βⅢ-tubulin在NSCLC中的表达与抗微管类药物耐药相关性的研究进展

肺癌是世界范围内肿瘤死亡的首要原因。约80％的肺癌为非小细胞肺癌（non—small cell lungcaneer，NSCLC），有半数以上的患者在诊断时已属晚期，化疗是提高晚期NSCLC生存期的主要手段。     

Survivin蛋白在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其三者之间的关系。方法用链霉菌生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学法(SP法)检测71例手术切除的非小细胞肺癌(NSCLC)组织和30例正常肺组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达;用原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡指数(AI)。结果在NSCLC组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达率分别为61.97%、52.52%、22.54%;30例正常肺组织中无Survivin、突变型P53蛋白表达(P<0.001),Bcl-2蛋白表达率为3.33%(P<0.005);肺癌Survivin阳性、阴性表达组织、正常肺组织的平均凋亡指数分别为11.86±4.67‰、18.67±7.93‰、23.32±6.98‰,肺癌Survivin阳性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.001),肺癌Survivin阴性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.05),差异有显著的统计学意义。结论Survivin蛋白在肺癌组织中的表达,提示该凋亡抑制蛋白在肺癌的发生发展中起抑制癌细胞凋亡的重要作用,AI显示出了Survivin蛋白的抗凋亡作用,Survivin基因有望成为基因治疗的新靶点。     

β-arrestin1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和组织中β-arrestin1的表达及β-arrestin1对肺癌细胞增殖能力的影响。方法收集该院经手术治疗的30例NSCLC患者的癌组织标本(NSCLC组)和肺良性病变边缘正常肺组织标本(对照组),培养NSCLC细胞系(SPC-A-1、H460、H520、H1975)和人正常肺上皮细胞系16HBE,分别提取NSCLC组、对照组及细胞系总RNA,逆转录后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用于检测β-arrestin1 mRNA的表达,蛋白印迹法(Western印迹)和免疫组化(IHC)分别检测细胞系和组织中的β-arrestin1蛋白的表达水平。MTT实验检测分别转染sh-β-arrestin1质粒和对照质粒sh-control到SPC-A-1细胞后对NSCLC细胞SPC-A-1增殖能力的影响。结果β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平在NSCLC组织和细胞系中分别高于对照组和16HBE细胞(P<0.05)。转染sh-β-arrestin1质粒后,β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平均显著下调,且在MTT实验中可显著抑制ASPC-A-1的增殖能力(P<0.05)。结论β-arrestin1在NSCLC组织和细胞系中呈高表达,且可以抑制肺癌细胞的增殖。     

WDHD1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨WDHD1蛋白在非小细胞肺癌发生,发展,浸润和转移中的作用。方法用免疫组化MaxVision法检测WDHD1蛋白在肺鳞癌,腺癌和正常肺组织中的表达。结果 WDHD1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于周围正常肺组织(P0.05),其表达与非小细胞肺癌临床分期(P0.05)、浸润范围(P0.05)、淋巴结转移(P0.05)和组织分化程度(P0.05)有关。结论 WDHD1蛋白在非小细胞肺癌中高表达,与非小细胞肺癌分化差、恶性程度、临床分期、淋巴结转移密切相关,在非小细胞肺癌的发生发展过程中可能起重要作用.     

肺癌耐药蛋白在非小细胞肺癌中的表达与临床相关性研究

目的：探讨肺癌耐药蛋白（LRP）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达与临床相关性。方法：通过纤维支气管镜活检、经皮肺穿刺活检或手术切除而药取肺癌组织标本69例,其中男52例,女17例。I、Ⅱ期28例,Ⅲ、Ⅳ期41例。采用免疫组织化学法进行检测,胞浆呈棕黄色着染为LRP阳性。结果：LRP主要表达于胞浆,69例肺癌组织中,LRP表达阳性39例,男性56％（29／52）,女性59％（10／17）,总检出率57％（39／69）,各年龄段间差异无显著性。肺腺癌中检出率67％（18／27）,肺鳞癌中检出率55％（17／31）;T1－2中检出率52％（23／44）,T3－4中检出率64％（16／25）;N3中检出率83％（5／6）;在M0中检出率57％（36／63）,M1中检出率50%(3/6)。LRP表达与NSCLC中组织类型无相关性（P＞0．05）,与原发灶的侵犯范围（T）及转移情况（N、M）无关。LRP阳性组化疗有效率低于LRP阴性组（P＜0．05）。随访中LRP阳性组死亡7例,LRP阴性组死亡3例。结论：在肺腺癌与鳞癌中由LRP引起的耐药发生机率相等;TNM指标只代表肿瘤进展而不代表耐药性差异;LRP在NSCLC中的表达与化疗的有效率及预后有一定的相关性,LRP表达阳性者预后差。有研究报道LRP的表达与多药耐药有关,LRP的检测能指导化疗方案的选择,提高化疗疗效,因此,值得进一步深入研究。     

MUC1和PINCH蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的探讨黏蛋白-1(MUC1)和PINCH蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况。方法以数字法抽选35例NSCLC患者癌组织为观察组,同时病理检查时选择35例正常肺组织为对照组。应用RT-PCR方法观察并比较两组肺组织中MUC1和PINCH蛋白的表达。结果对照组标本中均MUC1和PINCH蛋白的阳性表达,观察组中MUC1和PINCH的阳性表达率分别为62.9%(22/35)和57.1%(20/35),与对照组比较差异明显(P<0.05),MUC1和PINCH蛋白的阳性表达水平间无明显差异(P>0.05);MUC1和PINCH蛋白表达情况与NSCLC患者性别差异、年龄、分型、分期等因素无关,与淋巴结转移发生与否密切相关,有淋巴结转移者的MUC1和PINCH蛋白阳性表达分别为86.9%和73.9%,明显高于未淋巴结转移者;MUC1和PINCH蛋白阳性表达者的术后5年生存率为22.7%(5/22)和30%(6/20),明显低于MUC1和PINCH蛋白阴性表达者的77.3%(17/22)和70%(14/20)(P<0.05)。结论 NSCLC患者癌变组织中MUC1和PINCH蛋白可高度表达,并且淋巴结转移者中,两者表达程度高于非淋巴结转移者,因此,MUC1和PINCH蛋白可作为NSCLC检测和病情评估的指标,并且指导临床治疗方案的确定。     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者血清中的表达

目的 通过检测凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者、肺炎患者及健康者血清中的含量,探讨Livin对于诊断非小细胞肺癌的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验对85例非小细胞肺癌患者、20例肺炎患者、20名正常健康人血清Livin水平进行检测.结果 非小细胞肺癌组血清Livin水平表达最高,肺炎组次之,健康对照组最低.三组间具有显著差异(P＜0.001).血清Livin浓度随着肿瘤分期的升高而升高.Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者血清Livin水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P＜0.05).结论 Livin作为一种凋亡抑制蛋白对非小细胞肺癌的诊断及判断患者预后具有一定的临床价值.     

P63蛋白在非小细胞肺癌中表达研究

目的研究宣威与非宣威地区非小细胞肺癌P63蛋白的表达,探讨其与生物学行为的关系。方法免疫组织化学法。结果 P63在肺鳞癌组织中高表达;非小细胞肺癌中,P63的表达与患者的TNM分期、组织分化程度及淋巴结转移情况有关,与患者性别无关;P63在非小细胞肺癌中在相同病理类型、分期、组织分化、淋巴结转移情况及相同性别的阳性表达率,宣威组与非宣威组比较,差异无统计学意义。结论P63的表达在宣威并无地区特异性,并不是宣威肺癌高发的原因。     

NSCLC组织中β-微管蛋白Ⅲ、stathmin蛋白表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的stathmin、β-tubulinⅢ,并探讨其与紫杉醇化疗疗效的的关系。方法采用免疫组化SP法检测123例NSCLC患者肿瘤组织（观察组）和15例炎性假瘤患者瘤组织（对照组）中的stathmin、-βtubulinⅢ,并对其中行根治术后用紫杉醇类药物行辅助化疗的32例NSCLC患者的疗效进行分析。结果 NSCLC组织中stathmin、-βtubulinⅢ蛋白表达阳性率分别为52.8%、62.6%,显著高于良性对照组的6.7%、13.3%（P均〈0.05）。stathmin蛋白均在低分化和有淋巴转移的肿瘤中表达明显升高（P均〈0.05）;-βtubu linⅢ蛋白在低分化和Ⅲ~Ⅳ期肿瘤中表达明显升高（P均〈0.05）。32例术后用含紫杉醇化疗方案化疗的患者中,stath-min、-βtubulinⅢ蛋白表达全阳性者的生存率较全阴性者低（P〈0.05）。结论 NSCLC患者肿瘤组织中stathmin、β-tubulinⅢ蛋白均明显升高。二者表达均阳性预示着肿瘤的恶性程度较高,对紫杉醇类化疗药物的敏感性较差,术后预后较差。     

雌激素受体在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析雌激素受体α、β（ERα、β）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达。方法采用MaxVision免疫组织化学技术检测59例NSCLC石蜡包埋组织中ERα、ERβ的表达。结果 （1）ERα在肺癌组织及癌旁组织中均未见表达。ERβ在NSCLC中的阳性表达率为45.8%（27/59）,在癌旁组织中未见其表达。（2）ERβ阳性表达与NSCLC组织学类型有关,在腺癌组织中的表达明显高于鳞癌,与性别、年龄、肿瘤大小、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移及吸烟状况无关。结论本组资料显示ERβ可能在肺癌,尤其是腺癌的发生发展中发挥重要作用。     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者血清中的表达

Objective To investigate the clinical significance of Livin in the diagnosis of non-small cell lung cancer (NSCLC) through testing the content of inhibitor of apoptosis protein Livin in the serum of NSCLC patients, pneumonia patients and healthy persons. Methods Livin levels in the serum of 85 NSCLC patients, 20 pneumonia patients and 20 healthy persons were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Results Livin level in the serum of NSCLC patients was significantly higher than that in pneumonia patients and healthy persons. The serum Livin level was increased following with tumor progress. Livin level in NSCLC patients with stage Ⅲ-Ⅳ was higher than that in NSCLC patients with stage Ⅰ - Ⅱ ( P ＜0.05) . Conclusions As an inhibitor of apoptosis protein,Livin has certain clinical value on the diagnosis and prognosis judgement of NSCLC patients.     

P-gp和LRP在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)和肺耐药蛋白(LRP)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP技术监测56例NSCLC患者癌组织中P-gp和LRP的表达阳性率。结果 56例NSCLC患者的癌组织中P-gy、LRP表达的阳性率为51.7%,60.7%,且两者在癌组织中的表达呈正相关;两者表达阳性率在腺癌组高于鳞癌组(P<0.05),中高分化组高于低分化组(P<0.05);与TNM分期无相关性。结论P-gy、LRP在NSCLC的多药耐药(MDR)中可能起重要作用。且在形成MDR的过程中有某种程度的关联。     

非小细胞肺癌组织中β-连环蛋白、Cyclin D1的表达及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中的β-连环蛋白和Cychn D1的表达变化及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测42例非小细胞肺癌及10例肺良性病变组织中的β-连环蛋白和Cyclin D1蛋白。结果在10例肺良性病变组织中β-连环蛋白表达正常,Cyclin D1均呈阴性表达;而在42例非小细胞肺癌组织中β-连环蛋白异常表达率为71．4％,Cyclin D1阳性表达率为76．2％。β-连环蛋白异常表达率与非小细胞肺癌的淋巴结转移情况和生存期有关（P均〈0．05）。Cyclin D1表达阳性率与非小细胞肺癌的分化程度和增殖活性密切相关（P均〈0．05）;β-连环蛋白异常表达与Cyclin D1阳性表达在非小细胞肺癌中呈显著的正相关性（r=0．324,P〈0．05）。结论非小细胞肺癌中β-连环蛋白表达异常、Cyclin D1蛋白表达上调。β-连环蛋白的异常表达可能是非小细胞肺癌转移的分子机制之一。     

着丝粒蛋白A在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的明确着丝粒蛋白A(CENP-A)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况,探讨CENP-A表达与NSCLC患者临床病理因素及术后生存期之间的关系。方法应用免疫组化方法检测CENP-A在66例NSCLC组织中的表达情况,并回顾性分析了66例NSCLC患者的临床资料,采用电话和信件随访的方式,了解患者术后生存情况。计数资料比较采用χ2检验,生存率分析采用Kaplan-Meier生存曲线,组间生存率比较用Logrank检验,多因素分析采用COX风险比例回归模型。结果 CENP-A在NSCLC中表达的总阳性率为65.15%,肺良性病变中CENP-A皆为阴性表达,两者之间差异有显著性(P<0.05)。高分化组与中低分化组之间的CENP-A总阳性率分别为38.89%、75.00%,两组比较差异有显著性(P<0.05),吸烟患者CENP-A总的阳性表达率(75.68%)与非吸烟患者(51.72%)比较差异有显著性(P<0.05),CENP-A的总的阳性表达率在患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴转移、TNM分期各组间的差异无显著性(P>0.05)。COX比例风险回归模型结果显示,患者术后生存时间与CENP-A的表达情况、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线提示CENP-A的阳性表达NSCLC患者3年以上生存率与CENP-A的阴性表达患者差异有显著性(P<0.05)。结论 CENP-A在NSCLC组织中高表达;CENP-A在肿瘤组织分化程度高的NSCLC患者中的表达低于分化程度低的患者,吸烟患者的CENP-A阳性表达率高于非吸烟患者;CENP-A的阳性表达情况是影响NSCLC患者预后的危险因素。     

Kaiso蛋白在非小细胞肺癌中的表达及预后评估价值

目的探讨转录因子Kaiso在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其与临床病理学因素及肺癌患者预后的关系。方法免疫组化方法检测78例NSCLC组织中Kaiso蛋白的表达。结果 78例肺癌组织中,Kaiso蛋白的阳性表达率为66.7%(52/78),阳性染色定位于细胞质中。Kaiso蛋白的阳性表达率与肺癌的TNM分期、淋巴结转移有关(χ2=3.9、4.21,P<0.05)。Kaiso蛋白阳性表达患者组的中位生存期31个月,Kaiso蛋白阴性表达患者组中位生存期44个月。单变量分析结果显示Kaiso蛋白阳性表达与肺癌患者的预后不良密切相关(χ2=7.554,P=0.006,Log-rank法),Cox多元分析结果显示肺癌TNM分期、Kaiso蛋白的阳性表达、淋巴结转移(P=0.001、P=0.007、P=0.026)是肺癌预后独立的危险因素。结论 Kaiso蛋白的过度表达与NSCLC的恶性表型及预后不良有关。     

淀粉样前体蛋白和β-微管蛋白在脑梗死患者血液中的表达及意义

目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)和β-微管蛋白在脑梗死患者血液中的表达及其临床意义。方法收集88例脑梗死急性期患者为观察组,选择30健康体检者为对照组,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测两组血APP和β-微管蛋白的表达,分析其在不同临床特征之间的关系。结果 APP和β-微管蛋白在观察组患者中高表达,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01);APP和β-微管蛋白的表达在大面积脑梗死患者中高于中小面积患者,脑梗死死亡组患者高于存活组患者,差异有统计学意义(P0.05,0.01)。结论联合检测APP和β-微管蛋白可能对脑梗死患者判断预后及指导治疗有重要意义。     

非小细胞肺癌中WWOX蛋白、Ki67的表达及其意义

目的 探讨WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测50例鳞癌,31例腺癌及20例癌旁正常组织中WWOX基因蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标、细胞增殖之间的关系.结果 WWOX基因在72.8%的NSCLC中失表达或表达减少,而在相邻正常肺组织中有80.0%正常表达.WWOX基因的表达与组织类型、腺癌细胞分化程度密切相关(r=0.262,r=0.457,P＜0.05),在鳞癌和低分化腺癌中WWOX基因失表达或表达减少.细胞增殖指数越高,WWOX基因表达越少,二者呈负相关(r=-0.252,P＜0.05).Ki67的表达与吸烟、组织分化、临床分期、淋巴结转移密切相关(均P＜0.05);与WWOX蛋白表达呈负相关(r=-0.252,P＜0.05).结论 WWOX蛋白在NSCLC组织中呈低表达,其表达的缺失可能在不同类型NSCLC的形成中发挥了不同的作用,而且与肿瘤的恶性程度及侵袭有关.Ki67蛋白的高表达提示预后不佳.     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织乳腺癌易感基因1和β微管蛋白Ⅲ表达及其与化疗疗效的关系

目的 观察肿瘤组织乳腺癌易感基因1(BRCA1)、β微管蛋白Ⅲ表达与ⅢB和(或)Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)采用紫杉醇联合顺铂(TP)方案化疗疗效的相关性.方法 入选初治、NSCLC临床TNM分期为ⅢB和(或)Ⅳ期、体能状态(PS)评分0～2分、预计生存期≥3个月的患者入选本研究.入选者均进行TP方案化疗,每3周重复,每2个周期评价1次疗效,共4～6个周期,无效者更换二线化疗方案.免疫组化检测肿瘤组织中BRCA1、β微管蛋白Ⅲ表达.根据BRCA1、β微管蛋白Ⅲ表达高低分为A组(BRCA1、β微管蛋白Ⅲ低表达)、B组(BRCA1、β微管蛋白Ⅲ高表达)、C组(BRCA1高表达,β微管蛋白Ⅲ低表达),D组(BRCA1低表达,B微管蛋白Ⅲ高表达).评价疗效指标:客观反应率(RR)、总生存时间(OS)、至肿瘤进展时间(TTP).结果 (1)人组87例ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者,BRCA1、β微管蛋白Ⅲ表达阳性率分别为57.5%(50/87)、48.3%(42/87),BRCA1、β微管蛋白Ⅲ不同表达的NSCLC患者间临床特征比较差异无统计学意义.(2)87例患者中A组28例,B组23例,C组19例,D组17例.化疗前4组患者间的临床特征比较差异无统计学意义.4组患者RR分别为60.7%、34.8%、9/19、6/17;OS分别为(539.4±17.6)d、(267.2±20.5)d、(325.6±24.1)d、(283.7±26.2)d;TTP分别为(256.9±28.4)d、(143.8±17.6)d、(179.3±19.8)d、(152.6±23.5)d.方差分析显示,A组的RR、OS、TTP均优于其他3组,差异有统计学意义(P值分别为0.039、0.000和0.000).结论 BRCA1、β微管蛋白Ⅲ可作为TP方案疗效的预测分子;仅BRCA1、β微管蛋白Ⅲ低表达的NSCLC患者,可能是TP化疗方案的优势人群.

Abstract：

Objective To investigate the predictive value of breast cancer susceptibility gene 1 (BRCA1) and class Ⅲβ-tubulin protein expression in tumor tissue for the efficacy of taxol and cisplatin combined chemotherapy (TP) in stage Ⅲβ/Ⅳ non-small cell lung cancer(NSCLC) patients. Methods A total of 92 stage Ⅲβ/Ⅳ NSCLC patients were recruited with 87 patients evaluated. Bronchoscopy or lung puncture tumor biopsy samples were obtained with BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin protein expression examined immunohistochemically before chemotherapy. The patients were randomly assigned to be received 4 to 6 cycles of TP chemotherapy regiments and followed up until death or lost. Response rate (RR) , overall survival (OS) and time to tumor progression (TTP) were assessed. Results Among the 87 evaluated patients, the positive expression rates of BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin were 57. 5% (50/87) and 48. 3%(42/87) respectively. There was no significant difference in clinical characteristics among patients with different positive expression rate. According to different expression of BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin, the patients were divided into four groups: group A (low expression of both BRCA1 and class 1 p-tubulin) ,group B (high expression of both BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin) , group C (high expression of only BRCA1) and group D (high expression of only class Ⅲβ-tubulin). The RR was higher in group A than other three groups (60. 7% , 34. 8% , 9/19 and 6/17 respectively). The OS and TTP were longer in group A than other three groups [OS: (539. 4 ± 17. 6) days, (267. 2 ± 20. 5) days, (325. 6 ± 24. 1) days and (283.7±26.2) days respectively ; TTP: (256. 9 ± 28. 4) days, (143.8±17.6) days, (179. 3 ± 19. 8)days and (152. 6 ±23. 5) days respectively]. There were no significant differences among the other three groups. Conclusions The expression level of BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin in tumor tissue is probably a predictor for the efficacy of TP chemotherapy in NSCLC patients. TP chemotherapy is more suitable for the NSCLC patients with lower expression of both BRCA1 and class Ⅲβ-tubulin. Our study may provide a new sight for tailored chemotherapy in NSCLC patients.     

P27蛋白在非小细胞肺癌中表达的预后意义

Ｐ2 7蛋白具有限制性调节细胞周期进程的作用 ,这一作用主要通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 (ＣＤＫＳ)复合物的功能来实现。Ｐ2 7蛋白表达与预后的关系在乳癌、淋巴瘤、前列腺癌以及消化道肿瘤已有报道[1] ,而在肺癌中的研究甚少。我们运用免疫组化法检测Ｐ2 7在非小细胞性肺癌组织中的表达水平 ,从而探讨其在非小细胞性肺癌中的意义。对象和方法　 1 对象 :5 6例非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)病例均在本院接受治疗及随访。其中男 42例 ,女 14例 ,年龄39～ 77岁 ,平均 6 0岁。中位随访时间 2年 (1～ 5年 ) ,5 6例ＮＳＣＬＣ中 ,腺癌 36例 ,鳞…