海口市白纹伊蚊对菊酯类杀虫剂的抗药性及击倒抗性基因突变分析

目的 了解海口市白纹伊蚊对溴氰菊酯和氯菊酯的抗药性,并检测其击倒抗性(kdr)基因突变型,阐明抗性表型与kdr基因突变的关系。 方法 在海口新埠岛、龙塘镇、石山镇、白沙门和花卉市场采集白纹伊蚊幼虫,应用浸渍法测定其对溴氰菊酯和氯菊酯杀虫剂的敏感性,以抗性倍数确定抗性级别。对应生物测定的样品扩增和分析白纹伊蚊的kdr基因部分片段,采用χ²检验比较抗性表型与kdr突变基因型的差异性。 结果 海口白纹伊蚊花卉市场和白沙门群体对溴氰菊酯和氯菊酯均产生抗性,花卉市场群体对溴氰菊酯的抗性倍数高达436.36,为高度抗性。龙塘镇和石山镇群体对氯菊酯均为敏感,对溴氰菊酯的抗性为低度(9.09)或中度(18.18)。新埠岛群体对溴氰菊酯和氯菊酯均为敏感。在对应检测的317只白纹伊蚊的kdr基因中,发现1 534位点存在点突变,检测到2种突变等位基因(TGC/C、TCC/S)。5种基因型和频率分别为野生型TTC/TTC(62.15%)、野生/突变型杂合子TTC/TGC(0.63%)和TTC/TCC(16.09%)、突变型纯合子TCC/TCC(20.82%)以及突变型杂合子TGC/TCC(0.32%)。χ²检验结果显示,接触菊酯类杀虫剂后敏感表型与抗性表型个体中,kdr基因型间的差异有统计学意义(P <0.05),在抗性表型群体中的kdr突变型基因型的频率(42.94%)大于敏感表型个体(31.97%)。 结论 海口市白纹伊蚊多个群体对溴氰菊酯和氯菊酯同时存在抗性,抗性表型与kdr突变基因型密切相关。本研究首次记录了kdr新的等位基因TCC/S。     

电压门控钠离子通道基因I1532T突变与白纹伊蚊对菊酯类杀虫剂敏感性的相关性

目的 探讨I1532T突变与白纹伊蚊对氯菊酯和溴氰菊酯杀虫剂抗药性的相关性。方法 利用实验室饲养的白纹伊蚊长宁株作为试虫,分别对幼虫和成虫阶段,以幼虫浸渍法和成虫接触筒法对溴氰菊酯和氯菊酯的敏感性进行生物测定。收集生物测定死亡和存活的个体单只抽提基因组DNA,PCR扩增电压门控钠离子通道（voltage-gated sodium channel, VGSC）基因部分片段,测序并检测击倒抗性（knockdown resistance, kdr）突变情况,χ²检验I1532T与2种菊酯类杀虫剂抗药性的相关性。结果 幼虫浸渍法的结果显示,白纹伊蚊长宁株对氯菊酯和溴氰菊酯的LC₅₀分别是敏感品系的2.23倍和3.31倍,提示对2种杀虫剂均为敏感。成蚊接触筒测定的结果显示,接触氯菊酯和溴氰菊酯后成蚊的死亡率分别为74.69%和78.79%,提示白纹伊蚊长宁株对氯菊酯和溴氰菊酯均已产生抗性。本研究共测定了401只白纹伊蚊长宁株的VGSC基因部分片段,1532位点为突变基因型（突变纯合子ACC/ACC和野生突变杂合子ATC/ACC）的占59.10%,其余为野生型ATC/ATC,占40.90%;1534位点为突变基因型（突变纯合子TCC/TCC和野生突变杂合子TTC/TCC）的占4.49%,其余为野生型TTC/TTC,占95.51%。结果显示,白纹伊蚊幼虫氯菊酯或溴氰菊酯抗药性表型与敏感表型之间的I1532T突变频率差异均无统计学意义（P>0.05）;成虫的氯菊酯抗药性表型与敏感表型之间的I1532T等位基因型频率差异（P=0.019）和基因型频率差异（P=0.044）有统计学意义,而溴氰菊酯抗药性表型与敏感表型的I1532T等位基因型和基因型频率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 VGSC基因I1532T突变使白纹伊蚊成虫对氯菊酯敏感性下降,但与溴氰菊酯敏感性无相关性。     

2021年重庆市白纹伊蚊抗药性及解毒酶活性调查

目的 了解重庆市城区白纹伊蚊对常见杀虫剂的抗药性水平及白纹伊蚊解毒酶活性水平,为当地蚊虫防制提供参考。方法 分别在重庆市8个行政区采集白纹伊蚊,用幼虫浸渍法测定白纹伊蚊幼虫对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、双硫磷和残杀威5种杀虫剂的抗性水平,计算抗性倍数（RR）。用酶活性检测试剂盒测定各行政区白纹伊蚊解毒酶细胞色素P450(CYP450)、谷胱甘肽S-转移酶（GST）、羧酸酯酶（CarE）活性水平。结果 重庆市8个行政区白纹伊蚊对溴氰菊酯的RR为21.00～64.50,其中南岸区呈高抗水平,其余行政区均呈中抗水平;对高效氯氰菊酯的RR为8.00～17.25,其中沙坪坝区、北碚区、九龙坡区呈低抗水平,其余行政区均呈中抗水平;对氯菊酯的RR为7.83～30.83,其中沙坪坝区、北碚区、江北区呈低抗水平,其余行政区呈中抗水平;对双硫磷的RR为1.20～5.00,其中大渡口区呈低抗水平,其余行政区呈敏感水平;对残杀威的RR为1.58～2.26,均呈敏感水平。大部分行政区白纹伊蚊CYP450、GST、CarE活性高于敏感品系。结论 重庆市城区白纹伊蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和氯菊酯均产生一定程度...     

福建省福州市和莆田市2020年白纹伊蚊击倒抗性基因突变分析

目的 了解福州市和莆田市登革热伊蚊监测点白纹伊蚊击倒抗性基因的突变情况。方法 2020年5—6月在福州市（晋安区、永泰县）和莆田市（涵江区、仙游县）采集白纹伊蚊幼虫,饲养繁殖,使用成蚊接触筒法实验结束的F₁代单只雌蚊样本,提取DNA,PCR扩增电压门控钠离子通道（VGSC）基因部分片段,测序分析击倒抗性（knockdown resistance, kdr）基因突变情况。结果 福州市和莆田市共检测491只白纹伊蚊,其中VGSC基因第Ⅱ结构域及第Ⅲ结构域的I1532位点未发现突变位点,第Ⅲ结构域的F1534位点存在突变。F1534位点有4种等位基因,即野生型TTC/F（252,25.66%）、突变型TCC/S（722,73.52%）、TGC/C（3,0.31%）和CTC/L（5,0.51%）;7种基因型,分别为野生型纯合子F/F（39,7.94%）,野生/突变型杂合子F/C（1,0.20%）、F/S（172,35.03%）和F/L（1,0.20%）,突变型杂合子S/C（2,0.41%）和S/L（4,0.81%）,突变型纯合子S/S（272,55.40%）。F1534位点突变等位基因TCC/S在4个种群中均有发现,且莆田市涵江区和仙游县的频率高于福州市晋安区和永泰县的频率。晋安区和永泰县F1534位点存在5种基因型,涵江区和仙游县则只有3种。野生/突变型杂合子F/S和突变型纯合子S/S在4个种群中均存在,野生型纯合子F/F只在涵江区中没有发现。晋安区和永泰县基因型以F/S为主,涵江区和仙游县以S/S为主。结论 福州市和莆田市kdr基因突变频率高,以F1534S突变类型为主。提示应密切关注当地蚊虫抗性水平,减少拟除虫菊酯类杀虫剂的使用,科学合理地使用杀虫剂。     

北京市3个公园白纹伊蚊种群Rdl抗性基因突变分析

目的 对北京市3个大型森林公园白纹伊蚊（Aedes albopictus）野外种群的Rdl基因抗性突变进行检测,评估其对γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）受体类杀虫剂的抗性风险。方法 利用序列比对分析获得白纹伊蚊编码GABA受体的Rdl基因序列,通过PCR扩增Rdl基因片段并进行测序,分析与抗性有关位点（第A296和V327位点）的突变情况。结果 白纹伊蚊Rdl基因由10个外显子（Exon）和9个内含子（Intron）组成,编码区（CDS）全长1 608 bp,编码535个氨基酸;白纹伊蚊Rdl基因编码氨基酸序列与埃及伊蚊（Aedes aegypti）和淡色库蚊（Culex pipiens pallens）相应序列的相似性分别为99.63%,与黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）相似性为91.55%;在3个公园采集野外白纹伊蚊种群中（90只标本）均未检测到上述Rdl靶标抗性突变,均为敏感型（GCA和GTA）。结论 北京市3个大型的城市森林公园环境中白纹伊蚊种群对环戊二烯类有机氯杀虫剂和苯基吡唑类杀虫剂氟虫腈的靶标（即GABA受体）Rdl基因与其他昆虫表现出不同程度的同源性和高度保守的基因结构特征,3个受试白纹伊蚊野外种群未检测到Rdl基因抗性相关突变,提示以靶标敏感为导向反向研发杀虫剂。     

广东省登革热媒介白纹伊蚊成蚊抗药性水平的调查及防控

目的了解广东省登革热传播媒介白纹伊蚊成蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为科学使用杀虫剂、快速控制登革热蚊媒密度提供依据。方法 2016-2019年,选择广东省21个地级市各城区登革热疫点采集白纹伊幼虫,带回实验室饲养;采用国标《蚊虫抗药性检测方法生物测定法》(GB/T 26347-2010)中的诊断剂量法之接触通法进行检测。结果广东省21个地级市的白纹伊蚊成蚊接触3%氯菊酯、0.4%高效氯氰菊酯、0.1%溴氰菊酯、0.5%高效氯氟氰菊酯、0.2%杀螟硫磷、0.44%马拉硫磷的药膜1 h后,其24 h死亡率分别为52.2%～92.2%、24.4%～88.0%、34.7%～97.3%、64.4%～100.0%、88.1%～100.0%、84.4%～100.0%;对0.4%高效氯氰菊酯、0.1%溴氰菊酯属抗性群体的超过80%,未发现敏感种群;对3%氯菊酯大都属可疑抗性种群;对0.5%高效氯氟氰菊酯属敏感和抗性的分别为14.3%和23.8%;对0.2%杀螟硫磷、0.44%马拉硫磷属敏感种群和可疑种群分别为约60%和30%。结论广东省各地级市白纹伊蚊成蚊对菊酯类杀剂大多呈现抗性和可疑抗性,对有机磷杀虫剂多为敏感或接近敏感。白纹伊蚊的防制应坚持综合防制的原则,科学合理使用杀虫剂。     

菊酯类杀虫剂对海口市白纹伊蚊的效果测定

目的了解常用菊酯类杀虫剂商品对海口市白纹伊蚊群体的杀虫效果。方法采集海口市白沙门公园等地的白纹伊蚊幼虫,带回实验室饲养至成蚊作为试虫,应用玻璃药膜法检测15种常见市售杀虫剂对其的杀虫效果,并应用接触筒法检测其对0.1%溴氰菊酯的敏感性。结果氯氰菊酯等11种杀虫剂对海口市白沙门公园的白纹伊蚊群体杀虫效果显著,混配的杀虫剂30 min击倒率和24 h死亡率均为100%;效果不显著的有4种,有效成分分别是高效氯氟氰菊酯、顺式氯氰菊酯和溴氰菊酯,效果最差的是溴氰菊酯(击倒率为17%,死亡率为34%)。溴氰菊酯对海口其他地区的白纹伊蚊群体,除干家村外,击倒率和死亡率至少有1项未达到标准,效果不显著。接触筒法测定在3个时间点采集的白沙门公园白纹伊蚊群体对0.1%溴氰菊酯的敏感性,结果显示受试蚊虫均已产生抗性。结论海口市多个地区的白纹伊蚊群体对溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和顺式氯氰菊酯类杀虫剂商品的效果不明显,对氯氰菊酯等11种杀虫剂商品效果显著。在未来的蚊虫控制中,应加强对杀虫剂的抗药性监测,合理使用杀虫剂。     

成都市蚊虫对常用杀虫剂抗性的调查研究

目的 调查我市致倦库蚊和白纹伊纹对常用杀虫剂的抗性。方法 浸渍法。结果致库蚊对倍硫磷基本未表现出抗性(RR=1.21),对敌敌畏(RR=4.52)、溴氰菊酯(RR=6.32)、氯菊酯(RR=7.67)、右旋丙烯菊酯(21.49)均已产生不同程度抗性。现场白纹伊蚊对敌敌畏和氯菊酯的LC_(50)分别为0.03600Gmg/L和0.029293mg/L。结论 注重环境防治,密切监测蚊虫抗性发展。     

海南省白纹伊蚊、埃及伊蚊对菊酯类杀虫剂的敏感性测定

目的了解海南省白纹伊蚊与埃及伊蚊对菊酯类杀虫剂的敏感性，为使用杀虫剂防制登革热媒介提供依据。方法采用幼虫浸渍法，测试其半数致死浓度（LC50）和抗性系数。结果白纹伊蚊对溴氰菊酯和三氟氯氰菊酯的LC50分别为0．0036ppm和0．0069ppm，抗性系数分别为4．5和3．29；埃及伊蚊对两杀虫剂的LC50分别为0．0006ppm和0．001ppm，抗性系数均为2．00。结论海南省白纹伊蚊对此二种杀虫荆有低抗性，而埃及伊蚊则敏感性下降。     

PRKAG2基因G100S新突变对小鼠心肌细胞单磷酸腺苷活化蛋白激酶活性的影响

目的 探讨位于非胱硫醚β-合成酶（cystathionine β-synthase,CBS）区域的PRKAG2基因G100S突变对小鼠心肌细胞单磷酸腺苷活化蛋白激酶（AMPK）活性的影响。方法 建立人源PRKAG2（G100S）转基因小鼠模型,分别随机选取N4代4周龄、12周龄的转基因小鼠和同窝野生型小鼠各6只,用磷酸化检测试剂盒检测小鼠心肌细胞中AMPK活性,比较转基因小鼠与同窝野生型小鼠AMPK活性的差异,并观察随着周龄的增长转基因小鼠AMPK活性的变化。结果 4周龄和12周龄的转基因小鼠心肌细胞中AMPK活性均低于同窝野生型小鼠（0.042±0.013 vs 0.063±0.013,0.032±0.008 vs 0.062±0.018）,差异均有统计学意义（P=0.019,P=0.004）。12周龄和4周龄的转基因小鼠心肌细胞中AMPK活性差异无统计学意义（P=0.135）。结论 PRKAG2基因G100S突变可导致转基因小鼠心肌细胞AMPK活性下降,而且AMPK活性并不随着转基因小鼠周龄的增长而变化。     

淡色库蚊溴氰菊酯抗性治理的初步研究

目的:为了延缓和克服抗性的发生和发展,更好地选用卫生杀虫剂,控制卫生害虫,测定抗溴氰菊酯淡色库蚊对常用杀虫剂混用的敏感性。方法:采用幼虫浸液法,以Finney机率分析软件计算LC_(50)结果:对溴氰菊酯+辛硫磷,溴氰菊酯+DDT,溴氰菊酯+PB+二氧威,二氯+马拉硫磷,二氯+巴沙+胺菊酯,二氯+PB+DDT,氯氰+丙体六六六,氯氰+残杀威,氯氰+PB+敌百虫,苄呋菊酯+辛硫磷+DDVP,苄呋菊酯+残杀威和苄呋菊酯+PB+丙体六六六的抗性系数分别为4.1125,6.3457,3.7274,11.2170,9.9935,16.1454,9.2030,7.7504,4.4743,3.9096,4.8611,6.5618。结论:当淡色库蚊对溴氰菊酯产生抗性后,拟除虫菊酯与有机磷或氨基甲酸酯类进行混用能取得较好的防治效果。     

重庆市沙坪坝区2020年登革热媒介白纹伊蚊密度及抗药性监测

目的 了解重庆市沙坪坝区登革热媒介白纹伊蚊密度季节消长及对常用卫生杀虫剂的抗药性水平,为合理使用卫生杀虫剂、科学防控登革热提供依据.方法 2020年4-12月在沙坪坝区城镇居民区、农村居民区、公园和旧轮胎堆放地等4类生境中采用双层叠帐法监测白纹伊蚊成蚊密度;6-7月在沙坪坝区渝碚路街道、天星桥街道、覃家岗街道、山洞街道...     

广州市白云区2017年白纹伊蚊幼虫对常用杀虫剂的抗药性调查

目的 初步了解广州市白云区不同片区白纹伊蚊幼虫对常用卫生杀虫剂的抗药性现状,分析成因,提出治理对策。方法 在广州市白云区各街镇采集白纹伊蚊幼虫,在实验室繁殖1代后,采用幼虫浸渍法进行测定。结果 本区白纹伊蚊对5种常用杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,LC₅₀介于0.007~3.789 mg /L,抗性倍数介于2.66~18.12倍。其中高效氯氰菊酯抗性最高,除东片区为低抗外,其它均为中抗;其次为双硫磷,除西、北片区为低抗外,其它均为中抗;抗性最弱的是残杀威,除南片区为低抗外,其它均为敏感;氯菊酯除西片区为中抗外,其它均为低抗;溴氰菊酯除北片区为中抗外,其它均为低抗。LC₅₀分别为介于0.039~0.098,0.007~0.014,2.372~3.789,0.110~0.358,0.016~0.030 mg /L;抗性倍数分别为介于7.21~18.12,7.08~14.17,2.66~4.26,3.38~11.01,6.37~11.95。结论 白纹伊蚊抗性产生的根本原因在于各镇街消杀站及PCO公司的不规范用药,为延缓抗性产生,政府部门需做好药物配比、施药步速、消杀频次等方面的质量把控。     

云南致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)对七种杀虫剂的抗性调查研究

1992～1994年对云南省十一个县的致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)对7种杀虫剂(DDT、马拉硫磷Malathion、杀螟硫磷Fenitcothion、敌敌畏DDVP、敌百虫Dipterex、二氯苯酸酯Permethrin和溴氰菊酯Deltamthrin)的抗性情况进行了调查。结果抗性发生率为78.95％(45/57)、对DDT、Dipterex除个别地区外、全部产生了高度抗性。本结果显示溴氰菊酯最为敏感。本文最后对部分地区抗性出现的原因进行了分析讨论。     

86株痤疮丙酸杆菌的耐药性及生物膜成膜能力分析

目的 研究临床分离痤疮丙酸杆菌的耐药性及其生物膜成膜能力。方法 选取2020年12月—2022年1月长沙市第四医院皮肤科门诊诊治的114例痤疮患者为研究对象。分离出痤疮丙酸杆菌，通过琼脂稀释法检测其对常用抗生素的耐药性；采用结晶紫染色法检测其生物膜形成能力；通过激光共聚焦显微镜观察生物膜结构；选取8株生物膜成膜能力较强的菌株Pa01、Pa02、Pa03、Pa04、Pa05、Pa06、Pa07和Pa08检测体外抗生素的敏感性，随机选取成膜能力阴性菌株（浮游菌）Pa12和成膜能力阳性菌株Pa03进行大鼠实验，复制痤疮丙酸杆菌菌株感染模型。将感染模型大鼠随机分为2组，每组6只，分别皮下注射30 mg/kg的米诺环素（米诺环素组）或1%DMSO（溶媒组），感染后第5天处死大鼠，测量脓肿的面积，并分离脓肿组织进行均浆计数和HE染色。结果本研究共分离出86株痤疮丙酸杆菌，分离率为75.4%。痤疮丙酸杆菌对甲硝唑和夫西地酸的耐药性最高，分别为93.0%和90.7%；对大环内酯类抗生素的耐药率为75.6%～88.4%。对米诺环素和多西环素的敏感性最高，耐药率仅分别为7.0%和8.1%。86株临床分离痤...     

Evidence of increasing L1014F kdr mutation frequency in Anopheles gambiae s.l. pyrethroid resistant following a nationwide distribution of LLINs by the Beninese National Malaria Control Programme

Objective

To determine the susceptibility status to pyrethroid in Anopheles gambiae s.l. (An. gambiae), the distribution of kdr “Leu-Phe” mutation in malaria vectors in Benin and to compare the current frequency of kdr “Leu-Phe” mutation to the previous frequency after long-lasting insecticide treated nets implementation.

Methods

Larvae and pupae of An. gambiae s.l. mosquitoes were collected from the breeding sites in Littoral, Zou, Borgou and Alibori provinces. CDC susceptibility tests were conducted on unfed females mosquitoes aged 2-5 d old. An. gambiae mosquitoes were identified to species using PCR techniques. Molecular assays were also carried out to identify kdr mutations in individual mosquitoes.

Results

The results showed that An. gambiae Malanville and Suru-lere populations were resistant to deltamethrin. Regarding An. gambiae Parakou and Bohicon populations, they were resistant to permethrin. PCR revealed 100% of mosquitoes tested were An. gambiae s.s. The L1014F kdr mutation was found in An. gambiae s.s. Malanville and Parakou at various allelic frequencies. The increase of kdr allelic frequency was positively correlated with CDC bioassays data.

Conclusions

: Pyrethroid resistance is widespread in malaria vector in Benin and kdr mutation is the main resistance mechanism involved. More attention may be paid for the future success of malaria control programmes based on LLINs with pyrethroids in the country.     

The state of insulin resistance in patients with nonalcoholic fatty liver and the intervention with Gankangyin

Objective: To explore the correlation of nonalcoholic fatty liver (NAFL) with insulin resistance and the intervention of it by Gankangyin(GKY).Methods: Ninety-six patients with NAFL were randomly assigned into the treated group and the control group. They were treated with GKY and Silymarin for 3 months respectively. Oral glucose tolerance test (OGTT) and insulin release test (IRT) were conducted and insulin sensitivity indexes were determined before and after treatment. And 32 healthy nonalcoholic persons were enrolled and used as the healthy control group.Results: Before treatment, the levels of blood glucose and insulin at different time points in OGTT test, and the insulin resistance index (IRI) were significantly higher (P<0.05 orP<0.01) while insulin sensitivity index (ISI) and insulin active index (IAI) were lower (P<0.05 orP<0.01) in the NAFL patients than those in the healthy persons. After treatment, the above-mentioned raised criteria were significantly lowered (P<0.05,P<0.01) and the lowered criteria were significantly increased (P<0.01) in the treated group, while in the control group all the criteria were insignificantly changed (P>0. 05).Conclusion: Evident insulin resistance exists in NAFL patients. GKY could’increase the insulin sensitivity, thus improving the state of insulin resistance in NAFL patients.     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分布与耐药性分析

目的 了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）的分布特点及其耐药性,为指导临床合理使用抗菌药物提供依据。方法 收集2014年1月至2017年12月临床分离的CRKP菌株,采用自动化仪器法和纸片扩散法（K-B法）对上述菌株进行药物敏感性试验,药物敏感性结果严格按照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）和美国食品药品管理局（FDA）标准判定。采用WHONET软件和SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。结果 共收集临床分离CRKP菌株403株,主要标本来源为痰/支气管肺泡灌洗液（169株,占41.9%）。CRKP首次分离标本来源不同,后续CRKP血流感染的发生率也不同,差异有统计学意义（P<0.05）。CRKP来源科室位列前3位的分别为烧伤重症监护病房（30.0%,121/403）、消化科（8.4%,34/403）和急诊重症监护病房（7.2%,29/403）。药物敏感性试验结果显示CRKP除对替加环素和磷霉素耐药率较低外,对其余抗生素的耐药率均>60.0%。结论 CRKP对多数常用抗生素呈现高度耐药。应加强对CRKP的耐药性监测,尤其是烧伤重症监护病房等重点科室,并采取有效措施预防和控制CRKP的传播。