荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒的作用

目的: 探讨荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用. 方法: 采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照,观察比较荔枝核黄酮类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用. 结果: 荔枝核黄酮类化合物半数中毒浓度(TC50)为152.9 mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为58.6 mg/L,治疗指数(TI)为2.6,体外抗RSV作用与病毒唑相当,且对RSV抑制作用存在明显的量效关系. 结论: 荔枝核黄酮类化合物在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用.     

败酱草抗病毒有效部位体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

目的　了解败酱草抗病毒有效部位(AP3)体外抑制呼吸道合胞病毒的作用。方法　采用中药煎煮法、乙醇提取法和大孔吸附树脂层析法分离得到抗病毒AP3。采用细胞病变抑制试验,以病毒唑为阳性对照药,观察不同浓度AP3在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用,计算药物半数有效浓度(EC50 )和药物治疗指数(TI)。结果　AP3半数中毒浓度(TC50 )为1 1 .4 5mg ml;抑制呼吸道合胞病毒的EC50 为0 .0 986mg ml,TI 为1 1 6 .1 2 ;AP3对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在量效反应关系;AP3于感染后0、2、4h加药,有抑制呼吸道合胞病毒活性。结论　败酱草…     

龙胆抗病毒有效部位RG3-1体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的 探讨龙胆抗病毒有效部位(RG3-1)体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 采用煎煮法、二氯甲烷萃取法和柱层析法分离提取RG3-1.以病毒唑为阳性对照药物,采用细胞病变抑制试验观察RG3-1对RSV的抑制作用.结果 RG3-1半数中毒浓度(TC50)为5.29mg/mL,抑制RSV的半数有效浓度EC50为262.95μg/mL,治疗指数(TI)为20.12;RG3-1对RSV的抑制存在量效关系;RG3-1具有直接灭活RSV的作用;在感染后至少10h以内给药,RG3-1能够有效的抑制RSV复制.结论 RG3-1在HeLa细胞中对RSV有明显的抑制作用.     

乔木蓠精油的脂质体及其体外抗病毒活性

作者研究了乔木蒿Artemisia arborescens L．精油脂质体体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1）的活性，并研究了氢化大豆卵磷脂（P90H）、非氢化（P90）大豆卵磷脂和非离子表面活性剂聚氧乙烯十二烷基醚脂质体（Brij30）对抗病毒活性的影响。3种制剂都制备了多层脂质体（MLV）和单层脂质体（SUV）两种结构，并均含胆固醇和硬脂酰胺，以改善脂质体与细胞的相互作用。     

荔枝核黄酮体外抗单纯疱疹病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。     

槲寄生亚种提取物对人副流感病毒2型的抗病毒活性

将槲寄生亚种Viscum album ssp. album叶制成水提取物(AE)、50％乙醇提取物(EE)、石油醚提取物(PEE)、氯仿提取物(CE)和丙酮提取物(ACE)。用空斑形成试验检测各提取物的抗人副流感病毒2型(HPIV-2)的活性；分析AE对HPIV-2复制的不同阶段的作用以探讨其作用机理；     

荔枝核黄酮类化合物对小鼠Ⅰ型单纯疱疹病毒性脑炎的作用及机制

目的 探讨荔枝核黄酮类化合物(FLCS)对体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的作用及其可能机制,进一步验证该药对小鼠病毒性脑炎的治疗效果,从而为HSV-1感染的治疗提供新的手段.方法 采用微量细胞培养法和MTT比色法观察FLCS对HSV-1感染细胞的保护作用,通过检测细胞病变效应(CPE)以及病毒抑制率确定该药体外抗病毒活性.进一步利用小鼠病毒性脑炎模型,设计治疗方案(FLCS 3个剂量组,疗程5 d),观察小鼠生存率、平均存活时间、组织中病毒滴度,评价FLCS对小鼠病毒性脑炎的治疗作用.结果 FLCS不仅对HSV-1有直接灭活作用,而且还可阻止HSV-1的生物合成,表现为各剂量组FLCS通过不同方式和病毒作用后,HSV-1感染细胞的PE则随药物浓度的增加而减少,病毒抑制率明显升高.FLCS对HSV-1直接灭活作用和抑制生物合成作用的细胞半数抑制有效浓度(IC50)分别为32.76μg/mL和12.72μg/mL,相应作用方式的治疗指数(TI)分别为7.3和18.8.但是FLCS不能阻止HSV-1吸附细胞,表现为各剂量组FLCS作用细胞后,HSV-1再感染细胞,均出现典型CPE.对于小鼠来说,其体征大多数都会从厌食、呆滞以及嗜睡等症状,逐渐转变为颤抖、抖毛、背弓、抽搐、打转、体重下降等神经系统感染症状,直至死亡,FLCS治疗组小鼠组织病变程度减轻.结论 FLCS虽不能阻止病毒吸附与穿入易感细胞,但能直接杀灭病毒以及抑制HSV-1的生物合成或(和)以后环节发挥其抗病毒作用.FLCS能降低HSV-1感染小鼠死亡率,延长平均生存期,加快组织中病毒的清除,缓解小鼠脑炎症状.     

纳米雄黄对单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外抗病毒活性

目的：探讨纳米雄黄对单纯疱疹病毒II型(herpes simplex virus Type II,HSV-2)的体外抗病毒活性。方法： 以阿昔洛韦作为阳性对照,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法观察 不同浓度(200.00,150.00,100.00,50.00,25.00,12.50,6.25,3.13,1.54,0.78,0.39和0 mg/L)纳米雄黄对正常非洲 绿源猴肾细胞(Vero细胞)作用48 h的细胞毒性;空斑法测定病毒滴度,建立病毒感染细胞模型,并采用细胞病变观 察和MTT结合的方法对不同浓度(20.00,10.00,5.00,2.50,1.25,0.63,0.31,0.15,0.08,0.04和0 mg/L)纳米雄黄在 预防、治疗及直接灭活病毒3种给药方式下的抗HSV-2活性进行评价。结果：纳米雄黄对正常Vero细胞的半数细胞毒 性浓度为37.15 mg/L,HSV-2病毒滴度为7.30 log PFUs/mL,纳米雄黄在预防、治疗和直接灭活病毒3种给药方式下对 HSV-2感染细胞的半数有效浓度分别为0.13,1.80和0.52 mg/L,对应的治疗指数分别为285.77,20.64和71.44,纳米雄 黄在预防给药下的治疗指数高于其治疗和直接灭活给药。结论：纳米雄黄在3种给药方式下均具有良好的抗HSV-2活 性,且预防给药的疗效较好。     

The anti-HSV-2 effect of alumen: In vitro and in vivo experimental studies

This study investigated the anti-HSV-2 effect of alumen through in vitro and in vivo expe-riments.Viable cell counting was employed to assess the toxicity of alumen on Vero cells.The inhibition rate of HSV-2 was defined as the cytopathic effect(CPE)of the cells infected with the virus.Alumen suppositories of different concentrations were vaginally applied to the guinea pigs which were then infected with HSV-2 via a vaginal route.The clinical symptoms were observed and the local virus titer calculated.The results showed that alumen had an in vitro anti-HSV-2 effect by means of antiviral dup-lication,direct killing of the virus,and antiviral adsorption.Alumen suppositories of different concen-trations could reduce or completely inhibit HSV-2 infection in guinea pigs.It was concluded that alumen had an in vitro anti-HSV-2 effect through multiple approaches and it could suppress in vivo vaginal HSV-2 infection of guinea pig to some extent.     

利福平抗黄热病毒感染的效果及初步机制

目的 检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制.方法 用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50).YFV感染Huh-7细胞的同时加入不同浓度(0.04、0.2、1...     

HSV-tk基因特异性杀伤大肠癌细胞的实验研究

目的：探讨单纯疮疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ－tk)ad基因在大肠癌组织细胞中特异地表达, 以达到靶向基因治疗的作用。方法：构建以ＣＥＡ基因顺式转录调控序列（ＴＲＳ）驱动tk基因的组织特异性重组逆转录病毒载体Ｇ１ＣＥＡtkＮa,然后以重组逆转录病毒上清染法将重组组织特异性载体及非组织特异性载体分别转导入高分泌ＣＥＡ的大肠癌ＬoＶo细胞中,以Ｇ４１８筛选阳性克隆扩增后给予前药更昔洛韦（ＧＣＶ）进行敏感试验。结果：转导     

单纯疱疹病毒感染对大鼠脑毛细血管内皮细胞和多形核白细胞黏附力特性的影响

目的 探讨细胞间黏附分子在单纯疱疹病毒感染中的作用.方法 成年雄性Wistar大鼠20只,随机分为两组,即对照(伪手术)组,单纯疱疹病毒感染组,每组为10只大鼠.分离培养大鼠脑毛细血管内皮细胞(cerebral capillary vessel endothe-lial cell,CCEC)和多形核白细胞(polymorphism nuclear leucocyte,PMN),利用微管吸吮技术,观察各组CCEC和PMN间黏附力特性的变化.结果 HSV感染后各时间点CCEC和PMN的黏附力和黏附应力均明显高于对照组(P<0.01).结论 单纯疱疹病毒感染中存在细胞间黏附特性的变化.     

呼吸道合胞病毒及腺病毒在小儿疾病中的病原探讨

应用间接免疫荧光技术(IIF)对呼吸适合胞病毒(RSV)及腺病毒(AdV)3型和7型在我区小儿疾病中的病原作用进行了2年观察,共观察311例。结果表明:ESV在毛细支气管炎中阳性检出率为50％;在普通肺炎中为36.5％;在重症肺炎中为37.5％;在哮喘患儿中为42％;在上感患儿中为20.3％。而AdV(3,7型)在毛细支气管炎中的阳性检出率为5.5％;在普通肺炎中为2.2％;在上感患儿中为6.3％;在败血症患儿中为33.3％。不同性别、不同族别患儿中RSV阳性检出率无明显统计学差异。而婴儿与幼儿组之间RSV阳性检出率有显著统计学差异。     

绿色荧光蛋白示踪的HSV1-tk/GCV系统重组慢病毒载体的构建及活性检测

【目的】构建绿色荧光蛋白(GFP)示踪的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因(HSV1-tk)的重组慢病毒载体,并检测该系统对人皮肤黑色素瘤细胞株A375的感染活性。【方法】构建含有HSV1-tk、GFP融合基因的重组慢病毒表达载体p LV-tk-GFP,并使用限制性内切酶消化进行鉴定及序列测定;用该重组质粒与辅助质粒共转染包装细胞HEK293T,获得重组活病毒并感染A375,以嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株;使用荧光显微镜观察GFP基因的表达,更昔洛韦(GCV)杀伤实验验证tk-GFP基因的活性。【结果】重组质粒p LV-tk-GFP经限制性酶切鉴定和DNA序列测定分析显示,tk基因已连接到载体正确位置,序列无突变;包装病毒并感染细胞后,荧光显微镜下观察显示tk-GFP基因在A375中表达;筛选得到稳定表达细胞株A375/tk-GFP,GCV能显著杀伤A375/tk-GFP细胞,表明tk基因活性正常。【结论】成功构建了重组p LV-tk-GFP慢病毒载体,该载体能包装产生活病毒且在感染的人黑色素瘤细胞株A375中tk-GFP具有生物活性。     

葡萄籽原花青素抗兔动脉粥样硬化形成的实验研究

目的:观察葡萄籽原花青素(GSPE)对兔动脉粥样硬化(AS)形成的影响并探讨其作用机制。方法:30只雄性新西兰兔随机分为正常对照(A)组、高脂模型(B)组、GSPE(C)组,分别饲喂:标准、标准+1%胆固醇、标准+1%胆固醇+1%GSPE的颗粒饲料。于实验前1天和实验第1、2、4、8、12周末取空腹血,检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)和血浆氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。12周末动物取血后处死,取主动脉作病理形态学观察。所有数据经SAS8.2混合模型方差分析。结果:与高脂模型组相比,GSPE能显著降低血清TC(P<0.0001)、LDL-C(P<0.0001)、TG(P<0.0001)、TG/HDL(P<0.0001),升高HDL-C(P<0.05);GSPE能显著降低血清MDA、血浆ox-LDL(P<0.0001);病理分析显示GSPE组兔主动脉壁厚度和泡沫细胞数量较高脂模型组明显减轻、减少(P<0.01)。结论:GSPE具有预防AS的作用,该作用的发挥与其能调节血脂、抗LDL氧化修饰有关,并能改善胰岛素抵抗。     

大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体的构建与鉴定

目的以真核表达载体单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)质粒型载体(pHSV)作为表达载体,构建大鼠MeCP2基因反义表达载体.方法用PCR方法扩增出大鼠MeCP2 cDNA部分片段,将其反向插入表达载体pHSV,并以PCR、酶切电泳以及DNA测序等方法对重组质粒进行鉴定.结果经过PCR、酶切电泳以及DNA测序,鉴定出连接方向和插入序列正确的反义表达载体.结论成功构建了大鼠MeCP2基因HSV-1型反义表达载体,为进一步研究该基因的功能打下了基础.