过氧化氢诱导PC12细胞凋亡及芍药苷的保护作用

 目的探讨过氧化氢诱导PC12细胞凋亡及芍药苷保护作用的可能机制。方法MTT测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,DCFH-DA为细胞内荧光探针,测定细胞内ROS浓度,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位。结果200μmol·L^-1H₂O₂可诱导PC12细胞凋亡,细胞内ROS浓度增加,细胞线粒体跨膜电位明显下降。预先经过0.1,1和10μmol·L^-1浓度的芍药苷处理后,H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡明显减少,同时明显减弱H₂O₂对细胞内ROS浓度和线粒体跨膜电位的影响。结论芍药苷可抑制过氧化氢诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制细胞内ROS累积,稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

芍药苷对谷氨酸引起的PC12细胞损伤的保护作用

 目的探讨芍药苷对谷氨酸引起PC12细胞损伤的保护作用。方法MTT和测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用Fura3/AM为荧光指示剂,用1420 Vector2多标记免疫分析仪研究芍药苷对谷氨酸所致损伤PC12细胞内Ca²⁺的作用,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位。结果芍药苷可明显提高谷氨酸诱导的PC12细胞还原MTT的能力,抑制该细胞LDH的释放;芍药苷还可抑制兴奋性氨基酸所引起的细胞内Ca²⁺含量的升高;剂量相关性地降低PC12细胞的凋亡百分率。结论芍药苷可抑制谷氨酸诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制细胞内钙超载,稳定细胞线粒体跨膜电位有关。     

芍药苷对过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的 探讨芍药苷对过氧化氢(H2O2)诱导SH-SYSY细胞氧化损伤的保护作用及其可能机制.方法 MTT法测定细胞存活率;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡;罗丹明123(Rho123)染色检测线粒体膜电位(MMP)改变.结果 1.5mmol/L H2O2可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,导致SH-SY5Y细胞核形态改变和MMP改变.经过31.25和62.5 μg/ml浓度的芍药苷处理后,H2O2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡明显减少,同时减少H2O2引起的MMP改变.结论 芍药苷可抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,减少H2O2引起的MMP改变.     

阿魏酸和芍药苷混合剂对PC12细胞损伤的影响

目的观察阿魏酸和芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导的PCI2细胞损伤的影响,初步探讨其作用机制。方法采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导建立PC12细胞损伤模型。倒置相差显微镜进行细胞形态学观察;采用MTT比色分析测定细胞存活率;硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与FeSO4和H2O2损伤组进行比较,阿魏酸和芍药苷的混合剂能明显改善PC12细胞的存活数量,降低MDA的含量和提高SOD活性。结论浓度为5～50μmol／L的阿魏酸和浓度为1～10μmol／L的芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导PC12细胞损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与阿魏酸和芍药苷清除自由基和抑制脂质过氧化有关。     

红景天苷对CoCl_2诱导PC12细胞低氧损伤的保护作用

目的研究红景天苷(Sal)对Co Cl2诱导PC12细胞低氧损伤的影响。方法用200μM Co Cl2诱导PC12细胞致其损伤,用不同浓度的红景天苷(0.1、1、10μM)作用于PC12细胞,TUNEL染色法观察细胞凋亡情况;RT-q PCR法测定Arc m RNA的表达;Western blot法测定Arc蛋白的表达。结果不同浓度红景天苷能明显抑制Co Cl2诱导的PC12细胞凋亡,并能显著提高PC12细胞中Arc m RNA和蛋白表达水平。结论红景天苷对Co Cl2诱导的PC12细胞低氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与红景天苷抵抗Co Cl2诱导PC12细胞的凋亡,上调PC12细胞Arc m RNA和蛋白表达水平有关。     

芍药软肝合剂对氧化应激诱导肝细胞损伤的保护作用

目的:研究芍药软肝合剂的清除自由基、抗氧化能力和对肝细胞损伤的保护作用,从抗氧化应激角度探讨其临床治疗化疗药物性肝损伤的作用和机制。方法:采用DPPH、羟自由基和超氧阴离子自由基考察芍药软肝合剂的清除自由基作用。采用总抗氧化能力、脂质过氧化水平和亚铁离子络合能力考察芍药软肝合剂的抗氧化作用。采用过氧化氢诱导的肝细胞L-O2损伤模型评价芍药软肝合剂对肝损伤的保护作用。结果:芍药软肝合剂对DPPH自由基、羟基自由基以及超氧阴离子自由基均具有较强的清除能力,还具有较强的总抗氧化能力,抗脂质过氧化能力和金属离子络合能力。对过氧化氢引起的肝细胞死亡也就具有较好的抑制作用。结论:芍药软肝合剂的抗氧化应激能力可能是其临床其治疗化疗药物性肝损伤的的机制之一。     

芍药苷预处理对皮质酮损伤皮层神经元保护作用机制研究

目的:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测芍药苷预处理对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元凋亡相关基因以及营养因子BDNF mRNA表达的影响,初步阐明芍药苷对皮质酮损伤神经元的保护机制。方法:体外培养胎鼠皮层神经元,于原代第7天加入芍药苷低、中、高浓度(0.5,2,10μmol.L-1)预处理30 min后,加入皮质酮(200μmol.L-1)损伤,采用RT-PCR检测芍药苷预处理对神经元凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Caspase-3以及营养因子BDNF mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,芍药苷预处理组(2,10μmol.L-1)可显著下调Bax,Caspase-3 mRNA的表达,并显著上调Bcl-2和BDNF mRNA的表达(P0.05)。结论:芍药苷预处理对皮质酮损伤的大鼠皮层神经元的保护作用与芍药苷调控神经元凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Caspase-3 mRNA的表达直接相关,同时可能与上调神经营养因子BDNF基因表达有关。     

芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞氧化损伤的影响

目的:研究芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制.方法:Aβ25-35造成PC12细胞损伤,检测细胞的存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率以及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的变化.采用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位的变化.Western blot法检测细胞内HO-1,Cyt C和cleaved Caspase-3蛋白的表达水平.结果:芍药苷组(5,10,20 μmol·L-1)能不同程度地对抗Aβ25-35对PC12细胞的损伤,增加细胞存活率,减少LDH漏出率和MDA含量,增加抗氧化酶SOD,GSH-Px和HO-1的活性,减少细胞内ROS形成,提高线粒体膜电位,减少Cyt C释放和cleaved Caspase-3蛋白的表达.结论:芍药苷对Aβ25-35致PC12细胞损伤具有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制Aβ25-35诱导的氧化应激以及减轻线粒体损伤有关.     

芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究芍药苷对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:用Aβ25-35造成PC12细胞损伤模型,采用MTT比色法检测细胞存活率,Annexin-V/PI双染流式细胞计量法检测细胞凋亡,JC-1和Fluo-3荧光探针法分别观察线粒体膜电位和细胞内钙离子变化,Western印迹法检测Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,观察芍药苷对PC12细胞损伤的保护作用。结果:芍药苷可抑制Aβ25-35所诱导的PC12细胞毒性和凋亡,并呈剂量相关性,其保护作用可能是通过提高线粒体膜电位、降低Ca2+浓度;增加Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、抑制凋亡相关蛋白Caspase-3的激活而实现的。结论:芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤具有保护作用。     

芍药苷对KCl诱导原代培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 观察芍药苷对KCl诱导原代培养大鼠皮层神经元损伤的保护作用.方法 采用细胞培养方法,以出生24h内大鼠大脑皮层神经元为材料,利用KCl复制神经元损伤模型,测定细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)活力、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 芍药苷能够显著提高损伤模型中神经细胞的活性,降低损伤模型中MDA含量和LDH活力,提高SOD的活性,与模型对照组比较差异有显著性.结论 芍药苷对KCl所诱导的大鼠皮层神经元损伤具有保护作用.     

芍药苷对黑素细胞氧化损伤分子机制的研究

目的 观察芍药苷各组抑制B16黑素细胞氧化损伤的分子机制。方法 体外细胞实验分为对照组、模型组、不同浓度芍药苷干预组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst 33342观察凋亡细胞的核变化,激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体膜电位,底物荧光法检测Caspase-3/9的活性,Western blot法测定细胞凋亡Bcl-2、Cyt-c蛋白的表达。结果 (1)与正常对照组相比,模型组凋亡率明显增高(P<0.01);Caspase-3/9的活性显著增高;Cyt-c蛋白表达量升高;Bcl-2蛋白表达量降低。(2)与模型组相比,芍药苷各组凋亡率明显降低(P<0.01);Caspase-3/9的活性降低,Cyt-c蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量升高,均以芍药苷高剂量组最好。结论 该文揭示了线粒体信号转导通路可能是芍药苷干预氧化应激诱导B16黑素细胞凋亡的调控机制之一。     

红景天苷对百草枯诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究红景天苷保护百草枯(PQ)诱发PC12细胞损伤的作用及其机制。方法:实验分对照组、PQ诱导组、不同剂量(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)红景天苷治疗组。采用MTT法检测细胞活力,利用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;罗丹明123(Rh123)染色观察细胞线粒体膜电位(MMP)变化,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽还原酶(GSHPX)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性;免疫组织化学染色检测细胞色素C(CytC)的表达。结果:800μmol/L PQ明显抑制PC12细胞增殖、诱导细胞凋亡;以不同剂量(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)红景天苷预处理后,保护了PQ所致的PC2细胞增殖抑制,降低凋亡率(P0.01)。机制上,红景天苷抑制了MMP下降(P0.05),导致LDH、CytC的释放减少,增强了GSH-PX、SOD的活力(P0.05)。结论:红景天苷保护了PQ诱导的细胞损伤,抑制了PQ所致的细胞凋亡,这可能与抑制CytC的释放和MMP下降,提高GSH-PX、SOD的活性有关。     

女贞子对MPP＋诱导的PC12细胞氧化应激损伤保护作用研究

目的：探讨女贞子是否对Mpp＋诱导的PC12细胞氧化应激损伤具有保护作用.方法：采用Mpp＋诱导的PC12细胞作为帕金森病体外模型,同时给予不同浓度的女贞子醇提液、水提液.通过MTT法测定细胞存活率,通过超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）及乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒来检测女贞子对细胞氧化应激损伤的影响.结果：与正常组相比,模型组细胞的细胞存活率显著下降,SOD抑制率、NO含量、MDA含量及LDH水平显著升高（P＜0.01）;与模型组相比,浓度为1mg/mL的女贞子水提液显著提高细胞存活率,显著降低SOD抑制率、NO含量、MDA含量及LDH水平.结论：女贞子水提液对细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用.     

芍药苷神经保护作用机制的研究进展

综述近10年芍药苷的神经保护作用研究进展。芍药苷在神经系统中具有广泛的药理作用,主要包括抗神经细胞氧化(如降低氧自由基水平、调节一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶含量和活化腺苷A1受体)、防止线粒体损伤、调节MAPK、PI3K/Akt、Nrf2/ARE信号转导通路、防止钙离子内流、调节自噬、抑制神经炎症等。     

芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:选择健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、芍药苷组及尼莫地平组各20只,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察各组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积,TUNEL检测大鼠神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠大脑皮层中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果:假手术组大鼠未表现出神经功能缺失症状,模型组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积高于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);假手术组几乎未见神经细胞凋亡,模型组TUNEL阳性细胞明显多于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组细胞凋亡个数及阳性率均低于模型组,其差异具有统计学意义(P0.05);假手术组大鼠大脑皮质中Bcl-2及Bax的灰度值均高于模型组,芍药苷组及尼莫地平组大鼠Bcl-2灰度值较模型组降低,而Bax灰度值较模型组明显升高,2组Bcl-2/Bax灰度值较模型组下降,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:芍药苷可通过抑制Bax的表达,上调Bcl-2的表达来抑制神经细胞凋亡,从而保护神经功能,减轻脑梗死。     

芍药苷对HepG2肝癌细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨芍药苷(Paeoniflorin)对HepG2肝癌细胞凋亡的诱导作用,并考察其作用机制。方法:用不同浓度芍药苷(0.5,2mg/mL)对HepG2肝癌细胞进行培养,采用MTT法检测细胞活力,酶标法检测Caspase 3活性,western blot法检测NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果:随着给药浓度的增加,芍药苷能逐渐降低HepG2肝癌细胞活力,在48小时抑制率最高;并能提高Caspase 3活性,抑制细胞核内NF-κB p65磷酸化,IκBα磷酸化,从而促进细胞凋亡。结论:芍药苷可能通过NF-κB信号通路诱导HepG2肝癌细胞凋亡,达到抗肿瘤效果。     

黄芪总苷对阿霉素诱导的足细胞损伤的保护作用

目的:探讨黄芪总苷对阿霉素(ADR)诱导损伤足细胞的结构和功能的影响。方法:采用0.5μmol/L的阿霉素处理MPC5条件永生型小鼠足细胞系24h,以建立足细胞的损伤模型;以50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的3个浓度的黄芪总苷分别处理阿霉素损伤足细胞24h后,检测LDH、MDA及SOD生成水平或活力,以反映细胞损伤情况及氧化应激水平;MTT法检测足细胞的存活率;transwell法检测MPC5足细胞迁移能力,同时采用荧光染色法观察细胞骨架排布。结果:与空白对照组相比,足细胞损伤模型组足细胞存活率较对照组显著下降,与模型组比较,各浓度黄芪总苷均能上调阿霉素导致的损伤足细胞的存活率;同时,阿霉素可显著促进MPC5足细胞内LDH及MDA的生成量并且降低SOD活性,各浓度黄芪总苷均能抑制由阿霉素导致的MPC5足细胞内LDH及MDA的生成并增加SOD活性;细胞迁移实验结果显示,阿霉素可显著抑制MPC5足细胞的迁移能力,各浓度黄芪总苷均能改善由阿霉素导致的迁移能力下降;激光共聚焦显微镜观察结果显示,阿霉素破坏了细胞骨架完整性,50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预均可抑制由阿霉素导致的足细胞骨架重排及破坏,100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预的足细胞保持了较好的细胞骨架完整性。结论:黄芪总苷可维持处于阿霉素培养环境内足细胞内氧化应激环境的平衡、改善迁移能力、抑制细胞骨架重排与破坏及抑制细胞凋亡。因此,黄芪总苷对阿霉素损伤的MPC5足细胞具有保护作用。     

芍药苷对H2O2诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用

目的 研究芍药苷对过氧化氢（H₂O₂）诱导人神经瘤母细胞（SH-SY5Y）凋亡的保护作用及其机制。方法 制备H₂O₂诱导的氧化应激损伤模型。相差显微镜观察SH-SY5Y细胞形态的变化;CCK-8法测定细胞存活率;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡;碘化丙啶染色、流式细胞仪检测细胞周期;2′, 7′-二氯荧光素二乙酸盐（DCFH-DA）法检测细胞内活性氧（ROS）;INT显色反应法测定乳酸脱氢酶（LDH）的量;ELISA法检测8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的量;caspase-3催化特异性底物反应检测caspase-3活性。结果 与对照组相比,200 μmol/L H₂O₂作用SH-SY5Y细胞24 h,使细胞存活力显著下降（P＜0.01）,细胞凋亡率上升（P＜0.01）,增殖指数（PI）降低（P＜0.05）,8-OHdG的量上升（P＜0.01）,LDH释放量和细胞内ROS量增加（P＜0.01）,caspase-3活性增强（P＜0.01）。与H₂O₂损伤组相比,芍药苷终浓度为20～40 μmol/L,可浓度相关地减轻H₂O₂诱导的SH-SY5Y细胞上述指标的变化（P＜0.05）;芍药苷10 μmol/L组细胞PI、LDH和8-OHdG量未有明显改观,但能显著减轻H₂O₂诱导的SH-SY5Y细胞毒性、ROS和caspase-3活性（P＜0.05）。结论 芍药苷对H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞损伤具有显著保护作用,该作用可能与其清除ROS、减轻DNA氧化损伤、抑制细胞凋亡的caspase通路激活和调节细胞周期有关。     

罗汉果甜苷对PC12细胞氧化应激的保护作用研究

目的 考察罗汉果甜苷在PC12细胞中对外源性氧化损伤的保护作用.方法 采用MTT法考察0.01 ～ 100μg/ml罗汉果甜苷对正常PC12细胞活力的影响,并在H2O2刺激的PC12细胞中考察0.01 ～ 10 μg/ml的罗汉果甜苷对细胞活力的影响,通过对细胞活力的考察选择罗汉果甜苷合适的实验剂量,测定罗汉果甜苷0.1及1μg/ml对H2O2刺激的PC12细胞中过氧化氢酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响以及对丙二醛(MDA)含量的影响.结果 罗汉果甜苷在1 ～ 10 μg/ml浓度能提高正常PC12细胞活力,在0.1～ 10 μg/ml浓度下能显著提高H2O2刺激的PC12细胞活力(P＜0.01).0.1及1μg/ml两个剂量的罗汉果甜苷均能显著提高H2O2刺激的PC12细胞中SOD活力(P＜0.001)和GSH-Px活力(P ＜0.001),并减少MDA生成(P＜0.05).结论 罗汉果甜苷能缓解氧化应激导致的PC12细胞活力下降,并能增强PC12细胞的抗氧化能力.     

哈巴苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞毒性的保护作用

目的探讨哈巴苷对β淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞毒性的影响。方法 PC12细胞以哈巴苷(20、40、80μmol/L)预孵育3 h后以Aβ25-35(30μmol/L)损伤24 h;MTT法检测细胞增殖;检测细胞上清液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用Annexin-V-FITC双染法检测细胞凋亡率;检测活性氧(ROS)的生成;Western blotting法检测Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与对照组比较,Aβ25-35使PC12细胞的存活率显著降低(P0.01),细胞上清液中MDA水平显著升高(P0.01)、GSH和SOD水平显著降低(P0.01),细胞内ROS水平显著升高(P0.01),细胞凋亡率显著增加(P0.01),细胞内p-Akt、Bcl-2蛋白表达下调(P0.01),Bax蛋白表达显著上调(P0.01);哈巴苷预孵育PC12细胞3 h,使细胞上清液中的MDA水平降低,GSH和SOD水平显著升高(P0.05、0.01);明显剂量依赖性抑制细胞凋亡;上调p-Akt和Bcl-2蛋白表达(P0.05、0.01),并下调Bax蛋白表达(P0.05、0.01)。结论哈巴苷改善Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性,可能通过激活PI3K/Akt信号通路和上调细胞内SOD水平发挥作用。