FLT3基因突变在急性早幼粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的:检测急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）患者FMS样酪氨酸激酶3（FLT3）基因内部串联重复（ITD）突变和酪氨酸激酶结构域（TKD）突变的表达,并探讨临床意义。方法:提取APL患者骨髓单个核细胞DNA,采用聚合酶链反应及测序技术检测FLT3-ITD和FLT3-TKD,分析临床资料及预后。结果:在77例APL患者中,23例（29.9%）检出 FLT3-ITD,7例（9.1%）检出FLT3-TKD点突变,具体包括5例D835Y、1例N841I、1例D835Y和D835H复合杂合子。FLT3-ITD与高白细胞计数相关（P=0.033）,而FLT3-TKD并无此相关性。与无FLT3基因突变患者相比,尽管FLT3-ITD和TKD突变患者的完全缓解率（CR）、总生存期（OS）、无事件生存期（EFS）均相对更差,除FLT3-TKD与缩短EFS显著相关（P=0.043）外,差异均无统计学意义。值得注意的是,无论是FLT3-ITD（P=0.011）还是FLT3-TKD（P= 0.034）均提示高复发风险。多因素分析表明FLT3-ITD（HR=6.381,P=0.037）、FLT3-TKD（HR=5.198,P=0.009）、骨髓早幼粒细胞比例（HR=1.174,P=0.020）、高白细胞计数（WBC>10×109/L）（HR=9.067,P=0.011)可作为独立预后因素提示高复发风险。结论:FLT3-ITD和TKD在APL中均有表达,FLT3-ITD患者的白细胞计数高。虽然FLT3基因突变对APL患者的CR率和OS无显著影响,但可作为一个有价值的指标用于评估复发风险。     

急性髓系白血病患者FMS样酪氨酸激酶3基因内部串联重复突变的检测及其临床意义

目的 分析急性髓系白血病（AML）患者骨髓FMS样酪氨酸激酶3基因内部串联重复（FLT3／ITD）突变情况.方法 采用聚合酶链反应方法检测96例初发AML患者FLT3／ITD突变,分析FLT3／ITD阳性患者的临床特征.结果 96例AML患者中FLT3／ITD突变18例（18.8％）.其中M22例,M3 11例,M42例,M53例.FLT3／ITD阳性AML患者初发时外周血白细胞计数中位数为18.0×109／L（3.6× 109～ 137.6×109/L）,FLT3／ITD阴性AML患者为6.3×109/L（4.5×109 ～ 113.0×109/L）,两组比较差异有统计学意义（t=3.04,P＜0.05）.FLT3／ITD阳性者随访16例,中位随访时间10个月（6～ 15个月）,13例处于第1次完全缓解.诱导缓解率为81.3％（13／16）.结论 FLT3／ITD是AML患者常见的基因突变,FLT3／ITD阳性患者白细胞计数较高.     

DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变正常核型急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的 分析DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常核型急性髓系白血病(AML)患者的临床特征,探讨该类患者的预后.方法 回顾性分析2005年12月至2014年6月就诊的109例正常核型AML患者的临床特征及预后.其中DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+AML患者共25例,单独FLT3-ITD+ AML患者共32例,单独NPM1+AML患者24例,单独DNMT3A+ AML患者28例.结果 25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+ AML患者平均年龄46岁,伴有高白细胞(81.7×109/L)及较高的骨髓原始细胞(66.3％).其中,17例选择大剂量化疗,8例行异基因造血干细胞移植,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组比较,差异均无统计学意义.25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+患者的3年总生存率为17.65％,3年无病生存率为13.88％,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组差异均有统计学意义(P值分别为0.049 9、0.036 1、0.013 4),3年无病生存率差异无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常AML患者往往合并高的外周血白细胞及骨髓原始细胞,预后较差.     

急性髓细胞白血病NPM1和FLT3-ITD突变检测临床意义分析

目的:研究核仁磷酸蛋白1(NPM1)FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变在急性髓细胞白血病(AML)中发生的情况,并了解其临床特征及预后意义.方法:分别应用高分辨熔解曲线(HRM)和变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测103例初诊AML患者NPM1和FLT3-ITD突变情况,并结合临床资料进行分析.结果:103例初诊AML患者中,31例发现NPM1基因突变,20例发现FLT3-ITD突变,阳性率分别为30.1％和19.4％,而在核型正常组中所占的比例分别为47.6％(20/42)和26.2％(11/42).FLT3-ITD突变型外周血白细胞计数高,t=2.21,P=0.037;骨髓原始细胞比例高,t=2.44,P=0.023;NPM1突变型亦表现为高外周血白细胞计数,t=2.24,P=0.034.在非M3患者中,NPM1突变型的CR与野生型差异无统计学意义,但第1次化疗的CR(76.9％)明显高于野生型患者(35.0％),x2=12.78,P=0.000 35;FLT3-ITD突变型患者的CR为58.8％,野生型患者为82.6％,两者比较,x2=4.48,P=0.034;FLT3-ITD突变型患者第1次化疗的CR为17.6％,而野生型患者为55.1％,两者比较,x2=6.23,P=0.012.31例NPM1基因突变中有6例合并FLT3-ITD突变,NPM1+/FLT3-ITD-组的CR最高(85.0％),1年内RR率最低(17.6％);NPM1-/FLT3-ITD+组的CR最低(54.5％),1年内RR率最高(50.0％).结论:NPM1和FLT3-ITD突变是AML患者常见的分子遗传学异常,与预后密切相关,可成为目前细胞遗传学预后分组的重要补充,对于指导AML患者的个体化治疗具有重要的临床价值.     

伴Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复的急性髓系白血病临床特点及预后分析

目的 探讨Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)的急性髓系白血病(AML)患者的临床特点及预后.方法 回顾性分析2011年6月至2014年3月收治的39例FLT3-ITD的AML患者临床资料.结果 FLT3-ITD突变的发生率为11.6％(39/337),39例FLT3-ITD AML患者中,M5所占比例最高(43.6％,17/39),其次为M2(28.2％,11/39);外周血白细胞计数平均为88.63×109/L,其中12例(30.8％)大于100×109/L;骨髓原始细胞比例平均为82.53％,其中33例(84.6％)大于50.00％.13例发生髓外浸润;17例核型正常,9例核型异常,3例未见核分裂象;13例患者伴随NPM1突变,2例伴有KIT突变,3例伴有DNMT3突变.37例接受治疗的患者中,第1个疗程获完全缓解(CR)16例(43.2％),第2个疗程获CR 4例(10.8％),2个疗程累积CR率为54.0％,诱导治疗相关病死率为21.6％ (8/37),死亡原因主要为感染及出血.中位随访时间12个月,20例CR患者的复发率为50.0％(10/20),无复发生存(RFS)率为45.0％(9/20);移植组17例患者的总生存及RFS均优于单纯化疗组的20例患者(P=0.004、0.020).结论 FLT3-ITD AML具有初发时外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例高、与M5亚型高度伴随的临床特点,异基因造血干细胞移植能明显提高患者总生存期及无复发生存期.     

初次骨髓完全缓解时血象恢复不良急性髓系白血病患者临床特征及预后分析

目的 探讨初次骨髓完全缓解(CR)时血象恢复不良[血小板计数(Plt)<100×109/L或中性粒细胞绝对值(ANC)<1.0×109/L]急性髓系白血病(AML)患者的临床特征和预后因素.方法 回顾性分析2010年1月至2015年9月郑州大学第一附属医院血液科收治的302例初次骨髓CR的AML患者(M3除外)病例资料,根据初次获骨髓CR时血象恢复情况分为血象CR组(Plt≥100×109/L且ANC≥1.0×109/L)和血象未达CR组(Plt<100×109/L或ANC<1.0×109/L),比较两组患者临床特征和预后差异,并通过单因素和多因素分析对血象未达CR的AML患者复发和生存情况进行分析.结果血象CR组216例(71.5%),血象未达CR组86例(28.5%),两组年龄、就诊时高白细胞患者比例、外周血原始细胞比例、法美英协作组(FAB)分型、细胞遗传学危险度分层和FLT3-ITD/NPM1基因突变比较差异均无统计学意义(均P>0.05).血象CR组就诊时骨髓原始细胞数和首疗程化疗获骨髓CR比例高于血象未达CR组(均P<0.05),初次骨髓CR时微小残留病(MRD)阳性比例低于血象未达CR组(P=0.004),且初次骨髓CR时血象CR组骨髓增生程度更活跃(P=0.001).血象CR组3年复发率低于血象未达CR组(P=0.003),总生存(OS)率和无病生存(DFS)率高于血象未达CR组(P=0.002,P=0.040).多因素分析显示,对于血象未达CR的AML患者,高危染色体核型、诱导疗程数≥2个、初次骨髓CR时外周血中性粒细胞未恢复是复发率、OS率和DFS率的共同独立危险因素(均P<0.05).FLT3-ITD基因突变阳性是OS率的独立危险因素(P<0.001),就诊时外周血原始细胞比例≥0.60是DFS率的独立危险因素(P=0.047).结论 初次骨髓CR时血象未达CR的AML患者预后较差,且高危染色体核型、诱导疗程数≥2个、中性粒细胞恢复不良者可能预后更差,应视为高危人群,考虑更积极的治疗.     

老年正常核型急性髓系白血病患者临床特征及预后分析

目的 探讨老年正常核型急性髓系白血病(CN-AML)患者的临床特征及其预后相关因素.方法 回顾性分析104例初治老年CN-AML(M3除外)患者的临床资料.用χ2检验分析完全缓解(CR)的影响因素.用Kaplan-Meier法进行生存分析,并采用Log-rank检验对预后相关影响因素进行单因素分析,采用Cox回归模型进行多因素分析.结果 104例患者中首次化疗后可评价疗效者72例,CR率为38.9%(28/72),总有效率为55.6%(40/72).白细胞计数(WBC)<100×109/L、NPM1突变阳性患者的CR率较高[59.4%(38/64)比12.5%(1/8),83.3%(10/12)比36.4%(8/22),均P<0.05].104例患者中位总生存(OS)时间为6.9个月.单因素分析显示年龄≥70岁、继发AML、高WBC(≥100×109/L)、FLT3-内部串联重复(ITD)突变阳性、CD7阳性、达CR诱导疗程数>2个以及Charlson合并疾病指数(CCI)评分≥2分的患者OS时间较短(均P<0.05).多因素分析显示FLT3-ITD突变阳性(HR=7.61,95%CI 1.80~32.11,P=0.006)及达CR诱导疗程数>2个(HR=10.11,95%CI 2.38~43.03,P=0.002)是患者OS的独立不良影响因素.结论 老年CN-AML患者的预后是多种因素综合作用的结果,FLT3-ITD突变阳性、 达CR诱导疗程数>2个是老年CN-AML患者不良OS的独立影响因素.     

PML_RARα融合基因不同亚型急性早幼粒细胞白血病的临床特征

目的探讨PML-RARα不同亚型的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的临床特征及预后。方法收集福建医科大学附属协和医院2013年2月至2016年7月收治的78例初诊APL患者的临床资料,分析PML-RARα不同亚型患者的临床特征及预后。结果78例患者中,女性32例,男性46例,中位年龄40岁(13~68岁)。最常见的PML-RARα融合基因为L型(48.7%,38/78),其次为S型(46.2%,36/78)和V型(5.1%,4/78)。S型患者中白细胞计数>10×10^9/L(高危)者最多见(61.1%,22/36),与V型、L型比较,差异有统计学意义(χ^2=7.683,P<0.05)。78例中,合并CD34阳性8例(10.2%),合并FLT3-内部串联重复(ITD)突变17例(21.8%),合并DNMT3A突变12例(15.4%),附加染色体异常9例(11.5%);3种不同亚型间CD34阳性、FLT3-ITD、DNMT3A以及附加染色体异常发生率差异无统计学意义(P>0.05)。S型患者治疗期间发生维甲酸综合征(RAS)最多见(21/36),L型及V型较少发生(χ^2=7.633,P<0.05)。PML-RARα不同亚型患者间完全缓解率以及无病生存率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PML-RARα不同亚型APL患者临床特点不尽相同,L型最常见,V型、S型中高危者多见,S型治疗期间合并RAS多见,不同亚型对完全缓解率及无病生存率无影响。     

初诊高白细胞急性早幼粒细胞白血病患者临床特征及疗效分析

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病（APL）患者中高白细胞的发生率、临床特征及早期疗效。方法回顾性分析初诊APL患者248例,其中高白细胞患者70例,分析高白细胞的发生率、临床特征及诱导治疗的疗效。非高白细胞APL的诱导治疗以全反式维甲酸联合三氧化二砷为主,高白细胞APL的诱导治疗以全反式维甲酸+三氧化二砷+蒽环类化疗药物为主,同时给予对症支持治疗。结果248例患者中,高白细胞的发生率为28.2%（70／248）,其中WBC为10×109／L～50×109／L 46例（18.5%）, WBC＞50×109／L且≤100×109／L 14例（5.6%）,WBC＞100×109／L 10例（4.0%）。高白细胞APL患者的临床特征为PML-RARα融合基因S型（P＝0.004）及FLT3-ITD基因突变（P＜0.01）,原发性纤溶亢进更加严重;诱导治疗完全缓解率低于非高白细胞APL患者[88.9%（48／54）比98.1%（152／155）,P＝0.013],早期死亡率高于非高白细胞患者[11.1%（6／54）比1.9%（3／155）,P＝0.013]。高白细胞患者的早期死亡原因主要为脑出血。结论高白细胞是APL不良预后因素,诱导治疗应重视凝血异常的纠正、联合化疗迅速降低白细胞,以及联合地塞米松预防诱导分化综合征,以期降低早期死亡率。     

化学法提取贮存骨髓涂片DNA检测Fms样酪氨酸激酶3基因突变预测急性髓系白血病患者预后

目的 探讨用化学法(苯酚:氯仿:异戊醇法)从贮存的骨髓涂片中提取微量DNA检测Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)突变情况,分析其对急性髓系白血病(AML)预后的预测价值.方法 采用化学法从58例-20℃贮存1~5年的骨髓涂片(AML 48例和非恶性血液病10例)中提取微量DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测患者FLT3-ITD突变情况.结果 48例初治AML患者中6例(12.5%)检测到FLT3-ITD,10例非恶性血液病患者中均未检测到FLT3-ITD.FLT3-ITD阳性AML患者初次诱导完全缓解(CR)率较FLT3-ITD阴性者低[0(0/6)比77.78%(21/27),P=0.001],总生存时间短(x2=7.274,P=0.007).肝、脾大和FLT3突变是影响AML患者初次化疗CR的危险因素(OR=7.2,P=0.12;OR=36.3,P=0.10).FLT3-ITD是初治AML患者不良预后的危险因素(RR=9.088,P=0.029).结论 使用化学法提取贮存的AML患者骨髓涂片微量DNA可在临床中应用,是进行回顾性分子生物学研究的重要实验方法.从骨髓涂片中提取微量DNA检测FLT3-ITD可用于预测AML预后.     

Prognostic implication of FLT3 and Ras gene mutations in patients with acute promyelocytic leukemia (APL): a retrospective study from the European APL Group.

Internal tandem duplications (ITDs) of the FLT3 gene have been observed in about 35% of APL cases. If FLT3-ITD is associated with a worse outcome in patients with acute myeloid leukemia (AML) in general, its prognostic value in acute promyelocytic leukemia (APL) is still a matter of debate. We investigated incidence, associated clinical features, and prognostic implication of FLT3-ITD, but also FLT3-D835 point mutation and N-Ras or K-Ras mutations in 119 APL patients, all prospectively enrolled in the two consecutive APL-93 and APL-2000 trials. Mutation incidences were 38, 20, and 4%, for FLT3-ITD, FLT3-D835, and Ras, respectively. The presence of FLT3-ITD was associated with high white blood cell count, high Sanz index, M3-variant subtype, and V/S PML-RAR alpha isoforms. Complete remission (CR), induction death, and death in CR rates were not affected by FLT3 or Ras mutations, as well as cumulative incidence of relapse. However, a trend for a shorter overall survival (P=0.09) was observed in FLT3-ITD patients, because of a very poor postrelapse survival (P=0.02). This feature, which has been also reported in patients with AML in general, is suggestive of an underlying genetic instability in FLT3-ITD patients, leading to the acquisition of additional unknown bad-prognosis gene mutations at relapse.     

MA方案诱导治疗急性髓系白血病的疗效及其预后因素分析

 目的　研究MA方案诱导治疗急性髓系白血病（AML）患者的治疗效果及影响预后的相关因素。方法　对初治原发AML患者102例,采用MA方案（米托蒽醌+阿糖胞苷）诱导治疗,观察其治疗效果及不良反应。根据患者年龄、白细胞计数、FAB分型、乳酸脱氢酶（LDH）水平以及免疫表型进行分组,分析影响预后的相关因素。结果　经1个疗程的MA方案诱导治疗后,完全缓解（CR） 65例（63.73 %）,部分缓解（PR）18例（17.65 %）,未缓解（NR）19例（18.62 %）,总有效（PR+CR）率为81.38 %。年龄<60岁、白细胞计数<100×109／L、FAB分型为M2、LDH＜600 U／L者的CR率及总有效率较≥600 U／L组高,差异有统计学意义（P <0.05）,CD+7与CD-7组相比仅CR率差异有统计学意义（P＜0.05）,而CD+19与CD-19 组相比CR率及总有效率差异均无统计学意义（P >0.05）。结论　采用MA方案诱导治疗AML具有较好的疗效,不良反应少。患者年龄、白细胞计数、FAB分型、LDH水平以及CD7的表达是影响治疗效果的预后相关因素。     

原发血小板增多症患者 JAK2 V617F 突变与凝血功能的相关性

目的：探讨原发血小板增多症（ET）患者 JAK2 V617F 突变及其突变负荷与血常规及凝血功能之间的相关性。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月收治的90例 ET 患者临床及实验室资料,用等位基因特异性聚合酶链反应行 JAK2 V617F 点突变检测,实时定量特异性聚合酶链反应行JAK2 V617F 检测突变负荷,分析 JAK2 V617F 突变及突变负荷与血常规及凝血功能的相关性。结果90例ET 患者中,50例患者检出 JAK2 V617F 突变,突变率为55.6%。 JAK2 V617F 突变组红细胞计数[（4.67±0.89）×109／L 比（4.04±0.99）×109／L, P＝0.003]、白细胞计数[（11.64±5.20）×109／L 比（9.11±4.11）×109／L, P＝0.014]、血细胞比容[（0.41±0.07）比（0.36±0.07）,P＝0.005]均较野生型组高,凝血酶原时间较野生型组长[（13.18±1.63） s 比（12.02±1.24） s,P＝0.000]。 JAK2 V617F 突变负荷为（29.91±18.63）%,JAK2 V617F 突变负荷与血常规之间未见相关性（均 P＞0.05）,与纤维蛋白降解产物（FDP）之间存在相关性（r＝0.456,P＝0.001）。结论 ET 患者存在较高的 JAK2 V617F 突变率,临床早期检测JAK2 V617F 突变及突变负荷可能对 ET 患者血管性事件早期预防具有重要的临床价值。     

重组人血小板生成素治疗老年人急性髓细胞白血病化疗后重度血小板减少20例

 目的　研究重组人血小板生成素（rhTPO）对老年急性髓细胞白血病（AML）化疗后所致血小板减少的治疗效果及患者不良反应。方法　20例老年AML完全缓解（CR）患者予连续2个周期巩固化疗。第1个周期（对照周期）出现重度血小板减少后仅输注血小板悬液;第2个周期（治疗周期）在前述治疗基础上,当血小板≤50×109／L时每日给予rhTPO 1.0 μg／kg,皮下注射,连用14 d,或血小板计数≥80×109／L后停药。观察患者疗效及不良反应。结果　治疗周期血小板<100×109／L的持续时间为（23.1±4.5）d,≤20×109／L的持续时间为（6.8±2.6）d,与对照周期的（25.8±5.7）d、（11.7±3.2）d比较,差异有统计学意义（P＜0.005）;血小板最低值治疗周期为（13.2±4.4）×109／L与对照周期的（12.2±3.1）×109／L比较,差异无统计学意义（P＝0.0967）;治疗周期血小板最高值为（239.3±48.7）×109／L,显著高于对照周期的（163.5±32.4）×109／L（P＜0.005）;治疗周期血小板输注量为（22.8±6.8）U,明显少于对照周期的（30.0±6.3）U（P＜0.05）;血红蛋白、白细胞计数、尿常规、肝功能、肾功能及凝血功能治疗周期与对照周期比较差异无统计学意义（P＝0.0872）。治疗周期5例患者出现不良反应（25％）,均为一过性,未出现血栓栓塞事件。结论　在老年AML巩固化疗中应用rhTPO,可以明显加速血小板的恢复,减轻化疗引起的血小板降低程度和持续时间,减少输注血小板,并且安全有效,值得临床推广应用。