HPLC分析大蒜多糖中的单糖

目的建立一种反相高效液相色谱法（RP—HPLC）分析大蒜多糖中的单糖组成及摩尔比。方法大蒜多糖样品经2mol·L^-1硫酸降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化,采用Shimadzu VP—ODS柱（150mm×4．6mm,5μm）分离,以乙腈-醋酸铵缓冲溶液（取醋酸铵7．708g加水溶解并稀释至1000mL,用醋酸调pH5．5（22：78）为流动相,流速为0．8mL．min^-1,在245nm处检测单糖的衍生化产物。结果大蒜多糖中甘露糖（Man）、鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcUA）半乳糖醛酸（GalUA）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、阿拉伯糖（Arab）7种单糖的摩尔比为4．31：4．23：4．19：9．13：27．4：4．99：3．81。结论本方法灵敏度高,结果准确可靠,可用于大蒜多糖的单糖组成测定及质量控制。     

柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成

目的 合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法 采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C₁₈柱;流动相：0.1 mol·L^-1的磷酸盐缓冲液(pH 6.7)-乙腈(83∶17);流速：1 mL·min^-1;检测波长：245 nm;进样量：20 μL;柱温：室温。结果 蒲公英多糖由D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖组成,以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法,Rha∶Glc∶Gal∶ Ara=0.088∶0.500∶0.190∶0.340;超声提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.050∶0.350∶0.080∶0.320;酶提取法,Rha∶Glc∶ Gal∶Ara=0.270∶0.630∶0.330∶0.460;超声协提取同酶法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara =0.078∶0.550∶0.130∶0.170。结论 改进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点,可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔比的测定。     

柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成

目的 合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法 采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C₁₈柱;流动相：0.1 mol·L^-1的磷酸盐缓冲液(pH 6.7)-乙腈(83∶17);流速：1 mL·min^-1;检测波长：245 nm;进样量：20 μL;柱温：室温。结果 蒲公英多糖由D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖组成,以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法,Rha∶Glc∶Gal∶ Ara=0.088∶0.500∶0.190∶0.340;超声提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.050∶0.350∶0.080∶0.320;酶提取法,Rha∶Glc∶ Gal∶Ara=0.270∶0.630∶0.330∶0.460;超声协提取同酶法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara =0.078∶0.550∶0.130∶0.170。结论 改进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点,可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔比的测定。     

虫草多糖中单糖组成的柱前衍生化HPLC分析

建立了柱前衍生化HPLC法测定虫草多糖中单糖的组成及摩尔比。采用C18柱,以0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7)-乙腈(83∶17)为流动相,检测波长254nm。衍生化试剂为1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮。所测3批样品中虫草多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,单糖的摩尔比约为2∶2∶1。平均回收率分别为101.0%、98.6%和99.2%,RSD分别为1.9%、1.6%和1.2%。     

猪苓多糖的PMP柱前衍生化-HPLC指纹图谱研究

目的:建立猪苓多糖的柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其主要单糖组分含量,为猪苓药材的质量评价提供参考。方法:11批不同产地猪苓药材经水提醇沉、Sevage除蛋白后得到猪苓多糖。多糖经三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后,进行HPLC分析。色谱柱为HypersiL BDS C18,流动相为0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.84)-乙腈(84∶16,V/V),检测波长为254 nm,柱温为30℃,流速为1 mL/min,进样量为20μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立11批多糖样品的指纹图谱并进行相似度评价,通过与对照品比对进行色谱峰指认,再采用SPSS 23.0软件进行聚类分析,并测定多糖中主要单糖组分的含量。结果:11批猪苓多糖样品HPLC指纹图谱中共呈现出3个共有峰,分别指认为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,各批次样品的相似度均大于0.94。聚类分析将11批多糖样品分为3类,药材编号为S1～S6、S8的样品聚为一类,药材编号为S7、S10、S11的样品聚为一类,药材编号为S9的样品单独聚为一类。含量...     

柱前衍生化高效液相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成

［摘要］目的建立柱前衍生化高效液相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成。 方法用稀碱浸提法提取茯苓多糖,用三氟乙酸（TFA）水解,通过1 苯基 3 甲基 5 吡唑啉酮（PMP）衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱（RP HPLC）250 nm紫外检测和梯度洗脱,研究茯苓多糖的单糖组成。结果6种标准单糖的衍生物实现了良好的分离并具有良好的峰形。茯苓多糖是由葡萄糖组成的均一多糖,与文献报道的一致。结论该方法简便,结果准确,可用于茯苓多糖或者其他多糖的单糖组成分析。     

柱前衍生化HPLC法测定疏血通注射液及其原药材中糖的含量

目的:测定疏血通注射液及其原药材水蛭、地龙中游离糖和多糖的含量。方法:采用PMP柱前衍生化法,对疏血通注射液及水蛭、地龙药材进行分析,色谱柱为Phenomenex Prodigy ODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为20 mmol.L-1醋酸铵-乙腈,梯度洗脱;检测波长为254nm;流速为1.2 mL.min-1。结果:在确定的分析条件下,葡萄糖、甘露糖和半乳糖在测定范围内都有良好的线性,甘露糖的平均回收率为101%,葡萄糖的平均回收率为96.8%,半乳糖的平均回收率为97.3%。结论:该方法简便、准确、稳定,适合用于疏血通注射液及原药材中游离糖和多糖含量的测定。     

1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮糖衍生物在反相高效液相色谱法分离中保留行为的探讨

本文针对反相HPLC分离中,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)先于PMP糖衍生物(PMP-SD)出峰的现象,通过控制降解β-环糊精得到系列寡糖,PMP衍生后采用HPLC法对其保留行为进行考察,并结合相关文献以及不同条件下PMP和PMP-SD的结构进行讨论,来说明其极性变化的原因。结果表明,吡唑啉酮环为烯醇结构时是PMP的优势构象,烯醇基解离使PMP极性显著增大。衍生糖上顺式结构的C-2、C-3位羟基仅可与一个PMP吡唑啉酮环上的酮基通过氢键环合,抑制酮基向烯醇基的转变,使衍生糖上的PMP极性降低。衍生糖上反式结构的C-2、C-3位羟基可与2个PMP上的酮基通过氢键环合,使衍生糖上PMP的极性进一步降低。在使用高盐浓度的流动相对PMP-SD的洗脱中,糖链的高极性基本不发挥作用。本文为糖类成分反相HPLC分离时色谱柱的选择和更有针对性的条件优化提供参考。     

柱前衍生化HPLC法分析沙参多糖中单糖组成

目的建立北沙参多糖中单糖的组成和含量的检测方法。方法以三氟乙酸水解沙参多糖,水解产物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)生成衍生化产物,采用RP-HPLC法,色谱柱:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:体积分数为19%的乙腈溶液-醋酸铵缓冲液(醋酸铵-冰醋酸,pH5.5,体积比为100∶1),等度洗脱,流速:1.0 mL.min-1,检测器:紫外检测器,检测波长:250 nm,柱温:35℃。结果沙参多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖等8种单糖(有2种未鉴定出的单糖)组成。D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖的线性分别为4~80μmol.L-1(r=0.999 0)、12~240μmol.L-1(r=0.999 0)、5.6~1.12×103μmol.L-1(r=0.999 4)、1.54×103~30.80×103μmol.L-1(r=0.999 0)、80.0~1.6×103μmol.L-1(r=0.999 0)、64.00~1.28×103μmo.lL-1(r=0.9992);平均加样回收率分别为94.0%、88.5%、93.9%、95.9%、89.2%、90.8%。含量分别为0.22%、0.61%、8.55%、72.88%、4.79%、2.71%。结论该方法可以准确的测定出北沙参多糖中含有的各种单糖和含量。     

华山松松塔多糖中单糖组分的HPLC法分析及测定

建立了高效液相色谱法分析并测定华山松松塔多糖中的单糖.以三氟乙酸水解华山松松塔多糖,水解物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)进行衍生化.使用Agilent Venusil XBP-C18色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L乙酸铵缓冲液(pH 5.5)(20:80)为流动相,检测波长250 nm.华山松松塔多糖由10种单糖(其中3种未鉴定)组成.已鉴定出的7种单糖均在0.005～0.2 mg/ml范围内线性关系良好,回收率为89.2％～101.6％,RSD＜3.0％.在华山松松塔提取物C、D、E和F中的D-甘露糖、鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和D-阿拉伯糖的相对平均含量分别为0.144％～1.24％、0.13％～2.14％、0～0.99％、0.17％～2.27％、0.76％～2.73％、0.14％～9.17％和0.16％～ 8.16％.     

高效液相色谱柱前衍生化方法分析血浆中3-O甲基葡萄糖（英文）

目的：本文首次建立了用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）作为柱前衍生化试剂对3-O-甲基-葡萄糖（3-OMG）进行衍生化的方法,并应用此方法对大鼠血浆中的3-OMG进行分析。方法：70℃水浴时,3-OMG在0.4 mol/L的NaOH条件下和PMP进行反应。衍生物采用反相高效液相色谱法进行分析,紫外检测波长为245 nm。结果：线性系数在0.991以上,最低定量限0.0078 mg/mL。回收率在98%～105%之间,且日间与日内变异不高于12%。本方法成功应用于糖尿病大鼠血浆中3-OMG的分析。结论：本方法简便、高效,适合对正常和糖尿病大鼠的血浆3-OMG进行分析。     

高效液相色谱法分析松茸多糖的单糖组成

目的:测定松茸多糖中单糖的组成及其摩尔比。方法:松茸多糖采用2 mol·L-1三氟醋酸水解后通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用高效液相色谱法梯度洗脱测定;检测波长250 nm。结果:松茸多糖由D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖组成,摩尔比为18.92∶2.68∶1.63∶1。各单体线性关系良好,r>0.998。D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖平均回收率分别为94.0%,88.5%,93.9%,95.9%。结论:该方法简便、准确、重复性良好,适用于分析松茸多糖中单糖组成。     

柱前衍生化毛细管区带电泳法测定六味地黄丸中蜜二糖的含量

目的建立1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化毛细管区带电泳法测定六味地黄丸中蜜二糖的含量。方法采用熔融石英毛细管(45 cm×50μm,有效长度为36.7 cm),运行缓冲液为110 mmol.L-1硼酸(pH 10.0)溶液、分离电压为12 kV,检测波长为245 nm,温度为30℃,压力自动进样(50 mbar×6 s)。结果蜜二糖质量浓度在30.7~614.4 mg.L-1内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率为98.9%,RSD为2.6%(n=9)。结论该方法可作为六味地黄丸的质量控制方法之一。     

柱前衍生化HPLC法测定不同基源金线莲多糖的单糖组成

目的:建立测定不同基源金线莲多糖中单糖组成的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Alltima-C18,柱温为30℃,流动相为0.1 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(Na H2PO4-Na2HPO4,p H=6.7)-乙腈(83∶17,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为254nm。结果:花叶开唇兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.52∶0.53∶1.00∶5.07∶1.58;台湾银线兰多糖由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量之比为1.10∶0.50∶1.00∶1.92;滇越金线兰多糖由甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其物质的量之比为2.95∶0.28∶0.53∶1.00∶9.30∶2.26。甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的进样量分别在0.32~3.18μg(r=0.999 9)、0.08~0.83μg(r=0.9999)、0.08~0.78μg(r=0.999 9)、0.13~1.32μg(r=0.999 9)、0.38~3.75μg(r=0.999 8)、0.24~2.43μg(r=0.999 7)范围内与各自峰面积呈良好线性关系;精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为99.34%、98.43%、99.79%、98.93%、99.50%、99.71%(n=6)。结论:该方法简单、快速、分离效率高,可用于测定不同基源金线莲多糖中的单糖组成。     

天然和人工冬虫夏草多糖组分的HPLC分析

目的:比较天然和人工冬虫夏草多糖各组分的分子量分布及其构成比。方法:高效液相色谱法,采用TSK-GelG3000SW_(XL)分析柱(5μm,7.8mm×30cm)和TSK-Gel G3000SW_(XL)预柱(7μm,6.0mm×4cm),流动相为含0.1mol·L~(-1)硫酸钠的10mmol·L~(-1)磷酸盐缓冲液(pH 6.8),流速1mL·min~(-1),柱温和检测器温度均为25℃,示差检测,进样量25μL,GPC软件分析。结果:天然虫草多糖各组分构成比相似,均以大分子量(>1.5×10~5)组分为主(>50％);人工虫草多糖各组分构 成则差异明显,其中华东产人工虫草多糖与天然虫草多糖构成最为相似。结论:天然和人工虫草多糖构成存在一定差异,多糖组分的构成比应作为虫草的质量控制指标。     

Rp－HPLC法测定血清中的抗生育甾体药物利洛司酮

以ＲＵ４８６为内标，建立了血清样品中新型抗孕激素甾体药物利洛司酮（ｌｉｌｏｐｒｉｓｔｏｎｅ）的反相高效液相色谱法。色谱分析条件为μＢｏｎｄａｐａｋＣ１８柱１０μｍ，３００ｍｍ×３．９ｍｍＩＤ；流动相为甲醇－二氯甲烷－１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液（ｐＨ４．０）（６７：５：２８ｖ／ｖ）；紫外检测波长为３０２ｎｍ。利洛司酮的检测限为１ｎｇ（Ｓ／Ｎ≥４：１）。血清样品经二次液一液超声振荡萃取后，得到了较好的净化。血清样品中利洛司酮的方法回收率为１０３．３％，日内精密度及日间精密度平均ＲＳＤ为３．５１％及２．９２％。在浓度为１０～１０００ｎｇ·ｍｌ－１血清范围内呈线性关系。     

新疆药桑叶多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的分析新疆药桑叶多糖中单糖的组成及含量。方法将新疆药桑叶多糖用4mol·L-1三氟醋酸水解12h,加入10mg盐酸羟胺、0.5mL吡啶和0.5mL醋酸酐于水解产物中进行衍生化反应,反应生成糖腈乙酸酯衍生物,采用气相色谱法测定药桑叶多糖的单糖组成。用Rtx-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm,0.25μm);载气为N2;进样温度为235℃;检测器温度为280℃;进样量为1.0μL。柱温为程序升温,初始柱温155℃,维持1min,以0.4℃·min-1的速率升高到160℃,维持2min后,以0.5℃·min-1的速率升高到169℃,再以0.2℃·min-1的速率升高到172℃。结果新疆药桑叶多糖中鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔组成比例为7.16∶9.59∶1.09∶1.05∶12.36∶15.52。结论该方法简便、灵敏、准确可靠,可用于新疆药桑叶多糖中单糖的含量测定。     

怀牛膝多糖的柱前衍生化-HPLC指纹图谱建立及单糖成分含量测定

目的:建立怀牛膝多糖的柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,测定其主要单糖成分的含量,为怀牛膝饮片的质量评价提供参考.方法:以10批不同生产厂家的怀牛膝饮片为样品,采用水提醇沉法提取其多糖后,以三氟乙酸进行水解,再采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化处理后,进行HPLC分析.色谱柱为Hanbon Hede...     

PMP柱前衍生化-HPLC法分析不同生长年限黄芪中6种单糖的含量

目的:分析并比较不同生长年限黄芪中6种单糖的含量.方法:取来自3个产地的2～4年生黄芪药材,经水提醇沉、Sevage除蛋白后制得黄芪多糖;将上述多糖经三氟乙酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色谱法测定其中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等6种单糖的含量.以Symmetry...     

HPLC法测定大蒜、蒜氨酸中间体及单体的蒜氨酸含量

目的：建立高效液相色谱测定大蒜、蒜氨酸中间体及单体中的蒜氨酸含量的方法。方法：采用Hypersil BDS C18（4．6mm&#215;25cm，5μm）柱，分别以0．04％CF3 COOH水溶液和甲醇-0．02％CF3 COOH水溶液（5：95）为流动相，流速0．5mL&#183;min^-1，检测波长214nm。结果：蒜氨酸在26．3～263．2μg&#183;mL。呈良好线性关系，相关系数均为0．9999，方法灵敏、准确、重复性好，平均回收率（n=9）分别为99．1％和100．1％，日内精密度RSD（n=5）分别为0．56％和0．35％，日间精密度RSD（n=5）分别为0．57％和0．99％。结论：试验表明该方法简便、快速、适用性好。