羊肚菌胞外多糖体外降血糖降血脂活性研究

羊肚菌是一种名贵食药用真菌,具有较高的营养价值和药用功效。该研究通过深层发酵培养羊肚菌菌丝体,并分离纯化获得羊肚菌胞外多糖(Morchella esculenta extracellular polysaccharides,MEP),检测MEP的体外降血糖和降血脂活性。研究结果表明:羊肚菌在液体深层发酵条件下生长迅速,一般5 d～6 d即可获得较高的生物量,胞外多糖产量较高,通过脱蛋白、脱色和透析后,获得MEP混合物,过DEAE-纤维素52凝胶柱后发现MEP主要为中性多糖,并且含有少量的酸性多糖,MEP对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性具有一定的抑制作用,在高浓度条件下其抑制率分别可以达到20%和40%左右,同时MEP对脂肪酶活性具有较强的抑制作用,在浓度为5 mg/mL时抑制率为30%,MEP对胆酸盐的结合效率结果显示MEP对甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠的结合率达到了35%和30%,最后检测了MEP对葡萄糖的扩散速率影响,结果表明MEP可以在一定程度上抑制葡萄糖在溶液条件下的扩散。该研究结果显示,MEP具有较强的降血糖降血脂活性,有望作为相关疾病治疗的辅助药物。     

乳酸菌胞外多糖分离纯化方法研究进展

本文针对乳酸菌胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）的分离纯化方法进行分析与研究,探讨了目前在乳酸菌EPS分离、纯化研究中常用手段的优缺点,旨在寻找较优方法,以达到进行化学结构鉴定与功能试验的纯度要求,为单独研究EPS的分子结构、生理功能与分子作用机制奠定基础。     

根瘤菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

以根瘤菌发酵液为原料,提取纯化发酵液中胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS),并对其多糖组分进行分析。采用木瓜蛋白酶与sevage法结合脱蛋白,并利用柱层析法对胞外多糖进行单组分离和纯化,分别得到EPS 1-1、EPS 2-1、EPS 3-1、EPS 4-1和EPS 5-1等5种相对较纯的单一组分。分别采用不同色谱法对上述各单一组分的纯度、结构、相对分子量及单糖组成进行分析和测定,表明各个组分均具有多糖特征峰,且均是以β-型糖苷键连接的吡喃糖,其中EPS 1-1和EPS 3-1是β构型的半乳吡喃糖; 5种多糖组分均主要由具有不同摩尔比的半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,除了EPS 4-1之外,在其他组分中还检测到了不同含量的岩藻糖、鼠李糖和阿拉伯糖等。     

南瓜多糖的分离、纯化及其降血糖作用

为探寻南瓜中对正常及糖尿病模型小鼠血糖有影响的未知有效成分 ,本实验依次采用有机溶剂分步萃取、除蛋白、透析、乙醇沉淀及葡聚糖柱层析等分离手段 ,以小白鼠血糖值作为筛选活性成分的指标 ,在分离的每一阶段对分离所得各个组分进行活性定量评估 ,并追踪活性最强的部分 ,最后分离纯化出降血糖活性最强的组分G———南瓜多糖。高效液相色谱证明其为杂多糖 ,分子量为 1.16× 10 5。     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝(Ganoderma Sinense)胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性.方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性.结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性.其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3％;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5％.结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显.     

美味牛肝菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

主要对美味牛肝菌发酵产生的胞外多糖（BeBEP）进行了分离纯化和组分的分析。方法:采用DEAE-纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析对BeBEP进行分离纯化,得到的主要成分BeBEPⅢa,用紫外光谱和醋酸纤维素薄膜电泳方法进行纯度鉴定,红外光谱进行结构分析,高效液相色谱法分析单糖组分。结果表明:BeBEPⅢa为均一组分,存在吡喃糖苷,由D-木糖、D-甘露糖和D-半乳糖三种单糖组成,摩尔比为3.1∶63.3∶1.0,其中主要以D-甘露糖为主。      

美味牛肝菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

主要对美味牛肝菌发酵产生的胞外多糖(BeBEP)进行了分离纯化和组分的分析。方法:采用DEAE-纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析对BeBEP进行分离纯化,得到的主要成分BeBEPⅢa,用紫外光谱和醋酸纤维素薄膜电泳方法进行纯度鉴定,红外光谱进行结构分析,高效液相色谱法分析单糖组分。结果表明:BeBEPⅢa为均一组分,存在吡喃糖苷,由D-木糖、D-甘露糖和D-半乳糖三种单糖组成,摩尔比为3.1∶63.3∶1.0,其中主要以D-甘露糖为主。     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝（Ganoderma Sinense）胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性。方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性。结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性。其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3%;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5%。结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显。      

盐藻胞外多糖分离纯化方法研究

盐藻培养液经离心、超滤浓缩得胞外多糖粗品溶液,然后用乙醇沉淀,丙酮及无水乙醚洗涤,并冷冻干燥得胞外多糖（Exopolysaccharides,EPS）粗品。粗糖经双酶解、透析等初步纯化后,用DE-52离子交换柱层析分离纯化得两种EPS组分（EPSⅠ和EPSⅡ）,琼脂糖凝胶电泳鉴定各自为均一的成分。经检测,两组分的糖质量分数以葡聚糖为对照分别为61.34%和52.81%,蛋白质质量分数3.97%和1.35%,且核酸质量分数小于0.025%,达到了比较高的纯度。     

MBR膜污染层中胞外多糖的分离纯化

探讨了MBR膜污染层胞外多糖的分离提取及纯化方法.结果表明,采用80 ℃水浴法提取物中胞外多糖含量为86.0%,粗多糖经酶解-Sevag法去除蛋白质,通过DEAE-纤维52、Sephacry-400 HR柱分离纯化得到多糖EPS-A1.紫外光谱分析多糖EPS-A1未见蛋白质与核酸的特征吸收峰,红外光谱分析其具有典型的多糖特征吸收峰.     

牛膝多糖降血糖活性成分的分离鉴定

研究牛膝多糖与降血糖活性的关系。牛膝粉碎后先经乙醇提取,再用热水提取,水提液减压浓缩后经醇沉得到牛膝水提醇沉物。采用链脲佐菌素（streptozocin,STZ）诱导方法建立小鼠糖尿病模型,每日给药牛膝各分离组分,连续给药8周,通过测定小鼠血糖、糖化血红蛋白,检测牛膝中具有降血糖活性的组分。采用DEAE、HW-55F、Sephacryl S-400等凝胶色谱柱对具有降血糖活性的牛膝多糖组分进一步分离。运用Sephadex G-100凝胶色谱、飞行时间质谱（time of flight mass spectrometer,TOF-MS）、气相色谱（gas chromatography,GC）、核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）等手段鉴定多糖纯度、测定相对分子质量、分析结构。结果表明,牛膝的水提醇沉物能显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）和糖化血红蛋白（HbA1c）浓度（P＜0.05）。将水提醇沉部分进一步分离得到具有降血糖活性的牛膝多糖,并鉴定其纯度为均一多糖,相对分子质量为1 800.5,该多糖由1分子葡萄糖和10分子果糖组成,以葡萄糖分子为起点,与果糖C₂相连,果糖之间以β-1,2 糖苷键连接形成主链,支链连接在果糖的C₆上,该研究明确了牛膝中具有降血糖活性的多糖分子结构。     

甘谷红芪酸性多糖的纯化及结构初探

本实验主要采用水提醇沉法提取甘谷红芪多糖,首先用DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换柱层析进行分离得到其中的一种酸性多糖,后者再经 Sepharose 6B Fast Flow凝胶层析纯化后浓缩、透析、冷冻干燥。琼脂糖凝胶电泳显色证明该组分为均一性多糖,再经过紫外、红外光谱分析以及酸水解产物薄层分析,分析结果表明该酸性多糖为杂多糖,其组成单糖可能分别为：木糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸、氨基葡萄糖盐酸盐或氨基半乳糖盐酸盐、葡萄糖醛酸内酯或半乳糖醛酸内酯,并且含有硫酸根。     

黄伞子实体多糖PAP2的分离纯化及其结构初步鉴定

从黄伞子实体中提取出水溶性粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 200柱层析分离纯化得到一种多糖组分PAP2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测其为均一多糖组分,平均分子质量为2.1×106u;经高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ESLD)检测表明PAP2主要由葡萄糖组成;结合红外光谱、核磁共振1H NMR和13C NMR分析表明,黄伞子实体多糖PAP2是一种α-D-吡喃葡聚糖,主链为1-4糖苷键,存在1-6糖苷键的支链。     

黑木耳多糖的磷酸化修饰、结构表征及体外降糖活性

利用加压剪切联合萃取技术提取的黑木耳多糖为原料,以三偏磷酸钠为交联剂,不同温度下进行磷酸化修饰,并对其进行结构表征及体外降血糖活性研究。结果表明：磷酸化黑木耳多糖主要由木糖、果糖、甘露糖以及葡萄糖组成的杂多糖,随着温度的升高磷酸化黑木耳多糖相对分子质量明显下降,并出现三股螺旋结构。红外图谱显示在1 205、898 cm－1处出现了P＝O及P—O—C的特征吸收峰。核磁共振光谱分析表明磷酸化修饰主要发生在C6位的羟基上,且在δ 0～1.5范围内出现了磷酸基团中P的信号峰。扫描电镜结果表明修饰后黑木耳多糖表面形貌变化明显,相比修饰前多糖更加细小、破碎。且对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶具有较强的抑制作用,当PAAP-4质量浓度为5.0 mg/mL时,α-葡萄糖苷酶抑制率为56.89%,体外降血糖活性增强。     

植物多糖降血糖作用及机制研究进展

糖尿病是高血糖的临床表现之一,长期罹患糖尿病易引发各种并发症。目前尚未发现彻底根治糖尿病的方法,主要采用西药治疗;但是西药具有较严重的副作用,因此,有效降血糖、低毒、副作用小的天然物质备受关注。研究发现,广泛分布于自然界的植物多糖具有良好的降血糖功效,是一类天然的生物活性物质,具有低毒、副作用小的特点,其已成为医药界及保健食品领域的研究热点。本文主要概括了近几年国内外研究的降血糖植物多糖的种类及其降血糖机制。     

薯蔓多糖降血糖作用的研究

研究了薯蔓多糖（PSPV）对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。采用昆明种小白鼠分组，分别以PSPV、优降糖或生理盐水灌胃，每天记录饮水量及小鼠体重，实验末期测血糖2次；并研究了PSPV对正常小鼠血糖值的影响。实验结果表明：PSPV能明显缓解糖尿病小鼠消瘦和多饮症状，显著降低其血糖值，并存在量效关系，以高剂量PSPV效果最佳；PSPV对正常小鼠的血糖水平无明显影响。结论：PSPV具有显著的降血糖作用，是一种值得开发利用的植物多糖。     

中国楤木粗多糖对糖尿病大鼠的降血糖作用

目的：研究中国楤木粗多糖（Aralia chinensis polysaccharide,ACP）对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法：采用四氧嘧啶（alloxan,ALX）诱导建立糖尿病大鼠模型,并随机将Sprague-Dawley（SD）大鼠分为正常对照组,糖尿病模型组,ACP高、中、低剂量组,二甲双胍组。连续灌胃给药28 d,测定ACP对糖尿病大鼠空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c）、总胆固醇（totalcholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）水平的影响。结果：ACP能够有效降低糖尿病大鼠的FBG、HbA1c、TC、TG水平,提高HDL水平。结论：ACP能够显著降低糖尿病大鼠血糖水平,有效调节糖尿病大鼠血脂代谢紊乱。     

广东淮山水溶性多糖的分离纯化及体外抗氧化活性的研究

广东淮山经热水提取、乙醇沉淀得粗多糖，再经脱脂、脱蛋白、脱色、两次Sephadex G-75柱层析纯化得多糖精品，经纸层析、旋光度测定、紫外光谱鉴定为均一多糖。在体外设计产生超氧阴离子自由基、羟基自由基和脂质自由基等3个体系，分别加入广东淮山不同浓度的多糖粗品和精品，结果表明，广东淮山多糖粗品及精品对超氧阴离子自由基和羟自由基均有较高清除作用，但对脂质自由基的清除能力较弱，而且经纯化精制后的广东淮山多糖对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用均小于其粗品。     

巨大芽孢杆菌产胞外核糖核酸酶的分离纯化及部分酶学性质研究

巨大芽孢杆菌发酵液经硫酸铵沉淀、CM-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析,纯化得到核糖核酸酶电泳纯品,并对其性质进行研究。该酶比活力为54272.27U/mg,回收率为11.37%,纯化倍数为606.67倍。该酶分子质量约为33.3kD,最适温度为52.5℃,最适pH值为8.5,在20～40℃以及pH6.0～7.0范围内稳定性较好。Fe2+、Cu2+、SDS、抗坏血酸和草酸对该酶活性有抑制作用。