海南省71例黎、汉族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者的基因突变型分析

目的分析海南省29例汉族和42例黎族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症患者的G6PD基因突变类型。方法采用突变特异性扩增系统法筛查海南省人群中G6PD缺乏症的G1376T、G1388A和A95G三种常见突变位点；运用DNA测序技术鉴定未知突变标本G6PD基因外显子2至外显子13的基因突变类型。结果在29例汉族G6PD缺乏症患者中，发现G1376T 11例（37．9％）、G1388A 2例（6．9％）、G1376T复合G1388A突变1例（3．4％）和G1376T复合A95G突变1例（3．4％），G1376T、G1388A、A95G三种常见突变及其复合突变共占汉族G6PD缺乏症患者的51．7％；在42例黎族G6PD缺乏症患者中，发现G1376T 25例（59．5％）、G1388A 6例（14．3％）、A95G 2例（4．8％）、G1376T复合G1388A突变4例（9．5％）和G1376T复合A95G突变1例（2．4％），G1376T、G1388A、A95G三种常见突变及其复合突变共占黎族G6PD缺乏症患者的90．5％；18例（汉族14例，黎族4例）未发现G1376T、G1388A、A95G。对这18例标本的测序发现：1例G6PD内含子5第636或637位核苷酸T缺失（IVS-5 636或637 T del）突变；2例C1311T复合IVS-11 T93C突变，其余标本未发现突变。结论G1376T和G1388A是海南省人群中最常见的基因突变型；在我国人群中存在IVS-5636或637 T del突变型；在海南省黎族人群中首次报道G1376T／A95G复合突变型。     

应用ARMS法检测广东省常见的三种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因点突变

目的应用突变特异性扩增系统（ＡＲＭＳ）法筛查广东省常见的葡萄糖６磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因的Ｇ１３８８Ａ、Ｇ１３７６Ｔ和Ａ９５Ｇ,并初步估计其频率。方法应用已建立的Ｇ１３８８Ａ和Ｇ１３７６ＴＡＲＭＳ法和新建立的Ａ９５ＧＡＲＭＳ法,对９０例广东地区男性,经Ｇ６ＰＤ定性和定量证明为Ｇ６ＰＤ缺乏者进行检测。结果在９０例男性中检出Ｇ１３８８Ａ４２例（４６７％）,Ｇ１３７６Ｔ１４例（１５６％）,Ａ９５Ｇ１２例（１３３％）,共计７２例（７５６％）。其余为稀有突变和未定型者。结论ＡＲＭＳ法为一种简便、快速、经济、准确的检测Ｇ６ＰＤ基因常见突变的方法。     

云南省葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型的初步研究

目的 分析云南人群中葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｃ６ＰＤ）缺乏症患的基因突变类型及分布特点。应用自然或错配引物介导的聚合酶链反应／限制性酶切分析方法。检测６０例云南籍Ｇ６ＰＤ缺乏症患中Ｇ１３８８Ａ、Ｇ１３７６Ｔ、Ｃ１０２４Ｔ、Ｇ３９２Ｔ、Ｃ５９２Ｔ、Ａ９５Ｇ６种Ｇ６ＰＤ基因突变类型。结果 ６０例Ｇ６ＰＤ缺乏症患中,共检出６种Ｇ６ＰＤ基因突变类型,其中Ｇ１３８８Ａ突变７例（２８．３％）、Ｇ１３７６     

逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症

目的探讨逆转录-PCR-变性梯度凝胶电泳法（RT-PCR-DGGE）对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症（G6PD缺乏症）进行分子诊断的可行性。方法以硝基四氮唑蓝（NBT）G6PD／6PGD比值将患儿分为G6PD活性缺乏（60例）、不能确诊（51例）及G6PD活性正常值组（100例）；外周血提取总RNA和逆转录成eDNA；针对中国人群已报道的17种突变位点，以cDNA为模板，分段设计6对DGGE引物，利用PCR-DGGE等方法在全编码区范围内分区段进行基因突变筛查及分型，并对各类突变型进行测序验证。结果检出A95G、G392T、T517C、G871A、C1024T、C1360T、G1376T、G1388A8个已知基因突变位点和1个新发现位点，G6PD缺乏组、不能确诊组及G6PD活性正常值组基因突变总检出率分别为88．3％、77．3％和14．0％。结论RT-PCR-DGGE对G6PD缺乏组、不能确诊组的基因突变检出率较高，特别是对不能确诊组杂合子检出具有重要临床意义。     

红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症2例的治疗与护理

现将我们对红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症(G-6-PD)2例治疗与护理总结如下。1病历摘要例1:男,3岁。1993-08-05食入新鲜蚕豆,第2天突然出现血色巩膜及全身皮肤黄染,精神萎靡,烦躁不安,面部及口唇进行性苍白,尿液呈酱油色,于1993-08-07晨急诊入院,首次T 37℃,P 124次/m in,R 28次/m in,血常规:Hb 30 g/L,W BC 8.1×109/L,L 0.32,M 0.004,N 0.64。本例是首次在我院发现,该患儿出生于新疆北屯,其父母均为广东人,并出生在广东,因而考虑患儿与遗传因素有关,经科会诊为:G-6-PD缺陷症引起蚕豆病。经过有效抢救治疗,抗生素、激素的应用,预…     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的发病机制及诊疗现状

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症是一种X连锁不完全显性遗传病,可引发新生儿高胆红素血症.该病患者在无明显诱因影响下,可仅有轻微甚至无临床症状,而在摄人蚕豆、使用氧化性药物、发生感染等诱因下可出现急性溶血反应.G6PD基因突变造成的酶活性异常是该病的主要发病原因.目前,G6PD缺乏症筛查与诊断的主要方法是G6PD活性检测和检测G6PD基因突变位点.本文就近年来G6PD缺乏症的临床特点、发病机制、诊断和治疗的研究进展进行综述.     

遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症1例报告并家系分析

对1例具典型家族遗传史的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症报告并家系分析如下。 1、病历摘要 先证者Ⅳ1（图1）,男．32个月,发病前进食加有豆瓣酱的菜肴,潜伏期8h,1d内入院。临床表现为尿呈浓茶色,明显血红蛋白尿,发热,呕吐,哭闹不安,抽搐,贫血貌,黄疸,肝肿大。实验室检查红细胞渗透脆性试验、Coombs实验阴性,血象、     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA1311C→T复合11内含子93T→C突变

目的　探讨葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)基因cDNA1311C→T复合 11内含子 93T→C的突变与G6PD缺乏的关系。方法　运用硝基四氮唑蓝纸片法筛查G6PD患者 ,以定量法确诊 ,运用PCR SSCP筛查 11外显子异常的标本 ,以突变特异性扩增系统 (ARMS)法鉴定 1311C→T突变 ,DNA直接测序 1311突变标本的 11外显子和 11内含子。结果　在 12例 1311突变的标本中 ,在 11内含子的93位均发现有T→C突变。结论　cDNA1311C→T突变同时合并 11内含子的 93位T→C突变可能是G6PD缺乏患者酶活性降低的原因     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶三种测定方法的比较

目的对目前我科所开展的三种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定方法进行比较。方法选择我院门诊育龄夫妇和住院新生儿血标本共480例。其中成年男性血标本184例,成年女性血标本184例,新生儿血标本112例,分别按不同要求,用高铁血红蛋白还原试验、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性检测、改良G6PD定量比值法三种方法进行测定。结果三种方法的总检出率分别为7.70%、6.20%和6.20%,其中后两种方法有显著的一致性。结论G6PD酶法和定量比值法联合测定,可以取代高铁血红蛋白还原试验,是G6PD缺乏较理想的筛查方法。     

云南省几个民族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变型分析

目的：分析云南籍汉族及少数民族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症患者的Ｇ６ＰＤ基因突变。方法：应用自然引物或“错配引物”介导的多聚酶链反应限制性酶切分析方法，分析２９例云南籍几个民族Ｇ６ＰＤ缺乏症患者Ｇ６ＰＤ基因突变型。结果：发现１３８８突变１９例，１３７６突变１例，未定型９例。２９例标本中有７例为少数民族，分别为彝族３例（１３８８突变）、白族２例（１３８８突变）、傣族１例（１３８８突变）、纳西族１例（１３８８突变）。除傣族外，在其余三个少数民族中检出Ｇ６ＰＤ基因１３８８突变在国内尚属首次。结论：这种突变的发生早于少数民族形成之前，并可推测云南省Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中Ｇ６ＰＤ基因突变型分布比例，有助于了解分子进化进程。     

云南省汉族中所见的一例G6PD基因nt1004C→A突变

目的：检测云南人群中是否存在新的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因突变型。方法：在排除中国人中的常见突变后，作２～１２逐个外显子多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析，对电泳异常者测序证实。结果：在筛查云南人群８２３人Ｇ６ＰＤ缺乏症时，发现Ｇ６ＰＤ缺乏者５４例。对其中２９例作了突变型鉴定，除发现１３８８Ｇ→Ａ突变１９例、１３８１Ｇ→Ａ突变１例外，其余９例中，查出１例为第９外显子ＳＳＣＰ有异常泳带。直接测序证实在第９外显子ｎｔ１００４位有Ｃ→Ａ的碱基置换，导致丙氨酸→天冬氨酸。结论：该例为罕见突变，为中国人中的第二例，云南汉族中的首例。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA C1311T的多态性

目的 将突变特异性扩增系统法引入葡萄糖－６－磷酸脱氢酶Ｃ１３１１Ｔ突变型的检测,并利用它调查Ｃ１３１１Ｔ在正常人群中的发生频率,探讨此突变伴发的ＩＶＳ－１１ Ｃ９３５是否与酶活性降低有关。方法 测序检测Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中的Ｃ１３１１Ｔ突变,利用已证实为Ｃ１３１１Ｔ标本探索Ｃ１３１１Ｔ的ＡＲＭＳ检测法最佳条件,用此法来确定中国人中Ｃ１３１１Ｔ的发生频率。     

广西瑶族与汉族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因三种常见突变型？…

目的 研究广西瑶族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因突变特点,并与汉族作比较。方法 用突变特异性扩增系统（ＡＲＭＳ）法对广西瑶族３４例和汉族３７例Ｇ６ＰＤ缺乏进行中国常见的三种Ｇ６ＰＤ基因突变型筛查。结果 广西３４例瑶族Ｇ６ＰＤ缺乏的基因型分别为Ｇ１３７６Ｔ １４例（４１．２％）,Ｇ１３８８Ａ９例（２６．５％）,Ａ９５Ｇ５例（１４．７％）,Ｃ１３１１Ｔ１例（２．９％）。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因G487A突变型研究

目的　鉴定中国白族和傣族人群中的葡萄糖６磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）Ｇ４８７Ａ 基因突变型,为少数民族Ｇ６ＰＤ缺乏症的防治提供理论指导;为研究分子进化、民族起源及迁移提供遗传学资料。方法　对云南白族、傣族、汉族及广西汉族的Ｇ６ＰＤ缺乏症患者进行聚合酶链反应限制性内切酶分析（ＰＣＲＲＥ） ,聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ） 及ＤＮＡ序列分析。结果　首次在白族及傣族人群中发现Ｇ６ＰＤＧ４８７Ａ基因突变型。６６ 例白族患者中发现６ 例,５２ 例傣族患者中发现１ 例Ｇ４８７Ａ 突变;检查４６ 例广西汉族患者未发现该突变。Ｇ６ＰＤＧ４８７Ａ基因突变型的个体在无诱因作用时,其血红蛋白含量、红细胞计数及网织红细胞计数基本正常。结论　Ｇ６ＰＤＧ４８７Ａ 基因突变型多属Ｇ６ＰＤ 缺乏症临床Ⅲ型;该突变型是汉族、白族和傣族共同具有的基因突变型。提示：中华民族可能同源     

遗传性葡萄糖—6—磷酸脱氢酶缺乏症红细胞膜脂质的改变

目的：探讨葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症溶血的生化机制。方法：采用荧光偏振法测定红细胞膜脂流动性；荧光分光光度法测定膜过氧化脂质（ＭＤＡ）；硅胶柱层析及薄板层析分离磷脂，气相色谱法分析磷脂中脂肪酸含量。结果：Ｇ６ＰＤ缺乏症荧光偏振度为０．２６３３±０．００４３，较正常对照的０．２２６１±０．００６９高（Ｐ＜０．０１）；Ｇ６ＰＤ缺乏时ＭＤＡ含量为１．４８２±０．０９５ｎｍｏｌ／ｍｇ膜蛋白，正常对照为０．３８２±０．０７２ｎｍｏｌ／ｍｇ膜蛋白（Ｐ＜０．０１）；Ｇ６ＰＤ缺乏症总磷脂及磷脂酰丝氨酸中不饱和脂肪酸Ｃ１８∶１，Ｃ１８∶２含量减少（Ｐ均＜０．０５）。结论：红细胞膜脂流动性降低可能是Ｇ６ＰＤ缺乏症溶血的一个重要原因。     

应用ARMS法检测广东省常见的三种葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因？…

目的 应用突变特异性扩增系统法筛查广东省常见的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶基因的Ｇ１３８８Ａ,Ｇ１３７６Ｔ和Ａ９５Ｇ,并初步估计其频率。方法 应用已建立的Ｇ１３８８Ａ和Ｇ１３７６Ｔ ＡＲＭＳ法和新建立的Ａ９５Ｇ ＡＲＭＳ法,对９０例广东地区男性,经Ｇ６ＰＤ定性和定量证明为Ｇ６ＰＤ缺乏进行检测。     

中国人常见G6PD基因突变的快速检测

目的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）缺乏症是世界上最常见的遗传性红细胞酶缺陷病。本文探讨建立一种简便快速、准确可靠、经济实用的G6PD缺乏症分子诊断技术。方法采用DNA测序技术通过双盲法对所建立的单管多重PCR结合分子杂交技术进行方法学评价。结果所建立的新技术可成功地检出上述中国人常见的G6PD基因突变并能清楚区分男性杂合子、女性杂合子或纯合子或双重杂合子。盲法分析结果显示,该技术对经DNA直接测序确诊的G6PD标本的诊断准确度和重复性均达到100%。结论单管多重PCR结合分子杂交技术可准确、快速地检测中国人常见的G6PD基因突变且具有经济和实用的优点,非常适合于G6PD缺乏症的大人群分子筛查和临床样品的基因诊断。