘤敏感性的化疗药物，提高化疗效果，具有重要的临床应用价值。     

顺铂与卡铂对宫颈癌化疗作用的对照研究

目的:宫颈癌的化疗是以铂类药物为基础的化疗,对顺铂和卡铂在宫颈癌化疗中的作用进行体外药敏实验,对其细胞毒性进行比较,为临床选择用药提供实验依据。方法:1.ATP标准曲线的测定;2.采用三磷酸腺苷生物发光法,对宫颈癌细胞株Hela、Caski、Siha进行药敏实验,药物分别为顺铂和卡铂,浓度分别为0.5×、1×和2×血浆峰值浓度。结果:1.ATP标准品在浓度为10-9~10-5mol/ml时,与发光计数值显示极好的线性关系,直线方程为Y=0.892X+10.257,相关系数r=0.998(P<0.001)。2.在0.5×、1×和2×血浆峰值浓度下,Hela细胞株顺铂作用抑制率分别为53.5%、69.2%、100%,卡铂作用抑制率分别为56.1%、64.2%、98%;Siha细胞株顺铂作用抑制率分别为78.3%、84%、95%,卡铂作用抑制率分别为69.5%、77.8%、98%;Caski细胞株顺铂作用抑制率分别为36%、45%、52.6%,卡铂作用抑制率分别为40%、41.7%、42.3%,经统计学处理差异无统计学意义(P>0.05)。结论:顺铂和卡铂对宫颈癌细胞株的细胞毒性作用无差异统计学意义,由于卡铂毒副作用小,在宫颈癌化疗中优于顺铂。     

顺铂联合原花青素对宫颈癌Hela细胞生长抑制作用

目的探讨顺铂联合葡萄籽原花青素对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。方法 2015年10月—2016年1月体外培养宫颈癌Hela细胞,分为对照组、顺铂组、原花青素组及顺铂联合原花青素组,48、72 h后,倒置显微镜下观察细胞形态学变化,CCK8法检测细胞增殖抑制率。三组及以上计量资料比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法;计数资料比较采用χ2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果顺铂及原花青素对Hela细胞的增殖抑制呈现剂量和时间相关性,随着药物浓度的升高和作用时间的延长,Hela细胞的增殖抑制率升高。联合用药组9、18、37μmol/ml的顺铂联合340μmol/ml的原花青素分别作用48 h后Hela细胞的增殖抑制率分别为75.7%、76.1%、76.2%,72 h后Hela细胞的增殖抑制率分别为77.0%、78.0%、78.9%。两者联合用药组细胞增殖抑制率高于单独用药组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论不同浓度顺铂、原花青素对Hela细胞增殖均有抑制作用,原花青素对Hela抑制作用显著,顺铂联合原花青素对宫颈癌细胞Hela有协同抑制作用。     

盐酸小檗碱及其联合应用顺铂诱导宫颈癌细胞株凋亡研究

目的:研究不同浓度盐酸小檗碱(Ber)单用及联合应用顺铂(DDP)对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,并探讨其抗癌机制。方法:将不同浓度的盐酸Ber、DDP分别或联合作用于宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率;免疫组化SABC法检测Hela细胞中NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明盐酸Ber能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖,并具有剂量、时间的依赖性(P<0.05);TUNEL法可检测到凋亡细胞,其凋亡率显示盐酸Ber诱导宫颈癌Hela细胞凋亡表现出剂量和时间的依赖性(P<0.05);免疫组化SABC法结果显示,盐酸Ber能引起细胞内NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);盐酸Ber与DDP联合用药表现出明显的协同作用,且高剂量的盐酸Ber可增加DDP的疗效。结论:盐酸Ber对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用,且能增强DDP对宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并增加其诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡,其作用机制可能与降低NF-κBp65的表达有关。     

大蒜素对子宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的:探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化;采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,采用流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果:MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度的大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论:大蒜素对人宫颈癌Hela细胞的生长有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

沙利度胺联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用的研究

目的研究沙利度胺联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞增殖及迁移能力的影响。方法培养人宫颈癌Hela细胞,分为顺铂组(A组给予1 mg/L的顺铂进行干预)和不同浓度沙利度胺联合顺铂组(B、C、D组),分别进行100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L的沙利度胺和1 mg/L的顺铂临床干预,测定细胞增殖、细胞迁移、侵袭恶性生物学行为情况。结果D组药物作用12 h、24 h、36 h、48 h时,细胞的抑制率明显高于A、B、C组,B、C、D组Hela细胞抑制率依次升高。D组药物作用12 h、24 h、36 h、48 h时,细胞的迁移率、细胞的穿膜数均明显低于A、B、C组,B、C、D组Hela细胞迁移率及细胞穿膜数依次降低,且组间差异均有统计学意义(P0.05)。结论沙利度胺联合顺铂有助于抑制Hela细胞增殖和迁移。     

葡萄糖调节蛋白78抵抗宫颈癌细胞衰老的相关机制研究

目的:探讨顺铂诱导宫颈癌细胞衰老过程中葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)的作用及相关机制。方法:用亚凋亡剂量顺铂诱导宫颈癌细胞衰老;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况;GRP78诱导剂A23187诱导Hela细胞高表达GRP78;siRNA反义抑制GRP78表达;Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:亚凋亡剂量顺铂诱导绝大多数宫颈癌细胞发生衰老;A23187上调GRP78表达后顺铂诱导Hela细胞衰老率降低,GRP78表达被反义抑制后顺铂可重新诱导Hela细胞衰老;P53表达被抑制及Cdc2表达增多与GRP78抗衰老作用有关。结论:GRP78蛋白高表达能够抵抗顺铂诱导宫颈癌细胞发生衰老,可作为逆转肿瘤细胞化疗耐药的新靶点。     

甘氨双唑钠影响SiHa细胞对顺铂的敏感性

目的 以子宫鳞癌SiHa细胞为靶细胞,分析甘氨双唑钠是否可影响宫颈鳞癌SiHa细胞株对顺铂的敏感性.方法 不同浓度顺铂、甘氨双唑钠及两药联合作用于SiHa细胞,通过形态学观察、四甲基偶氮唑盐细胞活力测定等方法 检测对SiHa细胞敏感性的影响.结果 不同浓度的顺铂对宫颈癌细胞的生长均有抑制作用(P<0.05),而不同浓度甘氨双唑钠对SiHa细胞影响不显著(P>0.05).顺铂(5μg/mL)与不同浓度CMNa合用可明显增强顺铂对SiHa细胞生长的抑制作用,且随CMNa浓度的增加,组间抑制作用越明显(P<0.01).结论 联合应用甘氨双唑钠可提高顺铂对肿瘤细胞的敏感性,为临床制定宫颈癌化疗方案提供理论依据.     

STAT3信号转导通路调控人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的机制

目的:探讨信号传导和转录激活因子3(Stat3)通路与人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的关系,明确以Stat3为靶向的信号传导通路调控Hela细胞增殖、凋亡的分子机制。方法:人宫颈癌Hela细胞用酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490处理,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡及细胞周期;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2、Stat3、磷酸化Stat3(p-Stat3)、CyclinD1、Survivin的表达。结果:人宫颈癌Hela细胞中Stat3、p-Stat3、JAK2呈阳性表达。AG490呈时间和剂量依赖的方式抑制Hela细胞的增殖,促进其凋亡(P<0.05)。Western blot检测显示p-Stat3、CyclinD1、Survivin的表达水平随作用剂量的增大而逐渐下降(P<0.05),Stat3的表达未见明显变化(P≥0.05)。结论:Stat3信号转导通路与宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡密切相关,可能通过其下游靶基因蛋白CyclinD1、Survivin发挥作用。阻断Stat3信号通路可能为宫颈癌的防治提供一种新的策略。     

家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白对Hela肿瘤细胞抑制作用的形态学观察

目的 研究家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白(anticancer protein from Musca domestica larva hemolymph,MAC-1)对体外培养的人官颈癌Hela细胞抑制作用引起的形态学改变.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法、光学显微镜、HE和吖啶橙(AO)染色、透射电镜(SEM)的方法检测MAC-1对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及形态学改变.结果 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性,同时呈时间依赖性.MAC-1 12.5 μg/ml作用12h后在倒置显微镜、HE及AO染色和透射电镜均观察到典型细胞凋亡形态变化.结论 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株具有抑制增殖及诱导凋亡作用.     

枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长及其细胞凋亡的影响。方法不同剂量的枸杞多糖作用于体外培养的宫颈癌Hela细胞，用苔盼蓝染色、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测人宫颈癌Hela细胞存活率、抑制率及细胞凋亡等指标。结果枸杞多糖可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，抑制率司达96．85％，并呈剂量效应关系，细胞凋亡率可达36．8％。结论枸杞多糖对人宫颈癌Hela细胞生长具有抑制作用，其抑制机制可能是通过影响人宫颈癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

小剂量顺铂增加宫颈癌细胞凋亡抑制蛋白Survivin表达的研究

目的:研究化疗药物顺铂对宫颈癌细胞内凋亡抑制蛋白Survivin的诱导作用, 探讨Survivin在宫颈癌化疗抵抗中的作用机制。方法: 培养人宫颈癌细胞株Hela, 加入低浓度的化疗药物顺铂, 分别在加药前、加药后24h、48h、72h和96h采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 和免疫印迹技术(western-blot) 检测SurvivinmRNA和蛋白的表达。结果: 给予低浓度的顺铂可诱导SurvivinmRNA和蛋白的表达发生变化, 其中mRNA在加药后24h、48h、72h和96h分别较加药前提高了1 .5倍、2 .6倍、4 .9倍和1. 6倍, 蛋白在加药后24h、48h、72h和96h分别较加药前提高了0 .6倍、1. 7倍、2 .9倍和4 .7倍。结论:小剂量顺铂可诱导宫颈癌细胞内Survivin的表达增加, 抵抗化疗药物诱导的细胞凋亡。     

模拟CO_2气腹对宫颈癌细胞黏附和侵袭能力的影响

目的:体外模拟腹腔镜手术二氧化碳气腹方法,探讨二氧化碳(CO2)环境对人宫颈癌Hela细胞黏附和侵袭能力的影响。方法:培养人宫颈癌Hela细胞株,模拟CO2气腹环境12 mmHg气压处理4 h,以培养于常规条件下人宫颈癌Hela细胞为对照,通过MTT法检测细胞生长变化,通过细胞基质黏附试验检测细胞基质黏附能力改变,应用免疫组织化学方法检测人宫颈癌Hela细胞中E-钙黏素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达变化。结果:与对照组相比,CO2气腹处理组生长曲线上移(P<0.05)、细胞基质黏附能力增强(P<0.05)、E-钙黏素表达减少(P<0.05)、基质金属蛋白酶-9表达增加(P<0.05)。结论:CO2气腹环境增加宫颈癌侵袭和转移的风险,其机制之一可能与人宫颈癌Hela细胞的E-钙黏素的表达降低、基质金属蛋白酶-9的表达增加有关。     

内质网应激途径在天花粉蛋白诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的:探讨内质网应激在天花粉蛋白诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡过程中的作用,进一步分析天花粉蛋白诱导凋亡的作用机制。方法:以不同浓度天花粉蛋白分别处理Hela细胞24、48、72 h后,采用MTT法检测细胞的活性,流式细胞术检测细胞凋亡,并用RT-PCR及实时荧光定量PCR分析天花粉蛋白对内质网应激标志分子GRP78和CALPAIN基因表达的影响。结果:天花粉蛋白对HeLa细胞的生长具有抑制作用,对照组Hela细胞体外生长活跃,实验组分别经20、40、80μg/ml TCS处理24、48、72 h后,细胞生长均不同程度地受到抑制,呈时间-浓度依赖性。流式细胞直方图上亦出现特征性的亚二倍体峰(sub-G1 peak),随着天花粉蛋白浓度的增加,内质网应激分子GRP78和CALPAIN的表达逐渐增强。结论:天花粉蛋白可诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,内质网应激作为细胞凋亡的重要途径参与了天花粉蛋白诱导的HeLa细胞凋亡。     

仙鹤复方水提物抗肿瘤及辐射增敏研究

目的探讨仙鹤复方水提物对子宫颈癌Hela细胞的抗肿瘤和辐射增敏性能。方法建立细胞实验模型,将药物作用于Hela细胞。采用MTT法测定不同浓度仙鹤复方提取物对Hela细胞增值的抑制;并以克隆形成率法分析研究仙鹤复方对Hela细胞的放射增敏作用。结果仙鹤复方对Hela细胞的生长有显著的抑制性,且随药物浓度和用药时间的增大逐渐增加;仙鹤复方能有效提升Hela细胞的放射增敏性。结论仙鹤复方能有效的抑制子宫颈癌Hela的增殖,并能有效提升其放射增敏性。     

线粒体分裂融合基因在氧化应激诱导宫颈癌Hela细胞损伤中的作用

目的:利用维生素K3(VitaminK3,Vk3)复制子宫颈癌Hela细胞损伤模型,观察线粒体融合分裂基因的变化,探讨线粒体融合分裂基因在Vk3诱导Hela细胞凋亡过程中的作用。方法:MTT法检测各组Hela细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞凋亡,RT-PCR方法检测各组Hela细胞中线粒体融合基因Mfn1、Mfn2和Opa1及线粒体分裂基因Drp1、Fist1和MTP18mRNA表达。结果:Vk3能够降低Hela细胞存活率,并且Hoechst33258染色结果显示细胞呈现凋亡形态变化,凋亡率增加,Mfn1、Opa1、和MTP18mRNA表达量明显下降(P<0.05);而与Vk3单独作用组比较,Vk3+NAC联合作用组Hela细胞存活率增加(P<0.05),凋亡率降低,Mfn1、Opa1、和MTP18mRNA表达量明显增加(P<0.05)。结论:线粒体融合和分裂基因表达的降低都有可能参与了氧化应激诱导的细胞损伤作用。