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1.
目的 探究慢病毒介导微RNA-181a-5p(miR-181a-5p)过表达对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心脏重塑的影响.?方法 采用随机数字表法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、空载体组和miR-181a-5p过表达组,每组各10只.模型组、空载体组和miR-181a-5p过表达组均给予5 mg/kg·d-1异丙肾上...  相似文献   

2.
目的 探究沉默微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,重点分析miR-135a-5p在宫颈癌HeLa细胞中的作用机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞经培育后分为对照组、过表达组、沉默组,对照组不做处理,过表达组转染miR-135a-5p mimics上调载体,沉默组转染miR-135a-5p inhibitor下调载体。使用实时荧光定量法检测每组宫颈癌HeLa细胞中miR-135a-5p表达量;四甲基偶氮唑盐法检测每组宫颈癌HeLa细胞增殖水平;Transwell小室法检测每组宫颈癌HeLa细胞侵袭水平。结果 与对照组比较,过表达组(24 h、48 h、72 h)宫颈癌HeLa细胞增殖能力、miR-135a-5p、宫颈癌HeLa细胞迁移数、侵袭数明显升高,宫颈癌HeLa细胞凋亡能力明显降低(P<0.05);与对照组比较,沉默组(24 h、48 h、72 h)宫颈癌HeLa细胞增殖能力、迁移数、侵袭数、miR-135a-5p明显降低,凋亡能力明显升高(P<0.05);与过表达组比较,沉默组(24 h、48 h、72 ...  相似文献   

3.
4.
背景急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)发病迅速,并发全身感染,因此早期的高效治疗对控制病情起到关键作用.微小RNA(microRNA, miRNA)在AP中的作用机制及临床应用的研究成为近几年的热点.其在AP发生发展及转归中的作用有助于为AP的诊断和治疗提供新思路.目的探讨miR-181a-5p对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J凋亡的影响及机制.方法运用ELISA法检测雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞中AMY、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;将Cerulein+anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、Cerulein+anti-miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、Cerulein+si-con组(转染si-con)、Cerulein+si-白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)组(转染si-LIF),均用脂质体法转染至AR42J细胞,再用15 nmol/L的雨蛙素处理8h;流式细胞术法检测各组细胞的凋亡; qRT-PCR检测各组细胞中miR-181a-5p mRNA和LIF mRNA的表达; Western blot检测各组细胞中LIF、caspase-3的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果与对照组相比,雨蛙素处理8 h是AMY、TNF-α和IL-6的含量均升高的时间点,且细胞凋亡率显著降低(P 0.05);与Control组相比,Cerulein组AR42J细胞中miR-181a-5p mRNA表达显著下调, LIF mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05);过表达miR-181a-5p、敲减LIF均可抑制雨蛙素诱导的AR42J细胞凋亡的促进作用; miR-181a-5p可抑制野生型LIF细胞的荧光活性,且可负向调控LIF的蛋白表达.结论 miR-181a-5p可抑制雨蛙素诱导的AR42J细胞的凋亡,其机制可能与靶向LIF有关,将可为AP的治疗提供新方向.  相似文献   

5.
摘要 目的:探讨急性脑梗死(ACI)患者血浆中微小RNA(miR)-181a-5p的表达水平及临床价值。方法:收集148例ACI患者(ACI组)的临床资料,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为:轻度72例、中度35例、重度41例。ACI患者发病4.5h内用阿替普酶静脉溶栓治疗。根据出院后第90天的预后情况,将患者分为预后良好组(102例)和预后不良组(46例)。另选取同期健康体检者100例为对照组。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血浆miR-181a-5p表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中凋亡分子B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1)表达水平。相关性检验用Pearson分析;用Logistic多因素回归分析影响预后的因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血浆miR-181a-5p预测预后的价值,计算曲线下面积(AUC)、灵敏度及特异性。结果:与对照组比较,ACI组血浆miR-181a-5p和caspase-1表达水平较高,而Bcl-2表达水平较低(P均<0.05)。miR-181a-5p与caspase-1呈正相关(r=0.176,P=0.032),与Bcl-2呈负相关(r=-0.209,P=0.011)。轻度、中度和重度ACI患者血浆miR-181a-5p表达水平分别为(1.35±0.32)、(1.79±0.20)、(2.34±0.59),经单因素方差分析,组间比较差异有统计学意义(F=32.001,P<0.001),病情越重,血浆miR-181a-5p表达水平越高。与预后良好组比较,预后不良组年龄更大,入院时NIHSS评分、血浆miR-181a-5p和caspase-1水平较高,而Bcl-2水平较低(P均<0.05)。多因素分析显示,年龄、入院时NIHSS评分及血浆miR-181a-5p水平是ACI患者预后不良的独立影响因素(OR=1.532、1.832、3.111,P均<0.05)。血浆miR-181a-5p预测不良预后的AUC为0.856(95%CI:0.815~0.886,P<0.01),灵敏度为89.56%,特异性为70.12%。结论:ACI患者血浆中miR-181a-5p表达水平明显升高,对ACI病情和预后的早期评估有一定价值。  相似文献   

6.
目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-551-5p(miR-551-5p)、微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)表达水平与AP严重程度的相关性。方法:收集127例AP患者的临床资料,根据病情严重程度分为轻症AP(MAP组) 63例和重症AP(SAP组) 64例;另选取健康体检者60例为对照组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测3组血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)及脂肪酶(LPS)水平;利用Pearson法分析血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平与患者Ranson评分、急性生理与慢性健康评估(APCHEⅡ)评分、血清生化指标的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平对AP的诊断价值;采用Logistic回归分析评估影响AP的危险因素。结果:与对照组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05),MAP组血清IL-6、IL-18、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05);与MAP组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、CRP水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-551-5p与TNF-α、IL-6、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分呈正相关(r值依次为0. 755,0. 684,0. 531,0. 519,0. 712,0. 679,均P 0. 05);血清miR-126a-5p与IL-6、IL-18、AMS水平及Ranson评分呈正相关(r值依次为0. 711,0. 678,0. 628,0. 701,均P 0. 05);血清miR-551-5p、miR-126a-5p诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0. 809、0. 800,截断值分别为2. 01、1. 54,敏感度分别为73. 1%、85. 3%,特异性分别为82. 8%、72. 4%;二者联合诊断的AUC为0. 965,敏感度为96. 5%,特异性为82. 4%;多因素Logistic分析结果显示高水平血清AMS、LPS、miR-551-5p、miR-126a-5p是AP的危险因素。结论:血清高水平miR-551-5p及miR-126a-5p可能反映AP患者病情严重程度,是评估SAP患者预后的潜在指标。  相似文献   

7.
目的 探讨微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制。方法 X射线照射构建放疗抵抗的宫颈癌细胞株HeLa-X,qRT-PCR法检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、C33A、HCC-94、HeLa、HeLa-X及人正常宫颈上皮细胞HCer Epic中miR-181d-5p表达,使用LipofectamineTM2000试剂盒对HeLa-X细胞进行转染,分别转染miR-181d-5p模拟物阴性对照、miR-181d-5p模拟物、DDX3 siRNA阴性对照、DDX3 siRNA、DDX3 siRNA和miR-181d-5p抑制物阴性对照、DDX3 siRNA和miR-181d-5p抑制物序列5μL,并用4 Gy X射线照射处理,将细胞随机分为空白组、4 Gy组、4 Gy+miR-NC组、4 Gy+miR-181d-5p mimics组、4 Gy+si-NC组、4 Gy+si-DDX3组、4 Gy+siDDX3+anti-miR-NC组、4 Gy+si-DDX3+anti-miR-181d-5p组,CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各...  相似文献   

8.
9.
目的 观察微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清中的表达及对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)增殖和迁移的调控作用,探讨miR-181a-5p与血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)的靶向关系。方法 采集100例ACS患者[ACS组,其中急性心肌梗死(AMI)患者55例、不稳定心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)患者44例]、40例冠脉造影结果阴性者(对照组)的外周静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-181a-5p。取对数生长期HCASMC细胞,分为一、二、三、四组,采用脂质体转染法分别转染miR-181a-5p模拟物(miR-181a-5p mimics)、模拟物阴性对照(mimics-NC)、miR-181a-5p抑制物(miR-181a-5p inhibitor)及抑制物阴性对照(inhibitor-NC),培养48 h时采用CCK-8法测算细胞...  相似文献   

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白雪  董巧云  王博  赵丽  姚彦 《山东医药》2022,62(4):22-25
目的 探讨帕金森病(PD)患者血清miR-103a-3p、miR-486-5p水平变化及临床意义.方法 选取183例PD患者为PD组,根据Hoehn-Yahr分级分为重度组(n=53)、中度组(n=71)、轻度组(n=59),另选取75例体检健康者为对照组.采用qRT-PCR检测血清miR-103a-3p、miR-48...  相似文献   

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目的 观察miR-181a-5p对动脉钙化细胞模型的影响,探讨其可能的作用机制.方法 培养人主动脉平滑肌细胞(HASMC),经成骨样分化诱导后使用茜红素染色检测细胞成骨样分化的程度,采用real-time PCR检测成骨样分化标志基因骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和碱性磷酸酶(ALP)的mRNA...  相似文献   

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目的 探讨过表达miR-515-5p对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、侵袭能力的影响及其机制。方法 利用StarBase数据库进行生物信息学分析并预测miR-515-5p的靶基因为CBX4,并经双荧光素酶报告基因实验验证。选择视网膜母细胞瘤细胞系SO-RB50、Y79、HXO-RB-44细胞中miR-515-5p表达降低最明显的SO-RB50细胞进行实验,分为miR-515-5p NC组、miR-515-5p mimics组、miR-515-5p mimics+CBX4组、miR-515-5p mimics+CBX4-NC组,分别转染miR-515-5p阴性对照、miR-515-5p mimics、miR-515-5p mimics+CBX4过表达载体、miR-515-5p mimics+CBX4空载体。采用实时荧光定量PCR法检测各组miR-515-5p及CBX4 mRNA表达,Western blotting法检测CBX4蛋白表达,CCK-8法检测转染12、24、48、72 h的细胞增殖能力(OD值),TUNEL法检测细胞凋亡率,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果 mi...  相似文献   

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刘磊  杜攀  王芳  包迪  林立新 《山东医药》2020,60(20):11-15
目的观察结肠癌(CC)组织、细胞中微小RNA-513b-5p(miR-513b-5p)的表达变化,以及miR-513b-5p对CC细胞增殖和迁移的影响,并探讨相关机制。方法采用qRT-PCR法检测CC组织、癌旁组织和CC细胞株(HCT116、RKO、SW480、Lo Vo、SW620)、人结肠成纤维细胞(CCD-112CoN)中的miR-513b-5p。将HCT116细胞分为miR-con组(转染miR-con)、miR-513b-5p抑制剂组(转染miR-513b-5p inhibitors);采用CCK-8试剂盒和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力。通过生物信息预测miR-513b-5p在信号传导及转录激活因子3(STAT3)上的结合位点;分别将野生型STAT3(STAT3-WT)质粒、突变型STAT3(STAT3-MUT)质粒和miR-513b-5p mimic、miR-con转染HCT116细胞;用荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性,采用Western blotting法检测STAT3蛋白。取部分HCT116细胞,分为miR-con组(转染miR-con)、miR-5...  相似文献   

15.
目的 探讨miR-181a-5p、miR-126在炎症性肠病(IBD)患者血清中的表达及其与肠道菌群的相关性.方法 收集2016年10月至2018年12月保定市第二医院收治的100例活动期IBD患者作为研究组,根据IBD类型分为溃疡性肠炎(UC)组(60例)和克罗恩病(CD)组(40例),另选择同期在本院体检的50名健...  相似文献   

16.
目的]探讨血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病(PCAD)的相关性及其对PCAD的初筛价值。[方法]根据纳入标准及排除标准,纳入6例明确诊断的PCAD患者作为PCAD组,纳入6例健康受试者作为对照组,收集PCAD组和对照组血液,提取血清样本并保存,使用DNBseq平台检测两组血清中miRNA水平,筛选差异水平显著的miRNA。根据纳入标准及排除标准,收集78例PCAD患者、75例晚发冠心病患者和69例健康对照者的血液并对筛选的miRNA进行实时荧光定量PCR验证。分析PCAD患者冠状动脉造影报告,采用Gensini评分评估冠状动脉病变的严重程度。Spearman相关性检验分析有关miRNA水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。ROC曲线分析血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p及miR-30a-3p水平对PCAD的诊断价值,多因素Logistic回归分析PCAD发生的影响因素。[结果]DNBseq平台分析显示,差异表达miRNA 33个,其中上调miRNA 17个,下调miRNA 16个,差异水平最为显著的5个miRNA分别为miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p、miR-424-3p和miR-30a-3p;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PCAD患者血浆miR-1228-5p升高1.7倍,miR-34a-5p升高1.4倍,miR-192-5p升高0.7倍,miR-30a-3p升高2.5倍(P<0.05),两组间血浆miR-424-3p水平差异无统计学意义(P>0.05);血浆miR-1228-5p和miR-34a-5p水平与PCAD患者冠状动脉狭窄程度均呈正相关(r=0.307,P=0.004;r=0.238,P=0.036);ROC曲线分析显示,miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p诊断PCAD的ROC曲线下面积分别为0.903、0.832、0.731及0.798,其联合诊断PCAD的ROC曲线下面积为0.990,95%CI为0.976~1.000。[结论]PCAD患者血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平显著升高,其联合检测诊断PCAD具有较高的准确性,有望成为初筛PCAD的新型生物标志物。  相似文献   

17.
何霞  卫仙洪  李佳  李玲  王建 《山东医药》2023,(1):28-31+36
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清微小RNA-98-5p(miR-98-5p)、微小RNA-142-5p(miR-142-5p)水平变化及其临床意义。方法 选择AD患者103例(观察组)、体检健康的志愿者50例(对照组),采集两组清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-98-5p、miR-142-5p,采用ELISA法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42,同期采用简易精神状态检查量表(MMSE)评分评估认知功能。采用Pearson/Spearman相关分析法分析AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平与血清Aβ1-40、Aβ1-42水平和MMSE评分的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-98-5p、miR-142-5p水平对AD的诊断价值。结果 观察组血清miR-98-5p、miR-142-5p水平均显著高于对照组(t/Z分别为7.557、5.827,P均<0.01)。观察组血清Aβ1-40水平显著高于对照组(Z=7.519,P<0.01),血清Aβ1-42水平和MMSE评分均显著低于对照组(t/Z分别为5....  相似文献   

18.
目的 观察miR-383-5p转染对人卵巢颗粒细胞株KGN凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 取对数生长期KGN细胞,分为3组,Blank组为空白对照组,miR-383-5p mimics组转染150 pmol的微小RNA-383-5p模拟物(miR-383-5p),miR-383-5p mimics+NAC组为转染150 pmol的miR-383-5p mimics后N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预组,比较Blank组与miR-383-5p mimics组、miR-383-5p mimics组与miR-383-5p mimics+NAC组两组间凋亡率及凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3蛋白)的表达和活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 与Blank组比较,miR-383-5p mimics组凋亡率及Bax、cleaved caspase 3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P均<0.05);与miR-383-5p mimics组比较,miR-383-5p mimics+NAC组miR-383-5p mimic...  相似文献   

19.
目的?探讨外周血血清中微小RNA(microRNA, miR)-338-5p、miR-140-5p在HBV相关肝细胞癌患者中表达水平及临床意义。方法?选取2017年11月—2020年11月我院收治的HBV相关肝细胞癌患者95例作为肝细胞癌组,另选取同时期HBV相关良性肝病患者100例作为良性组,及健康体检者100例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平及HBV DNA载量,采用Pearson相关分析分析HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量的关系,采用多因素Logistic回归模型分析影响HBV相关肝细胞癌发生的危险因素;ROC曲线分析miR-338-5p、miR-140-5p、异常凝血酶原-Ⅱ(abnormal prothrombin-Ⅱ, PIVKA-Ⅱ)表达对HBV相关肝细胞癌的诊断价值。结果?外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平从高至低依次为肝细胞癌组[(2.73±0.88)、(103.14,319.19)mAU/ml]、良性组[(1.48±0.40)、(32.70,87.15)mAU/ml]、对照组[(1.00±0.27)、(10.36,16.82)mAU/ml],外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为对照组(1.00±0.25)、良性组(0.72±0.20)、肝细胞癌组(0.38±0.12),两两比较差异均具有统计学意义(P均<0.05);肝细胞癌组患者HBV DNA载量(144.97±47.32)明显高于良性组(75.66±21.91)(P<0.05)。不同TNM分期患者间比较,外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平及HBV DNA载量从高至低依次为TNM Ⅳ期、Ⅲ期、Ⅱ期、Ⅰ期,外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为TNM Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期,两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p表达水平与HBV DNA载量呈正相关(P<0.05),而miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量呈负相关(P<0.05)。HBV相关肝细胞癌发生与患者有无糖尿病史、有无长期饮酒史、HBV DNA载量及外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平有关(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示外周血血清中PIVKA-Ⅱ>40 mAU/ml、miR-338-5p高表达、miR-140-5p低表达是影响HBV相关肝细胞癌发生的独立危险因素(P<0.05)。外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平联合诊断HBV相关肝细胞癌的AUC为0.930,明显高于3指标单独诊断的AUC(P均<0.05),联合诊断的敏感度为98.90%,特异度为87.00%。结论?HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p高表达,miR-140-5p低表达,2者可作为评估HBV相关肝细胞癌发生的血清指标,2者联合PIVKA-Ⅱ更有利于诊断HBV相关肝细胞癌。  相似文献   

20.
目的 探讨微小RNA(miR)-485-5p对鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-485-5p在人永生化鼻咽上皮细胞系NP69和人鼻咽癌细胞系CNE2中的表达情况;将体外培养的CNE2细胞分为Con组(正常培养)、NC组(转染mimics阴性对照)和mimics组(转染miR-485-5p mimics),实时荧光定量PCR测定miR-485-5p表达,噻唑蓝法、Transwell小室、流式细胞术分别检测细胞增殖活性、侵袭和迁移、凋亡,免疫印迹法检测细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白和CDC28蛋白激酶调节亚基(CKS)1B蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-485-5p和CKS1B靶向关系。结果 与NP69细胞比较,miR-485-5p在CNE2细胞中的表达水平明显降低(P<0.05)。与Con组、NC组比较,mimics组细胞中miR-485-5p表达水平、细胞凋亡率和E-钙黏蛋白表达水平均明显升高,而增殖活力、侵袭与迁移能力和N-钙黏蛋白、波形蛋白、CKS1B蛋白表...  相似文献   

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