三氧化二砷对VEGF诱导人骨肉瘤SaOS-2细胞TRAF-2和STAT-6表达的影响

目的通过观察三氧化二砷(As2O3)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导人骨肉瘤Sa OS-2细胞肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF-2)和信号转导子与转录激活子(STAT-6)表达的影响,探讨As2O3治疗骨肉瘤的作用机制。方法分别采用CCK8法、实时荧光定量PCR法和流式细胞术测定细胞生长抑制率、TRAF2和STAT-6的表达。结果 2μmol/L的As2O3对Sa OS-2细胞的生长抑制率达57%(0.57±0.03比0)(P0.01),使VEGF诱导作用显著降低(0.42±0.02)(P0.05),TRAF-2及STAT-6的表达也显著下降(分别为:149.00±7.21比167.33±8.02;1.29±0.12比2.53±0.67)(P均0.05)。结论 As2O3可能通过TRAF-2和STAT-6途径对Sa OS-2细胞的生长呈剂量相关的抑制作用。     

三氧化二砷对CO2气腹下小鼠肿瘤细胞CD44、VEGF表达影响的实验研究

目的:研究腹腔内注射三氧化二砷(As2O3)对小鼠CO2气腹下肝癌H22转移的影响。方法:昆明鼠40只(清洁级),中腹部穿刺置入1mm套管针,自套管针注入1×106肿瘤细胞后,建立CO2气腹,压力8mmHg,时间30min。术后随机分4组,每组10只,分别腹腔内注入:生理盐水,1ml;As2O3(2mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg) 肝素(10U/ml),共1ml。气腹后第3、7天测量CD44、VEGF的变化;比较各组生存状态、腹围、体重变化及转移瘤直径。结果:与对照组相比,As2O3组CD44、VEGF表达,转移瘤直径均明显降低。高剂量组比低剂量组效果稍好。As2O3肝素组戳口种植率最低。结论:As2O3对CO2气腹腹腔镜肿瘤生长转移有抑制作用。     

三氧化二砷对Hela细胞hTERTmRNA表达的调节和对端粒酶活性的影响

目的：观察三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌细胞(Hela细胞)端粒酶活性及端粒酶逆转录酶(hTERTmRNA)表达的影响。方法：以2μmoL／L的As2O3作用于人宫颈癌Hela细胞，在不同时间点用MTT法检测Hela细胞活力的变化，用流式细胞仪检测细胞周期的变化，用RT-PCR法检测hTERTmRNA表达的变化，用TRAP-ELISA法检测端粒酶活性的变化。结果：随着As2O3作用时间的延长，Hela细胞的活力逐渐降低，G0／G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例减少，hTERTmRNA表达水平逐渐降低，端粒酶活性逐渐下降。结论：As2O3可引起Hela细胞周期阻滞，hTERTmRNA的表达水平下调，端粒酶活性降低。     

SPOCK1在大肠癌组织中表达的研究

目的 对SPOCK1 mRNA及其蛋白在大肠癌组织、癌旁组织中的表达和SPOCK1蛋白质的表达与临床病理特征之间的关系进行探讨。方法 收集哈尔滨医科大学附属第四医院普外科2014年7月1日~2015年7月1日手术切除的19例新鲜大肠癌组织及癌旁组织标本(癌旁组织标本为正常的大肠黏膜组织,距离癌组织≥5cm),每例标本取2块,1块用于实时荧光定量PCR(real-time-PCR)检测大肠癌组织中SPOCK1 mRNA的表达情况,另外1块制成石蜡标本,连同收集的笔者医院病理科2007年7月1日~2012年7月1日大肠癌及癌旁石蜡标本35例,共54例标本采用免疫组织化学方法(immuno hisochemistry,IHC)检测SPOCK1蛋白的表达,将结果与相应的临床病理学资料进行统计学数据分析。结果 实时荧光定量PCR结果显示,在大肠癌组织标本中的SPOCK1 mRNA比癌旁组织中的表达高,差异有统计学意义(P＜0.05);IHC结果显示,在大肠癌组织标本中的SPOCK1蛋白比癌旁组织中的表达高,差异有统计学意义(P＜0.05)。SPOCK1蛋白与临床病理学资料分析结果显示,SPOCK1蛋白的表达和大肠癌组织分级呈正相关,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 SPOCK1在大肠癌组织中呈现高表达,其表达量同大肠癌组织学分级呈正相关。     

三氧化二砷、顺铂对人卵巢癌细胞联合作用研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)、顺铂(DDP)对人卵巢癌细胞HO-8910的联合作用及其相关机制。方法采用形态学方法研究As2O3、DDP对细胞增生的影响,用流式细胞术分析细胞周期,免疫细胞化学染色法检测p53基因表达。结果1.As2O3、DDP协同作用时,浓度分别在1.5μmol/L以上、2μmol/L以上时,有显著性差异;当三氧化二砷、顺铂浓度分别是12μmol/L、4μmol/L时,72h时癌细胞接近100%死亡。2.As2O3、DDP引起HO-8910细胞S期阻滞、p53基因表达增强。结论As2O3、DDP对人卵巢癌细胞HO-8910的生长有协同抑制作用;As2O3、DDP联合作用引起卵巢癌细胞凋亡的机制与S期阻滞、p53基因表达增强有关。     

大肠癌Ets-1基因mRNA定量表达研究

目的：探讨原癌基因Ets-1的表达与大肠癌生物学行为的关系。方法：应用实时荧光定量PCR技术分别检测30例大肠癌组织及切端组织中Ets-1 mRNA转录水平。结果：全部大肠癌组织中可见Ets-1的阳性表达。大肠癌组织Ets-1 mRNA转录水平明显高于切端组织（P〈0．05）。Ets-1的表达与大肠癌的淋巴结转移、浸润深度和Dukes分期明显相关，差异具有显著性（P〈0．05）。而与大肠癌的病理组织学类型和分化程度无关，差异无显著性（P〉0．05）。结论：Ets-1在大肠癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。检测Ets-1的表达可作为判断大肠癌浸润、转移的良好参考指标。并可为将来大肠癌的诊断、分期和治疗开辟一个新的方向。     

Claudin-1基因在大肠癌中表达检测的意义

目的探讨Claudin-1基因mRNA在大肠癌发病过程的表达及意义。方法收集62例液氮保存的新鲜大肠癌组织及其对应的正常大肠组织,常规方法提取组织总RNA。将这些总RNA逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR方法检测Claudin-1基因在这些组织中的表达情况,最后统计分析Claudin-1表达变化与大肠癌进展相关的临床病理参数之间的关系。结果与正常大肠组织相比,Claudin-1基因在大肠癌组织中表达明显增强,此外,DukesⅢ、Ⅳ期大肠癌患者Claudin-1基因表达比Ⅰ、Ⅱ期患者明显增强。结论 Claudin-1基因在大肠癌中高表达,提示其可能与大肠癌发生和进展过程有关。     

PTEN、VEGF、COX-2在大肠癌组织的表达及相关性

目的探讨PTEN、VEGF、COX-2在大肠癌组织的表达及相关性。方法采用免疫组织化学方法检测68例大肠癌组织中PTEN、VEGF、COX-2的表达,并分析三者关系。结果PTEN在正常大肠组织中阳性表达显著高于大肠癌组织（P〈0．01）,VEGF、COX-2在大肠癌组织中阳性表达显著高于正常大肠组织（P〈0．01）;PTEN、VEGF和Cox-2阳性表达与年龄、组织分化类型无相关性（P〉0．05）;PTEN在无淋巴结转移及Dukes分期为A、B期的组织中显著高表达（P〈0．05）．VEGF和COX-2在有淋巴结转移及Dukes分期为C、D期的组织中显著高表达（P〈0．05）;PTEN与VEGF和COX-2在大肠癌组织中表达呈负相关,VEGF与COX-2在大肠癌组织中表达呈正相关（P〈0．05）。结论PTEN、VEGF和COX-2均参与了大肠癌的发生和发展,PTEN低表达和VEGF、COX-2的高表达的肿瘤组织转移性和侵袭性显著增加。     

Bmi-1蛋白过表达促进大肠癌发病过程

目的 Bmi-1是一个癌基因,参与了多种肿瘤的发病过程。本研究主要探讨Bmi-1蛋白表达在大肠癌发病过程的作用。方法收集22例配对正常大肠和大肠癌以及大肠癌淋巴结转移石蜡标本。免疫组化的方法检测Bmi-1蛋白在三者之间的表达差异。结果与正常大肠组织相比,Bmi-1蛋白在原位大肠癌组织中表达明显增高（p=0.003）。此外,与原位大肠癌标本相比,Bmi-1蛋白在转移到淋巴结的大肠癌组织中表达更高（p=0.045）。结论 Bmi-1可能参与了大肠癌发病过程,并促进了大肠癌的转移。     

大肠癌EGFR、HER-2、VEGF表达及对靶向治疗的指导作用

目的：通过实验探讨大肠癌中表皮生长因子受体（EGFR）、人表皮生长因子受体-2（HER-2）以及血管内皮生长因子（VEGF）表达,旨在为靶向治疗提供理论指导。方法选取大肠癌患者36例,取肿瘤组织,经处理行PV-9000二步法免疫组化法检测,观察大肠癌肿瘤组织中EGFR、HER-2、VEGF的表达,同时分析与其余病理组织的关系。结果 EGFR阳性率为58.33%,HER-2阳性率为66.67%,VEGF阳性率为58.33%;EGFR、HER-2、VEGF与肿瘤大小、侵袭深度以及淋巴结转移表现为密切相关。结论 EGFR、HER-2、VEGF的表达与大肠癌的侵袭、生长、转移都有较大关联,故通过三者的联合筛查更利于高危患者的早期判断,同时还可为靶向治疗提供用药指导。     

顺铂、三氧化二砷对人卵巢癌细胞的作用研究

目的:探讨顺铂(DDP)、三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌细胞 HO-8910 的联合作用及其分子生物学机制.方法:采用形态学方法研究 DDP、As2O3 对细胞增殖的影响,免疫化学染色法检测基因表达.结果:1.联合作用时,As2O3 浓度在 1.5μmol/L 以上、DDP浓度在2μmol/L 以上时,有显著性差异;当三氧化二砷、顺铂浓度分别是12μmol/L、4μmol/L 时,72h 时癌细胞接近100%死亡.2.DDP、As2O3 引起HO-8910 细胞 p53 基因表达增强.结论:DDP、As2O3对人卵巢癌细胞 HO-8910的生长有协同抑制作用;DDP、As2O3 联合作用引起卵巢癌细胞凋亡的机制与 p53 基因表达增强有关.     

EGFR、VEGF和HER-2在大肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)和人表皮生长因子受体-2(HER-2)在大肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 应用免疫组化法检测新疆医科大学附属肿瘤医院99例大肠癌组织中EGFR、VEGF和HER-2的表达情况,分析其表达与临床病理特征的关系.结果 在99例大肠癌中,EGFR、VEGF和HER-2的阳性率分别为57.6%(57/99)、66.7%(66/99)和59.6%(59/99);EGFR、VEGF和HER-2表达在不同年龄、性别、民族及肿瘤部位的差异均无统计学意义(P＞0.05).EGFR表达在不同浸润深度、淋巴结转移组中的差异有统计学意义(P<0.05),VEGF和 HER-2表达在不同分化程度组中的差异有统计学意义(P<0.05).结论 EGFR、VEGF和 HER-2表达与大肠癌临床分期有关,可作为判定大肠癌生物学行为和预后的参考指标,对指导临床治疗具有一定的意义.     

三氧化二砷抗肿瘤的药理研究进展

本文就近年来对三氧化二砷抗肿瘤的药理研究作一概述。1　As2 O3 对动物体内抗肿瘤的药理作用1 1　对小鼠白血病L12 10的治疗作用　As2 O3 对小鼠白血病L12 10具有明显的疗效 0 2 5mg/kg的As2 O3 连续用药 7d可使DBA小鼠的生命延长率到 138 7%。1 2　对小鼠肝癌腹水的治疗作用     

VEGF和LN在大肠癌中的表达及与大肠癌预后的关系

目的：探讨大肠癌血管内皮生长因子(VEGF)、层黏连蛋白(LN)表达及与大肠癌预后的关系。方法：应用SP免疫组化法检测正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌组织VEGF和LN的表达,并分析二者与大肠癌病理特征和预后的关系。结果：大肠癌VEGF和LN的表达均明显高于大肠腺瘤和正常大肠黏膜(P＜0.01,P＜0.05)。大肠癌VEGF和LN的表达均与淋巴结转移、分化程度、Duke’s分期和术后生存期有关(P＜0.01,P＜0.05)。结论：联合检测VEGF和LN可作为判断大肠癌浸润转移和评估预后的参考指标。     

三氧化二砷对肿瘤血管内皮细胞作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对肿瘤血管内皮细胞生长和功能的抑制作用及其相关的抗血管形成机制。方法：采用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）成为肿瘤血管内皮细胞（tumor-derived endothelial cells,Td-EC）,通过细胞迁徙实验流式细胞术、流式细胞术、血管形成实验检测As2O3对Td-EC细胞生物学特征的影响。结果：As2O3在体外对Td-EC有显著促进凋亡的作用,并能抑制其迁移和血管的形成,较在同样条件下对HUVEC的凋亡、迁移和血管形成作用显著。结论：As2O3在体外可特异地抑制Td-EC生长及功能。     

As2O3引起LoVo细胞内钙离子浓度增高及意义

目的　观察LoVo细胞株经As2 O3 作用后细胞内钙离子浓度的改变并探讨其意义。方法　应用流式细胞仪观察亚二倍体细胞峰并检测LoVo细胞内的钙离子浓度。应用光镜、电镜观察As2 O3 对LoVo细胞生长的抑制作用、凋亡细胞形态和线粒体形态。结果　①As2 O3 引起细胞内Ca2 +浓度升高 (P <0 .0 1) ,呈剂量依赖关系 (P<0 .0 1或 0 .0 5 ) ,在 2 .0 μmol/L组Ca2 +浓度最高 ;②在各时间段 ,对照组的Ca2 +浓度无变化 (P >0 .0 5 ) ,而经As2 O3 作用后Ca2 +浓度出现变化 (P <0 .0 1或 0 .0 5 ) ,在 2 0min时Ca2 +浓度均已增高 ,10h时增高最明显 ,至 2 4h ,0 .5 μmol/LCa2 +浓度回复到 2 0min时的水平 ,1.0和 2 .0 μmol/L组则低于 2 0min时的浓度 ;③As2 O3 抑制LoVo细胞生长 ;④LoVo细胞经As2 O3 作用后在光镜、电镜下出现细胞凋亡的形态学改变 ,并见线粒体肿大、嵴破坏或消失。流式细胞仪检测发现高浓度组凋亡细胞数高于对照组和低浓度组 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。结论　As2 O3 作用于LoVo细胞引起细胞内钙离子浓度增高 ,可能通过引起线粒体功能的改变而诱导细胞凋亡。     

阿司匹林对大肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的 观察阿司匹林对人结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及探讨可能的作用机制.方法 用不同浓度阿司匹林处理体外培养的LoVo细胞24、48、72h,MTT法检测其对结肠癌LoVo细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,阿司匹林（浓度分别为2、4、8mmol/L）分别处理LoVo细胞48h,行流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度计检测easepase-3相对活性,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2＋浓度的变化,Western blot法检测bcl-2、bax基因表达情况.结果 阿司匹林（浓度1～10mmol/L）能显著抑制LoVo细胞增殖,呈剂量、时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;阿司匹林处理LoVo细胞48h后,细胞凋亡率分别为11.4％、22.3％、37.1％,对照组凋亡率为2.4％;阿司匹林处理细胞48h后,casepase-3相对活性显著增加;阿司匹林能上调bax的表达并下调bcl-2表达,呈剂量依赖性.结论 阿司匹林均能抑制LoVo细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能为增加细胞内Ca2含量、casepase-3活性及上调bax的表达并下调bcl-2表达.     

三氧化二砷联合顺铂治疗乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的初步研究

目的：观察联合应用三氧化二砷（As2O3）和顺铂（DDP）治疗人乳腺癌MCF-7裸鼠皮下移植瘤的疗效。方法：建立裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,应用As2O3和DDP联合治疗,计算抑瘤率并用透射电镜观察瘤体细胞凋亡情况。结果：联合用药组的抑瘤率为76．47％,明显高于单独应用As2O3,或DDP的抑瘤率（P〈0．01）;且联合用药组的肿瘤细胞呈明显凋亡形态改变。结论：As2O3与DDP联合用药比两药单独应用具有较强的抑制肿瘤生长作用,二者具有协同抗癌作用。     

VEGF—C对胰腺癌细胞凋亡影响的实验研究

目的研究VEGF—C对胰腺癌细胞凋亡的影响。方法建立人胰腺癌细胞株PANC-1裸鼠原位种植瘤模型,原代培养原发和淋巴结转移灶中胰腺癌细胞,通过VEGF—C反义寡核苷酸体外转染抑制其表达,应用RT—PCR及流式细胞术等方法研究对淋巴结转移胰腺癌细胞凋亡及bcl-2的影响。结果体外转染后,原代培养原发和淋巴结转移灶中PANC-1胰腺癌细胞VEGF—C的mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）。体外转染VEGF—C反义寡核苷酸抑制其表达后,对照组、SODN组、ASODN组淋巴结转移胰腺癌细胞的凋亡率为（2．83±1．01）％、（4．98±2．05）％、（13．22±2．17）％,ASODN组细胞凋亡率显著提高（P〈0．01）,而原发灶胰腺癌细胞的凋亡率分别为（3．51±1．38）％、（4．79±2．16）％、（5．33±2．18）％,凋亡率无明显影响（P〉0．05）;淋巴结转移胰腺癌细胞的反义组bcl-2表达水平明显下调（P〈0．05）,而原发灶胰腺癌细胞bcl-2表达水平无明显变化（P〉0．05）。结论抑制淋巴结转移灶中胰腺癌细胞VEGF—C的高表达可促进胰腺癌细胞凋亡,这和bcl-2表达下调有关;但对原发灶胰腺癌细胞无明显影响。     

AS2O3对胶质母细胞瘤细胞增殖的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）及其联合地塞米松（DEX）对胶质母细胞瘤细胞的增殖抑制作用。方法实验分为空白对照组、As2O3组、DEX组、As2O3-4-DEX组，经倒置显微镜观察细胞形态、细胞计数、MTT法、流式细胞计数等方法研究As2O3及其联合DEX作用对胶质母细胞瘤细胞的增殖抑制作用。结果As2O3能够且呈浓度和时间的依赖性抑制BT-325细胞的增殖；DEX具有明显的协同效应。结论As2O3及其与DEX联合用药可能成为治疗胶质母细胞瘤的一条新途径。