酶法水解花生蛋白制备短肽及其降血压活性试验

对酶法水解花生蛋白制备高水解度短肽的工艺进行研究。选用碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶分别对单酶水解工艺、复合酶水解工艺及前处理条件进行考察。研究发现:单酶水解优化工艺虽可达到较高水解度(27.85%、23.40%),但水解时间长(386.25、382.68 min)、底物质量浓度低(1.09、1.07 g/100 m L);所考察的前处理技术中除亚硫酸钠前处理外,热处理、超声处理条件对水解度无显著影响。研究得到理想的酶法水解条件为:以花生蛋白(质量浓度为5 g/100 m L)为原料,先用亚硫酸钠(质量浓度为0.07 g/100 m L)进行前处理;随后进行复合酶酶法水解,调整料液体系至p H 8.0、温度50℃,按加酶量为7 429.79 U/g加入碱性蛋白酶,水解120 min,随后将料液体系调至p H 6.8、温度45℃,按加酶量为7 642.50 U/g加入菠萝蛋白酶,水解120 min,测得蛋白质水解度为(33.21±0.70)%。通过对原发性高血压大鼠的作用试验表明,灌胃剂量在1 000~1 500 mg/kg(按体重计)时,给药4 h后,大鼠收缩压显著降低,降压效果可持续8 h,表明酶法水解产物(花生短肽)有明显的降血压效果。     

玉米肽、大豆肽及其复配肽的降血压活性比较

为了得到高降血压活性、具有良好营养且便于工业化生产的生物活性肽,本实验以碱性蛋白酶A lcalase水解玉米大豆复配蛋白,通过正交试验,用试剂盒测定了酶解肽抑制血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)的活性,结果表明:最佳酶解条件为pH=8.0,温度55℃,[E]/[S]=0.5%,料液比1∶15,时间4h。比较了高降血压活性大豆肽、玉米肽、复配肽ACE的抑制活性,其抑制率分别为63.05%,82.59%,84.02%。复配肽不仅ACE抑制率最高,且营养价值高,与玉米肽相比,水解时间可减少14h,节省能源。结论:玉米大豆复配肽是优于玉米肽、大豆肽的降血压肽。     

玉米ACEI活性肽体内降血压功能试验研究

采用灌胃和静脉注射的方法,考察了玉米ACEI活性肽对SHR大鼠的降血压作用。结果表明,经灌胃玉米ACEI活性肽后,SHR大鼠的血压明显下降且平稳,高剂量组(450mg/kg.bw)降压效果与药物Captopril(5mg/kg.bw)相当。静脉注射效果远远好于灌胃,可能肠道酶对玉米ACEI活性肽有一定的分解作用。     

大豆降压肽的制备、纯化及活性分析方法研究进展

大豆降压肽是抑制和治疗高血压病最有前途的天然产物之一。本文综述了大豆降压肽的制备、分离纯化及活性分析方法的研究近况,分析了大豆降压肽生产中存在的问题并作出展望,以期为大豆降压肽的开发利用提供素材。     

南瓜籽蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽的制备及其降血压活性

食源性降血压肽在调节机体血压过程中发挥着一定的积极作用。本实验采用碱性蛋白酶水解南瓜籽蛋白,水解物经膜分离获得血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽,通过质谱鉴定其结构,并采用抑制动力学和分子对接方法研究ACE抑制肽的活性机制;此外,通过ACE抑制活性实验、自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHRs）模型等评价南瓜籽蛋白水解物、膜分离组分以及南瓜籽肽的降血压活性。结果表明,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物组分ACE抑制活性较好,1 mg/mL下ACE抑制率为46.22%,100 mg/kg mb 剂量下灌胃SHRs 6 h后收缩压可以降低21.42 mm Hg;鉴定出9 个ACE抑制肽（LLV、LVF、LTPL、SVLF、LLPQ、MLPL、LLPGF、VLLPE和RFPLL）,其中RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF具有较好的ACE抑制活性,半抑制浓度均低于1 mmol/L;RFPLL和LVF具有较好的降血压活性,30 mg/kg mb剂量下灌胃6 h后SHRs的收缩压降低量分别为37.0 mm Hg和22.2 mm Hg,SHRs的舒张压降低量分别为17.0 mm Hg和11.2 mm Hg;RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF可以很好地对接ACE的活性中心,RFPLL是ACE混合型抑制剂,MLPL对ACE的抑制模式可能是竞争型抑制,LLPGF、LVF可能是ACE的非竞争型抑制剂。综上,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物是一种良好的降血压功能食品原料,其中RFPLL和LVF可用于降血压功能食品或者药品的开发原料。     

膜技术分离纯化花生蛋白酶解液制备活性短肽

对膜技术在花生蛋白酶解液分离纯化应用的工艺进行了研究。考察了超滤膜截留相对分子质量(1、3、5 kDa)、超滤压力(0.086、0.121、0.157、0.193 MPa)、超滤温度(30、35、40、45℃)、超滤加水量(0.5~5.5倍)对超滤效果的影响,以及考察加水次数(1~12次)对纳滤脱盐效果的影响。结果表明:超滤操作的最适工艺为用截留相对分子质量为1 kDa的超滤膜,在超滤压力0.193MPa、超滤温度45℃的条件下进行恒体积超滤,加水量以加入3倍水为最适,此时短肽透过率可达65.01%,透过液中短肽的相对分子质量主要分布在283~402 Da之间;纳滤操作在纳滤温度为常温(20℃)、纳滤压力为1.5 MPa的条件下进行,采用间歇式恒容纳滤方式,最适加水次数为10次,此时Na+脱除率为(69.78±0.69)%,短肽损失率仅为2.00%。采用最适的先超滤、后纳滤联用工艺制备的花生短肽液经冻干后,冻干粉对ACE的IC50为0.78 mg/mL,体外抗氧化活性为ORAC值(以Trolox计)(2 359.50±40.43)μmol/g,表明短肽同时具有较强的ACE抑制活性和体外抗氧化活性。     

大豆蛋白肽降血压稳定性研究

为了解大豆源降血压肽ACE(血管紧张素转化酶)活性抑制活性稳定性及降压效果,采用放大反应体系、热和酸、减压浓缩以及冷冻干燥等方法处理大豆肽产品.结果表明:酶解反应体系由1L放大到5L, ACE活性抑制率波动不大.样品经浓缩及冷冻干燥,稀释至原来浓度,其活性保持不变;选取85、100、121℃ 3种温度对降血压肽进行处理后,其ACE活性抑制率略有提升;用柠檬酸将肽液pH调至4.5和5.4,经相同热处理后,结果大致相同.3种pH样品装入棕色瓶,85℃加热15min贮藏;60d贮藏期间其ACE活性抑制率未发生显著性变化.经85℃处理15min样品灌胃SHR,其最大降压值为12mmHg(P<0.05);但经相同温度处理30min和60min后,其降压效果明显下降;冷冻干燥样品降压效果与原液大致相同.     

花生抗氧化活性肽制取工艺的研究

采用Alcalase及Neutrase蛋白酶酶解花生粕中的蛋白,制取花生抗氧化活性肽。在相同条件下,通过测定水解度得出Alcalase的水解效果比Neutrase好。通过正交试验得出Alcalase最佳水解条件为：底物质量分数8％,酶加量4％,pH8．0,温度55℃,时间2h。在最佳条件下水解度为17．95％。通过油脂的抗氧化试验,证明花生抗氧化活性肽具有明显的抗氧化活性,5％的花生抗氧化活性肽抗氧化效果与3％的VE抗氧化效果相当。     

花生多肽的体外抗氧化活性研究

通过对红细胞溶血、肝脏与肝线粒体中的脂质过氧化以及肝线粒体肿胀度的测定,结果发现花生多肽能够有效地抑制由羟自由基引起的脂质过氧化,保护生物膜,减少红细胞溶血,减轻肝线粒体肿胀程度,提示花生多肽具有很强的抗氧化能力.     

海蜇刺胞素降血压活性的研究

为开发一种降血压新药,向已麻醉的自发性高血压大鼠静脉注射沙蜇刺胞素200μg/k9,通过颈动脉插管测定并描记大鼠血压和心率的变化.结果表明:静脉注射一定剂量的沙蜇刺胞素,可使SHR血压和心率在短时间内明显下降,血压从原基础值(230.5±16.4)mmHg下降至(100.1±22.9)mmHg,心率从(485.1±12.3)BPM下降至(253.4±42.3)BPM.因此沙蜇刺胞素具有强降血压和降心率作用.     

花生短肽脱盐工艺研究

对花生短肽脱盐方法进行了系统研究,比较了阴阳离子交换树脂法、大孔树脂法和阴阳离子混合床法的脱盐效果,结果显示,阴阳离子混合床脱盐法效果最优。在此基础上,对花生短肽阴阳离子混合床脱盐工艺进行优化,确定了花生短肽脱盐较优参数组合为:水解液过柱速度为5~10倍柱体积/h、水解液初始pH值4.5、阴阳离子树脂比例为3:2,在此条件下花生短肽脱盐率和回收率均大于80%。成分测定结果表明,脱盐后花生肽纯度达到90.25%。     

条斑紫菜蛋白酶解物降血压活性

研究了以条斑紫菜为原料,采用木瓜蛋白酶制备紫菜蛋白活性寡肽,以ACE抑制率为评价指标,研究不同水解条件下酶解液的降血压活性,优化酶解工艺条件并测定酶解物的分子量。优化后的木瓜蛋白酶酶解工艺条件为pH7.5,温度50℃,底物浓度30 mg/mL,酶添加量600 U/g,在此条件下,水解4 h的酶解产物抑制活性达30%以上,ACE抑制肽的半抑制浓度IC50值为4.48 mg/mL。将制备的酶解液进行层析分析,测得具有降血压活性的紫菜蛋白酶解产物是相对分子质量小于2 000的活性肽。     

花生衣红抗氧化活性的研究

花生衣是花生产品的副产物,经济价值低,但是含有大量的多酚物质.作者研究了从花生衣中提取的红色素对超氧阴离子(O2-.)、羟自由基(OH.)的清除作用及其对脂质过氧化物的阻抑作用.实验结果表明,花生衣红色素对超氧阴离子(O2-.)、羟自由基(OH.)有不同程度的清除作用,对脂质过氧化有明显的抑制,且呈剂量依赖关系.     

玉米高F值寡肽的分离纯化及抗氧化活性研究

目的研究玉米高F值寡肽混合物的分离纯化及抗氧化作用。方法采用碱性蛋白酶Protex 6L、中性蛋白酶Protex 7L和木瓜蛋白酶3种酶复合酶解玉米黄粉(CGM),经超滤得到寡肽混合物,用Sephadex G-15凝胶分离纯化,测定寡肽混合物及其分离纯化组分的相对分子质量(Mr)及抗氧化活性。结果寡肽混合物的F值为28.40。寡肽混合物经Sephadex G-15测定其Mr为231~2392,并分离得到3个组分:P1、P2和P3,其Mr分别为2392,1581,231。寡肽混合物对邻苯三酚自氧化的抑制率达73.31%,3个组分对邻苯三酚自氧化的抑制率分别为22.10%,18.86%和75.75%,抗氧化活性最高的为二肽组分P3。结论玉米高F值寡肽混合物有良好的抗氧化活性,P3为主要抗氧化组分。     

不同包装材料对花生储藏微生物活动的影响

本文研究了豫花15、远杂9307两种花生使用不同材料包装后在25℃,相对湿度80%～85%条件下储藏期间的吸湿性、霉菌数量以及微生物活性等指标的变化。结果表明,包装材料可通过阻隔花生对空气中水分的吸收,显著延缓花生样品中微生物数量的升高,但在适宜的温度下微生物仍可进行缓慢的代谢活动。为了保障储藏花生的品质和食用安全性,花生及其制品应该采用较密封的包装和在较低的温度下储藏。     

大蒜精油对食用油脂的抗氧化特性

以过氧化值（POV）为指标研究了大蒜精油对花生油的抗氧化性能。结果表明：大蒜精油对花生油具有较强的抗氧化作用，且具有剂量效应关系；添加了大蒜精油的花生油应尽量贮存于低温条件下；VC、柠檬酸、酒石酸对大蒜精油的抗氧化作用均有协同增效作用；大蒜精油与合成抗氧化剂混合使用时，其抗氧化能力均好于只添加单一抗氧化剂的效果；使用0．2％大蒜精油和0．04％大蒜精油＋0．005％PG为花生油的抗氧化剂时，可使花生油在20℃下的贷架寿命由4．2个月延长至24．3个月和14．1个月。     

花生红衣低聚原花色素抗氧化性的研究

研究了花生红衣低聚原花色素还原能力,对羟基自由基、亚硝酸根离子的清除效果,对亚油酸氧化的抑制作用及对超氧阴离子的抑制效果.结果表明:在相同浓度每件下,花生红衣低聚原花色素还原能力,对羟基自由基、亚硝酸根离子的清除效果均优于VC;对亚油酸的自动氧化起到很好的抑制作用;当花生红衣低聚原花色素达到一定浓度时,对邻苯三酚产生的超氧阴离子具有显著的抑制作用.低聚原花色素是一种优良的天然抗氧化剂.     

低值海洋鱼低聚肽抗氧化和抗疲劳活性

目的：研究低值海洋鱼（以鳀鱼为主的海产小杂鱼）低聚肽体外抗氧化活性和抗疲劳作用。方法：通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼等4 种体外化学模型、DNA氧化损伤模型及小鼠生理生化指标综合评价低值海洋鱼低聚肽的抗氧化与抗疲劳能力。结果表明：低聚肽清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为（4.76±0.57）、（5.09±0.27）、（5.91±0.23）mg/mL,还原力IC50为（1.31±0.12）mg/mL;与空白组相比,不同剂量的低值海洋鱼低聚肽均延长了小鼠力竭游泳时间,降低了小鼠疲劳后乳酸和尿素氮含量,提高了肝糖原含量和超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力。结论：低值海洋鱼低聚肽具有一定的抗氧化活性,并且能够提高运动耐力,缓解疲劳。     

河豚鱼皮胶原寡肽螯合锌的体内体外抗氧化活性研究

以河豚鱼皮为原料,制备了河豚鱼皮胶原寡肽螯合锌,并对螯合锌的基本组成成分和结构进行了表征.以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(.OH)的清除能力、三价铁(Fe3+)的还原能力为指标,考察河豚鱼皮胶原寡肽螯合锌的体外抗氧化能力,实验表明,河豚鱼皮胶原寡肽螯合锌对DPPH 自由基、羟自由基的清...     

复合低聚肽增强免疫力功能研究

对复合低聚肽增强免疫力的功能进行研究。分别以0.4、0.8、2.4 g/kg·BW(相当于人体推荐量的5、10、30倍)剂量的复合低聚肽对小鼠连续灌胃30 d,分别测定小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性。结果显示,体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性均为阳性,细胞免疫功能为阴性,表明复合低聚肽具有增强免疫力功能。