HPLC-ESI-MS测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的 建立快速、灵敏的HPLC-MS检测方法测定人血浆中多奈哌齐浓度。方法 以马来酸氯苯那敏为内标,待测血浆经碱化处理后,经乙酸乙酯进行液-液萃取,采用Shim-pack ODS C₁₈柱(250 mm×2.0 mm,5 (m),以甲醇-0.1%醋酸溶液(60∶40)为流动相,流速0.2 mL·min^-1,柱温35 ℃。采用质谱电喷雾离子源正源(ESI⁺)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果 多奈哌齐在0.1~16.0 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.1 ng·mL^-1。方法回收率为92.5%~105.3%,提取回收率均大于75%,批内与批间RSD均小于10%。结论 该方法简单,快速、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中多奈哌齐浓度的测定及药动学研究。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度

目的:建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度的方法。方法:血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中多奈哌齐,紫外检测器检测,检测波长316nm。色谱柱:Sh im-Pack C18柱(150mm×4.6mm,5μm),保护柱:Sh im-Pack C18柱,流动相:0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH3.0)-乙腈(65∶35),流速为1.0mL.m in-1。结果:标准曲线线性范围为5~100mg.L-1(r=0.999 3),萃取回收率在81.9%~90.7%之间。日内、日间RSD在5.4%~10.2%之间,最低检测浓度为2mg.L-1。结论:本测定方法快速、灵敏、准确,适用于临床治疗药物浓度检测的要求。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定血浆中多奈哌齐及其代谢物6-O-去甲基多奈哌齐浓度。方法:采用HPLC-MS/MS法,加入内标后,样品用二氯甲烷为萃取剂提取后进样,以Shisheido C18(100 mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵-甲酸(80∶20∶0.05)为流动相,流速为0.2 mL·min-1,柱温为室温。离子化方式为电喷雾离子化,多反应离子监测。结果:多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐标准曲线线性范围分别为0.05～15 ng·mL-1和0.008～2.4 ng·mL-1,定量下限分别为0.05和0.008 ng·mL-1,二者日内RSD及日间RSD均<9%,方法回收率在96%～103%之间。稳定性考察试验,二者血药浓度变化率均在±15%内。结论:该方法简单,快速,可满足多奈哌齐及6-O-去甲基多奈哌齐血药浓度的测定及多奈哌齐药代动力学研究。     

HPLC-MS(TOF)法测定人血浆中多奈哌齐的浓度

目的建立测定人血浆中多奈哌齐的HPLC-MS(TOF)法。方法血浆中加入内标氯雷他定后经碱化以异丙醇-正己烷(3∶97)提取血浆样品,用LC/MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择多奈哌齐的准分子离子(［M+H］⁺,m/z 380)和内标氯雷他定的准分子离子(［M+H］⁺,m/z 383)作为测定离子,测定人血浆中多奈哌齐的浓度。结果多奈哌齐的回归方程:As/Ai=0.0137+0.1056C,r=0.9998;线性范围为0.1～15 μg·L^-1,定量限为0.1 μg·L^-1,方法回收率和提取回收率均大于90%。结论该测定方法灵敏度高、专属性好、快速,可满足人体内药代动力学研究要求。     

盐酸多奈哌齐的合成

4-哌啶甲酸甲酯经N-苄基取代、KBH4/ZnCl2还原、Swern氧化得到1-苄基-4-哌啶甲醛(5);3-(3,4-二甲氧基苯基)丙烯酸经催化氢化、闭环生成5,6-二甲氧基-1-茚酮(8).5和8再经Aldol缩合、催化氢化、成盐制得盐酸多奈哌齐,总收率33%(以4-哌啶甲酸甲酯计).     

多奈哌齐治疗阿尔茨海默病的临床观察

目的探讨多奈哌齐对阿尔茨海默病患者认知功能和日常生活能力的治疗作用。方法收集阿尔茨海默病患者140例,随机分为治疗组70例与对照组70例,治疗组采用多奈哌齐,对照组不使用多奈哌齐治疗。两组患者分别在治疗前、治疗后1个月、3个月、6个月进行MMSE和ADL评分。结果治疗组经多奈哌齐治疗后MMSE和ADL评分较对照组有明显改善,随治疗时间延长两组间差异增大即治疗作用增强,且均具有统计学差异（P〈0.05）。治疗1个月、3个月和6个月后,多奈哌齐对AD患者认知功能改善的总体有效率分别高出对照组13%、32%、43%,对日常生活能力改善的总体有效率分别分别高出对照组8%、13%、23%,与对照组相比多奈哌齐疗效显著（P〈0.05）。结论多奈哌齐对阿尔茨海默病患者认知和日常生活能力有显著改善作用。     

LC-MS/MS法测定家兔血浆中多奈哌齐的浓度

目的建立测定家兔血浆中多奈哌齐浓度的LC-MS/MS法,并用该法研究多奈哌齐在家兔体内的药动学特征。方法色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-5 mmol·L^(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L^(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L^(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L^(-1)。结论该方法适用于多奈哌齐在家兔体内药物动力学的研究。     

单用多奈哌齐与多奈哌齐、尼莫地平联用治疗阿尔茨海默病的对照研究

目的：观察多奈哌齐联合尼莫地平治疗阿尔茨海默病的临床疗效。方法：将60例阿尔茨海默病患者随机分为治疗组和对照组,对照组,多奈哌齐每晚5mg临睡前口服,4周后将剂量调整为每晚10mg临睡前口服;治疗组,多奈哌齐用法同对照组,同时联用尼莫地平30mg,每日早晚各1次口服。疗程为8周。治疗4周后评价简易精神状态检查表（MMSE）、日常生活活动量表（ADL）、不良反应及副反应量表（TESS）量表,将结果进行统计学处理。结果：两组MMSE及ADL量治疗后与治疗前相比均有所改善,治疗组与对照组比较,在MMSE评分上治疗组的疗效更显著,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组不良反应的发生率差异无统计学意义。结论：多奈哌齐联合尼莫地平用于治疗阿尔茨海默病疗效优于单独使用多奈哌齐。     

盐酸多奈哌齐治疗老年痴呆疗效观察

目的：临床分析盐酸多奈哌齐治疗老年痴呆的疗效。方法选取本院2011年5月-2013年5月收治的90例老年痴呆患者,给予盐酸多奈哌齐治疗,5 mg/d,治疗4周后加用剂量至10 mg/d,一个疗程为8周。治疗前后、治疗8周后,测定MMSE、ADL。结果经过治疗后,老年性痴呆患者的MMSE明显高于治疗前, ADL明显优于治疗前,治疗前后对比差异有统计学意义（P〈0.05）。血管性痴呆患者的ADL、MMSE与治疗前对比,差异无统计学意义（P〉0.05）。混合性患者的ADL与治疗前对比差异无统计学意义（P〉0.05）, MMSE明显优于治疗前（P〈0.05）。结论针对老年痴呆患者,采用盐酸多奈哌齐治疗,可有效改善部分混合性、老年性痴呆的认知功能,但无法改善血管性痴呆。     

多奈哌齐的合成方法研究

多奈哌齐为1-苄基-4-[（5，6-二甲氧基-1-茚酮）-2-亚甲基]哌啶盐酸盐，是第二代可逆性乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制剂，为治疗阿尔茨海默病（AD）的第二个药物。本文介绍了盐酸多奈哌齐的合成方法，比较各方法的优缺点，为提供寻找一条适合大规模、商业化生产的工艺路线做参考。     

高效毛细管电泳法测定清胃黄连丸中盐酸小檗碱含量

目的建立测定清胃黄连丸中盐酸小檗碱含量的高效毛细管电泳法。方法毛细管区带电泳法,采用熔融石英毛细管柱(47cm×75μm),有效长度40 cm,缓冲溶液为pH=3.0的60 mmol/L磷酸盐溶液-甲醇(65∶35),分离电压30kV,进样时间5s,毛细管柱温25℃,紫外检测波长200 nm。结果盐酸小檗碱进样质量浓度在0.05～0.45 g/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 7),平均加样回收率为100.31%,RSD为2.53%(n=5)。结论该方法测定清胃黄连丸中盐酸小檗碱的含量灵敏、快速、结果可靠。     

高效毛细管电泳法测定黄连中盐酸小檗碱的含量

目的建立高效毛细管电泳法(HPCE)测定黄连中盐酸小檗碱的含量。方法熔融石英毛细管柱50 cm×75μm,缓冲液为0.05 mol.L-1四硼酸钠溶液(pH=7.0)-甲醇(85∶15),分离电压14 kV,毛细管柱温20℃,UV检测波长254 nm。结果盐酸小檗碱进样浓度在0.026~0.414 mg.mL-1内线性关系良好(r=0.999 4),平均加样回收率为98.90%(RSD=2.64%,n=5)。结论本法灵敏、快速、准确,可用于黄连的质量控制。     

RP-HPLC测定祛疣软膏中盐酸小檗碱的含量

目的测定祛疣软膏中盐酸小檗碱含量.方法采用反相高效液相色谱法,Dikma HPLC column色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),以0.033 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(70∶30)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长349 nm,柱温25 ℃测定.结果RP-HPLC测定的线性范围为0.041～0.41 μg,相关系数为r=0.999 8;软膏中盐酸小檗碱的平均回收率为98.6%,RSD=1.6%(n=6),精密度良好(RSD=0.51%).结论该法操作简便、快速、准确,适用于祛疣软膏中盐酸小檗碱的含量测定.     

高效毛细管电泳法分析血样尿样中巴比妥类药物

建立了血、尿样品中巴比妥类药物的高效毛细管电泳分离测定方法，测定条件为：运行缓冲液配比：１００ｍｍｏｌ／Ｌ十二烷基硫酸钠－１００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠－甲醇－水＝７０∶１５∶５∶１０（ｐＨ值调至７．５５±０．０５），操作电压１７ｋＶ，检测波长２００和２８５ｎｍ，２０ｍｉｎ内７种巴比妥类药物全部得到分离。考察并选择了体液样品的预处理方法，测定了血浆和尿液中６种巴比妥类药物浓度（苯巴比妥、甲基苯巴比妥、异戊巴比妥、硫喷妥、戊巴比妥和速可眠）。测定血药浓度的线性范围为５．０～３５μｇ／ｍｌ，尿样药物浓度线性范围为１．０～８．０μｇ／ｍｌ，最低检测浓度为１．０μｇ／ｍｌ，方法重现性为ＲＳＤ小于１３％。     

反相高效液相色谱法测定复方金黄痔疮软膏中盐酸小檗碱含量

目的测定复方金黄痔疮软膏中盐酸小檗碱的含量。方法采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法,色谱柱为DiamondC18柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸（42∶58,每100mL加十二烷基磺酸钠0.1g）,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长345nm,进样量20μL。结果盐酸小檗碱进样质量浓度在12.8～102.4μg/mL范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）;软膏中盐酸小檗碱的平均回收率为99.83%,RSD=1.10%（n=6）。结论所用方法操作简便、快速、准确,适用于复方金黄痔疮软膏中盐酸小檗碱的含量测定。     

HPCE和HPLC测量导赤丸中盐酸小檗碱含量

目的建立毛细管电泳法（HPCE）与高效液相色谱法（HPLC）测定导赤丸中盐酸小檗碱含量的方法,并比较二者在测定本品中盐酸小檗碱含量方面的差异。方法采用盐酸-甲醇（1∶100）溶液提取导赤丸样品。HPCE分离条件为：熔融石英毛细管柱（67 cm×75μm,有效长度60 cm）,缓冲液体系为60 mmol.L-1磷酸二氢钾缓冲溶液-甲醇（65∶35）,pH 3.5,分离电压30 kV,毛细管柱温25℃,检测波长254 nm,进样时间5 s;HPLC分离条件为：C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温25℃,流动相为60 mmol.L-1磷酸二氢钾-甲醇（60∶40,用磷酸调pH3.5）,流速1.0 mL.min-1,检测波长254 nm。结果盐酸小檗碱在HPLC和HPCE各自的分离条件下进样浓度分别在5.03～30.18μg.mL-1、30.18～80.48μg.mL-1内表现出良好线性关系（r=0.999 8;r=0.999 8）,平均加样加收率分别为99.0%,100.8%,RSD分别为1.4%,0.6%。结论这两种方法均可用于导赤丸中盐酸小檗碱含量的测定,二者的测定结果稍有差异,HPCE测定盐酸小檗碱在柱效、分离时间、多组分生物碱分离上更有优势。     

高效毛细管电泳法测定清经胶囊中小檗碱含量

目的:采用高效毛细管电泳法(HPCE)的毛细管区带电泳分离模式(CZE)分离测定清经胶囊中小檗碱含量并与HPLC法比较。方法:熔融石英毛细管柱:58.5 cm(有效长度50 cm)×75μm;运行缓冲液:0.2 mol·L~(-1)乙酸钠溶液-甲醇(8:2);压力进样:20kPa·s;运行电压15 kV;柱上检测:λ=265 nm;毛细管柱温:25℃。结果:盐酸小檗碱进样浓度在9.95～159.2mg·L~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为100.4％(RSD=1.9％,n=5)。结论:该法与HPLC法所测结果吻合,但具有有机溶剂消耗少等优点,可用于清经胶囊中小檗碱含量的质量控制。     

大鼠经皮给药血浆中多奈哌齐浓度的UPLC-MS/MS法测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中的多奈哌齐.以氯雷他定为内标,液-液萃取处理血浆样品,采用ESI源正离子模式、多反应监测进行定量分析.监测离子对为m/z 380.3→m/z 243.2(多奈哌齐)和m/z 383.1→m/z337.1(氯雷他定).多奈哌齐在0.5～200 ng/ml范围内线性关系良好,方法回收率为94.1％～106.8％,日内、日间RSD均小于10％.     

高效毛细管电泳法分离测定淫羊藿中淫羊藿甙的含量

采用ＨＰＣＥ法测定淫羊藿中的淫羊藿甙的含量,用缓冲液为含２０％乙腈的２０ｍｍｏｌ／Ｌ,硼砂,电压２５Ｋｖ温度２５℃,检测波长２５４ｎｍ,检测结果样品在２５μｍ／ｍｌ范围内呈线性关系,ｒ＝０．９９９,天内,天间精密度ＲＳＤ〈２％（ｎ＝３）,加样回收率９８．３５％（ｎ＝３）,说明本法测定淫羊藿甙快速,重现性好,为淫羊藿的质量控制提供了新的方法学手段。     

高效毛细管电泳法测定血浆中肝素含量及临床应用

采用硼砂电泳缓冲体系的胶束动电毛细管电泳法（ＭＥＣＣ），非涂渍毛细管（３０ｃｍ×５０μｍ），电压２０ｋＶ，外标法定量，检测波长２７０ｎｍ。血浆中肝素含量在８０～７０００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限２５Ｕ／Ｌ。低、中、高３种样品液的平均回收率分别为９５．６％、９７．５％、９８．７％。批内与批间相对标准偏差分别小于３．５％和５％。同时用ＭＥＣＣ法和凝血酶法检测１批血样，结果相似。此法适合于肝素含量高的血样检测。