体外香菇多糖对顺铂抑制胃癌细胞增殖的促进作用

目的:研究体外香菇多糖(Lentinan)对多药耐药基因表达的影响和促进顺铂抑制胃癌细胞增殖的作用.方法:分别用顺铂(Cisplatin)、香菇多糖和顺铂联合香菇多糖处理SGC-7901胃癌细胞,将其分为4组:对照组(Con组),香菇多糖组(Len组),顺铂组(Cis组)和顺铂联合香菇多糖组(L+C)组.应用RT-PCR检测多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP基因mRNA表达;应用CCK-8试剂盒检测Con组和药物处理组前后的胃癌细胞增殖状态.结果:正常SGC-7901胃癌细胞中多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP均表达mRNA,香菇多糖能显著降低多药耐药基因表达而对细胞增殖无明显影响;顺铂明显增加多药耐药基因表达,同时抑制细胞增殖(P<0.05);香菇多糖联合顺铂作用后,MDR1和MRP1基因表达完全受到抑制,LRP表达显著降低,细胞增殖速度明显低于Con组、Len组和Cis组,差异具有统计学意义(10d:0.54vs1.90,1.88,0.92,均P<0.05).结论:香菇多糖联合顺铂后因抑制多药耐药基因表达而显著增强顺铂的抑制细胞增殖作用.     

Juglone对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞增殖及细胞周期的抑制作用

目的测定Pin1抑制剂(Juglone)对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞生长增殖及细胞周期的影响,讨论Ju-glone的抗鼻咽癌肿瘤的作用效果。方法体外培养人鼻咽癌CNE-2Z细胞,采用MTT实验观察细胞生长增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期。结果 MTT测定结果显示,Juglone对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞生长有明显的抑制作用,并且随着时间的延长和作用浓度的升高,其抑制作用也逐渐增强;流式细胞仪分析检测结果显示,加入Juglone培养24 h后造成CNE-2Z细胞G1期阻滞,48 h后,CNE-2Z细胞G2/M期阻滞(P<0.01)。结论 Juglone有抑制鼻咽癌细胞增殖和细胞周期阻滞的作用,有望为鼻咽癌防治提供候选药物。     

姜黄素联合顺铂抗胰腺癌细胞增殖的效应

[目的]体外观察姜黄素（curcumin）联合顺铂（CDDP）抗胰腺癌细胞（Pane-1）增殖的效应。[方法]采用MTT法观察不同浓度姜黄素、CDDP单独应用对Panc-1细胞生长的抑制效应，并利用中效原理判定2药合用的效果，应用中位效应原理和联合作用指数法来定量姜黄素与CDDP的联合作用。[结果]姜黄素和CDDP对Panc-1有剂量依赖性的抑制增殖作用，作用48h姜黄素、CDDP的IC50值分别为（20．05±1．32）μmol／L、（0．89±0．31）μg／ml。中效原理分析显示，2药在联合应用时为协同效应，在相同的抑制效应下可降低姜黄素和明显降低CDDP的使用量。[结论]姜黄素可以促进Panc-1对CDDP的敏感性，降低其有效治疗浓度。     

顺铂诱导食管癌EC9706耐药细胞中Bcl-2的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白Bcl-2在顺铂(DDP)诱导食管癌EC9706耐药细胞中的表达。方法建立EC9706/DDP细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,Western印迹检测DDP处理后EC9706细胞及EC9706/DDP细胞Bcl-2蛋白表达,RTPCR、荧光定量PCR检测Bcl-2 mRNA水平。结果 EC9706/DDP细胞对DDP诱导的凋亡不敏感,Western印迹检测到EC9706/DDP细胞中Bcl-2表达上调,与EC9706细胞相比具有统计学意义(P0.05)。RT-PCR、荧光定量PCR检测到EC9706/DDP细胞中Bcl-2 mRNA水平上调,与EC9706细胞相比具有统计学意义(P0.05)。结论 Bcl-2表达上调可能为食管癌EC9706细胞对DDP耐药的重要机制。     

奥沙利铂联合顺铂对肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

目的 通过对奥沙利铂(L-OHP)、顺铂(DDP)单独及联合作用抑制肝癌细胞株HepG2生长的实验研究,探讨两药合用的效果及最佳剂量.方法 采用一定浓度梯度L-OHP和DDP单独及联合与人肝癌细胞株HepG2孵育后,采用MTT法检测细胞生长变化,并采用两药相互作用系数来评价两药相互作用性质.结果 在各作用时间点,联合组对肝癌细胞HepG2的生长抑制率与相应浓度L-OHP、DDP单药组相比均显著增强.结论 L-OHP与DDP联用可增强互补,减少各自用药剂量,达到减毒增效的目的 .     

Pinl抑制剂Juglone对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用

目的:测定Pin1抑制剂(Juglone)对食管癌细胞EC1生长增殖的影响,探讨Juglone的抗肿瘤作用.方法:体外培养人食管癌细胞系EC1,用MTT试验观察细胞生长增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡.结果:MTT试验表明,Juglone对EC1细胞生长有明显的抑制作用,且抑制作用随作用浓度和作用时间增加而增强.流式细胞仪检测表明,加入Juglone培养48 h后,EC1细胞出现G2期阻滞.Juglone药物(10、20、30 μmol/L)培养48 h后,EC1细胞的凋亡率明显增加,与对照组相比有统计学意义(9.06%,32.88%,53.18% vs 8.77%.均P<0.05).结论:Pin1抑制剂Juglone可以通过抑制Pin1表达从而抑制食管癌细胞的增殖,Pin1抑制剂有望成为新型的抗肿瘤治疗靶点.     

端粒酶抑制因子X1过表达对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响

目的 探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法 体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照（NG）组（空白对照细胞）、pcDNA组（转染阴性对照质粒）、pcDNA-PinX1组（转染PinX1过表达质粒）、N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）组（加入信号通路抑制剂）。采用实时荧光定量PCR法检测各组PinX1 mRNA的表达水平。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用荧光探针法检测各组活性氧簇（ROS）水平。采用蛋白质印迹法检测各组腺苷酸激活蛋白激酶/信号转导与转录激活因子3(AMPK/STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果 经成功转染细胞后,与NG组、pcDNA组比较,pcDNA-PinX1组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均升高,而p-STAT3/STAT3均降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与pcDNA-PinX1组比较,NAC组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均降低,p-STAT3/STAT3升高,差异均有统计学意义（P均<...     

顺铂联合放疗治疗中晚期食管癌49例临床观察

目的探讨顺铂联合放疗治疗中晚期食管癌的疗效及安全性。方法将98例中晚期食管癌患者随机分为观察组和对照组各49例,两组均予^60Co体外照射或6mV X线照射,在此基础上观察组予顺铂静滴。观察两组临床症状改善情况、白细胞减少率、肿瘤消退率、肿瘤消退时照射野总剂量（DT）及3a生存率、复发率及转移率。结果观察组进食梗阻消失率、胸背疼痛消失率显著高于对照组,白细胞减少发生率显著低于对照组;照射野DT为40Gy时观察组肿瘤消退率显著高于对照组（P均〈0．05）;肿瘤消退时观察组和对照组照射野DT分别为52、62Gy,化疗增敏比为1．19;观察组3a生存率显著高于对照组,复发率及转移率显著低于对照组,P均〈0．05。结论顺铂联合放疗治疗中晚期食管癌可提高患者生存率,防治复发和远处转移,且不良反应小;远期疗效有待于进一步研究。     

益肺解毒方联合顺铂对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的探讨益肺解毒方联合顺铂对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法 (1)应用血清药理学方法制备益肺解毒方药物血清。60只SD大鼠,分为低、中、高剂量组及空白血清组,每组15只。给予低、中、高剂量益肺解毒方煎剂及等体积生理盐水灌胃3 d,然后腹主动脉取血,制备益肺解毒方药物血清。(2)应用噻唑蓝(MTT)法检测益肺解毒方含药血清、顺铂及将两者协同后对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。益肺解毒方药物血清组分为3个剂量组(低、中、高剂量组)、空白血清组、顺铂组;联合组(低、中、高剂量益肺解毒方与空白血清联合顺铂)。将顺铂设为5个浓度梯度(1、2、4、8、16 mg/L)。另设空白对照组、空白调零组。每组设6个复孔,实验重复3次。计算各组对人肺腺癌A549细胞增殖抑制率。结果低、中、高剂量益肺解毒方药物血清对人肺腺癌A549细胞增殖均具有抑制作用(P<0.05),且剂量与抑制率呈一定量效关系。顺铂对人肺腺癌A549细胞增殖亦具有抑制作用,且随着浓度的增高,抑制率逐渐增高,作用呈现浓度依赖效应。中、高剂量益肺解毒方药物血清与顺铂协同,协同指数>1.15,数据结果提示益肺解毒方可以协同顺铂增加其疗效。而应用低剂量益肺解毒方则与顺铂协同效应为单纯相加。结论益肺解毒方联合顺铂对肺腺癌A549细胞具有协同增效作用。     

五味子粗多糖与顺铂抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用

目的研究五味子粗多糖(FSP)单独或与顺铂联合抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用。方法培养脑胶质瘤(SHG-44)细胞,应用四甲基偶氮唑(MTT)法检测FSP单独及联合顺铂抑制细胞增殖的情况。结果脑胶质瘤SHG-44细胞在FSP浓度200、400、800μg/ml时,均可以抑制细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),且有浓度依赖性。FSP与顺铂联合作用时可以明显地抑制细胞的生长(P<0.01)。结论 FSP可以抑制胶质瘤SHG-44细胞的增殖,联合顺铂时可发挥协同作用。     

联合应用活性氧抑制剂对降低胃癌顺铂耐药性的影响

目的探讨活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过Akt(蛋白激酶B)有关的信号途径在胃癌细胞中对顺铂化疗敏感性的影响。方法应用化疗药物顺铂以一系列梯度浓度处理对数期生长的胃癌BGC-823细胞,通过MIT法检测顺铂对BGC-823细胞增殖抑制率的影响,应用顺铂和活性氧抑制剂NAC单独及联合应用处理胃癌BGC细胞后测定细胞的活性氧水平以及Akt及磷酸化Akt的表达水平。结果顺铂对胃癌细胞有明显的抑制作用,呈浓度依赖性。单用顺铂组活性氧水平高于联合用药组;顺铂联合应用活性氧抑制剂NAC组与单用顺铂或活性氧抑制剂组的Akt表达无统计学意义(P>0.05),而磷酸化Akt的表达下调(P<0.05)。结论活性氧抑制剂NAC可能通过阻断P13K/Akt信号途径或其他有关Akt的信号通路以提高癌细胞对顺铂化疗的敏感性。     

五味子总木脂素与顺铂抑制大鼠胶质瘤细胞增殖的作用

目的 探讨大鼠脑胶质瘤细胞对五味子总木脂素作用的敏感性及五味子总木脂素与顺铂作用后对胶质瘤细胞增殖的影响.方法 培养大鼠C6脑胶质瘤细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特性,应用MTT法检测五味子总木脂素单独及联合顺铂作用后细胞的增殖程度.结果 大鼠C6脑胶质瘤细胞在五味子总木脂素低浓度作用时抑制生长作用不明显,甚至出现轻微的增殖现象,药物浓度达到200 μg/ml时,明显抑制细胞增殖.总木脂素与顺铂联合作用检测结果为0.43 ±0.01,与对照组(0.75 ±0.04)相比,具有显著性差异(P＜0.01).结论 五味子总木脂素与顺铂联合可发挥协同作用,从而抑制细胞增殖.     

蛋白酶体抑制剂单用或联合顺铂对人胃癌细胞的抑制效应

背景：蛋白酶体抑制剂通过阻断泛素．蛋白酶体通路中的蛋白降解，致使错误折叠蛋白或受破坏蛋白堆积．启动热休克反应并进一步导致细胞死亡，对多种恶性肿瘤细胞具有抑制作用。目的：探讨蛋白酶体抑制剂Z-Leu—Leu—Phe-CHO（ZLLFC）单用或联合顺铂对人胃癌细胞株SGC-7901体外增殖和凋亡的影响及其对肿瘤多药耐药相关切除修复交叉互补基因1（ERCC1）mRNA表达的影响。方法：将ZLLFC和顺铂单独或联合作用于SGC-7901细胞。以甲基噻唑基四唑（MITT）法检测细胞存活率，透射电子显微镜观察凋亡细胞形态，流式细胞仪检测细胞凋亡率．逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测ERCC1 mRNA表达。结果：ZLLFC或顺铂单独作用后，SGC-7901细胞存活率较对照组显著降低（P〈0．01），呈现轻度凋亡形态；ZLLFC联合顺铂组细胞存活率较单用顺铂组显著降低（P〈O．01），细胞凋亡率显著升高（P〈O．01），呈现明显凋亡形态。联合组ERCC1 mRNA表达显著低于单用顺铂组（P〈0．01）。结论：蛋白酶体抑制剂ZLLFC能轻度抑制人胃癌细胞株SGC．7901生长，诱导细胞凋亡，与顺铂联用具有协同抑制效应。ZLLFC可能通过下调ERCC1转录水平逆转顺铂耐药，从而增强顺铂的抗肿瘤作用。     

siRNA沉默Annexin-1基因对膀胱癌T24细胞顺铂耐药的影响

目的 观察RNA干扰沉默膜联蛋白-1(Annexin-1)基因表达技术对膀胱癌T24细胞Annexin-1基因表达和顺铂耐药的影响.方法 针对Annexin-1基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小分子干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染膀胱癌T24细胞,转染后应用半定量RT-PCR和Western印迹检测Annexin-1 mRNA 和蛋白的改变,用MTT法检测沉默Annexin-1表达在膀胱癌T24细胞对顺铂敏感性的变化.结果 转染siRNA后膀胱癌T24细胞Annexin-1的mRNA和蛋白水平显著下降(P＜0.05),增强细胞对顺铂的敏感性(P＜0.05).结论 RNA 干扰Annexin-1基因后其mRNA 和蛋白水平显著下降,并且增强T24细胞对顺铂的敏感性.     

p38在二硫苏糖醇与顺铂诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的作用

将人食管癌Eca109细胞分为七组,其中三组分别加二硫苏糖醇(DTT,Ds)、顺铂(Cs)及二药联合(Ds Cs)处理细胞,另三组则先用磷酸化p38特异性抑制剂SB203580孵育,再分别加Ds、Cs及Ds Cs处理细胞,未加药组作为对照(C′).采用流式细胞仪技术检测细胞凋亡率.结果与C′比较,各组均存在明显差异(P均＜0.01); SB203580孵育细胞后,与相应组别比较,Ds 、Cs 、Ds Cs凋亡率均明显下降(P均＜0.01).证实p38 MAPK在Ds 和Cs诱导食管癌Eca109细胞凋亡中被显著激活,p38 MAPK的激活可能是多种上游凋亡信号传导必经的共同通路.     

DC-exosomes联合顺铂对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响

目的观察利用人树突细胞(DC)制备的治疗性疫苗DC-exosomes联合顺铂对人脑胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响。方法将传代的U251细胞随机分为四组,A组加常规培养液,B、C、D组分别加DC-exosomes激活的淋巴细胞(2×106/mL)0.5 mL、顺铂(1 mg/mL)0.01 mL、DC-exosomes激活淋巴细胞(2×106/mL)0.5 mL+顺铂(1 mg/mL)0.01 mL培养2 d;用MTT法检测U251细胞光密度值(OD值)观察细胞增殖情况,用流式细胞仪检测U251细胞凋亡率。结果加入MTT培养12、24、36、48、60 h,A组细胞OD值分别为1.38±0.01、1.36±0.02、1.34±0.03、1.32±0.05、1.30±0.03,B组分别为1.30±0.02、1.10±0.03、0.90±0.04、0.75±0.03、0.62±0.03,C组分别为1.00±0.04、0.80±0.02、0.55±0.04、0.30±0.03、0.15±0.04,D组分别为0.75±0.04、0.50±0.04、0.38±0.02、0.21±0.02、0.05±0.03;B、C、D组与A组比较,P均<0.05;D组与B、C组比较,P均<0.05。培养24 h时,A、B、C、D组细胞凋亡率分别为0.5%±0.3%、18.6%±1.7%、36.9%±4.3%、57.5%±2.1%。B、C、D组与A组比较,P均<0.05;D组与B、C组比较,P均<0.05。结论 DC-exosomes疫苗联合顺铂可抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,并诱导其凋亡。     

紫杉醇联合顺铂加三维适形放疗同步治疗中晚期食管癌疗效观察

目的探讨紫杉醇联合顺铂加三维适形放疗(3DCRT)同步治疗中晚期食管癌的疗效及毒副反应。方法将45例初治无远处转移的中晚期食管癌患者随机分组,22例列入3DCRT+化疗(放化疗组),23例列入3DCRT组(单纯放疗组)。两组放疗均全程应用3DCRT,2 Gy/次,1次/d,5次/w,食管癌原发病灶总剂量60～70 Gy。放化疗组放疗第1天开始给予紫杉醇联合顺铂化疗,每3周为一个化疗周期,共化疗2～3个周期。结果放化疗组近期有效率(CR+PR)为90.9%,单纯放疗组为65.2%,两组差异有统计学意义(P0.05)。1、2、3年生存率放化疗组分别为63.6%、50%、36.4%,单纯放疗组为47.8%、36.4%、8.6%,两组差异有统计学意义(P0.05)。放化疗组毒副反应大于单纯放疗组,但患者均能耐受。结论紫杉醇联合顺铂加三维适形放疗同步治疗中晚期食管癌的近期疗效确切,且可以提高远期生存率,但毒副反应增加(患者均可以耐受)。