离子交换树脂固定化α-淀粉酶的研究

选择12种吸附和离子交换树脂对α-淀粉酶进行固定化,筛选出固定效果较好的D380大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂为载体,通过先吸附后交联的方法固定化。通过实验对加酶量、交联剂浓度、吸附时间、吸附pH等能够影响固定化酶活力回收率的因素的研究和优化,得出较优的固定化条件为:戊二醛浓度0.1%、处理时间45min、加酶量3mg/g（蛋白量/载体）、酶液pH5.8、25℃、固定化处理时间为6～10h,获得的固定化酶活力可达80U/g（载体）,并进一步对固定化后的酶学性质作了初步研究。      

壳聚糖小球共价固定化α-淀粉酶的研究

以壳聚糖小球为载体,采用戊二醛交联共价固定α-淀粉酶。试验结果表明,以1 g壳聚糖小球为载体,经5m L 2%戊二醛处理后,加入24 mgα-淀粉酶,30℃,在p H 6的磷酸缓冲液中固定化2 h,制备的固定化α-淀粉酶活力达1 407.6 U/g。固定化酶最适p H向酸性方向偏移,最适反应温度不变,固定化α-淀粉酶的酸碱稳定性和热稳定性均优于游离酶。     

表面复合修饰纳米超顺磁性材料固定化α-淀粉酶性能研究

以复合修饰的纳米超顺磁性Fe3O4颗粒聚集体为载体固定化α-淀粉酶,比较分析固定化α-淀粉酶及游离α-淀粉酶的酶学性能。研究固定化及游离α-淀粉酶的最适温度、最适p H、操作稳定性及基本动力学等。结果表明,固定化α-淀粉酶最适p H为7,最适温度为60℃。固定化α-淀粉酶与游离α-淀粉酶相比,具有更好的温度和酸碱的耐受性。固定化α-淀粉酶重复催化反应10次,相对酶活力仍剩余72.09%,重复操作的半衰期为18.97次,具有良好的操作稳定性。固定化α-淀粉酶的米氏常数Km值为45.31 mg/m L,亲和性弱于游离α-淀粉酶。      

氨基化硅胶载体固定化α-淀粉酶的研究

采用5种硅胶作为载体,戊二醛作偶联剂,制备了固定化α-淀粉酶.对制备固定化α-淀粉酶的硅胶目数、偶联剂浓度、温度、pH值的影响因素进行了研究和优化.并对固定化酶和游离酶的酶学性质进行了比较.结果表明:固定化酶的最适温度为75℃,比游离酶提高了10℃,固定化酶的热稳定性优于游离酶.与游离酶相比,其对酸碱的适应性、贮存稳定性、操作稳定性也都有较明显改善.固定化酶的Km值略低于游离酶,前者为2.13mg/ml,后者为1.02mg/ml.     

磁性聚乙烯醇微球固定化α-淀粉酶的研究

磁性聚乙烯醇微球为载体,采用戊二醛交联法固定化α-淀粉酶,并对固定化酶的理化性质等进行了研究。结果表明,磁性固定化α-淀粉酶的总活力、蛋白载量、比活、活性回收率分别为1107.89U/g微球、125.36mg/g微球、8.84U/mg蛋白质和37.96%;固定化α-淀粉酶的反应最适温度和最适pH分别为110℃和7.0;固定化α-淀粉酶对金属离子Mg2+、Fe2+、Zn2+和Cu2+的抑制作用的忍耐性比自由酶的明显提高;α-淀粉酶被固定化后其热稳定性、操作稳定性、pH稳定性均比自由酶的明显提高。固定化α-淀粉酶在4℃,pH7.0的缓冲液中保存30d,其活力仍保持最初活力的91.6%,这比其自由酶的高12.3%。      

磁性聚乙烯醇微球固定化α-淀粉酶的研究

磁性聚乙烯醇微球为载体,采用戊二醛交联法固定化α-淀粉酶,并对固定化酶的理化性质等进行了研究。结果表明,磁性固定化α-淀粉酶的总活力、蛋白载量、比活、活性回收率分别为1107.89U/g微球、125.36mg/g微球、8.84U/mg蛋白质和37.96%;固定化α-淀粉酶的反应最适温度和最适pH分别为110℃和7.0;固定化α-淀粉酶对金属离子Mg2+、Fe2+、Zn2+和Cu2+的抑制作用的忍耐性比自由酶的明显提高;α-淀粉酶被固定化后其热稳定性、操作稳定性、pH稳定性均比自由酶的明显提高。固定化α-淀粉酶在4℃,pH7.0的缓冲液中保存30d,其活力仍保持最初活力的91.6%,这比其自由酶的高12.3%。     

Bacillus subtilis UN13产α-淀粉酶酶学性质研究

对Bacillus subtilis UN13所产生的α-淀粉酶酶学性质进行初步研究.结果表明:该酶是一种中温酸性α-淀粉酶;其最适温度为50 ℃,在40～60 ℃范围内稳定性较好;最适pH为5.5,在pH值为5.0～7.5范围内较稳定;Ca2+和Mn2+对该酶有激活作用, Cu2+,Zn2+,K+和EDTA 则抑制该酶的活性;动力学研究表明该酶的Km值为1.7039 mg/mL,Vmax值为3.1615 mg/min·mL.     

超声波对固定化α-淀粉酶催化活性的影响

对超声波处理固定化α-淀粉酶进行了研究,结果表明,在一定参数范围内,固定化α-淀粉酶活力升高.对超声功率、超声频率和超声时间等能够影响固定化酶活力的因素的研究和优化,得出最适当的超声参数为:超卢功率为40W、超声频率为15kHz、超声时间为5min.     

低温α-淀粉酶产生菌GS230发酵条件与酶学性质研究

对分离自连云港海域的低温α-淀粉酶产生菌Pseudoalteromonas sp．GS230进行了产酶条件的优化和酶学性质的研究。结果表明,该酶在0．4％可溶性淀粉、0．25％牛肉膏、1．5％蛋白胨以及5％接种量、培养32h产酶量达到最高。对低温仪．淀粉酶性质进行研究发现,该酶的最适作用温度和pH值分别是30℃和pH8．0、0℃时相对酶活达28％。对酶稳定性的研究发现,该酶对热敏感,30℃半衰期为1．5h,Ca^2＋可以提高酶的稳定性;在反应体系中添加5mmol／L Ca^2＋,30℃保温1．5h,残余酶活达93％。Na^＋K^＋、Ca^2＋等对酶有激活作用,而Pb^2＋、Cu^2＋、Fe^3＋等强烈抑制酶活性。     

PVA小珠表面固定化α-淀粉酶及其性质研究

聚乙烯醇(PVA)具备优良的生物相容性和大量可以用于修饰的羟基。文中通过戊二醛交联得到水不溶性PVA小珠,对PVA小珠的表面进行环氧改性,并采用共价交联法固定化α-淀粉酶。对固定化与自由α-淀粉酶性质进行对比:固定化酶的最适催化温度(70℃)比自由酶(65℃)高,最适催化pH(6)与自由酶相同,热稳定性优于自由酶,对酸碱的敏感性也降低;重复使用8次仍保持60%酶活力。     

菌株F21来源α-淀粉酶的酶学性质研究

该研究对菌株F21所产的α-淀粉酶进行纯化和酶学性质研究。 通过硫酸铵盐析、疏水层析等方法纯化后,α-淀粉酶酶活达到 4 616.3 U/mL。 酶学性质研究表明,该酶最适pH值为4.8,最适温度为55 ℃,且酶在pH 4.0～9.0及低于45 ℃的条件下稳定性较高;Ca2+ 对酶活有较强激活作用,Fe2+及Fe3+对酶活有较强的抑制作用。     

蒙脱石固定化α-淀粉酶和糖化酶的研究

以蒙脱石为载体,利用吸附法分别固定α-淀粉酶、糖化酶以及共固定化α-淀粉酶和糖化酶。α-淀粉酶和糖化酶最佳固定化温度分别是20℃和30℃,最佳固定化pH是6.5和4.5。共固定化最佳条件为淀粉酶(U):糖化酶(U):蒙脱石(g)为15:7.5:0.2,pH为5.5;温度为20℃。固定化α-淀粉酶、固定化糖化酶和共固定化酶的最适pH分别为6.0、4.5和5.5,最适反应温度分别是60、60℃和55℃。蒙脱石固定化α-淀粉酶、固定化糖化酶和共固定化酶的稳定性均较好,尤其是共固定化酶表现突出。     

耐酸性α-淀粉酶产生菌株的筛选及其液态发酵条件研究

从富含淀粉质的土壤中筛选到1株耐酸性α-淀粉酶的产生菌株ZY8,经初步鉴定为黑曲霉。并对其液态发酵条件进行了研究,产酶适宜培养基为可溶性淀粉50g/L,柠檬酸氢二铵20g/L,KH2PO43g/L,CaCl20.1g/LF,eSO4.7H2O0.01g/L,MgSO4.7H2O1g/L。以2%的接种量在30℃、120r/min、初始pH4.0的条件下培养72h,酶活力达到19.86U/mL。酶学特性研究表明,该耐酸性-α淀粉酶最适反应温度为70℃,最适反应pH值为2.0～5.0,在90℃高温处理20min酶活力仍然保持在80%以上。     

α-淀粉酶对糖化酶测定的影响

本研究以WMC-15糖化酶菌株所产发酵液为供试酶液,系统研究了糖化酶发酵过程中的α-淀粉酶活力以及α-淀粉酶对糖化酶测定结果的影响,有利于更加精确地测定糖化酶活力单位及控制糖化酶发酵过程。     

温度和pH值对耐高温α-淀粉酶活力的影响

本文系统的研究了温度、pH值和底物浓度对地衣芽孢杆菌HM-3产生的耐高温α-淀粉酶酶活力的影响。研究结果表明：地衣芽孢杆菌HM-3N耐高温α-淀粉酶的最适酶促反应温度为：75％-85℃之间，最适作用的pH值为：6．1-7．0之间，该酶用于玉米淀粉的液化其最适底物浓度是20％～25％。     

天然复方促进剂对α-淀粉酶酶学性质的影响

文中就α-淀粉酶的最佳作用温度和最佳作用pH条件进行了优选，在此基础上对天然复方促进剂1#(本课题组研制)的使用浓度展开研究，确定了其最适添加浓度。并较系统地考察和探讨了天然复方促进剂1#对α-淀粉酶活力和稳定性等酶学性质的影响。     

一株产酸性α-淀粉酶菌株的筛选及酶学性质研究

从酿造大曲中筛选到高产α-淀粉酶菌株A-5-3,对其进行生物学鉴定,鉴定结果为黑曲霉;对其发酵液进行酶学性质初步研究,结果表明:该酶的最适pH值为3.6,最适温度为70℃,热稳定性良好。在pH3.0~5.0之间,具有很好的酸稳定性且为非Ca2+依赖型水解酶,在工业生产上有良好的应用前景。     

壳聚糖纳米胶囊固定化α-淀粉酶及其特性的研究

采用离子凝胶法制备了壳聚糖纳米微胶囊,以此为载体通过吸附法固定了α-淀粉酶.分析了固定化后α-淀粉酶特性的变化,并考察了固定化酶的热稳定性、储藏稳定性与重复利用性.结果表明:固定化酶的最适温度与游离酶相比,提高了20℃;最适温度下的活性比游离酶的大,酶的最适作用DH值不受纳米载体的影响.纳米壳聚糖固定酶能较大提高其热稳定性、储藏稳定性和重复利用性.     

树脂固定化α-乙酰乳酸脱羧酶的初步研究

采用7种树脂对α-乙酰乳酸脱羧酶进行固定化,并将固定化酶应用于啤酒发酵实验,从中筛选出降低发酵液中双乙酰能力较强的大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂D314FD作为固定化的载体。通过单因素和正交实验确定固定化ALDC的最优条件为:每克树脂加入1.25mL原酶液,吸附时间10h,吸附pH7.5,吸附温度15℃,在此条件下固定化效率可达44%。发酵实验亦表明,固定化ALDC可以显著降低发酵液中双乙酰的含量,降低率达40%以上。      

橡胶籽β-葡萄糖苷酶固定化酶学性质的研究

采用戊二醛交联的方法将来源于橡胶籽的β-葡萄糖苷酶固定到壳聚糖球上,对比研究了固定化酶和游离酶的酶学性质。固定化后的β-葡萄糖苷酶最适温度为65℃,比游离酶提高了10℃;固定化酶热稳定性相比于游离酶,在55～70℃范围内有所提高;固定化酶的最适pH为6.0,游离酶的pH为5.5;固定化酶与游离酶相比,其耐酸耐碱性有所提高;金属离子对固定化酶的抑制作用与游离酶相比有所改变;葡萄糖对固定化酶的影响相对于游离酶更为明显;以p-NPG为底物,固定化酶的Km为3.5 mmol/L,游离酶的Km为1.75 mmol/L;固定化酶在操作和贮藏方面的性质都有明显提高。固定化酶相对游离酶部分酶学性质得到显著提高和改善,有效拓宽了其使用范围,提高了其应用价值。