穿膜肽修饰胸腺五肽类似物的合成和生物活性研究

采用Fmoc固相合成法,利用穿膜肽Tat对胸腺五肽(TP-5)进行修饰,合成了新的胸腺五肽类似物,总收率为32.2%.通过RP-HPLC和质谱对该化合物进行了鉴定,采用E-玫瑰花结实验进行生物活性分析,结果表明:经穿膜肽修饰的类似物在其摩尔浓度稀释20倍后仍然比标准品TP-5具有更强的生物活性.     

基于小热休克蛋白-细胞穿膜肽蛋白纳米粒的siRNA递送系统

利用大肠杆菌表达系统原核表达并纯化小热休克蛋白-细胞穿膜肽融合蛋白(Hsp-Tat);用动态光散射和透射电镜成像分析Hsp-Tat纳米粒的粒径和形貌;用噻唑蓝(MTT)法和活/死细胞染色法研究蛋白纳米粒的细胞相容性;用凝胶阻滞实验检测纳米粒的小干扰RNA(siRNA)复合特性;用激光共聚焦荧光显微镜成像研究蛋白纳米粒的...     

正反向Penetratin转导肽细胞穿膜效率的初步比较

目的:实验致力于研究正反向细胞穿膜肽Penetratin携带工具的穿膜效率,为进一步解决大分子药物的临床应用奠定基础。方法:通过质粒构建重组成融合质粒载体pET-28a-EGFP,pET-28a-Penetratin(+)-EGFP和pET-28a-Penetratin(-)-EGFP,分别在BL21(DE3)中进行表达、经过His标签蛋白纯化柱纯化,得到比较纯的融合蛋白,然后用这些蛋白与HeLa细胞共同孵育,进行蛋白质的穿细胞功能检测。结果:His-Penetratin(+)-EGFP和His-Penetratin(-)-EGFP穿细胞膜能力类似,而His-EGFP不具有细胞穿膜功能。结论:经过研究验证正向和反向序列Penetratin穿膜能力类似,并且两种融合蛋白穿膜机制与膜受体无关,属于被动运输的一种,两种融合蛋白对细胞无创伤作用,为开发新药成功建立了技术平台。     

东莨菪碱PVC膜离子选择性电极的研究

用氢溴酸东莨菪碱－ 四苯硼离子缔合物为电活性物质,以邻苯二甲酸二丁酯为增塑剂,研制成 Ｐ Ｖ Ｃ为基质膜的东莨菪碱离子选择性电极。东莨菪碱浓度在１０×１０－ ４ｍ ｏｌ／ Ｌ～１０×１０－ ２ｍ ｏｌ／ Ｌ时,电极电位服从能斯特方程式, 响应斜率为５９０７ ｍ Ｖ／△ｐｃ, 检测下限为７９４×１０－ ５ ｍ ｏｌ／ Ｌ, 对东莨菪碱的回收率为９７９％ ～１０９２％ , 变异系数为０４５％ 。本文考察了电极的各种性能, 测定了２０种常见离子选择性系数。方法用于实际样品中东莨菪碱的测定, 与药典标准方法比较, 相对误差２８２％ , 结果满意     

具有GPx和SOD双酶活性含硒76肽的制备及其穿膜效应

根据模块酶原理设计一种嵌有穿膜结构域序列并具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)双酶活性的含硒76肽(Se-CuZn-76P),利用半胱氨酸缺陷表达法在单一蛋白生产(SPP)系统表达该肽,并鉴定其穿膜效应.实验结果表明:该方法可成功表达纯度较高的Se-CuZn-76P,并且每毫克蛋白表现出109μmol/min的GPx活力和1 218μmol/min的SOD活力;在Se-CuZn-76P存在的环境中培养肝L02细胞一段时间后,细胞内的GPx和SOD活力分别升高1.65和4.12倍,且Se-CuZn-76P可顺利进入L02细胞.     

铝酸根离子选择性膜电极的研究

分别以两种季铵盐为活性物质 ,以聚乙烯醇 (PVA)和壳聚糖 (CS)的共混物为支撑体制成了铝酸根离子选择性膜电极。测定了不同浓度的铝酸钠溶液 ( 0 1mol/LNaOH)的膜电位及响应时间。实验结果表明 :这两种活性物质对铝酸根离子的响应不太理想 ,而且纯PVA -CS膜与加了活性物质的PVA -CS膜对铝酸根离子的响应非常接近。这说明以PVA -CS膜为膜支撑体不理想 ,还需要另外寻找惰性膜支撑体和合适的活性物质 ,以使制成的膜电极有应用价值     

牛泡沫病毒跨膜蛋白的穿膜区具有细胞毒性作用

泡沫病毒(FV)具有广泛的宿主范围,可以感染从人到鱼几乎所有脊椎动物细胞,可见其包膜蛋白具有极强的膜融合能力.分析牛泡沫病毒(BFV)的跨膜蛋白(TM),在其C端存在一个穿膜螺旋区,其中含有连续的疏水氨基酸.本文以BFV3026原病毒DNA为模板,利用PCR分段扩增TM编码区,克隆原核表达载体pET32a( ),序列分析证实后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,仅有穿膜区完全缺失的TM3获得表达,其余含有完整或部分穿膜区的TM1及TM2均未表达.表达菌生长状态测定显示:TM穿膜区C端疏水氨基酸串联区对细胞具有强烈致死效应.同时利用金属螯合层析对所表达TM3蛋白进行初步纯化,Westernblot证实其有良好的抗原性.     

细胞穿透肽增强抗肿瘤效果的研究进展

细胞穿透肽(CPPs)是一种能够穿透细胞膜的多肽,可携带多种物质进入细胞内,并产生生理活性.现有一些抗肿瘤药物由于其本身的水溶性差、活性低、毒性大和易产生耐药性等缺陷,影响了肿瘤治疗效果.综述了近几年来细胞穿透肽增强抗肿瘤效果的研究进展,为更好地寻求治疗肿瘤药物的给药途径提供新思路.     

镧离子跨入红细胞膜的研究

本文采用fura-2荧光指示剂技术研究了在不同条件下镧离子跨红细胞膜的行为,结果发现：在正常条件下无论钙或镧离子都不能跨膜进入红细胞;红细胞ATP耗竭后出现明显的Ca^2 内流现象,而镧离子仍不能观察到跨膜现象,由此可见,稀土镧离子在过膜上与钙子表现出很大的差异性,不能利用钙通道进入细胞内。     

一种跨膜受体偶联离子通道调控网络模型研究

以一种受体偶联钙离子通道为例,讨论了普遍存在的细胞信号跨膜传递中的离子通道启闭的控制功能,对Ｂｒａｙ和Ｌａｙ的跨膜信号传递模型进行了改进．给出了一种跨膜受体偶联离子通道调控的网络模型．运用单细胞显微荧光测量［Ｃａ２＋］ｉ技术,测量了单个ＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞内游离钙离子浓度的变化,说明了此模型能够较好地完成离子通道的控制功能,并给出了关于此模型的一些讨论．     

10例肿瘤导致ABO血型系统抗原减弱病例分析

探讨肿瘤因素导致 ABO 血型系统抗原减弱所引起的定型困难,解放军总医院2002年以来.在血型鉴定时发现10例肿瘤患者血标本,正向定型出现弱凝集或不凝集;反向定型正常,正反定型不一致.其自身对照为阴性,且排除假凝集所致.通过吸收放散、唾液型物质中和试验、H 抗原强度等实验检测弱抗原,并对患者进行随访,在患者病情缓解后重新进行血型鉴定.结果表明10例受检者红细胞上确有弱抗原存在,其中3例血清学实验呈现较明显亚型特征,但肿瘤经过治疗缓解后,亚型特征逐渐减弱甚至消失,定型恢复正常.说明某些肿瘤可以导致 ABO 血型系统抗原减弱,出现正反定型不一致,血清学呈现亚型特征,应综合病情、输血史、家系调查及特殊血清学检查来确定血型,并与亚型相鉴别.     

绿豆根瘤菌形态研究

本文对12个品种绿豆根瘤进行采集、培养，并通过染色对根瘤情况及根瘤菌形态学进行研究，结果表明：①12个品种中V3476、博绿2号外形为卵圆形，其余均为椭圆形；②根瘤着生部位除绿洲1号、95515只着生在侧根外其余品种的主根、侧根均着生根瘤；③不同品种的绿豆根瘤在同一生长时期的根瘤在大小和结瘤率上明显不同，根瘤生长最大的品种是长荚绿豆，根瘤直径为2．76～6．84mm，根瘤最小的为维绿1号，直径为1．2～3．32mm，结瘤率最高的为河北明绿、长莫绿豆、中绿1号、秦豆6、达90％，维绿1号结瘤率最低，仅为20％；④在甘露醇-酵母汁培养基上生长的孤立菌落只有长荚绿豆、秦豆6的菌落形态型为R，其余均为S；⑤培养72小时，菌落大小各有相同，生长最快的为长荚绿豆，直径达9．1mm，生长最慢的为南绿1号，直径为6．6mm；⑥绿豆根瘤菌为短杆状、长椭圆形．     

一种遗传算法的细胞跨膜信号传递调控模型

分析了跨膜信号传导稳态模型以及电生理实验数据的局限性，针对生理情况下随机刺激和响应的特点，采用遗传算法优化模型动力学参数．结果与大量实验数据能较好地符合     

不确定交货条件下的供应链协调研究

研究了不确定条件下的供应链协调机制。在此供应链模型中,生产商以成本最小为目标确定最佳的定货量和惩罚成本,供应商以使其利润最大化的额外生产能力作为响应策略。采用了结合蒙特卡洛模拟的遗传算法进行了仿真计算,结果表明这种供应链协调机制的有效性。     

快递行业配送网点布局规划研究

在分析快递行业配送网点的布局规划问题的基础上,首先根据最大覆盖模型的思想建立了配送网点布局的覆盖模型,模型以所覆盖的需求最大为目标函数。然后,根据所建立的模型设计了分支定解法进行求解。最后,给出了一个简单的算例来验证了模型和算法的有效性,并进行了简单的总结。     

Fura-2荧光指示剂法研究稀土离子跨红细胞膜的作用

文章采用Fura-2荧光指示剂法研究了稀土离子跨红细胞膜的作用，结果发现，即使在很低的浓度下也能检测到稀土离子的跨膜现象，说明该方法在研究稀土离子对完整红细胞的生物效应时是非常有效的．     

蛙皮抗菌肽在低温肉制品中防腐作用研究

对蛙皮抗菌肽在低温火腿肠制品中的防腐作用进行研究,并比较了抗菌肽、山梨酸钾、乳酸链球菌素以及相关复合防腐剂的防腐效果.研究结果表明:抗菌肽添加量与低温火腿肠制品保质期呈正相关;抗菌肽对低温肉制品具有明显的抗菌活性,其抗菌活性低于山梨酸钾.     

自组装巯基环肽单层膜修饰金电极电化学行为的研究

应用循环伏安及交流阻抗技术研究了巯基环肽自组装单层膜修饰金电极的电化学行为，证明了巯基环肽分子能够在金表面形成一定覆盖度的吸附层，同时考察了金/巯基环肽自组装单层膜电极在不同pH值的KCl溶液中的电化学行为。为深入研究巯基环肽的膜结构及性质打下了必要的基础。