RP-HPLC测定人血浆中咪唑斯汀浓度

 目的测定人血浆中咪唑斯汀的浓度方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为日本HiQ silC₁₈ V(4.6 mm×150 mm,5μm),检测波长为285nm,流动相为0.025 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液-乙腈-甲醇(75:25:5)(pH=2.58).流速0.5 mL·mm^-1。结果回归方程Y=0.002 8X+0.0013(r=0.999 4),其线性范围为20.8～554.7 ng·mL^-1,最低检测浓度为13.87 ng·mL^-1(S/N>3),提取回收率在77.93%～88.84%之间(RSD为2.49%-7.45%),日内和日间RSD分别为4.58%～8.25%和2.08%～7.65% 结论该法操做简便、快速、准确、重现性好,适用于咪唑斯汀的药动学研究。     

去甲乌药碱在犬体内的药动学研究

 目的 建立固相萃取-高效液相色谱电化学检测法,测定犬血浆中去甲乌药碱的血药浓度,并以此法研究去甲乌药碱在Beagle犬体内的药动学。方法 血浆样品中去甲乌药碱经Alltech酸性氧化铝柱萃取后,以多巴酚丁胺为内标进行色谱分析。色谱柱为Alltech公司Apollo Phenyl(5μm,150 mm×4.6mm)柱,柱前加预柱(2.5cm×4.6 mm),日本岛津L-ECD-6A型电化学检测器检测。流动相为0.05mol·L^-1磷酸二氢钠(pH 3.0)-乙腈(89:11),流速1.0 mL·min^-1。结果 去甲乌药碱与内标峰面积比和血浆去甲乌药碱浓度直线相关,r=0.9998,线性范围为25.0～10000.0 ng·mL^-1。去甲乌药碱的最低检测浓度为2.55ng·mL^-1,日内及日间RSD均小于7％。研究表明,去甲乌药碱的药-时曲线符合二室模型,t_1/2为8.60min。结论 此方法灵敏、准确、稳定,可用于去甲乌药碱药动学研究。     

同位素标记示踪法测定神经生长因子血药浓度

 目的：建立测定小鼠血浆中神经生长因子(NGF)浓度的放射性核素(¹²⁵I)示踪测定法。方法：¹²⁵I-NGF采用氯胺T法标记，血浆中NGF的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或SDS-PAGE电泳法测定，并比较其测定结果。结果：TCA沉淀法和SDS-PAGE电泳法同时对照测定50份NGF血浆样品，结果呈良好的相关性，r=0.9948。两种方法的最低检测浓度均为2.0ng·ml^-1，日内、日间RSD均小于10%,血浆在12.5ng·ml^-1-400ng·ml^-1浓度范围内均呈良好的相关性,相关系数分别为r=0.9990和r=0.9997，血浆中NGF的平均回收率分别为(95.21±3.70)%和(94.30±4.60)%。结论：同位素示踪法与沉淀法或电泳法结合，方法稳定、可靠、灵敏度较高，两法相辅相成，适于NGF血药浓度的测定。     

HPLC-UV测定人血浆瑞芬太尼浓度

 目的建立高效液相色谱-紫外检测法测定人血浆瑞芬太尼浓度。方法人血浆经甲醇沉淀蛋白后先用氯丁烷萃取,再将药物提取至0.01mol·L^-1盐酸中。以Hypersil CN(4.6mm×250mm,5μm)为固定相;0.02mol·L^-1NaH₂PO₄水溶液-乙腈(70:30),内含三乙胺0.01%为流动相,流速1.5mL·min^-1,紫外检测波长为210nm。结果标准曲线在1.0～100ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.9984)。3种不同浓度平均方法回收率为(113.18±12.26)%,提取回收率为(87.90±3.21)%,日内RSD和日间RSD分别小于10%,15%。结论本方法准确、灵敏、专一性好,适用于临床瑞芬太尼血药浓度检测和药动学研究。     

离子对反相高效液相色谱法测定人血浆中吉西他滨的药物浓度

 目的　建立使用离子对反相高效液相色谱测定吉西他滨血药浓度的方法。方法　血浆用三氯乙酸沉淀后取上清液直接进样。色谱柱为Symmetry C₁₈(4.6mm×250mm ,5μm) ,流动相为0.52%的磷酸二氢钠溶液(pH2.66)-乙腈(85:15,含0.202%庚烷磺酸钠)。柱温25℃,流速1.0mL·min^-1,检测波长273nm。结果　吉西他滨血药浓度在 0.1～100μg·mL^-1内的线性关系良好(r=0.9999),血浆中低、中、高3种浓度的方法回收率在97.39%～103.11%之间,日内RSD≤1.94%,日间RSD≤7.34%。结论　本法快速、灵敏、高效,适于吉西他滨的血药浓度监测。     

反相离子对色谱法测定人血浆中芬太尼浓度

 目的：建立测定人血浆中芬太尼(Fen)浓度的HPLC测定法，为临床Fen的药动学研究提供科学的分析技术。方法：Fen测定以μ-Bondapak-C₁₈为固定相,水(含0.005mol·L^-1.辛烷磺酸钠和0.01mol·L^-1磷酸) 乙腈(69∶31)为流动相，以阿芬太尼为内标物，紫外检测波长为220nm。结果：验证实验表明，Fen与内标物分离良好，血浆中Fen的平均回收率为99.97%，日内、日间的RSD值均小于8%。血药浓度在10ng·ml^-1～200ng·ml^-1范围内与峰面积呈线性关系，r=0.9996。本方法最低检测浓度为5ng·ml^-1。结论：本方法具有较高的准确度，方法灵敏，专一性好，适用于临床Fen血药浓度的测定。     

RP-HPLC测定全血中环孢素A

 目的建立全血中环孢素A(CsA)的HPLC测定方法,并用于临床血药浓度监测。方法色谱柱采用YMC—Pack CN柱(4.6mm×150mm,5μm):柱温为55℃;流动相为乙腈-水(48:52),流速1.2 mL·mm^-1:检测波长205nm。全血样品经乙醚单步萃取后,50℃水浴通N₂挥干,残渣用50%乙腈溶解,正己烷反提,取下清液进样。结果CsA在47.2～1699.2 ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.999 9,当S/N≥3时,方法的最低检测浓度为12.0ng·mL^-1。CsA低、中、高3种浓度的平均绝对回收率为94.7%,方法回收率在100.3%-102.2%之间,日内RSD小于7.5%,日间RSD小于9.0%。结论本方法结果准确,操作简便,成本低,易于质量控制,适合于临床CsA血药浓度监测及药动学研究。     

HPLC同时测定复方布洛芬软胶囊中布洛芬、对乙酰氨基酚的含量

 目的采用高效液相色谱法同时测定复方布洛芬软胶囊中布洛芬和对乙酰氨基酚的含量。方法采用氰基色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH6.6)-甲醇(60:40)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为223nm,柱温30℃,外标法测定。结果布洛芬和对乙酰氨基酚与已知杂质时氨基酚、对氯苯乙酰胺之间能够达到很好分离,理论板数以对乙酰氨基酚峰计为12 696,以布洛芬峰计为4 188;布洛芬的线性范围为0.21～124.86μg·mL^-1,r=0.999 9(n=9),平均回收率为99.80%,RSD=0.26%;对乙酰氨基酚的线性范围为0.17～100.14μg·mL^-1,r=0.999 9(n=9),平均回收率为99.82%,RSD=0.28%;两组分精密度分别为0.31%和0.36%,结果良好。结论该法能够同时准确测定两组分的含量,而且简便、准确、快速,可用于批次样品的含量测定及质量控制。     

高效液相色谱法测定人血浆中艾地苯醌浓度

 目的:建立人血浆中艾地苯醌浓度高效液相色谱测定方法?方法:色谱条件:色谱柱为C₁₈反相柱,流动相为甲醇-水(70∶30),紫外检测波长为280nm?血浆样品加盐酸后用乙醚萃取,浓缩后进样?并测定2名健康受试者口服艾地苯醌后的血浆药物浓度?结果:标准曲线范围为20～1600ng·ml^-1,线性良好?最低定量浓度为5ng·ml^-1?40,200,800ng·ml^-13种浓度的平均回收率(n=5)分别为73.86%,83.72%和76.17%?日内、日间RSD≤5.38%(n=5)?结论:本方法操作简便,结果准确可靠,适用于临床血药浓度监测和人体生物利用度研究?     

HPLC测定血浆中硝苯地平浓度及在Beagle犬体内的应用

 目的建立血浆中硝苯地平浓度的HPLC分析方法,并用此法检测硝苯地平在Beagle犬体内的药物浓度。方法选择尼群地平为内标,血浆经无水乙醚-正己烷(3:1)提取,采用Hypersil BDS C₁₈(4．6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(1:1) (1%磷酸调节pH至3．5)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,紫外检测波长为238 nm。2只Beagle犬服用硝苯地平30 mg后用此法检测其血药浓度。结果硝苯地平在2～200μg·L^-1线性关系良好(r=0．999 6),最低检测限为1μg·L^-1(S/N≥3)。提取回收率为77.6%～87.3%,相对回收率在90.5%～101.7%内;日内精密度RSD≤7.1%,日间精密度RSD≤2.5%。结论本方法简便、准确灵敏,重现性好,可用于硝苯地平的血药浓度分析及进行药动学和生物等效性实验研究。     

舒肝凉血方对三苯氧胺代谢产物影响的研究

目的:研究临床有效中药复方舒肝凉血汤对三苯氧胺(Tamoxifen,TAM)及其活性代谢产物4-羟基三苯氧胺(4OHtam)体内代谢的影响。方法:标本样品取自参加临床随机双盲试验的患者血标本。采用两组用药前后自身对照和组间对照的方法。TAM及4OHtam血清浓度采用高效液相-质谱联用(HPLC-MS)方法检测。使用SPSS13.0分析软件,进行统计学分析。结果:中药组服中药前血中TAM,4OHtam浓度分别为(215.63±95.36)ng·mL^-1,(4.49±1.49)ng·mL^-1。服中药后分别为(233.17±126.48)ng·mL^-1,(5.34±2.78)ng·mL^-1。安慰剂组服药前血中TAM,4OHtam浓度分别为(209.80±75.05)ng·mL^-1,(5.15±1.67)ng·mL^-1;服药后分别为(216.86±98.89)ng·mL^-1,(4.21±1.41)ng·mL^-1。两组间检验结果和用药前后各组自身比较差异均无统计学意义。结论:实验提示中药舒肝凉血汤对三苯氧胺及4-羟基三苯氧胺的体内代谢无明显影响,为该方与三苯氧胺合用的安全性提供了依据。     

乌拉地尔缓释胶囊相对生物利用度和体内外相关性研究

 目的　对乌拉地尔缓释胶囊进行相对生物利用度和体内外相关性研究。方法　采用反相高效液相色谱法测定24名健康志愿受试者单剂量和多剂量口服乌拉地尔缓释胶囊供试制剂与参比制剂后乌拉地尔血药浓度的变化。用3P97药动学程序处理试验数据,并对试验结果进行方差分析和双单侧t检验;体外释放度采用中国药典2000版二部的转篮法。结果 单剂量试验乌拉地尔的相对生物利用度为:(96.37±13.77)%;两种制剂乌拉地尔的药-时曲线下面积(AUC_0→t)分别为:(2347.6±493.2),(2458.9±526.5 )ng·h·mL^-1;达峰时间(t_max)分别为:(4.17±0.28),(4.23±0.29)h;峰浓度(c_max)分别为:(325.6±40.3),(322.0±75.5 )ng·mL^-1。多剂量试验乌拉地尔的相对生物利用度为:(99.99±16.24)%;两种制剂乌拉地尔的药-时曲线下面积(AUC_0→t)分别为:(4513.1±1372.7) ,(4549.7±1308.8)ng·h·mL^-1;稳态达峰时间(t_max)分别为:(4.00± 0.49),(4.08±0.43)h;稳态峰浓度(c_max)分别是 :(544.5±147.1),(565.7±146.8)ng·mL^-1;波动度DF分别是(91.22±14.07)%,(84.53±26.10)%。体外12h平均累积释放86.33%和87.35%。结论　对单剂量口服两种制剂后的lnAUC_0→∞,lnAUC_0→t,lnc_max经双单侧t检验，t_max经秩和检验进行生物等效性评价，表明两者为生物等效制剂，且乌拉地尔缓释胶囊的体内吸收与体外释药有良好的相关性(P<0.05)。     

血和尿中7-氨基硝西泮的GC-ECD检测

 目的　建立血、尿中硝西泮的代谢物 7-氨基硝西泮GC-ECD检测方法。方法　碱性条件下用苯-异戊醇(98.8∶1.5)提取,七氟丁酸酐为酰化试剂,室温无水条件下进行酰化,GC-ECD法检测。结果　血、尿中7-氨基硝西泮浓度在5～300ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,血、尿中的提取率分别为(86.9±4.5)%(n=5)和(96.9±3.9)%(n=5),检出限分别为2.8及1.4ng·mL^-1。结论　该方法灵敏度高,线性范围宽,将建立的方法应用于人口服药物后的血、尿检测,结果满意。     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中米格列醇

 目的　建立高效液相色谱 质谱联用测定人血浆中米格列醇浓度的方法,并用于健康人体内米格列醇药物动力学研究。方法　采用MACHEREY NAGELCN色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),柱温50℃,以乙腈甲醇0.02%盐酸水溶液为流动相,流速0.80mL·min^-1;质谱采用电喷雾电离源正源(ESI⁺),定量分析采用选择离子监测(SIR),质荷比为准分子离子峰;血浆样品用乙腈沉淀后,将乙腈挥干,残渣用氯仿-异丙醇提取杂质,磷酸液提取药物,外标法定量。结果　米格列醇浓度在32～32.00ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.9997,最低检测浓度5ng·mL^-1(S/N =3)。批内、批间RSD符合方法学要求,单次服用10.0mg米格列醇片后药动学参数AUC_0～12 ,AUC_0～∞,c_max,t_max,t_1/2 分别为(7592.7±4207.4)ng·h·mL^-1,(7957.6±4425.7)ng·h·mL^-1,(1883.9±912.3)ng·mL^-1,(2.4±0.6)h,(2.5±0.9)h。结论　该方法稳定、灵敏度高、操作简单 ,适用于米格列醇血药浓度测定及药动学研究。     

人血清中伊立替康的液质联用测定方法

 目的　建立高效液相-质谱联用法(LC-MS)测定人血清中伊立替康(CPT-11)的浓度。方法　液相 :采用WatersSymmetryC₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,5μm) ;流动相 :甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵缓冲液(38∶62);流速:0.2mL·min^-1。质谱:电喷雾电离源(ESI⁺ ) ,选择性离子监测 (SIR)质荷比 (m/z)为 587。以盐酸洛贝林为内标 ,采用乙腈沉淀蛋白 ,上清液经酸化后进样分析。结果　本方法在 10～10000ng·mL^-1内线性良好,相关系数r=0.996.7(n =7)。高、中、低浓度质控样品的批内RSD均在2.70%～4.58% ,批间RSD均在2.74%～5.82%,方法学回收率为98.21%～110.49%,最低检测浓度为0.2ng·mL^-1。结论　本方法灵敏度高,操作简便易行 ,完全能满足体内低药物浓度的测定,可用于该药临床药物动力学特性的研究。     

高效液相色谱 荧光检测法测定人血浆中酒石酸唑吡坦的浓度

 目的建立酒石酸唑吡坦血药浓度测定方法。方法采用HPLC-荧光检测法测定血药浓度,激发波长254 nm,发射波长390 nm。血样加0.25 mol·L^-1KOH碱化后用乙醚萃取;色谱柱：HypersilODS2(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相：乙腈-0.02mol·L^-1KH₂PO₄(pH6.0)(40∶60);流速：1.0 mL·min^-1。结果血药浓度线性范围5.0～250.0 ng·mL^-1(r=0.9995,n=6),血浆最低检测浓度为2.5 ng·mL^-1,高、中、低3种浓度平均回收率分别为：(103.60±2.44)%,(104.40±0.84)%,(106.64±9.93)%。结论该法为酒石酸唑吡坦药动学研究提供了一种检测方法。     

LC-MS法测定人血浆匹伐他汀药物浓度及应用

  目的 建立液质联用(LC-MS直接沉淀法测定人血浆匹伐他汀的浓度。方法 Waters Cosmosil Packed Coulmn C₁₈-MS-Ⅱ(2.0 mm×150 mm, 5 μm色谱柱, 流动相为10 mmol·L^-1甲酸胺(含0.1%甲酸-乙腈(40∶60, 流速为0.3 mL·min^-1, 进样体积为20 μL, 柱温为40 ℃, 样品室温度为15 ℃,采用内标定量法,内标为罗素伐他汀。结果 匹伐他汀线性范围为0.5~1 000 ng·mL^-1, 最低检测限为0.1 ng·mL^-1, 方法灵敏、稳定、特异性高, 并已成功地应用到人血浆匹伐他汀药动学研究。 结论 该方法简便、准确、重复性好, 可以准确地定量人血浆匹伐他汀的浓度, 适于药理科研。     

HPLC-MS同时测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物的浓度

 目的建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物M-Ⅲ(酮类衍生物)和M-Ⅳ(羟化衍生物)的方法。方法采用WatersXTerraTN C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,3.5μm),Phenomenex C₁₈保护柱,柱温50℃,流动相:乙腈-30mmol·L^-1醋酸铵溶液(含0.1%的甲酸和0.05%的三氟醋酸)(35:65),流速0.22mL·min^-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI⁺),选择性监测质荷比(m/z)357.4(吡格列酮),358.2(内标),371.5(M-Ⅲ),373.2(M-Ⅳ)的准分子分子离子峰;血浆样品经盐酸酸化后,采用叔丁基甲醚-氯仿提取,内标法定量。结果吡格列酮,M-Ⅲ和M-Ⅳ分别在11.16～1748.60,3.33～520.50,5.00～687.50ng·mL^-1内线性良好(r≥0.9997),最低检测浓度分别为2.90,1.10,1.20ng·mL^-1,3个化合物的方法回收率均在90%-110%范围内,日间和日内RSD皆小于15%。结论本方法操作简单,灵敏准确,稳定性好,适用于临床吡格列酮治疗药物监测,药动学及其药物相互作用的研究。     

3种剂量9-硝基喜树碱大鼠单次灌胃给药后的药动学研究

 目的建立测定血浆中9-硝基喜树碱的反相高效液相色谱法,研究其在大鼠体内的药动学规律及特点。方法SD大鼠单次灌胃9-硝基喜树碱后于不同时间点自眼眶后静脉丛取血,用HPLC测定其血药浓度,用DAS(1.0)软件计算药动学参数。结果血药达峰浓度c_max随给药剂量的递增而递增(2 mg·kg^-1组为653.02 ng·mL^-1,3 mg·kg^-1组为832.9 ng·mL^-1,5 mg·kg^-1 组为2 731.15 ng·mL^-1),达峰时间t_max不随给药剂量增加而延长(2 mg·kg^-1组为0.32 h,3 mg·kg^-1组为0.45 h,5 mg·kg^-1组为0.3 h),药时曲线下面积AUC_0-∞随剂量递增而增加(2 mg·kg^-1组为856.49μg·h·L^-1,3 mg·kg^-1组为1 485.69μg·h·L^-1, 5 mg·kg^-1组为3 995.39μg·h·L^-1)。结论3种剂量9-硝基喜树碱大鼠单次灌胃后的药动学参数显示其在大鼠体内转化或消除均较快,呈一房室模型,药物的体内过程表现为线性药动学特征。     

HPLC测定四方蒿中总木犀草素苷的含量

 目的建立用反相高效液相色谱法测定四方蒿提取浸膏中主要黄酮苷(木犀草素)含量的方法。方法以ODS C₁₈柱为分析柱,PH 2.0磷酸缓冲液-四氢呋喃-异丙醇(70:30:5)为流动相,检测波长为360nm结果该黄酮水解后的苷元——木犀草素线性关系良好,在高、中、低浓度的日内精密度分别是2.82%,3 41%,5.17%;日间精密度分别是2.56%,5.46%,6.87%; 标准曲线线性0.999 9;检测限为50ng·mL^-1,定量限为(2.40±0.13)μg·mL^-1,方法回收率为高、中、低分别是101.28%, 105.58%,95.56%。结论木犀草素苷含量为(3.12±0.15)% 此法操作简便,准确率、灵敏度高。