生防菌剂田间试验示范

田间试验、示范结果表明生防剂ＩＰＣ、ＶＣ能提高烟株鲜根重；统计分析表明，ＩＰＣ、ＶＣ能显著降低烟株的根结百分率、根坏死百分率和病级（０．０５水平显著），对烟草根结线虫病有显著的防治效果，达到增产、增值和提高经济效益的目的；各项调查表明ＶＣ的防效优于ＩＰＣ的防效；跟踪调查表明生防剂对根结线虫病有多年的防治作用，而化学杀线剂必须年年增施。     

烟草灰霉病复合生防细菌的筛选

采用平板对峙法和孢子萌发法,测定470株烟草内生细菌对烟草灰霉病菌的抑菌活性,初筛出抑菌作用较强的27株菌株;利用烟叶组织法进行复筛,获得防治效果超过50%的12株菌株,属于芽孢杆菌属或假单胞菌属;测试了7株生防菌之间的亲和性,除菌株Y98外,其他菌株之间均表现亲和;根据菌株亲和性及生防效果,选择5株生防菌株进行混配,测定其对烟草灰霉病的防治效果,发现芽孢杆菌菌株Y11与假单胞菌菌株Y141在其比例为2:1时的防效较好,且高于单菌株处理。      

烤烟霉变病原菌鉴定及其生防菌筛选

为明确云南省大理州烟叶烘烤变黄期叶柄和部分叶片霉变的病原菌,依据柯赫氏法则,采用组织分离法分离病原菌,经室内和烤房内验证致病性,结合形态学和多基因序列分析鉴定病原物种类,运用平板拮抗法和活体生测法筛选生防菌。结果表明,分离物的形态学与根霉属（Rhizopus sp.）真菌相似,其ITS序列与少根根霉菌（Rhizopus arrhizus.,异名Rhizopus oryzae）模式菌株CBS 112.07T序列一致性大于99%;基于内转录间隔区（ITS）、肌动蛋白（ACT）和翻译延伸因子1-α(TEF)的多基因序列系统发育分析也表明,病原菌与少根根霉菌亲缘关系最近。综合形态学和多基因序列分析结果,确定烤烟霉变病病原菌为少根根霉菌。通过平板对峙法筛选获得5株抑菌能力较强的拮抗菌,其中芽孢杆菌（Bacillus spp.）Z002和05-1205在烤房内的防治效果均在70%以上。     

肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对品质的影响

为研究肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对番茄果实品质的影响,在离体条件下分别研究肉桂醛对
灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发的抑制作用,采用人工活体接种法研究肉桂醛对番茄果实灰霉病斑的控制作用,及
其对番茄自然发病果实的品质的影响。结果表明,肉桂醛对灰葡萄孢菌的菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制作
用,对菌丝生长的EC50值为95.6 μg/mL,质量浓度为60 μg/mL时对孢子萌发抑制率为100%;活体条件下肉桂醛能够
有效地抑制番茄果实采后灰霉病病斑的扩展,以4 000 μg/mL效果最好,且在此质量浓度条件下,对于降低果实质
量损失率,维持番茄硬度、可溶性固形物、可滴定酸和VC含量均具有较好的效果。4 000 μg/mL肉桂醛处理能够有
效地控制番茄采后灰霉病的发生及延长其保鲜期。     

葡萄灰霉病生防菌株的筛选及其拮抗机理初探

以新疆哈密瓜、蟠桃及红枣中分离出的59株内生细菌为出发菌株,采用离体实验和活体实验,从中筛选出11株对葡萄灰霉菌具有较好抑制作用的菌株;经低温作用、农药耐受性及致病菌广谱性等复筛实验,从红枣中获得1株性能优良的目标菌株T2,该菌在0 ℃条件下对葡萄灰霉菌的抑菌率可达58.43%,农药耐受性达68.2%～98.4%,对致病菌具有广谱抗性,其中桃褐腐病菌和草莓灰霉菌的病原菌菌落直径均小于30 mm,葡萄炭疽菌病原菌菌落直径小于50 mm。经过形态、生理生化和16S rDNA同源性分析,确定菌株T2为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,该菌主要依靠菌体本身和重寄生作用对葡萄灰霉菌发挥拮抗作用。     

烟草野火病拮抗生防菌的筛选、鉴定与应用

为筛选出烟草野火病拮抗生防菌,开发防治烟草野火病的新型生物农药,降低烟叶农药残留,提高烟叶的安全性,从烟田采集的健康烟草叶片经平板划线法分离和纯化后得到287个细菌分离物,从中筛选到14个对烟草细菌性野火病有抑制作用的拮抗生防菌,测得其中具有较强抑制作用的菌株抑菌带宽度为9.3 mm,经16S rDNA序列鉴定,该菌属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。烟草叶片经该拮抗菌液诱导后接种,叶片内主要防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性均显著增强。防效测定表明:施用生防剂后接种野火病菌的处理,拮抗菌株防治效果达97.54%,对照农用链霉素防治效果为41.44%。先接种野火病菌后施生防剂的处理,拮抗菌株防治效果达51.40%,对照农用链霉素防治效果为50.69%。说明该拮抗菌株的预防效果高于当前生产上使用的农用链霉素,且其预防效果优于治疗效果。     

两株生防菌对烟草黑胫病的抑制活性及其鉴定

为测定烟草黑胫病生防菌K9-3和L14-2两菌株的生防潜力,通过对峙培养法、孢子萌发试验和盆栽试验测定对烟草黑胫病病原菌的抑制能力,以双层滤纸法和盆栽检测法测定在烟草根际定殖能力,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析,鉴定K9-3和L14-2两株生防菌。结果表明:在室内试验中,这两株生防菌可抑制烟草黑胫病病原菌菌丝的生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发;在盆栽试验中,有效防治烟草黑胫病,L14-2对烟草黑胫病的防治效果达到96.29%,K9-3的防治效果为77.78%。同时,K9-3和L14-2均具有良好的根际定殖能力,以双层滤纸法测定其在烟草根部的定殖密度分别为1.30×105cfu.cm-1和7.00×104cfu.cm-1,在盆栽试验中两菌株在烟草根际土壤和烟草根部保持一定的定殖密度,在烟草根际土壤中的定殖密度随着时间经过有所下降,但在烟草根部定殖密度均稳定保持在105cfu.g-1以上。另外,两菌株的鉴定结果,K9-3鉴定为普城沙雷菌,L14-2鉴定为绿针假单胞菌。     

猕猴桃灰霉病生防真菌的分离与鉴定

为了获得对猕猴桃灰霉病具有较高拮抗活性的生防菌株,采用系列稀释法和平板涂布法从猕猴桃果园土壤和健康的猕猴桃果皮表面初步分离筛选到真菌20株;以导致灰霉病的灰霉菌为靶标菌,经平板对峙实验复筛,发现5株真菌对灰霉病有一定拮抗作用,其中1株编号为HuW1的菌株抑菌直径最宽,对灰霉病的抑制率最高,达80%左右,形态观察和ITS rDNA、26S rDNA D1/D2区域序列分析表明该菌株为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)。     

番茄灰霉病拮抗细菌Bacillus-1的筛选和鉴定

为了寻找番茄灰霉病的高效生防菌,从感染灰霉病的番茄大田土壤中,筛选出一株对灰霉病有较强拮抗能力的细菌Bacillus-1,对番茄体外和体内实验发现,Bacillus-1对番茄灰霉病发病率的抑制率达到83%.经过形态特征、生理生化特性鉴定和16S rRNA基因序列分析,初步确定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).该高效拮抗菌的分离为番茄灰霉病的生物防治及其防治机理的研究奠定了基础.     

玉溪雪茄烟发酵霉变病原菌鉴定及生防菌筛选

为明确云南玉溪雪茄烟发酵过程中的霉变病原菌,采用组织分离法从霉变烟叶上分离病原菌,并依据柯赫氏法则,结合形态学和ITS基因鉴定病原物种类,以病原菌为指示菌筛选生防菌,经室内发酵验证防霉变效果及对香气成分的影响。柯赫氏试验结果表明,原分离病菌XJ-a与显症烟叶再分离病菌XJ-b在形态、显微、病状上高度相似,两株病原菌ITS序列与多株Aspergillus flavus菌聚为一支,序列一致性大于99%,综合形态学和分子生物学特征,确定雪茄烟叶发酵霉变病原菌为黄曲霉（A. flavus）。筛选获得3株抑菌活性较强的生防菌,其中菌株CC-3对黄曲霉的抑制带宽度达9.04 mm,鉴定为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。在发酵中添加CC-3可显著降低烟叶霉变率,在发酵15 d和30d霉变率分别下降64.44%和52.66%,并且香气物质总量提高28.96%。本研究确定黄曲霉是玉溪雪茄烟发酵的主要致霉菌,添加生防菌CC-3进行发酵可降低黄曲霉的侵染同时提高香气成分含量。     

Biocontrol of Postharvest Decay on Cherry Tomatoes by Recombinant Strain GS115/CEC and Its Possible Mechanism

Due to cecropin A’s effective antifungal effects against Alternaria alternata (A. alternata), recombinant Pichia pastoris expressing cecropin A could control incidence of the black rot in cherry tomatoes caused by A. alternata, when compared with fruits inoculated with sterile water or plasmid without the gene insertion. Observations using a scanning electron microscope and a transmission electron microscope showed that when treated with the recombinant yeast, obvious changes in the morphology and inner structure of the A. alternata were induced leading to some cell abnormality and lysing. In order to further clarify the molecular mechanism of action, the binding properties exerted by GS115/CEC on DNA and RNA of A. alternata fungal cells were examined. The results showed that DNA and RNA of the A. alternata fungal cells were degraded by the recombinant yeast GS115/CEC. Furthermore, the recombinant strain GS115/CEC could induce the expression of the pathogenesis-related protein in order to decrease postharvest decay in cherry tomatoes.     

苹果采后灰霉病抗性生理差异分析

以‘秦冠’、‘富士’苹果果实为材料,对损伤接种灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)后果肉组织抗病相关物质及酶活力变化进行分析测定,揭示苹果采后灰霉病抗性差异的生理机制。结果表明:接种B.cinerea后,两种果实的发病率和病斑直径存在差异,其中‘秦冠’苹果发病率和病斑直径显著小于‘富士’苹果(P0.05);进一步研究发现抗病品种果肉组织中苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶活力均高于感病品种,从而促进抗病品种果肉中类黄酮和木质素的积累,降低膜脂过氧化程度,减少丙二醛的产生,提高了果实的抗病性,但总酚含量‘秦冠’苹果低于‘富士’苹果。研究结果可以为苹果灰霉病抗性鉴定和筛选抗灰霉病苹果资源提供理论指导。     

琥珀酸产生菌SH-24菌株的初步鉴定

根据丝状真菌的常用鉴定方法,对诱变选育的一株琥珀酸产生菌（SH-24）进行菌落培养、菌株形态的观察和生理特性研究。结果表明,该菌株为真菌门（Fungi）、藻菌纲（Phycomycetes）、毛霉目（Mucorales）、毛霉科（Mucoraceae）、毛霉属（Muco）、总状枝毛霉组（Racemousus）中的总状枝毛霉（Mracemosus fresenius）。该菌株的平板生长温度范围在37℃以下,最适生长温度为28℃左右;对所研究的几种碳源均能利用,且对葡萄糖的利用最好;能利用各种氮源包括硝态氮、亚硝态氮、氨态氮和有机氮,无机氮中氨态氮的利用效果最差,有机氮中除豆粉之外都能很好利用。     

植物内生菌011粗提液对番茄采后保鲜效果的影响

本文以湘粉1号番茄为试材,研究了植物内生菌011粗提液对番茄保鲜效果的影响。试验结果表明,贮藏25 d后,粗提液处理显著降低了番茄采后腐烂率,与无菌水对照组比较,其腐烂率降低了52.17%。在整个贮藏期间,粗提液处理延缓了番茄果实的质量损失率,显著减小了番茄果实的维生素C(Vc)、还原糖、可溶性蛋白以及可滴定酸含量的降低,较好的维持了番茄果实的风味,显著抑制了丙二醛(MDA)的积累和超氧阴离子自由基(O2-.)的上升,保持了细胞膜的完整性;显著提高了抗逆性酶过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。因此,011粗提液能较好的保持番茄的营养价值和商业价值,显著提高番茄的贮藏效果,为果蔬采后生物防治和贮藏保鲜提供了理论参照。     

WRD-Ⅲ型农用杀菌剂的研制

报道了ＷＲＤ—Ⅲ型农用杀菌剂的制备方法及部分试验结果。实验证明该药剂是一种较理想的生物源农药和植物生长调节剂。其原料来源丰富，制作工艺简单，对有关植物病原菌和致病病毒抑制效果好，环境污染小，有较高的开发利用价值     

湖北传统酒曲中优势霉菌F14的鉴定

从湖北民间传统酒曲中分离得到1株霉菌F14,其糖化酶活力强,所酿的酒具有独特风味.对F14进行了菌落形态、菌体特征形态的观察及Pfeffer氏液培养等鉴定试验,F14具有假根、匍匐菌丝、孢囊孢子、菌丝无隔膜等根霉的典型形态特征;且在Pfeffer氏液中于28℃、37℃条件下培养生长,在45℃条件下不生长.鉴定确定该菌株为米根霉种(Rhizopus oryzae).     

沙枣胶/枯茗醛复合涂膜对番茄采后红粉病的抑制作用及机制

红粉病是番茄果实主要的病害之一,采前采后均可发生,给番茄生产和贮运造成了较大损失。本实验研究枯茗醛对番茄红粉病病原真菌粉红单端孢（Trichothecium roseum Pers. Link）的体外抑制活性,并制备沙枣胶与枯茗醛复合涂膜‘千禧’樱桃番茄,果实经损伤接种后探究该涂膜对番茄红粉病的抑制作用及其对番茄果实抗性的影响。结果显示,枯茗醛在离体条件下能有效抑制T. roseum孢子萌发和菌丝生长,在0.1 μL/mL枯茗醛作用下,对菌落生长的抑制率达80%以上。在体内条件下,沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能明显抑制果实上T. roseum菌体生长,延缓病斑扩展并降低番茄果实接种发病率,在贮藏第9天,质量浓度30 mg/mL沙枣胶与体积分数0.2%枯茗醛复合涂膜组病斑直径和发病率分别为对照组的36.7%和69.2%。复合涂膜可显著提高番茄果实接种前期H2O2含量,并显著提高果实贮藏期间过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和4-香豆酸辅酶A连接酶的活力,促进果实中总酚和类黄酮的积累。沙枣胶与枯茗醛复合涂膜能够有效抑制番茄采后红粉病的发生与发展,其作用机制不仅与枯茗醛抑制病原菌生长有关,还与诱导番茄果实增强抗性有关。     

烟草疫霉生防细菌的筛选及鉴定

为获得防治烟草黑胫病的生防菌株,通过对峙平板法,从烟田土壤中分离出1株对烟草疫霉具有很好抑菌作用的细菌B40-3.培养3 d后,该菌株对烟草疫霉抑菌带宽度为0.9 cm,抑菌圈半径为2.3 cm,并对其余12种植物病原真菌有很好抑制作用.该菌株在LB液体培养基中,37 ℃,210 rpm条件下培养40 h,OD值达到最大值.依传统生理生化反应鉴定,B40-3属于枯草芽孢杆菌.     

梨采后黑斑病拮抗菌J18的鉴定及防治效果的初步研究

从国内16个省市自治区的果园梨果上和土样中分离筛选到对由链格孢霉Alternaria alternate(Fr.)Keissler引起的梨采后黑斑病有明显抑制效果的拮抗菌J18,经生理生化及分子生物学鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).梨果在拮抗菌J18菌悬液中浸果30 s,晾干后喷施接种病原真菌...     

蒜苔采后灰霉病害及生防拮抗菌的筛选研究

在蒜苔贮藏后期,从0℃冷库里发生灰霉病的蒜苔上分离到灰霉菌,经纯化和致病性鉴定得到灰霉属病原菌株。并且在其中并未发病的蒜苔分离到16种拮抗细菌,通过平板筛选法筛选出4株对灰霉菌具有拮抗作用的细菌,这4株拮抗菌在平板上对灰霉病菌的抑制力分别为:63.5%、47.6%、41.3%、38.1%。