水蛭提取物对HL60细胞增殖与细胞周期的影响

目的：研究水蛭提取物对人白血病HL-60细胞的细胞增殖与细胞周期的影响。方法：用液氮快速冻融法制备水蛭提取物,将0.7~2.8g/L浓度提取物作用HL-60细胞48h,采用MTT、FCM法分别观察提取物对HL60增殖、细胞周期的影响,并用Western blotting检测HL60细胞的细胞周期调节蛋白Cyclin E与CDK2蛋白表达。结果：0.7~2.8g/L浓度范围内的水蛭提取物以剂量依赖性抑制HL-60细胞增殖;水蛭提取物能阻滞HL60细胞于细胞分裂周期的G1期、阻止进入S期;提取物能显著降低HL60细胞的Cyclin E、CDK2的表达,且剂量越高,其抑制效果越明显。结论：水蛭提取物具有良好的抑制HL60细胞增殖作用,其机理之一与细胞周期G1期阻滞有关。     

斑蝥素对白血病HL60细胞株hTERT mRNA表达及启动子甲基化的影响

目的:研究斑蝥素对人白血病HL60细胞株端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的影响及启动子甲基化的作用及其机制。方法:采用MTT法证实斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的确切作用;采用RT-PCR半定量法检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株端粒酶逆转录酶mRNA的表达情况的影响;利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)的方法,用亚硫酸氢钠修饰后的DNA为模板进行聚合酶链反应(PCR),检测不同浓度斑蝥素对HL60细胞株hTERT启动子甲基化作用情况。结果:斑蝥素可抑制HL60细胞增殖,具有明显的时间和剂量效应;中剂量斑蝥素组、高剂量斑蝥素组均能降低hTERT mRNA的相对表达量;高剂量组hTERT mRNA的相对表达量低于中剂量组(P<0.01);各组hTERT启动子均处于甲基化状态。结论:斑蝥素抑制HL60细胞株增殖的作用与其下调hTERT mRNA的表达有关。     

蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:为了进一步研究蛇葡萄素体内抗肿瘤作用,我们进行了人肺癌GLC-82裸小鼠移植瘤的抑瘤实验研究.方法:人肺癌GLC-82 细胞接种于裸鼠腋窝建立移植模型.荷瘤BALB/C裸鼠随机分成6组,蛇葡萄素以3个剂量腹腔给药.观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤生长曲线,以此评价蛇葡萄素的抗瘤作用.结果:250mg/kg蛇葡萄素对裸鼠移植瘤的抑制率,二次实验结果分别为35.5%(P＜0.01)和37.1%(P＜0.01),相对肿瘤增殖率则分别为55.24%(P＜0.01)和57.71%(P＜0.05).结论:蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤具有显著的抑制作用.     

补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对细胞内钙离子浓度的影响

目的研究补骨脂素对HL60/HT耐药细胞的逆转作用及对耐药细胞内Ca2 浓度的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用MTT法测定补骨脂素对细胞增殖的抑制作用,高效液相色谱法检测细胞内三尖杉酯碱(HT)的量,激光共聚焦显微镜测定细胞内不同时段和不同时间点的Ca2 浓度。结果补骨脂素在1~20μmol/L能不同程度降低HT对HL60/HT细胞的IC50,并不同程度提高细胞内HT的量;1~20μmol/L补骨脂素作用不同时段(24、48、96h),HL60/HT细胞内Ca2 浓度与作用时间成负相关,10和20μmol/L补骨脂素作用HL60/HT不同时间(5、10、15、20、25min),细胞内Ca2 浓度与作用成负相关性。结论补骨脂素能逆转HL60/HT细胞的多药耐药,其作用机制与影响耐药细胞内Ca2 浓度、增加细胞内HT的量有关。     

琼玉膏加强顺氨氯铂对肺腺癌细胞株GLC-82的体外抑制作用

目的：观察琼玉膏对顺氨氯铂抑制肺腺癌细胞株ＧＬＣ－８２增殖的影响。方法：使用血清药理学分别观察空白对照组（生理盐水）、化疗组（顺氨氯铂）及联合组（顺氨氯铂加琼玉膏）细胞形态学的变化;使用活细胞计数方法记录各组癌细胞６日的生长情况并绘制其生长曲线;使用流式细胞等方法分析各组癌细胞株ＧＬＣ－８２的调亡情况。结果：对照组癌细胞生长良好,化疗组癌细胞数基本不增长,联合组活癌细胞数则下降。流式细胞仪的分析结     

蛇葡萄素钠协同卡铂体外抑制人肺腺癌GLC-82细胞增值的作用

目的:考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Caspase-3的表达。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠在浓度为12.5²00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13200μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13¹00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5100μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5⁵0μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞12 h后,Caspase-3表达上调,且有浓度依赖性。结论:蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠诱导细胞凋亡的机制之一可能是通过激活细胞内的Caspase-3,从而促进凋亡的发生。     

新疆紫草提取物对GLC-82人肺腺癌细胞的体外作用

目的:研究不同浓度的紫草提取物(SE)对体外培养的GLC-82人肺腺癌细胞(简称"GLC-82细胞")的作用。方法:荧光显微镜观察细胞形态的变化;MTT法检测不同浓度SE培养细胞后细胞的存活率;划痕试验检测不同浓度的SE对细胞迁移力的影响;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果:SE诱导细胞凋亡程度与用药剂量呈正相关,较高剂量的药物能引起GLC-82细胞亚结构发生变化,如呈现边界不清,体积缩小,核固缩,染色质凝集、边缘化,甚至细胞发生破碎,凋亡小体形成;随着SE浓度的增高GLC-82细胞向划痕区的愈合速度不断减慢;SE的浓度≥3mg/mL时,细胞周期主要表现为G1期比例的上升伴随S期比例的下降。结论:高剂量SE能够诱导GLC-82细胞凋亡及周期的改变,为临床上用药剂量提供一定的依据。     

黄芪多糖组分-A3对HL60白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用

目的研究黄芪多糖组分-A3(APS-A3)对HL60白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用。方法用10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L APS-A3作用HL60白血病细胞5 d,采用液体培养,2,3-双(2-甲氧基-4-硝基-5磺基苯)-5-[(苯胺基)羰基)]-二氢-四氮唑氢(XTT)试验和集落形成抑制试验观察HL60细胞增殖能力;用流式细胞术检测HL60细胞周期;通过Wright-Giemsa染色和表面分化抗原CD14表达观察APS-A3对HL60细胞分化的作用。结果XTT试验和集落形成抑制试验均显示APS-A3剂量依赖性地抑制HL60细胞增殖,与对照组比较有显著差异(P<0.01);细胞周期显示APS-A3剂量依赖性地将HL60细胞周期阻滞在S期(P<0.01);形态学观察APS-A3处理后的HL60细胞体积变大,核浆比例减少,趋向成熟分化;流式细胞术检测经过10-5mol/L APS-A3处理5 d后的HL60细胞膜上CD14表面标记表达阳性率为(84.67%±8.87%),显著高于对照组(P<0.01)。结论 APS-A3对HL60白血病细胞具有明显的抑制增殖和诱导分化作用。     

六神丸对肝癌BEL7402、肺癌A549和白血病HL60的体外抗肿瘤作用

目的研究六神丸对肿瘤细胞生长的影响。方法采用MTT法,对六神丸进行体外抗肿瘤活性的研究。结果显示六神丸对人癌细胞系,白血病细胞株HL60、肝癌BEL7402H和肺癌A549均有不同程度抑制作用(P<0.01),其中高浓度组对白血病细胞株HL60、肝癌BEL7402H、肺癌A549的抑制率分别达到87.4%、91.3%、80.0%。结论六神丸在实验给药浓度下对上述3种人癌细胞的生长具有一定的抑制作用。     

蛇葡萄素钠协同卡铂体外诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡研究

目的:考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Bax以及Bcl-2表达。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠单独应用及与卡铂联合应用对GLC-82细胞的增殖均具有浓度依赖性的抑制作用;流式细胞仪检测结果表明,蛇葡萄素钠(100、50、25μg/ml)单用组及与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞48 h后,Bax表达上调,且有浓度依赖性;AMP-Na 50μg/ml单独用药组、卡铂25μg/ml单独用药组以及AMP-Na(50、25、12.5μg/ml)与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞48 h后,Bcl-2蛋白的表达下调,但无浓度依赖性。AMP-Na各剂量组(100、50、25、12.5μg/ml)单用组及AMP-Na各剂量组与卡铂25μg/ml联合用药Bax/Bcl-2的比率增高,且有浓度依赖性。结论:蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠可能是通过下调Bcl-2并上调Bax从而促进肿瘤细胞凋亡。     

蟾蜍灵诱导人白血病HL60细胞凋亡的初步研究

目的 :探讨中药蟾蜍灵诱导白血病HL60细胞凋亡作用。方法 :应用台盼蓝染色法测定HL6 0细胞的生长曲线 ,应用相差显微镜、电子显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳等技术分析细胞凋亡。结果 :蟾蜍灵与HL60细胞共育时 ,能明显抑制细胞生长 ,细胞呈典型的凋亡形态学改变 :细胞皱缩 ,染色质凝集 ,沿核膜内侧分布 ,呈新月形 ,可见由膜包被细胞内容物的凋亡小体的产生 ;细胞DNA裂解成 180～200bp及其倍数的片段 ,电泳得到特有的梯形条带。结论 :蟾蜍灵诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的作用机制之一。     

二氢青蒿素联合放疗对肺癌GLC-82细胞凋亡的影响及机制研究

目的研究二氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）联合放疗对人肺腺癌GLC-82细胞周期和凋亡的影响及其机制。方法 MTT法检测不同浓度DHA分别在24、48、72 h对GLC-82细胞的抑制作用;克隆形成实验分析,多靶单击拟合模型方程计算放射增敏比,评价增敏效果;流式细胞术检测DHA联合放疗对GLC-82细胞周期和凋亡的影响;Western blot检测P53、P21、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果不同浓度DHA（4、8、16、32、64、128μg/mL）作用24、48和72 h的IC50值分别为：38.25、20.58、10.36μg/mL,对GLC-82细胞的毒性有明显剂量和时间依赖性,抑制率较空白对照组明显增加（P〈0.01,P〈0.05）;DHA对GLC-82细胞具有放射增敏作用,其增敏比为1.4。DHA联合放疗可使GLC-82细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡,凋亡率为21.5%,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blot表明,DHA联合放疗作用GLC-82细胞后P53和P21的蛋白水平表达增加,同时下调Bcl-2蛋白表达（P〈0.01,P〈0.05）。结论 DHA对肺腺癌GLC-82细胞有较强的细胞毒性和放射增敏作用,其作用机制可能是使GLC-82细胞生长停滞在G0/G1期并诱导细胞凋亡,使S期细胞比例降低;使P53功能恢复,通过抑制Bcl-2蛋白的表达促使凋亡,从而起到杀伤肿瘤的作用。     

活血化瘀类中药水提液对HL—60的细胞毒作用

本文采用细胞培养法,以人早幼粒白血病细胞(HL-60)为靶细胞,观察了41种活血化瘀类中草药水提液(每毫升含0.5克生药)在不同浓度及不同作用时间下对靶细胞的杀伤作用。本结果与多数体外抗癌研究结果一致。提示:1.HL-60细胞可用作体外抗癌筛选的靶细胞。2.应用活血化瘀类中药治疗癌症具有一定的合理性。     

野菊花注射液对人肿瘤细胞SMMC7721、PC3、HL60增殖的影响

目的:探讨野菊花抗肿瘤作用.方法:采用直接将药物加入培养液的方式,以MTT法观察野菊花注射液在不同浓度下对人肿瘤细胞SMMC7721、PC3、HL60增殖的影响.结果:野菊花注射剂在32μl/ml浓度下对人肿瘤细胞株PC3、HL60增殖有明显抑制的作用,但对人肝癌细胞株SMMC7721增殖作用无明显影响.结论:体外实验表明野菊花注射液可抑制人肿瘤细胞株PC3、HL60增殖,提示野菊花注射液具有一定的抑瘤作用.     

墓头回对HL—60细胞诱导分化作用的实验研究

1 材料和方法1.1 墓头回 购自河北省,品种未鉴定。1.2 墓头回水煎液的制备 取墓头回生品50g,粉碎,加蒸馏水500ml,浸泡30min后,100℃水浴蒸发,收集上清液,共提取2次,合并提取液,1000rpm,离心20min,再次100℃水浴蒸发至50ml,该药液浓度为100％,高压灭菌后备用。1.3 细胞与细胞培养 HL-60细胞引自中国医学科学院血液学研究所,培养液为RPMI-1640(GIBCO产品),加入15％胎牛血清,在含5％CO_2的37℃温箱内传代培养。     

人参炔醇对 HL60细胞体外诱导分化作用的研究

目的 通过细胞形态学和增殖动力学研究人参炔醇对HL—60细胞诱导分化作用。方法 采用台盼蓝染色及细胞计数器测定细胞存活量，流式细胞仪检测人参炔醇对细胞周期和分子标志表达的影响，观察信号通路阻断剂对人参炔醇诱导细胞分化的影响。结果 人参炔醇使HL—60细胞倍增时间延长，诱导HL—60向单核细胞分化，细胞集中于G1期，显著上调细胞表面CDl4分子表达，并中度上调CDllb分子表达，RpcAMPS及H7均可使人参炔醇诱导的HL—60细胞NBT阳性率降低。结论 人参炔醇诱导HL—60向单核细胞分化，与细胞内腺苷酸环化酶(cAMP)，蛋白激酶C(PKC)信号通路活化有关。     

斑蝥素对HL—60细胞和QGY7703细胞的作用研究

采用MTT法和流氏细胞仪技术,研究了斑蝥素对HL－60细胞和QGY7703细胞的存活率和细胞周期分布影响。结果表明,斑蝥素对HL－60细胞的IC50是15．34μmol/L,对QGY7703细胞的IC50是18．54μmol/L。按蝥素处理HL－60细胞和QGY7703细胞24h后,G2－M期细胞分布都有所增加,G0－G1期细胞分布都有所降低;斑蝥素处理HL－60细胞24h后,G0－G1期峰前有亚二倍体峰出现,说明斑蝥素在所用剂量下降够诱导HL－60细胞发生凋亡。     

基于聚类分析对中药活性成分逆转HL60/HTM耐药性评价研究

目的:对具有耐药逆转作用的数种中药成分进行聚类分析。方法:MTT比色法测定补骨脂素、补骨脂甲素、姜黄素、槲皮素、贝母碱、异补骨脂定、补骨脂酚、大黄酸八种中药成分HL60/HT细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪测定细胞内化疗药物HT荧光强度及细胞P糖蛋白表达;测定得到的相关数据,通过聚类分析方法进行药物分组。结果:8种药物的逆转倍数在6.2～12.5之间,HL60/HT细胞中HT浓度在9.6～25.6之间,HL60/HT细胞P-gp表达率在29.3～50.1之间。结论:基于4种实验指标可将八种药物按相似性聚类分成3组:补骨脂素、姜黄素、槲皮素3种成分为第一组,补骨脂甲素、贝母碱、异补骨脂定、大黄酸四种成分为第2组,补骨脂酚为第3组。     

蝎毒对白血病HL—60细胞生长的抑制和诱导凋亡作用研究

目的：研究蝎毒对HL－60细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法：应用MTT法观察蝎毒对细胞的抑制作用,光镜、荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变,原位末端标记检测DNA断裂,流式细胞术分析凋亡细胞和bcl-2蛋白表达。结果：蝎毒可明显地抑制HL－60细胞生长和诱导细胞凋亡,作用在一定范围内呈对浓度和时间的依赖性,蝎毒并能下调HL－60细胞bcl-2蛋白表达。结论：蝎毒能抑制HL－60细胞生长和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与bcl－2蛋白表达的下降有关。