针康法对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠细胞凋亡相关因子表达的影响

目的观察针康法对缺氧缺血性新生大鼠大脑皮质内细胞凋亡诱导因子及死亡基因受体mRNA表达及细胞凋亡的影响。方法随机将实验用Wistar大鼠分为假手术组、模型组、针刺组、康复组及针康组,又将各组于12、24、48、72 h分为4个亚组(n=8)。后应用Rice-Vannucci法建立缺氧缺血性脑损伤模型。其中假手术组不予任何治疗;模型组在造模成功后只予以同等条件抓取;针刺组进行头穴丛刺,留针2 h;康复组进行转笼转棒训练,每日10 min;针康组针刺方案同针刺组,康复方案同康复组。结果与假手术相比,其余各组的AIF、FasmRNA在各时间点的表达及细胞凋亡情况,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,针刺组、康复组及针康组在各时间点的AIF、FasmRNA表达及细胞凋亡情况差异也有统计学意义(P<0.05);针康组与针刺组及康复组比较,在各时间点的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、针刺组、康复组、针康组在各时间点内的细胞凋亡数与假手术组比较差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组、康复组、针康组在各时间点与模型组相比,其细胞凋亡数明显减少,...     

基于NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡探讨针康法对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的影响

目的：观察针康法对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠神经元NLRP3炎症小体及细胞焦亡的影响，探讨其改善缺氧缺血性脑损伤后运动功能缺损的可能机制。方法：选择120只7 d龄大鼠分为正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、头穴丛刺组(C组)、康复训练组(D组)和针康组(E组),再均分为24 d、7 d和14 d 3个时间点。结扎颈总动脉构建HIBD动物模型。C组针刺百会以及左右各旁开2 mm处，1次/d,每次留针2 h; D组进行转笼转棒训练，1次/d, 10 min/次；E组在头穴丛刺的基础上进行转笼转棒训练。在各时间点，采用网屏实验评定运动功能缺损，TUNEL+Caspase-1免疫荧光双标法观察海马区神经细胞焦亡的情况，蛋白印迹法检测海马区NLRP3、Caspase-1和GSDMD-N端蛋白表达。结果：相较于A组，经缺氧缺血造模处理的4组在各时间点网屏实验评分和海马区神经细胞焦亡率均显著升高，NLRP3、Caspase-1和GSDMD-N端蛋白的表达显著增加，差异具有统计学意义(P<0.05);相比较B组，各治疗组在各时间点网屏实验评分和海马区神经细胞焦亡率均显著减少，NLRP3、Caspase-1和GSDMD-N端蛋白的表达水平降低，其中E组的疗效最明显，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：针康法可改善HIBD新生大鼠的运动功能缺损，且疗效优于单纯针刺或康复疗法，其机制可能与抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡有关。     

针刺对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠大脑皮质14-3-3蛋白表达的影响

目的:探讨针刺对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠大脑皮质中14-3-3及凋亡相关的Bcl-2家族中两大主要成员Bcl-2和Bax的影响。方法:明确预产期的SD雌性妊娠大鼠接受延迟5min剖宫产术,所得新生大鼠随机分为模型组和针刺组;接受正常剖宫产术的大鼠所产新生大鼠为假手术组;代乳雌鼠自然分娩的新生大鼠为正常组。每组8只动物。针刺组新生大鼠饲养至14d时,每天针刺"脑三针""颞三针""智三针",每个穴位刺激20s,不留针,连续7d。各组新生大鼠均于出生后21d断头取脑,用免疫组织化学染色法检测大脑皮质中14-3-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:比较各组新生大鼠大脑皮质14-3-3的表达,假手术组和模型组显著低于正常组和针刺组(P0.05,P0.01);比较各组新生大鼠大脑皮质Bcl-2的表达,模型组略低于正常组(P0.05),针刺组高于模型组(P0.05);比较各组新生大鼠大脑皮质Bax的表达,假手术组、模型组显著高于正常组(P0.01,P0.05),针刺组与模型组间的差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺可以提高HIBD新生大鼠大脑皮质中14-3-3和Bcl-2的表达水平。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1a表达与细胞凋亡的关系及干预研究

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后及2-甲氧基雌二醇（2ME2）干预后对脑组织缺氧诱导因子-1a（HIF-1a）表达趋势的变化与细胞凋亡的关系,探讨2ME2对HIBD的影响及可能的作用。方法将7d龄Wistar大鼠120只,随机分为假手术组、HIBD组及2ME2干预组。其中后两组又根据HIBD后处死动物的时间不同随机分为7个亚组。采用免疫组化的方法对各组新生大鼠脑组织HIF-1a和Caspase-3的表达进行检测及用TuNEL法测定细胞凋亡指数（AI）。结果HIF-1a正常情况下低水平表达,HIBD后12h达高峰,后逐渐降低;Caspase-3表达于HIBD后6h明显升高,2d时达高峰;细胞凋亡指数于HIBD后3h升高,随着观察时间的推移,逐渐增多。2ME2干预后各时间点HIF-1a和Caspase-3的表达水平及细胞凋亡指数均较HIBD组明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIBD后HIF-1a表达增高,诱导细胞凋亡,促进了HIBD的进展;2ME2干预后,抑制了HIF-1a的表达,从而发挥脑保护作用。     

HIF-1α及其抑制剂对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其抑制剂2-甲氧基雌二醇（2ME2）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时神经细胞凋亡的影响。方法将120只新生7d龄Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组,n=8）、缺氧缺血模型组（HIBD组,n=56）、2ME2干预组（2ME2组,n=56）,后两组采用Rice法建立模型后,根据断头取脑的时间不同又分为3h、6h、12h、24h、48h、72h和7d7个亚组。应用HE染色观察脑组织的病理变化,免疫组化技术检测HIF-1α、Bax、Bcl-2的表达,TUNEL法计数脑细胞凋亡。结果 HE染色显示2ME2干预后脑组织的损伤减轻;免疫组化显示：HIF-1α在HIBD组于模型制备后3h升高,12h达高峰,之后下降,2ME2组表达趋势和HIBD组相同,表达水平显著下降。与HIBD组比较,2ME2组各时间点的Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低,TUNEL标记的阳性细胞数明显减少。结论在新生大鼠缺氧缺血急性期使用2ME2抑制HIF-1α的表达,引起Bax/Bcl-2表达量比值降低,凋亡细胞数目减少,改善脑损伤。     

葛根素对缺氧缺血性脑病新生大鼠脑细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响

目的观察葛根素对缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠脑细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响。方法7日龄Wistar大鼠随机分成假手术组、HIE模型组、葛根素治疗组,每组22只,参照Rice法制作HIE模型,应用Western-blot和流式细胞术在不同时间点分别检测大脑皮质Bim蛋白的表达和细胞凋亡情况。结果HIE模型组和葛根素治疗组脑细胞Bim蛋白表达灰度值在12 h分别为137.00±5.00和78.20±4.38,24 h分别为164.40±5.50和90.40±3.36,均显著高于假手术组(29.60±3.20和30.00±3.74),葛根素治疗组Bim蛋白表达低于HIE模型组。HIE模型组和葛根素治疗组脑皮质早期凋亡细胞比例在12 h分别为(16.2±1.86)%和(8.54±1.91)%,24 h分别为(20.03±2.02)%和(13.36±1.64)%,均显著高于假手术组((0.76±0.09)%和(1.34±0.24)%),葛根素治疗组细胞凋亡低于HIE模型组。结论葛根素能抑制HIE新生大鼠脑细胞凋亡启动因子Bim蛋白表达,具有抗脑细胞凋亡作用。     

亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织Caspase-3的表达变化

目的探讨亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑组织天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶一3（Caspase3）的表达变化。方法将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组。假手术组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型组（肛温37℃）和亚低温治疗组（肛温33℃）,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分为5个亚组：6h组、12h组、24h组、48h组、72h组,每亚组各8只。采用免疫组化的方法测定Caspase-3的活性。结果HIBD组缺氧缺血侧大脑组织Caspase-3活性逐渐增高,48h达高蜂（caspase-3阳性细胞平均灰度值144．15±4．50）,然后逐渐下降,72h后仍有明显增高;与HIBD模型组各时间点相比,亚低温组各时间点脑组织Caspase-3表达均明显降低（P〈0．01）。结论亚低温治疗可通过降低缺氧缺血后Caspase-3酶的活性,从而起到脑保护作用。     

热敏灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织细胞凋亡的影响

目的 观察热敏灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织细胞凋亡和Caspase-9表达的影响,以阐明热敏灸的作用机制.方法 选取50只7dICR新生小鼠,按完全随机的方法分为假手术组15只、模型组15只与艾灸治疗组20只.艾灸治疗组再根据艾灸前后小鼠的尾温变化,分为非热敏灸组8只(尾温未升高)和热敏灸组12只(尾温明显升高)....     

针康法对脑缺血大鼠Caspase-3 mRNA和蛋白表达的影响

目的:通过观察针康法对脑缺血大鼠Caspase-3 mRNA和蛋白表达的影响,探讨针康法治疗缺血性脑损伤的机制.方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组.改良的线栓法制备永久性脑缺血模型,采用实时荧光PCR法检测Caspase-3 mRNA的表达,免疫组化检测大鼠海马组织Caspase-3蛋白的表达.结果:假手术组大鼠Caspase-3 mRNA和蛋白未见表达;模型组各个时间点Caspase-3 mRNA和蛋白表达均较假手术组增加(P＜0.01);术后3天、7天、14天与模型组相比,针刺组、康复组和针康组Caspase-3 mRNA及蛋白表达均减少(P＜0.05);术后21天,与针刺组、康复组相比,针康组Caspase-3 mRNA及蛋白表达趋于一致(P＞0.05).结论:脑缺血可引起Caspase-3 mR-NA和蛋白的表达上调,针刺结合康复疗法可下调Caspase-3 mRNA和蛋白,从而抑制海马神经元的凋亡,保护神经元.     

EPO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织Caspase-9和Caspase-3的影响

目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）时脑组织Caspase-9和Caspase-3的表达变化及促红细胞细胞生成素（EPO）对其表达的影响,从而探讨EPO发挥脑保护作用的可能机制。方法将新生7 d SD大鼠120只随机分成3组,假手术组、HIBD组r、hEPO治疗组,每组根据不同时间点又分为5个亚组：6 h组、12 h组、24 h组、48 h组、72 h组,每组8只,用免疫组化的方法观察各组脑组织Caspase-9和Caspase-3的表达。结果 Caspase-9的表达在缺氧缺血6 h即增强,12 h时逐渐升高,24 h~72 h维持在高峰水平（P〈0.01）;Caspase-3的表达也在缺氧缺血6 h即增强,12 h时逐渐升高,24 h~48 h达高峰,72 h稍有降低（P〈0.01）;rhEPO治疗组各时间点Caspase-9和Caspase-3的表达水平较HIBD组均明显降低（P〈0.01）。结论 Caspase-9和Caspase-3参与了新生大鼠脑组织HIBD的发生发展过程,EPO可能通过降低新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织Caspase-9和Caspase-3的表达发挥其脑保护作用。     

醒脑静注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨醒脑静注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的影响.方法：将新生7日龄SD大鼠108只随机分为假手术组、缺氧缺血组、醒脑静干预组.观察醒脑静注射液对缺氧缺血72小时后脑组织含水量以及24小时、48小时和72小时后实验侧脑组织匀浆MDA和SOD含量的影响.结果：与假手术组比较.缺氧缺血组大鼠脑组织含水量、脑组织MDA含量明显增高,SOD含量显著降低.与缺氧缺血组比较,醒脑静干预组大鼠脑组织含水量、脑组织MDA含量明显降低,SOD含量显著增高.结论：醒脑静注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有保护作用,可以减轻脑水肿,抑制自由基的生成.     

参麦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的干预作用

[摘要]目的研究参麦注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的干预作用。方法建立新生鼠HIBD模型。免疫组化方法检测缺氧缺血（HI）后2h、12h、24h、3d、7d、14d各时间点新生大鼠右侧大脑海马CAl区Bax、Bcl-2蛋白表达情况。实验各观察点随机分为假手术组（s组）、参麦注射液治疗组（SM组）、生理盐水对照组（c组）,每纽9只。结果Hl后2h,SM组、c组右侧大脑海马CAl区Bcl-2蛋白表达及Bax蛋白表达均已有升高,24h达到高峰,14d各组降到与SM组同一水平：SM组、c组在2h、12h、24h、3d、7ct点与s组比较均有显著性差异,在14d与s组比较无显著性差异;SM组在24h、3d、7d与c组比较,Bcl-2蛋白表达较c组高,在2h、12h、14d点与c组比较无显著性差异。SM组在12h、24h、3d、7d与c组比较,Bax蛋白表达较c组降低,在2h、14d与c组比较无显著性差异。结论参麦注射液可以提高抑制凋亡基因Bcl-2的表达及降低促凋亡基因Bax的表达。     

葛根素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元凋亡的影响

目的:研究葛根素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经元凋亡的影响及其神经保护机制。方法:96只新生7d龄SD大鼠随机分为3组:葛根素治疗组、缺氧缺血性脑损伤组(HIBD组)和假手术对照组。按经典方法制作新生大鼠H IBD模型,并于脑缺氧缺血后6h,24h,48h,72h留取脑组织标本。观察各组新生大鼠海马CA 1区神经细胞形态学变化及葛根素对HIBD后海马CA1区神经细胞凋亡的影响。结果:HIBD后6h海马CA1区凋亡细胞增多,24h达高峰,48h阳性细胞开始减少,凋亡细胞多位于病变较重的皮质的边缘内带和海马CA 1区;而假手术对照组仅偶见到阳性细胞;葛根素治疗组细胞凋亡的时程与HIBD组一致,分布极其相似,但海马CA1区的凋亡细胞数在24h后各时间点较HIBD组均明显减少。结论:葛根素可通过抑制神经细胞凋亡而对HIBD后的脑组织起到保护作用。     

促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤凋亡的研究

目的研究单次注射外源性人重组促红细胞生成素（rhEPO）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）凋亡的影响,探讨rhEPO神经保护作用分子机制。方法新生7d龄Wistar大鼠,随机分为假手术组、HIBD组、rhEPO治疗组。采用Rice等方法建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型（HIBD模型）,rhEPO治疗组于缺氧缺血完成后即刻腹腔内注射rhEPO5000U/Kg1次。各组分别于术后及给药后不同时间点断头取脑组织,HE染色观察神经细胞形态变化、用免疫组化方法检测凋亡相关蛋白：Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果HIBD组神经细胞凋亡增加,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;rhEPO治疗组神经细胞凋亡减少,与HIBD组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;Bcl-2蛋白在假手术组呈低水平表达,HIBD组表达增高,rhEPO治疗组则较假手术组及HIBD组表达更高;Bax蛋白在假手术组中表达弱,HIBD组表达增高,rhEPO治疗组则HIBD组表达低。结论rhEPO通过减少新生大鼠脑神经细胞坏死和凋亡来发挥其神经保护作用。     

促红细胞生成素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织HIF-1α及存活素表达的影响

目的研究促红细胞生成素（EPO）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及凋亡相关蛋白存活素（Survivin）表达的影响,探讨其抗凋亡的可能机制。方法将120只7dWistar大鼠随机分为3组：假手术组（n=8）、HIBD组（n=56）、rhEPO治疗组（n=56）。后两者根据处死时间分为：3h组,6h组,12h组,24h组,48h组,3d组,7d组,每组8只。采用免疫组化法测定HIF-1α、Survivin的表达,用TUNEL法对细胞凋亡指数（AI）进行检测。结果 HIF-1α的表达在缺氧缺血后3h即增强,12h达高峰,后逐渐降低（P〈0.01）;Survivin在缺氧缺血后12h开始增高,7d明显升高,与假手术组相比,除3h、6h组,其余差异有统计学意义（P〈0.01）,细胞AI值在缺氧缺血后6h增加,7d明显增高,除3h组,其余差异有统计学意义（P〈0.01）;与HIBD组相比,rhEPO治疗组12h、24h、48h、3d的HIF-1α表达明显减少（P〈0.05）,12h、24h、48h、3d的Survivin表达明显增高（P〈0.05）,细胞AI值24h、48h、3d、7d明显降低（P〈0.05）。结论 EPO可通过降低HIF-1α的表达和提高Sur-vivin的表达,从而减少HIBD后的细胞凋亡,发挥其神经保护作用.     

川芎嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨川芎嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用。方法：建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型，观察川芎嗪对脑组织中超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(NDA)和一氧化氮(NO)含量的影响以及对HIBD新生大鼠生存时间的影响。结果：HIBD新生大鼠SOD活性下降，NDA、NO含量升高，川芎嗪缺氧前与缺氧后干预均能使SOD活性升高，NDA、NO含量下降；且川芎嗪能使HIBD新生大鼠生存时间延长。结论：川芎嗪缺氧前与缺氧后干预均对HIBD新生大鼠有保护作用，其作用机制可能与减少氧自由基生成，降低NO含量有关。     

外源性腺苷对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑水肿的影响

内源性神经介质系统在缺氧缺血性脑损伤的病理生理中起着重要的作用。腺苷(Adenosine，ADO)则是其中作用较强的神经调节因子。为了探讨腺苷在新生儿缺氧缺血性脑病中的作用，制备了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型，并应用外源性腺苷观察其治疗效果，为临床应用提供依据。     

外源性腺苷对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠一氧化氮的影响

腺苷(Adenosine，ADO)是一种作用较强的神经调节因子，在缺氧缺血性脑损伤的病理生理中起着重要的作用。为了探讨其作用机制，我们制备了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的动物模型，并给予不同浓度的外源性腺苷，观察其对一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的影响，探讨其作用机制。     

针康法对缺血性脑卒中患者肢体运动功能的影响

目的:观察针康法对缺血性脑卒中患者肢体运动功能的影响.方法:在黑龙江中医药大学附属第二医院选缺血性脑卒中患者56例,治疗组28例,对照组28例.参照改良的爱丁堡与斯堪的纳维亚研究组标准对患者的肢体运动功能进行评分,比较针康法治疗后两组间的差异.结果:治疗组的28例缺血性脑卒中患者经针康法治疗后,肢体肌力总积分显著高于对照组.结论:针康法治疗对缺血性脑卒中患者肢体运动功能的提高有明显作用.