柴胡桂枝汤相合方剂免疫调节作用的实验研究

目的:观察柴胡桂枝汤、桂枝汤、小柴胡汤的免疫调节作用,以证实其合方中方与方间存在着功效的相加、协同或拮抗关系。方法:设柴胡桂枝汤、桂枝汤、小柴胡汤3个药物组和空白时照组,计算其对正常小鼠脾淋巴细胞转化率、迟发型变态反应的耳肿胀率、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率。结果:药物组与对照组比较均能增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率、小鼠迟发型变态反应(P<0.05),柴胡桂枝汤的免疫调节作用优于小柴胡汤、桂枝汤(P<0.05)。结论:桂枝汤和小柴胡汤的免疫调节作用具有协同关系。     

柴胡桂枝汤合方解热作用关系的实验研究

目的:观察合方柴胡桂枝汤与桂枝汤、小柴胡汤的解热作用功效.方法:首先复制干酵母大鼠发热模型,给予桂枝汤、小柴胡汤及合方柴胡桂枝汤,然后测量体温,观察各自解热效果.结果:桂枝汤、小柴胡汤、柴胡桂枝汤均有解热作用,且柴胡桂枝汤解热作用优于桂枝汤、小柴胡汤,小柴胡汤与桂枝汤比较无差别.结论:柴胡桂枝汤解热作用优于桂枝汤、小柴胡汤,柴胡桂枝汤合方中方与方间解热作用存在协同作用.     

柴胡桂枝汤治疗面部神经炎1例

柴胡桂枝汤治疗面部神经炎１例李恒欣（河南省南乐县公疗门诊部河南４５７４００）关键词：柴胡桂枝汤；面神经炎；少阳经络不利；清利少阳案例：万某，女，５２岁，工人，１９９３年３月６日初诊。患左侧口眼斜近３个月，曾用激素、Ｂ组维生素、扩血管药等治疗，并屡服牵...     

白藜芦醇对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其与Sirt1-p53通路的关系

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的保护作用及其具体分子机制.方法 雄性6周龄SD大鼠20只[体质量(200 ±20)g]随机数字法分为4组(n=5):假手术组、缺血再灌注组、RES预处理组、RES预处理+抑制剂组.建立大鼠肝脏70％热缺血再灌注模型(缺血1h,再灌注6h),并提前1h给予RES及Sirt1抑制剂(EX527).建模后检测血清标本中ALT活力及肝组织SOD活性,HE染色观察肝组织病理损伤,TUNEL法检测肝细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝组织Sirt1、乙酰化p53、Bax表达水平.结果 RES能够显著降低由HIRI引起的ALT活力升高(P＜0.01)并增加SOD活性(P＜0.01),显著缓解由HIRI引起的肝脏病理学改变(P＜0.01)和减少肝细胞凋亡(P＜0.01),显著提高Sirt1和Bax mRNA表达水平(P＜0.01,P＜0.01),提高Sirt1和Bax蛋白表达水平(P＜0.01,P＜0.01)并降低乙酰化p53蛋白表达水平(P＜0.01).结论 RES能减轻缺血再灌注诱导的肝脏损伤,该保护作用部分是通过激动Sirt1-p53通路实现.     

柴胡桂枝汤挥发油对Fmr1基因敲除小鼠脑组织超氧化物歧化酶和丙二醛及一氧化氮的影响

目的利用超临界二氧化碳（CO2）萃取法获取柴胡桂枝汤挥发油,并在Fmrl基因敲除小鼠（脆性基因敲除小鼠）模型上观察柴胡桂枝汤挥发油的抗癫痫作用,及其与超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的关系。方法将30只30日龄的Fmrl基因敲除小鼠（KO）和30只30日龄的野生型小鼠（WT）分别分成两组（KO空白组和KO用药组,WT空白组和WT用药组）,按1．7ml／kg的剂量腹腔注射柴胡桂枝汤挥发油,观察柴胡桂枝汤挥发油对小鼠旷场行为的影响,并取不同部位的小鼠脑组织制成1：10（重量体积比）的组织匀浆,测定SOD活性及MDA、NO的水平。结果与空白组比较,用药组小鼠在旷场实验中运动的平均速度、总路程、穿过各区的次数减少：脑组织中SOD活性增高,而MDA、NO水平均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论柴胡桂枝汤挥发油对Fmr1基因敲除小鼠的探索性、兴奋性、运动性均有抑制作用;其抗癫痫作用与清除自由基、阻止过氧化物生成,减少NO的神经毒性相关。     

人参皂苷Rg1的抗抑郁作用及其作用机制

目的：观察人参皂苷Rg1的抗抑郁作用,探讨其抗抑郁机制。方法：采用小鼠悬尾（tail suspension test）和强迫游泳（forced swim test）建立急性应激模型,选择大鼠慢性温和不可预见性应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）的方法建立长期抑郁模型。同时给予人参皂苷Rg1（5,10,20 mg·kg^-1·d^-1）和度洛西汀（10 mg·kg^-1·d^-1）,观察Rg1的抗抑郁作用。结果：在急性应激实验中,Rg1三个剂量组（5,10,20 mg·kg^-1）均能够显著降低动物的不动时间。慢性应激后,采用强迫游泳和糖水消耗实验进行行为学检测,与模型组相比,Rg1三个剂量均能够显著降低大鼠在强迫游泳实验中的不动时间,增加糖水偏好实验中的糖水消耗百分比,延长动物的睡眠时间。机制研究证明,Rg1可抑制PDE₄引起cAMP的累积,进而激活cAMP介导的抗抑郁信号转导途径,还可增加雄激素水平,而雄激素又能拮抗糖皮质激素的释放和增加基础突触传递。此外,增加突触新生也是抗抑郁的重要机制。结论：人参皂苷Rg1对小鼠急性应激和CUMS诱导的大鼠抑郁行为有显著的改善作用,并可能通过调节神经递质和激素的释放、减少糖皮质激素含量、增加神经营养因子的表达以及增强突触可塑性来发挥抗抑郁作用。     

基于MAPK/PPAR-γ通路探讨柴胡桂枝汤对非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响

[目的]柴胡桂枝汤对非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响及对MAPK/PPAR-γ通路的调节作用研究.[方法]72只大鼠随机分为空白对照组、NAFL模型组、柴胡桂枝汤低、中、高剂量组及硫普罗宁组,12只/组,采用高脂饲料喂养法建立非酒精性脂肪肝大鼠模型,柴胡桂枝汤低、中、高剂量组分别灌胃给予大鼠5 g/kg、10 g/kg、...     

柴胡皂甙加强氟西汀在强迫游泳模型上的抗抑郁作用

通过强迫游泳模型初步研究了柴胡皂甙和氟西汀的抗抑郁作用，发现4～16mg／kg柴胡皂甙不能缩短小鼠和大鼠强迫游泳不动时间，氟西汀20和40mg／kg也不能缩短小鼠和大鼠强迫游泳不动时间，80mg／kg方有作用，而亚活性浓度的氟西汀（20mg／kg）加上柴胡皂甙能缩短小鼠强迫游泳不动时间，说明柴胡皂甙单用难以起到抗抑郁作用，与氟西汀合用能加强其抗抑郁作用。     

柴胡加龙骨牡蛎汤加减通过p38 MAPK通路改善CKD小鼠PFC突触可塑性及抑郁行为研究

目的 探讨柴胡加龙骨牡蛎汤加减(CLMD)对慢性肾脏病(CKD)小鼠抑郁行为的作用及可能机制.方法 3月龄雄性C57BL/6小鼠60只,分为对照组、模型组、氟西汀组、CLMD低剂量组、CLMD中剂量组和CLMD高剂量组.除对照组外,其余5组小鼠先予0.2％腺嘌呤饮食喂养2周.中药干预组分别予2.36、4.725、9.4...     

桑黄素通过抑制ERK1/2-p38信号通路介导对老年大鼠骨骼保护作用

【目的】探讨桑黄素（SSS）治疗对老年大鼠骨代谢及骨量影响,并阐明其可能的作用机制。【方法】10只3月龄年轻雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠和20只24月龄老年雌性SD大鼠随机分为3组,对照组（CON,10只年轻大鼠）、模型组（MOD,10只老年大鼠）和桑黄素组（SSS,10只老年大鼠）。在实验过程中,SSS组每日接受腹腔注射桑黄素（10 mg/kg）治疗。治疗为期12周,待治疗结束后使用Micro-CT、HE染色切片、血清学检测以及蛋白质印迹观察治疗效果以及可能的机制。【结果】治疗12周后,与MOD组相比,SSS组的大鼠骨小梁数量和密度得到明显的改善。SSS组左侧股骨BMD、Conn.D、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较MOD组明显改善（P <0.05）。治疗12周时,SSS组CTX-1、骨钙素、TRACP-5b和PINP水平较MOD显著降低（P<0.05）。和MOD组比较,SSS组的大鼠ERK1/2-p38信号通路显著抑制,ERK1/2和p38水平显著降低,比较有统计学差异（P <0.05）。【结论】桑黄素通过抑制ERK1/2-p38信号通路和降低骨...     

小乌桂汤治疗小鼠胶原诱导性关节炎的作用机制

目的 以胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠为模型,探讨小乌桂汤治疗类风湿关节炎的免疫学机制。方法 构建DBA/1小鼠CIA模型,将关节炎指数（AI）评分相近的30只CIA小鼠随机分为正常对照组、模型组（CIA）、甲氨蝶呤组、小乌桂汤低剂量组（0.975 g/mL）、小乌桂汤中剂量组（1.95 g/mL）、小乌桂汤高剂量组（3.9 g/mL）,5只/组。其中,正常对照组和CIA组给予生理盐水,甲氨蝶呤组给予0.1 mg/mL甲氨蝶呤溶液,3个小乌桂汤处理组按照规定剂量分别给予小乌桂汤药液（0.2 mL/10 g体质量）连续灌胃28 d处理。使用AI评分和HE染色评价小乌桂汤对CIA模型小鼠关节的影响。利用流式细胞术观察小乌桂汤对CIA小鼠脾脏Th1、Th17、MDSC、G-MDSC、M-MDSC细胞亚群的影响。结果 甲氨蝶呤和不同剂量组小乌桂汤治疗后小鼠AI评分降低,炎症程度比其他组明显缓解,踝关节损伤得到有效修复,且随着小乌桂汤剂量增高,其治疗效果呈现出逐渐增强的趋势（P<0.05）。与模型组相比,甲氨蝶呤组和不同剂量组小乌桂汤组脾脏中Th1、Th17和M-MDSC细胞比例降低（P<0.05）,GMDSC细胞比例显著增加,且随着小乌桂汤剂量增高,细胞比例变化呈现逐渐明显的趋势（P<0.01）。相关分析结果显示,Th1、Th17细胞比例与M-MDSC细胞比例呈正相关,而与G-MDSC细胞比例呈负相关（P<0.01）。结论 小乌桂汤可通过调节MDSC细胞亚群水平,升高G-MDSC细胞比例和降低M-MDSC、Th1、Th17细胞比例改善CIA小鼠关节损伤,高剂量小乌桂汤其作用与甲氨蝶呤等效,且安全性更高。     

原发性干燥综合征患者睡眠障碍的相关影响因素

目的:探讨原发性干燥综合征(primary Sj?gren’s syndrome,pSS)患者中睡眠障碍的发生率及其相关的影响因素。方法:选取就诊于北京大学人民医院符合纳入及排除标准的186例pSS患者作为研究对象进行回顾性研究,采用匹兹堡睡眠质量量表(the Pittsburgh sleep quality index, PSQI)、抑郁症筛查量表(patient health questionnaire-9, PHQ-9)、广泛性焦虑量表(generalized anxiety disorder-7,GAD-7)进行调查,收集一般资料及临床数据,以欧洲抗风湿病联盟干燥综合征疾病活动度评分(the European League Against Rheumatism Sj?gren’s syndrome disease activity index,ESSDAI)评估疾病活动度。以pSS患者的PSQI分值>7分为界,分为152例睡眠障碍组和34例睡眠正常组。采用Mann-Whitney U秩和检验、卡方检验、t检验,Spearman相关分析以及Logistic回归进行统计学处理。结果:pSS患者中睡眠障碍的发生率为81.7%(152/186), 其中52.7%(98/186)的pSS患者存在中重度睡眠障碍。睡眠障碍组pSS患者的PSQI平均得分为(12.29±3.30)分,睡眠正常组PSQI平均得分为(5.50±1.20)分。睡眠障碍组患者的PSQI评分、PHQ-9评分及GAD-7评分均明显高于睡眠正常组患者,并且差异均具有统计学意义,P值分别为0.000、0.035、0.031。睡眠障碍组的PSQI量表评分在睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物使用及日间功能障碍等七个方面均明显高于睡眠正常组,并且两组间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。疾病病程、焦虑程度、抑郁评分与PSQI评分呈正相关(r值分别为0.151、0.240、0.421,P <0.05),而补体C3、C4与PSQI评分呈负相关(r值分别为-0.021、-0.235,P <0.05)。二元Logistic回归分析显示病程、PHQ-9评分为pSS患者睡眠障碍的预测指标,其中病程OR=2.809, 95%CI: 1.21~6.52;PHQ-9评分,OR=1.422, 95%CI: 1.04~1.94(P <0.05)。结论:pSS患者睡眠障碍的发生率较高,且与疾病病程、抑郁、焦虑情绪等因素密切相关。     

黄芩汤通过调节ILC3s-Th细胞反应减轻小鼠的溃疡性结肠炎

目的探讨黄芩汤在治疗溃疡性结肠炎（UC）过程中对三型固有淋巴细胞（ILC3）及辅助性T细胞（Th）免疫反应的调控作用。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为6组：正常组、模型组、美沙拉嗪组、黄芩汤低、中、高剂量组（HL，2.275 g/kg；HM，4.55 g/kg；HH，9.1 g/kg）。各组自由饮食，除正常组自由饮用蒸馏水外，其余各组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液，持续7d以建立UC模型，同时美沙拉嗪组和黄芩汤低、中、高剂量组小鼠每日分别给予美沙拉嗪及低、中、高剂量黄芩汤灌胃1次。流式细胞术分析结肠固有层淋巴细胞中ILC3s细胞比例及其表面主要组织相容性复合物Ⅱ类（MHCⅡ）分子表达变化以及Th细胞中Th1与调节性T细胞（Treg）的比例变化。采用Milliplex多因子测定方法检测结肠组织中多个细胞因子含量的变化。结果与模型组相比，黄芩汤各剂量组小鼠溃疡性结肠炎症状得以缓解，疾病活动指数评分及宏观评分下降（P < 0.001）。流式细胞术结果表明，黄芩汤各剂量组小鼠结肠中ILC3s细胞比例增加（P < 0.05）且MHCⅡ分子表达增多（P < 0.05），其中黄芩汤低、中剂量组Th1细胞比例降低（P < 0.05）而Treg细胞比例增加（P < 0.05）。Milliplex多因子测定结果表明，黄芩汤各剂量组小鼠结肠组织中Th细胞相关的促炎性细胞因子如白介素-2、白介素-17A、白介素-23、α肿瘤坏死因子、γ干扰素含量降低（P < 0.05）。结论黄芩汤通过增加ILC3s细胞数目及其MHCⅡ的表达，调节Th细胞免疫反应，从而缓解DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎。     

富心方通过调控c-Fos-NR4A1-p38通路改善人动脉血管内皮细胞缺氧引起的损伤

目的探讨富心方改善动脉内皮细胞损伤的分子机制。方法将13只雄性SPF级SD大鼠随机分为含药血清组（8只）与普通血清组（5只），通过灌药物、生理盐水分别制备血清。通过预实验采用体外培养的HAECs，分为21% O₂常氧培养细胞，2% O₂的缺氧培养细胞，两部分细胞都分别给予普通大鼠血清与低、高浓度富心方含药血清（1%，10%）；确定RNA高通量测序检测比较21% O₂培养对照组（普通血清10%）、2% O₂的缺氧模型组（普通血清10%）、2% O₂的缺氧模型组加载富心方含药血清(1%和10%)给药组之间的差异基因（DEGs），并从中筛选出本研究的目标基因：既因缺氧发生表达变化，且这些DEG又因富心方作用发生表达变化，同时也是动脉血管内皮细胞损伤相关基因。再结合AmiGO和String数据库筛选推测这些目标基因的相互关系，然后通过ELISA方法和Western blot法验证这些最终筛选出的目标因子在不同细胞模型中的蛋白表达水平和RNA高通量测序基因筛选结果的一致性。结果预实验结果显示，21% O₂培养对照组，2% O₂的缺氧模型组（两组各加入普通血清1%，10%），不因为不同血清浓度的加入影响细胞的形态和缺氧细胞模型验证因子（eNOS、ACE、ACE2、AGT、IL17、IL18）的表达差异。高通量测序结果显示，缺氧条件下的HAECs中共有7134个基因的表达和正常对照组细胞中的基因表达相比发生了显著变化（上调基因4205个，下调基因2929个），而在富心方作用后的缺氧HAEC中共有762个DEGs（上升305个，下调457个）的变化水平比缺氧模型组细胞中的相同基因变化有显著不同（P < 0.05）。最终根据在高通量变化中变化显著，从中选择了与抑制动脉粥样硬化和动脉血管内皮细胞损伤有关的基因，并结合AmiGO和String数据库通过Cytoscape软件构建蛋白质之间相互作用网络确认以下3个基因：原癌基因（c-Fos）、孤儿核受体（NR4A1）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK），既在缺氧条件下相对表达升高，又在富心方加入后相对表达降低，故选择作为本研究的研究靶点基因。ELISA与Western blot结果显示，与21% O₂常氧处理的对照组HAEC细胞相比，缺氧模型组c-Fos、NR4A1、p38MAPK的水平在缺氧条件下升高（P < 0.05）；与缺氧模型组比较，富心方含药血清处理后的细胞HAEC中的c-Fos、NR4A1、p-p38MAPK的蛋白表达水平明显下降，并且是富心方浓度依赖性的（P < 0.05）。结论缺氧可导致动脉血管内皮细胞损伤有关的基因的表达水平发生变化，但是富心方含药血清可以浓度依赖性的逆转这些基因的表达，推测富心方通过下调缺氧条件下HEAC细胞中c-Fos基因的表达从而抑制NR4A1基因，并降低由于缺氧升高的p38的磷酸化起到改善动脉血管内皮细胞损伤引起的动脉粥样硬化的作用，该机制还需要进一步通过in vivo和in vitro的实验加以求证。     

抗核抗体阳性类风湿关节炎的临床和实验室检查特点

目的:分析抗核抗体(anti-nuclear antibodies, ANA)阳性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的临床及实验室检查特征。方法:选择2013年1月—2018年12月于北京大学第三医院风湿免疫科住院的428例RA患者的临床及实验室检查资料,回顾性分析ANA阳性RA患者的临床和实验室检查指标的特点。统计学方法符合正态分布的定量资料采用t检验,非正态分布的定量资料采用Wilcoxon秩和检验。定性资料采用χ²检验,1≤理论频数<5采用校正四格表χ²检验,理论频数<1采用确切概率法。结果:收集到ANA阳性患者共231例(54%),ANA阳性组中女性占比明显多于ANA阴性组(82.7% vs. 63.5%, χ²=20.355,P<0.01);ANA阳性组出现跖趾关节受累(22.1%)低于ANA阴性组(33.0%, χ²=6.414,P<0.05),ANA阳性组中合并继发性干燥综合征(secondary Sj?gren’s syndrome, sSS)的比例显著高于ANA阴性组(19.5% vs. 4.1%, χ²=23.300,P<0.01);ANA阳性组合并类风湿因子(rheumatoid factor, RF)阳性(77.1% vs. 53.8%, χ²=25.743,P<0.01)及抗环瓜氨酸多肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)抗体阳性(74.9% vs. 59.4%, χ²=11.694,P<0.01)的比例均显著高于阴性组。ANA阳性组免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平[(15.1±5.1) g/L vs. (13.8±5.3) g/L, t=2.359, P<0.05]及免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)水平[1.25(0.92) g/L vs.1.05(0.65) g/L, Z=-3.449, P<0.01]高于阴性组,而血红蛋白(hemoglobin, Hb)水平[(109.64±17.98) vs. (114.47±18.48) g/L,t=-2.734, P<0.01]、血小板(platelet, PLT)水平[(266.4×10⁹±104.6×10⁹) vs. (295.9×10⁹±100.1×10⁹) /L,t=-2.970, P<0.01]低于阴性组。结论:ANA阳性RA患者合并sSS的比例显著高于ANA阴性者,前者IgG水平更高,而Hb及PLT水平则更低。     

垂体肿瘤转化基因1在系统性硬化症中的表达及作用

目的 研究垂体肿瘤转化基因（PTTG1）在系统性硬化症（SSc）中的表达及其对成纤维细胞的作用。方法 收集皮肤活检组织,其中SSc患者组21例,正常组22例。分别应用实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测皮肤组织中PTTG1基因表达水平;应用免疫组化方法检测皮肤组织中PTTG1蛋白表达水平;应用小干扰RNA（siRNA）降低成纤维细胞中PTTG1基因表达,通过 Real-time PCR 方法检测细胞中 PTTG1 及与细胞纤维化密切相关的几个基因α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1的表达变化;通过细胞实时增殖检测系统检测细胞增殖。结果 与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中PTTG1的表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中阳性细胞增多,PTTG1蛋白表达明显升高;原代皮肤成纤维细胞中PTTG1表达水平和α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1均存在正相关,差异具有统计学意义（R²=0.8192,P<0.05;R²=0.6398,P<0.05;R²=0.316,P<0.05;R²=0.3723,P<0.05）;同时,原代皮肤成纤维细胞中PTTG1干扰后,细胞增殖被显著抑制,纤维化相关基因（COL1A1、COL1A2、PAI-1）表达下降,胶原蛋白的基因表达降低。结论 SSc患者中存在PTTG1过度表达,干扰PTTG1可降低成纤维细胞活性,提示PTTG1与SSc纤维化程度密切相关。     

一种新的胎心率信号压缩方法——卷积编解码网络

为减少物联网系统中数据传输和存储的能量损失，提高胎心率数据的传输效率，实现胎儿的实时监控，本文使用卷积编解码器网络（CC-Net）压缩数据。网络有两个模块：编码和解码，在编码模块中，原始数据被压缩; 在解码模块中，压缩数据被重建。然后，通过使用原始信号和重建信号的均方误差来连续更新内部参数，以使误差最小。最后，在编码模块中获得有效的压缩数据。在本研究中，该方法对胎儿心率信号的压缩率达到了12.07%，重构信号与原始信号之间的误差为0.03。本研究提出的卷积编解码器网络（CC-Net）可以实现非常低的胎儿心率压缩率，并且可以确保重建的信号与原始信号非常相似，表明压缩方法是有效的，并且保留了胎儿心率信号的重要信息。     

miR-324-5p通过抑制Syk/Ras/c-fos通路降低脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖

目的 探讨miR-324-5p调控Syk/Ras/c-fos信号通路对大鼠肾小球系膜（HBZY-1）细胞增殖能力的影响。方法 体外培养HBZY-1 细胞;设计并合成 miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC 片段;采用 Lipo3000 试剂盒瞬时转染 miR-324-5pmimics,miR-324-5p mimics-NC片段至脂多糖（LPS）诱导的HBZY-1细胞内,RT-qPCR验证转染效率;将HBZY-1细胞分为对照组（生理盐水）,LPS 组（LPS 0.5 μg/mL）,LPS+mimics 组（LPS 0.5 μg/mL+miR-324-mimics）,LPS+mimics-NC 组（LPS 0.5 μg/mL+miR-324-mimics-NC）;MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖活性;RT-qPCR法检测各组细胞miR-324-5p及Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达;Western blot和免疫荧光法检测各组细胞p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白的表达。结果 MTT结果显示,LPS组细胞增殖水平较正常组显著升高,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比,LPS+mimics组细胞增殖能力降低;RT-qPCR结果显示,LPS+mimics组中miR-324-5p表达明显高于LPS组及LPS+mimics-NC组,且LPS+mimics组中Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达显著低于LPS组及LPS+mimics-NC组,差异具有统计学意义（P<0.05）;Western Blot结果显示,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比LPS+mimics组中p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白表达显著降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;免疫荧光结果显示,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比,LPS+mimics组p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白标记细胞数目明显减少。结论 miR-324-5p可通过抑制Syk/Ras/c-fos信号通路降低LPS诱导的慢性肾小球肾炎细胞的增殖活性,miR-324-5p有望成为慢性肾小球肾炎诊断和治疗的潜在靶标。     

RUNX1基因突变对成人急性髓细胞白血病的预后有不良影响

目的 了解Runt相关的转录因子1（RUNX1）在急性髓系白血病（AML）中的突变率及分布情况;探索RUNX1基因突变与临床特征的相关性及其对患者预后的影响。方法 收集158例初发AML患者的骨髓标本,提取骨髓基因组DNA,采用聚合酶链式反应技术（PCR）扩增目的基因片段,应用基因测序分析RUNX1基因突变情况。同时检测ASXL1、DNMT3A、TET2、FLT3、CEBPA、NPM1、IDH2、NRAS及c-KIT突变情况,分析其突变与RUNX1突变的关系。用Kaplan-Meier方法进行生存分析,并行Log-rank检验比较生存时间差异。结果 158例初发急性髓系白血病患者中,共发现RUNX1突变19例,突变率为12.0%,其中A166G 9例,A142T 6例,A162L 4例。RUNX1基因突变组与野生型组的年龄差异有统计学意义（P<0.01）,突变组患者年龄偏大,在M4和M5型中的发生率较高,较野生型组更易表达CD36、CD7。RUNX1突变发生于正常核型或预后中等风险核型的患者中,但差异均无统计学意义（P>0.05）。突变组的完全缓解率和生存率均低于野生型组（P<0.05）,而两组在性别、初诊时白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、骨髓原始细胞比例以及乳酸脱氢酶水平的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 RUNX1基因突变对AML患者的预后具有不良影响。     

沙利度胺治疗原发性干燥综合征合并轻中度非特异性间质性肺炎疗效观察

关于原发性干燥综合征(primary Sj(o)gren's syndrome,pSS)继发间质性肺炎的治疗,目前尚无统一共识,治疗常以激素和免疫抑制剂为主,其中环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)应用最为广泛.但因CTX具有骨髓抑制、肝功能损伤、潜在致肿瘤风险、生殖毒性、出血性膀胱炎等副作用限制了其在部分患者中的应用.近年来已有多项研究发现,沙利度胺具有调节免疫、抗炎和抑制血管增生的作用,可以改善间质性肺炎患者的临床症状和肺功能[1-2].本研究通过临床对照实验,观察沙利度胺治疗pSS继发轻中度非特异性间质性肺炎(nonspecific interstitial pneumonia,NSIP)的疗效.