CD4+T辅助细胞在乙型肝炎病毒感染中的作用

对乙型肝炎病毒抗原所引起的宿主细胞免疫应答,一般认为是乙型病毒性肝炎肝细胞损伤的决定因素,其免疫病理变化主要由T细胞调节,近十年的研究证明,作为T细胞亚群之一的CD4+T辅助细胞(Th)在许多方面有着重要的作用.     

CD+4 CD+25调节性T细胞抑制持续性丙型肝炎病毒感染患者CD+4T细胞反应

目的探讨CD+4 CD+25调节性T细胞(CD+4 CD+25Treg细胞)在持续性HCV感染患者CD+4 T细胞下调中的意义.方法流式细胞术检测慢性丙型肝炎患者外周血中CD+4 CD+25Treg细胞的数量以及细胞内因子的合成;与正常人或患者CD+4 CD-25 T细胞共同培养,检测其抑制功能;RT-PCR检测Foxp3的mRNA表达.结果 CD+4 CD+25Treg细胞约占慢性丙型肝炎患者外周血中CD+4 T细胞的(13.5±1.8)%,高于正常对照(5.3±0.8)% (P=0.004);主要合成IL-10,高表达Foxp3;CD+4 CD+25Treg细胞显著抑制CD+4 T细胞的增殖,以及合成IFNγ,并且抑制活性较正常人增高(P=0.034),这种作用不依赖IL-10和转化生长因子β.结论持续性HCV感染患者CD+4 CD+25Treg细胞表达增加,抑制活性增强,特异性抑制Th1反应.     

关于CD4+ CD25+调节性T细胞的研究

ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + 细胞同时具有无能性和抑制性 ,是一类存在于动物和人类体内的调节性Ｔ细胞。近来研究证实生后第 3天切除胸腺的小鼠缺乏ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + Ｔ细胞 ,而其他Ｔ细胞则不受影响 ;从胸腺细胞和成熟个体的脾细胞中分离纯化小鼠用抗ＣＤ2 5抗体去除ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + Ｔ细胞后则易患自身免疫病 ;裸鼠过继转移去除ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + Ｔ细胞的ＣＤ4 + Ｔ细胞后所发生自身免疫病 ,且能被过继转移ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + Ｔ细胞所治愈。这些研究证据表明ＣＤ4 + 、ＣＤ2 5 + Ｔ细胞是免疫调节性Ｔ细胞。ＣＤ2 5是白细胞介素 (Ｉ…     

CD4+CD25+调节性T细胞对慢性丙型肝炎患者病毒特异性CD8+T细胞的抑制作用

HCV感染是严重危害人民健康的传染病，易发展成慢性丙型肝炎、肝硬化，且与原发性肝癌密切相关。HCV持续感染的一个重要原因是HCV特异性CD8^＋T细胞数量及功能缺陷，表现在体外增殖能力下降和IFN-γ分泌水平降低。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（T regulatory cells，Treg）主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用，在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在应用价值。已有研究表明，     

慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CD3+ T细胞的研究

目的：研究慢性乙型肝炎患者外周血中可作用于病毒感染靶细胞的特异性CD3^ T细胞比率，方法：筛选HLA－A2患者：将MHC：Ig双体融合蛋白试剂，加入HBV核心蛋白（C），聚合酶蛋白（P）及表面抗原蛋白（S）中HLA－A2限制性合成肽，与患者CD3^ 细胞作用，采用双重荧光抗体染色，用FACS检测各患者的特异性T细胞比率，同时设立各种对照管，结果：23／54例（42．6％）患者为HLA－A2，其中15例经用HBV C，P，S肽染色后，5例患者的特异性CD3^ 阳性细胞比率高于对照管，4例患者有结合S肽的特异性CDs^3 细胞，其中1例同时可结合P肽，1例仅与P肽结合，结论：慢性乙型肝炎患者外周血中与特异性肽结合的CD3^ T细胞比率较少，MHC：Ig双体融合蛋白技术使用方便，但非特异性染色率偏高，本技术可用于随访治疗中的慢性乙型肝炎患者免疫状态的变化。     

慢性HBV感染患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达及其临床意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞与慢性HBV感染后不同临床转归和临床特点的相关性。方法在26例慢性乙型肝炎(CHB)患者、15例无症状HBsAg携带者(ASC)和11例肝炎肝硬化(LC)患者和16例正常对照者,分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平。结果CHB组和ASC组的CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的百分率分别为4.40±2.76%和4.43±2.10%,均高于正常对照组(2.70±0.97%),差异显著(P0.01);CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平与HBVDNA水平无相关性(r=0.018,P0.05);在HBeAg阳性与阴性组患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达也无明显的差异(P0.05)。结论慢性HBV感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平升高,可能与HBV感染的慢性化有关。     

CD4+CD25+T细胞与支气管哮喘

本文就CD4^＋CD25^＋T细胞的调节机制，CD4^＋CD25^＋T细胞与变态反应的关系，以及CD4^＋CD25^＋T细胞在支气管哮喘发病机制中的作用作一综述。     

CD4+CD25+T细胞在系统性红斑狼疮患者外周血的表达研究

调节性T细胞是最近发现的一个独立的CD4~ T细胞亚群,主要功能是抑制其他T细胞的活化,维持自身免疫耐受,其功能异常与许多自身免疫性疾病有密切关系。CD4~ CD25~ T细胞是一种重要的调节性T细胞,并将其视为调节性T细胞     

CD4^＋CD25^＋T细胞在感染慢性化中的作用

早在1983年,liew等从进行性利什曼原虫感染的BA LB/c小鼠中克隆出一种C D4+T细胞,它们能够抑制抗原特异性T细胞的增殖和迟发性超敏反应[1]。当时,这些抑制性T细胞的表型特征还不明确。自Sakaguchi等人于1995年在未免疫小鼠外周循环中发现了C D4+C D25+T细胞后[2],人们对免疫机制有了新的认识。以往认为维持体内免疫耐受的主要机制是中枢免疫器官发生克隆清除,在外周中诱导自身潜能细胞进入免疫无能状态,及部分淋巴细胞对自身抗原的免疫忽视[3]。而近年积累的大量实验证据表明,机体可能更主要地是通过C D4+C D25+T细胞以“主动”的方…     

CD4+ CD25+调节性T细胞在重型乙型肝炎发病中的作用

目的探讨CD4 CD25 调节性T细胞在重型乙型肝炎病人发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪检测30例重型乙型肝炎患者、20例慢性乙型肝炎患者、20例无症状乙肝病毒携带者和10例健康的外周血CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Treg)的水平,并应用荧光定量PCR方法测定上述研究对象血中HBVDNA滴度。结果(1)重型乙型肝炎组外周血CD4 CD25 调节性T细胞的平均百分率为(2.63±0.83)%,较慢性乙型肝炎组的(4.15±1.17)%有显著差异(P<0.05),较无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组则有极其显著差异(P均<0.01);(2)慢性乙型肝炎组外周血CD4 CD25 调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者及健康对照组,有显著的差异(P<0.05);无症状乙型肝炎携带者组外周血调节CD4 CD25 T细胞的百分率为(8.32±2.72)%,与健康对照组(8.10±2.65)%比较无差异;(3)重型乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度为1.2×104拷贝/ml,与慢性乙型肝炎组(2.3×106拷贝/ml)和无症状乙肝病毒携带者(7.8×105拷贝/ml)相比较,有极其显著差异(P均<0.01);慢性乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度与无症状乙肝病毒携带者相比,无差异;(4)无症状乙型肝炎携带者;慢性乙型肝炎和重型乙型肝炎,患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的百分率与HBVDNA滴度呈正相关。结论(1)CD4 CD25 调节性T细胞能抑制T细胞对乙型肝炎病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎病毒诱导的对肝细胞的免疫攻击的发生;(2)不同乙型肝炎病人外周血CD4 CD25 调节性T细胞的百分率与HBVDNA滴度呈正相关,表明CD4 CD25 调节性T细胞数量对体内HBV载量具有较大的影响;(3)CD4 CD25 调节性T细胞在重型乙型肝炎的病情进展及病毒抑制清除等方面起着重要的作用。     

慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞计数变化及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞数量的变化。方法在56例乙型肝炎肝衰竭、49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎和41例乙型肝炎病毒携带者使用流式细胞仪检测外周血CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK(CD3-CD16+CD56+)细胞占淋巴细胞的比率(%)。结果肝衰竭患者CD3+T细胞和CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者显著性降低(P0.05);慢性乙型肝炎患者CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比乙型肝炎病毒携带者显著性升高(P0.05)。结论乙型肝炎肝衰竭患者外周血T细胞和NK细胞数量减少,而HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T细胞数量增多。     

慢性乙型肝炎患者肝组织自然杀伤细胞G2D表达水平的变化及其临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者自然杀伤细胞（NK）G2D表达水平及临床意义。方法 2015年7月~2018年7月我院收治的慢性HBV携带者20例、慢性乙型肝炎（CHB）患者18例和HBV相关慢加急（亚急性）肝衰竭患者16例,另选健康体检者20例作为对照,患者接受肝活检,正常肝组织取自肝血管瘤患者手术获得的肝组织。使用流式细胞术检测单个核细胞中NK细胞和NKG2D⁺NK细胞百分比,采用ELISA法检测血清穿孔素和颗粒酶B水平,采用荧光定量PCR法检测肝组织NKG2D mRNA,采用Western blot法检测NKG2D蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK法。结果 HBV携带者NK细胞频率和NKG2D⁺NK细胞频率分别为（5.1±1.5）%和（3.4±1.1）%,CHB患者分别为（8.5±2.0）%和（12.3±2.1）%,肝衰竭患者分别为（8.8±1.6）%和（19.0±2.4）%,健康人分别为（14.2±2.1）%和（7.5±1.5）%,差异显著（P<0.05）;HBV携带者血清穿孔素和颗粒酶B水平分别为（15.2±3.2）ng/L和（23.0±3.5）ng/L,CHB为（31.5±3.6）ng/L和（52.5±4.0）ng/L,肝衰竭为（60.2±11.0）ng/L和（126.8±30.1）ng/L,健康人为（13.9±4.0）ng/L和（21.1±3.9）ng/L,差异显著（P<0.05）;HBV携带者肝组织NKG2D mRNA和NKG2D蛋白水平分别为（0.1±0.0）和（0.0±0.0）,CHB为（3.5±0.9）和（1.1±0.2）,肝衰竭为（7.0±1.2）和（1.8±0.2）,健康肝组织为（0.6±0.2）和（0.3±0.0）,差异显著（P<0.05）。结论 NKG2D可能通过NK细胞合成分泌穿孔素和颗粒酶B等杀伤介质因子发挥效应。不同免疫状态下慢性HBV感染者NKG2D水平存在差异,下调NKG2D表达可能通过抑制NK细胞而改善肝组织免疫损伤。     

急性和慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的动态变化

目的：观察急性和慢性乙型肝炎患者急性期和恢复期外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化。方法在40例急性乙型肝炎和40例慢性乙型肝炎患者,分别在急性期和恢复期检测CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD8＋T细胞和NK（CD3-CD16＋CD56＋）细胞占淋巴细胞的比率（%）。结果在急性乙型肝炎急性期NK细胞计数为（15.7±7.5）%,而在恢复期则上升至（21.9±8.2）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎患者在急性期CD3＋CD4＋T细胞为（35.5±6.8）%,到恢复期则显著下降（33.6±7.0）%,（P＜0.05）;急性乙型肝炎在急性期CD3＋CD8＋T细胞为（35.6±7.6）%,而在恢复期则显著下降（30.0±7.5）%,（P＜0.05）,后者仍比慢性乙型肝炎患者在病情恢复期高（19.1±7.1）%,（P＜0.05）。结论在急性乙型肝炎病程中,NK细胞呈上升趋势,CD3＋CD8＋T细胞呈下降趋势,而在慢性乙型肝炎患者NK细胞及T淋巴细胞数量下降,致病情迁延不愈。     

慢性支气管炎患者自然杀伤T细胞的表达与临床意义

目的:探索自然杀伤T细胞(NKT)在慢性支气管炎患者的表达及意义。方法:收集慢性支气管炎患者30例(慢支组),以30例健康志愿者为对照组;采用流式细胞术分析NKT及其胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:与对照组比较,慢支组NKT及IFN-γ含量明显降低(P0.05),但TNF-α含量明显升高。结论:NKT及IFN-γ含量降低、TNF-α含量增加,是慢性支气管炎的一个重要免疫学现象,可能是慢性炎症导致TNF-α蓄积,而NKT及IFN-γ消耗过多所致。     

慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞杀伤细胞凝集素样受体G1表达及其对NK细胞杀伤功能的影响*

目的 探讨CHB患者外周血NK细胞杀伤细胞凝集素样受体亚家族G成员1(KLRG1)表达的变化以及其对NK细胞杀伤功能的影响。方法 在120例CHB患者和120例健康体检者,抽取外周血,提取外周血单个核细胞,使用流式细胞仪检测NK细胞、KLRG1⁺ NK细胞和分泌γ-干扰素的NK细胞百分率,体外检测NK细胞对LX-2细胞的杀伤力。结果 CHB患者外周血NK细胞百分率为(17.2±7.7)%,显著高于对照组 [(11.3±6.9)%,t=9.85,P=0.01】, KLRG1⁺NK细胞百分率为(52.2±20.3)%,显著高于对照组 【(30.3±16.9)%,t=6.57,P=0.01】,分泌IFN-γ的NK细胞百分率为(14.6±3.8)%,显著低于对照组【(42.5±9.5)%,t=11.24,P=0.01】;CHB患者外周血NK细胞CD38、CD69、HLA-DR和TRAIL表达均显著高于对照组(P=0.012,P=0.015,P=0.025,P=0.019);CHB患者NK细胞诱导LX-2细胞发生早期凋亡率为11.5% (6.6%～13.7%),晚期凋亡率为7.2% (5.1%～8.5%),与对照组的15.4% (11.5%～24.3%)和13.5% (8.1%～20.4%) 比,显著降低 (U=6.50, P=0.025;U=2.02,P=0.002) 。结论 CHB患者NK细胞表达KLRG1增强,通过减少分泌INF-γ而导致其杀伤功能减弱,可能系造成慢性感染的重要原因。     

HBV感染者自然杀伤细胞活性分析

目的 探讨不同临床病期的慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群及NK细胞活性变化.方法 收集慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌四组患者及健康人群的外周血,应用流式细胞术检测CD8+T细胞、CD4+T细胞及NK细胞的表达量和分泌细胞因子的能力,并检测NK细胞的杀伤活性.结果 各组患...     

基于自然杀伤T细胞的恩替卡韦治疗乙型病毒性肝炎的疗效评价

目的从细胞免疫学的角度评价恩替卡韦（ETV）治疗慢性乙型肝炎（CHB）的疗效。方法收集66例CHB患者随机分为ETV及ADV组各33例,分别给予ETV及ADV治疗52周,分别于第13、26、39及52周随访采血检测自然杀伤T细胞（NKT）及其细胞因子γ干扰素（IFN-γ）及白介素4（IL-4）的含量,并比较乙肝病毒定量（HBV-DNA）、肝功能的差异。结果①NKT及其细胞因子：治疗前及第13周两组患者上述指标均不存在统计学差异,且治疗前与第13周之间无统计学差异（均为P〉0.05）;第26、39及52周两组的NKT、IFN-γ及IL-4百分含量开始显著高于治疗前,两组均呈单调递增,且ETV组上述三者显著高于ADV组（均为P〈0.05）。②HBV-DNA及肝功能：从治疗第13周开始,两组的HBV-DNA、ALT及Bil水平即低于治疗前,但治疗前及治疗第13及26周两组HBV-DNA、ALT及Bil组间无显著差异。第39及52周ETV组的HBV-DNA显著低于ADV。③相关性分析：HBV-DNA与NKT、IFN-γ及IL-4三者当中任何一者均呈显著负相关性（r=0.695-0.884,P均〈0.05）。结论与阿德福韦酯比较,恩替卡韦更有效提高自然杀伤T细胞及其细胞因子的含量及活性。     

慢性HBV感染者外周血CXCR5~+CD4~+Tfh细胞的测定及其与FoxP3~+Treg细胞的相关性

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染不同阶段患者外周血CD4+T淋巴细胞中CD4+CXCR5+Tfh细胞及CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的百分比及其意义.方法:应用流式细胞术检测15例慢性无症状HBV携带者(chronic asymptomatic HBV carriers,AsC)、42例慢性乙型肝炎(chronic hepatitisB,CHB)患者(HBeAg阳性25例、HBeAg阴性17例)、11例非活动性HBsAg携带者(inactive HBsAg carriers,InC)外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞及CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,并与15例健康对照(healthycontrol,HC)进行比较.结果:AsC、HBeAg(+)CHB、HBeAg(-)CHB组外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例分别为17.66(15.34%-20.56%),21.95(19.60%-26.32%),22.33(17.58%-24.85%),显著高于HC组的13.67(9.80%-15.32%),差异具有统计学意义(P<0.001).与AsC及InC组的16.11(12.33%-19.73%)相比,HBeAg(+)、HBeAg(-)CHB组外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例显著升高(P<0.05).此外,AsC组外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为7.70(6.35%-9.13%),显著高于HC组的6.53(5.54%-7.35%),P<0.05.HBeAg(+)CHB组外周血CD4+T淋巴细胞中CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的频率为7.52(6.09%-8.49%),与AsC组相比呈降低的趋势.外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞占CD4+T淋巴细胞的比例与HBVDNA载量呈负性相关(r=-0.275,P<0.05);而与血清ALT水平、HBsAg滴度无相关性.结论:CD4+CXCR5+Tfh细胞可能参与了慢性HBV感染所介导的免疫反应,外周血CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞及CD4+CXCR5+Tfh细胞的消长可能与疾病的活动性相关.     

Immune response pattern varies with the natural history of chronic hepatitis B

BACKGROUND Chronic hepatitis B is a highly heterogeneous disease that can be divided into four phases: Immune tolerant(IT), immune active(IA), inactive carrier(IC) and hepatitis B envelope antigen(HBeAg)-negative hepatitis(ENEG).AIM To investigate the immune status of natural killer(NK) and T cells in different phases of chronic hepatitis B.METHODS The frequency, phenotype and function of circulating NK cells, as well as nonantigen-specific and hepatitis B virus(HBV)-specific T cell responses were detected by flow cytometry in healthy and HBV-infected subjects.RESULTS The ability of NK cells to produce IFN-γ was markedly attenuated in HBVinfected patients overall but was less compromised in IC patients. Patients in the IT and IA phases also displayed significantly lower TNF-α production compared to healthy subjects. NK cells were phenotypically activated in the IA and ENEGphases, as evidenced by the upregulation of NKp44 in CD56^bright NK cells and CD69 in CD56^dim NK cells. Furthermore, global T-cells from the ENEG phase displayed a proinflammatory cytokine profile with upregulated IFN-γ and TNF-αexpression, while this profile was suppressed in IT and IA patients. Finally, core and S antigen-specific T cell responses were significantly stronger after in vitro expansion in the IC phase compared to other phases.CONCLUSION Our findings demonstrate the changes in immune response pattern during the natural history of HBV infection. Both NK and T cells are functionally impaired in the IT and IA phases. With the spontaneous clearance of HBeAg and hepatitis B surface antigen decline, NK cell cytokine production and HBV-specific T responses are partially restored in IC phase, and the ENEG phase is dominated by nonantigen-specific T cell responses.