小菜蛾nAChR靶标敏感性与沙蚕毒素类药物的抗性关系

【目的】研究抗杀虫双、杀螟丹和溴氰菊酯品系的神经乙酰胆碱受体及与它们对沙蚕毒素类药物的抗性间的关系。【方法】测定不同品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体与125I标记的α-银环蛇毒素的结合率。【结果】抗杀虫双、杀螟丹品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体对沙蚕毒素药物有显著的靶标不敏感性,它们与配体的结合率大约分别是敏感品系的66%和60%,在溴氰菊酯抗性品系中没有明显变化。【结论】神经乙酰胆碱受体对杀虫剂敏感性下降可能是小菜蛾对沙蚕毒素药物产生抗性的一种作用机理。     

Functional identification of C-type lectin in the diamondback moth,Plutella xylostella (L.) innate immunity

C-type lectins (CTLs) are a superfamily of Ca²+-dependent carbohydrate-recognition proteins, and an important pattern recognition receptor (PRR) in insect innate immunity which can mediate humoral and cellular immunity in insects. In this study, we report a novel dual carbohydrate-recognition domain (CRD) CTL from Plutella xylostella which we designate PxIML. PxIML is a protein with a 969 bp open reading frame (ORF) encoding 322 amino acids, containing a signal peptide and a dual-CRD with EPN (Glu₁₂₄-Pro₁₂₅-Asn₁₂₆) and QPD (Gln₂₇₄-Pro₂₇₅-Asp₂₇₆) motifs. The expression of PxIML mRNA in the fat body was significantly higher than in hemocytes and midgut. The relative expression levels of PxIML in the whole insect and the fat body were significantly inhibited after infection with Bacillus thuringiensis 8010 (Bt8010) at 18 h, while they were significantly upregulated after infection with Serratia marcescens IAE6 or Pichia pastoris. The recombinant PxIML (rPxIML) protein could bind to the tested pathogen-associated molecular patterns (PAMPs), and the bacteria of Enterobacter sp. IAE5, S. marcescens IAE6, Staphylococcus aureus, Escherichia coli BL21, and Bt8010 in a Ca²⁺-dependent manner, however, it showed limited binding to the fungus, P. pastoris. The rPxIML exhibited strong activity in the presence of Ca²⁺ to agglutinate Bt8010, Enterobacter sp. IAE5 and S. aureus, but it only weakly agglutinated with E. coli BL21, and could not agglutinate with S. marcescens IAE6 or P. pastoris. Furthermore, the rPxIML could bind to hemocytes, promote the adsorption of hemocytes to beads, and enhance the phenoloxidase (PO) activity and melanization of P. xylostella. Our results suggest that PxIML plays an important role in pathogen recognition and in mediating subsequent humoral and cellular immunity of P. xylostella.     

10%阿维·毒乳油对小菜蛾的田间药效评价

经过两年田间试验结果表明,10%阿维.毒乳油1500m l/hm2,药后3~7d对小菜蛾的防效为85.43%~87.03%,与对照药剂1.8%集琦虫螨克乳油450m l/hm2的防效相当,而与48%毒死蜱乳油600m l/hm2的防效达极显著差异。     

小菜蛾细胞色素P450基因的cDNA片段克隆及其序列分析

以小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]3龄幼虫(对氰戊菊酯的LC50为38.75 mg/L)的总RNA为模板,利用简并引物,采用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出1个长度为240 bp的cDNA片段。序列分析结果表明,扩增出的cDNA片段与细胞色素P450的Cyp6基因有较高的同源性。     

小菜蛾对杀螟丹抗药性的生化遗传研究

采用室内选育的小菜蛾对杀螟丹的抗性品系和敏感品系,研究了各杂交世代小菜蛾多功能氧化酶（ＭＦＯ）,乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）和羧酸酯酶活性。结果表明：（１）抗性品系（抗性提高３５．５倍）多功能氧化酶环氧化活性比敏感品系高（１．８３倍）,并随着杂交后代中对杀螟丹抗性水平的下降而降低;（２）抗药性品系和敏感品系的ＡｃｈＥ和ＣａｒＥ活性没有明显差异。     

抗杀虫双和抗杀螟丹小菜蛾近等基因系的培育

将小菜蛾抗性品系与敏感品系杂交,Ｆ１代用能杀死全部敏感个体和部分杂合个体的剂量进行选择;存活个体与敏感品系回交,其后代再用上述适量药剂进行选择;存活个体与敏感品系回交。通过１２代回交,建立了抗杀虫双和抗杀螟丹近等基因系,并对其多功能氧化酶环氧化活性和生物学特性进行了比较研究。结果显示：（１）抗杀虫双和抗杀螟丹小菜蛾近等基因系的艾氏剂环氧化活性均高于敏感品系,分别为１．５６倍和１．９７倍;（２）在回交后代中,抗性水平逐代降低。小菜蛾对杀虫双和杀螟丹的抗性并未付出明显的生物学代价。     

Sub-Lethal Effects of Fenvalerate on the Development,Fecundity, and Juvenile Hormone Esterase Activity of Diamondback Moth,Plutella xylostella （L.）

The toxicities of fenvalerate （20% EC） to the 3rd instar larvae of diamondback moth （DBM）, Plutella xylostella （L.）, reared on three host plants viz., radish, oilseed rape, and cabbage were tested. The LC50 values of fenvalerate to the 3rd instar larvae of DBM varied with host plants, however, there wasn＇t any significant difference among them （P〉 0.05）. Similarly, DBM fed on three host plants had same pupal weight, pupal period, pupation rate, adult emergence rate, female ratio, and fecundity. The activity of juvenile hormone esterase （JHE, EC 3.1.1.1） in the 3rd instar larvae of DMB did not significantly vary with host plants, either. These suggested that DBM had similar fitness on the three host plant species. When fed on the host plants pretreated with fenvalerate at the concentrations equivalent to LC20, LC50 and LC50, the pupation rate, pupal weight, adult emergence rate, female ratio, fecundity, and JHE activity of the tested insects were declined as compared with insects in control treatments fed on the same host plant species. Furthermore, the pupal period of the tested insects was extended after fenvalerate treatment. The decrease in JHE activity after fenvalerate treatment in the tested insects could partly explain the changes in the mentioned growth parameters. Whether the role of fenvalerate in the inhibition of JHE activity could serve as a new way to control DBM needs further investigation.     

小菜蛾对沙蚕毒素类杀虫剂抗性的生化遗传分析

利用室内选育的小菜蛾抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系和敏感品系 ,研究了各杂交世代小菜蛾的生物学特性以及蛹期的乙酰胆碱酯酶 (AchE)和羧酸酯酶 (CarE)活性。结果表明 :杀虫双和杀螟丹的选择作用没有改变小菜蛾的性比、蛹重和羽化率等生物学特性 ;抗性品系和敏感品系的AchE和CarE活性没有明显差异。由此进一步证明AchE和CarE的活性变化不是小菜蛾对杀虫双和杀螟丹抗性的主要机理。     

公主岭地区小菜蛾发生动态和世代的研究

１９８８年在公主岭的春、夏、秋三茬甘蓝田系统调查了各虫态数量，性诱器监测了成虫数量。结果表明，１９８８年小菜蛾在公主岭主要发生４代，部分发生５￣６代。     

小菜蛾储存蛋白基因的克隆与表达分析

克隆和分析了2个小菜蛾的储存蛋白基因——Px AJSP-1和Px BJHSP-2.其中,Px AJSP-1属于芳基贮存蛋白,而Px BJHSP-2属于富甲硫氨酸储存蛋白.进化树分析表明,它们在同一目昆虫中相对保守.利用实时荧光定量PCR分析其表达模式,发现Px AJSP-1和Px BJHSP-2在4龄幼虫和蛹期高表达,且在脂肪体中的表达量远高于其他组织.     

小菜蛾研究的概况与进展

简述了小菜蛾（Plutella xylostella)在种群饲养，生物学，生态学特性，天敌昆虫,病原微生物、寄主植物及抗药性研究方面的概况与进展，对不同饲养方法的特点，已报道的生长发育起点温度，有效积温常数值以及与小菜蛾生长发育有关的空气相对湿度范围，光照对成虫交尾行为的影响情况进行了比较。     

田间小菜蛾对9种杀虫剂的抗药性测定

在室内采用浸叶法测定湖南3个蔬菜产区(长沙市长沙县、株洲市茶陵县和永州市祁阳县)的田间小菜蛾对9种药剂的抗药性。试验结果表明,小菜蛾对高效氯氰菊酯抗性达到极高水,对定虫隆、阿维菌素和茚虫威抗性属于高抗水平,对溴虫腈,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素属于中抗水平,对氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌相对敏感。因此,这3个地区的小菜蛾防治应该减少溴虫腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素的使用,交替使用氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌,停止阿维菌素、茚虫威、高效氯氟氰菊酯的使用,以便延缓抗药性的产生与发展。     

小菜蛾抗药性研究及其治理

小菜蛾是一种世界性十字花科蔬菜害虫，巳报道小菜蛾对50多种杀虫剂产生抗药性，包括有机氯、有机磷、氨基甲酸酯、拟除虫菊酯类、昆虫生长调节剂及苏云金杆菌（Bt）类等杀虫剂。本全面阐述了国内外小菜蛾抗药性研究概况，包括小菜蛾抗性发展、交互抗性、抗性稳定性、抗性机理及抗性遗传等方面的研究，并对小菜蛾抗药性的治理策略进行讨论。     

小菜蛾过氧化氢酶和过氧化物酶与耐药性的关系

毒力测定结果表明 ,小菜蛾幼虫对抑太保的耐药力 3龄是 2龄的 2 .65倍 ,4龄是 2龄的 4.0 7倍 .抑太保处理后 5 h,2、3、4龄幼虫过氧化氢酶 (CAT)活力均降至最低 ,分别为对照的 71 .9%、80 .9%和 90 .2 % ;处理后 1 0 -1 5 h,与对照相比 ,4龄幼虫 CAT活力上升程度最大 ,2龄最小 .H2 O2 由 0增加至 1 .1 7m L,CAT活力呈线性关系上升 .抑太保处理后 ,过氧化物酶 (POD)活力除 2龄幼虫在处理后 5 h下降 ,仅为对照的 65 .0 % ,3龄幼虫在处理后 1 h为对照的 99.2 %外 ,3个虫龄幼虫的 POD活力均高于对照 .H2 O2 由 0增加至 0 .1 m L,POD活力呈线性关系上升 .小菜蛾 2、3和 4龄幼虫的 CAT和 POD活力与耐药性存在着一定的相关性     

2.5%菜喜胶悬剂对甘蓝小菜蛾和菜青虫的防效

生物源杀虫剂2.5%菜喜胶悬剂防治甘蓝小菜蛾和菜青虫的田间药效试验结果表明,2.5%菜喜胶悬剂1 000、1 500、2 000、3 000倍液防治甘蓝小菜蛾和菜青虫的速效性好,药后第1 d的防效优于20%氰戊菊酯乳油2 000倍液和20%米满悬浮剂2 000倍液.以1 000倍液防效最好,药后第1天、第3天、第7天对小菜蛾的防效分别达91.42%、94.46%、92.77%,对菜青虫的防效分别达93.18%、96.06%、94.48%.示范结果表明,2.5%菜喜胶悬剂1 000倍液对小菜蛾的防效为89.74%～92.76%,对菜青虫的防效 90.19%～93.47%.从防效、成本等方面综合考虑,大面积示范推广该药剂的适宜剂量为1 000倍液.     

10种植物提取物对小菜蛾产卵忌避作用研究初报

【目的】寻找新的小菜蛾生物防治方法,为植物源农药的研究和开发提供科学依据。【方法】以10种产于广西的楝科、番荔枝科、无患子科和报春花科植物提取物对小菜蛾成虫进行室内产卵忌避作用试验。【结果】以地黄连（Melia sinica）、香椿（叶）（Toona sinensls）、番荔枝（Annona squamosa）、四瓣米仔兰（A．terapetala）、灵香草（Lysimachia foenurn-graeeurn）等植物提取物处理后48h对小菜蛾成虫的产卵忌避率分别为86．21％、94．69％、97．92％、98．91％和100．00％。【结论】地黄连、香椿（叶）、番荔枝、四瓣米仔兰、灵香草等5种植物对小菜蛾成虫有强烈的产卵忌避作用,在蔬菜害虫生态控制中均具有广阔的应用前景和开发潜力。     

广东省蔬菜小菜蛾抗性监测与治理研究

连续4年(1999～2002年)就深圳、汕头、广州和高要地区的小菜蛾对阿维菌素、锐劲特、高效氯氰菊酯、Bt的抗性进行监测。结果表明，4个地区小菜蛾都对高效氯氰菊醋产生了明显的抗性，总体趋势均是抗性水平逐年提高，特别是深圳地区，2002年的LC50值高达1037．97μg／mL，比1999年提高近1倍；深圳地区小菜蛾对阿维菌素、锐劲特和Bt都表现较高抗性水平，高要地区小菜蛾对阿维菌素的抗性上升幅度大，广州地区小菜蛾对锐劲特的抗性较高；除深圳外，其他3个地区对Bt的抗性水平均较低。根据抗性监测结果，广东省植保总站提出了大力推广高效、低毒、低残留农药和生物农药，合理使用农药及轮换用药等抗性治理措施，并通过建立蔬菜小菜蛾抗性综合治理示范区，有效地控制了蔬菜小菜蛾的发生危害。     

小菜蛾产卵行为与寄主植物次生物质关系研究进展

在影响小菜蛾成虫产卵行为的各种因素中,十字花科植物次生物质中的特异性化合物发挥着重要的作用,对其进行深入研究,不仅有助于阐明小菜蛾的寄主选择机理,同时也可为提出新的小菜蛾防治策略提供理论依据。重点阐述对小菜蛾成虫有引诱和刺激产卵作用的十字花科植物特异性化合物的研究进展,详细分析影响小菜蛾成虫产卵各种因素,探讨小菜蛾产卵选择性机制,分析和讨论昆虫行为与寄主植物次生物质关系研究的前景。     

小菜蛾寄生性天敌的动态调查与作用分析

停止使用化学杀虫剂1年后,调查梅菜不同品种上小菜蛾寄生性天敌的寄生作用。结果表明,菜蛾绒茧蜂(Cotesia plutellae)在矮脚白梗仔、三联种上发生2个世代,高峰期分别为11月中下旬与1月上中旬,其平均寄生率分别为20.83%与31.73%、16.71%与22.63%。菜蛾啮小蜂(Oomyzus sokolowskii)在矮脚白梗仔、三联种上发生1代,高峰期为11月20日,寄生率分别达28.75%、26.00%。将寄生性天敌的作用合并,早中熟品种上寄生性天敌的作用比晚熟品种强。其中以矮脚白梗仔和大梗齐尾品种上的寄生作用最大,排除作用控制指数EIPC(Exclusive index of population control)分别为2.634 1和2.355 0,即如果排除寄生性天敌,小菜蛾将分别增长2.634 1倍、2.355 0倍。晚熟品种矮脚黒叶仔、陂(B)种上寄生作用较强,EIPC分别为1.639 9和1.589 4。     

阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾谷胱甘肽S-转移酶的影响

研究了阿维菌素和高效氯氰菊酯亚致死剂量对小菜蛾Plutella xylostella(L.)谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响。用亚致死剂量的阿维菌素和高效氯氰菊酯处理小菜蛾敏感品系后，二处理组的CSTs活性比对照组分别增长了42％和70％；抗性品系经上述2种药剂同样处理后的活性比对照分别降低了45％和30％。对GSTs的动力学研究表明，敏感品系用高效氯氰菊酯处理后GSTs的Km值比对照降低了近40％，而阿维菌素处理后其Km值变化不大，说明高效氯氰菊酯处理后，GSTs对底物的亲和力明显增强；抗性品系中二处理组GSTs的Km值与对照无显著差异。