稀释介质对化学发光免疫分析检测血清HCG的影响

在临床检验工作中,有时检测项目的血清浓度较高,超出标准曲线可测范围,需稀释后复测.有些检测项目自动化仪器上配有专用稀释液,可进行稀释;在没有专用稀释液时,用什么稀释介质既方便又不影响结果的准确性?本文用生理盐水和零浓度血清作为稀释液,探讨两者对血清HCG测定值的影响.     

应用FITC系统建立雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法

目的利用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)系统建立人血清雌二醇(estradiol,E_2)直接竞争化学发光免疫分析方法。方法采用兔抗-FITC抗体、FITC-抗-E_2两步包被制备预包被板,采用直接竞争法原理建立E_2化学发光免疫分析检测体系,并对FITC-anti-E_2包被浓度、酶标抗原稀释比例、缓冲体系、反应时间等各种影响因素进行优化。结果本系统线性范围为30～3000 pg/mL,空白检测限4.8pg/mL,定量检测限30 pg/mL,分析内精密度5.6%,批间精密性8.7%,平均回收率95.9%,与雌三醇、睾酮、孕酮均无明显交叉反应,与贝克曼全自动化学发光试剂同时测定164份样本,二者测定结果的相关系数r为0.979。结论成功建立了雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法 ,该方法性能指标优秀,具有一定的临床应用价值。     

化学发光免疫分析测定血清甲状腺素

建立了以鲁米诺，过氧化氢作为发光底物，辣根过氧化物酶作同标记酶的化学发光免疫分析法，用于血清中甲状腺素水平测定，此法灵敏度为４．６ｎｇ／ｍｌ，不同水平Ｔ４批内变异系数为４．５％～７．８％，批间变异系数为７．０％～７．４％，加入Ｔ４５０ｎｇ／ｍｌ，１００ｎｇ／ｍｌ，２００ｎｇ／ｍｌ回收率分别为１０５％，１０１％，１０４％，与放免法有较好的相关性，ｒ＝０．８３１，Ｐ〈０．００１，关系式为Ｔ４－ＣＬＩＡ     

化学发光免疫分析法测定血清甲状腺素

建立了以鲁米诺、过氧化氢作为发光底物，辣根过氧化物酶作为标记酶的化学发光免疫分析法，用于血清中甲状腺素水平测定，此法灵敏度为４．６ｎｇ／ｍｌ，不同水平Ｔ＿４批内变异系数为４．５％～７．８％，批间变异系数为７．０％～７．４％。加入Ｔ＿４５０ｎｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌ、２００ｎｇ／ｍｌ，回收率分别为１０５％、１０１％、１０４％，与放免法有较好的相关性，ｒ＝０．８３１，Ｐ＜０．００１，关系式为Ｔ４－ＣＬＩＡ＝０．９１５Ｔ４－ＲＩＡ＋２７．１（ｎｇ／ｍｌ），ｎ＝２６。　此法操作简便，检测速度快，适合于临床应用。     

化学发光免疫法测定生殖激素的质量控制

为了探讨化学发光免疫法(CLIA)测定生殖激素的质量控制,使用CLIA测定生殖激素,观察实验室的室间、室内质控.结果表明:室内、室间质控符合要求.雌二醇(E2),孕酮(P)稀释时应用特定的稀释液.做好E2和P测定的质量控制是提高结果准确性,满足临床需要的保证.     

血清真胰岛素化学发光免疫分析方法学研究

建立一种高灵敏度真胰岛素临床常规检测方法.采用两株特异的抗胰岛素单抗体,分别抗胰岛素肽链上两个不同的抗原决定簇,用一株制备固相抗体,另一株标记碱性磷酸酶C,以金刚烷衍生物为发光底物建立化学发光免疫分析(CLIA)法.结果表明本方法灵敏度为0.06μIU/mL,标准曲线量程为1.0～150μIU/mL,批内和批间CV分别为5.0%、7.8%,平均回收率为94.4%.分别测定了男、女成人空腹血清各100份,男性实测范围0.52～11.23μIU/mL,平均值为3.86μIU/mL,女性实测范围为0.75～10.66μIU/mL,平均值为3.62μIU/mL.真胰岛素CLIA法简便快速,能真实反应血清胰岛素的水平,对临床糖尿病的诊疗和病理生理研究具有实用价值.     

基于化学发光磁微粒免疫分析技术检测血清Lp- PLA2浓度

目的 建立一种脂蛋白相关性磷脂酶A2(Lp-PLA2)直接化学发光免疫分析方法并进行性能评价。方法 根据双抗夹心法原理,将磁珠-Lp-PLA2抗体1(MAb, Coating)与血清中的Lp-PLA2抗原以及吖啶酯-Lp-PLA2抗体2(MAb, Labeling)反应形成免疫复合物,磁场吸附清洗,加入预激发液和激发液后仪器检测反应过程中相对发光单位(RLU),通过标准曲线方程计算样本中Lp-PLA2浓度,并对试剂各项性能进行评估。结果 本方法空白限为0.5ng/mL,线性范围为5～1 000ng/mL,回收率在85%～115%范围内,批内精密度为2.26%～3.80%,批间精密度为3.82%～4.63%,特异性和抗干扰能力符合要求,与热景Lp-PLA2检测试剂盒比对相关系数r=0.9874。结论 本方法各项性能指标均达到临床检验质量要求,与现有试剂盒比对结果具有较好的一致性,可供广大研究者借鉴参考。     

化学发光法测定241例医院就诊患者血清透明质酸水平

血清透明质酸（HA）主要由肝内皮细胞摄取分解,少量小分子HA亦由肾小球滤过,当肝、肾功能受损时,血清HA升高且随病变加剧而呈升高趋势。HA预测肝硬化优于现有常规肝功能指标。作者对我院2010年1月至2010年3月住院和门诊的241例患者用化学发光免疫分析法测定其血清HA,结果报告如下：     

化学发光免疫分析仪常见故障分析与排除

ACS：180SE化学发光免疫分析仪采用化学发光技术和磁性分离技术相结合的测定方法，以丫啶酯为发光标记物，固相载体为极细小的顺磁性颗粒。可测定甲状腺激素、性腺激素、肿瘤标记物、治疗药物等多种物质。我院自1999年使用该仪器后，提高了检测质量。对于出现的常见故障，我们通过不断地摸索与分析，掌握了一些排除方法，现报告如下。     

血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸(T3)化学发光定量免疫分析方法.方法 采用固相竞争法,96孔微孔板包被T3抗体,辣根过氧化物酶标记T3,鲁米诺为发光底物,建立T3化学发光定量免疫分析方法.结果 本方法的线性范围为0.5 ～8.0ng/mL;分析灵敏度为0.18ng/mL;批内变异系数为4.4％ ～6.6％,批间变异系数为5.5％～10.6％;回收率为90.0％～113.3％;高值T3血清样品经系列倍比稀释后的测定值与稀释度呈线性关系,相关系数为0.9922;与T4、γT3的交叉率分别为0.35％、0.54％;与罗氏电化学发光分析法的测定值具有较好的相关性.结论 本方法具有分析灵敏度高、特异性好和操作简便快速的特点,适用于临床检测和科研应用.     

化学发光免疫法和放射免疫法对甲状腺激素检测的比较分析

本文应用化学发光免疫分析和放射免疫分析检测血清甲状腺激素。结果表明,两种分析技术测定值相关性良好,其相关系数（ｒ）分别为０．９８４,０．９７９,０．９６,０．９８３。化学发光法实现分析程序安全自动化,非常适宜大量样品的检测,试剂盒有效期长,在一定时期两种方法将相互补充。     

两种检测方法测定抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺过氧化物酶抗体结果的比较

目的 应用化学发光免疫分析法（CLIA）和放射免疫分析法（RIA）分别测定血清抗甲状腺球蛋白抗体（抗TgAb）和抗甲状腺过氧化物酶抗体（抗TPOAb）.方法 采用CLIA法和RIA法测定304例不同类型甲状腺疾病患者和38名健康对照者血清抗TgAb和抗TPOAb水平.结果 CLIA法测定血清抗TgAb和抗TPOAb水平与RIA法测定的结果具有良好的一致性.结论 CLIA法测定血清抗TgAb和抗TPOAb可以用来替代RIA法.     

化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能验证

目的验证化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合科室具体实际,验证深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus检测系统检测C肽的基本分析性能。结果C肽低、高浓度批内不精密度、批间不精密度均在可接受范围内;无样本携带污染;C肽原装配套定值标准品检测值与靶值的偏倚小于12.5%,20例临床样本与MAGLUMI 4000检测结果差异无统计学意义(P>0.05),平均相对偏差为3.76%;C肽最大稀释倍数为8倍;功能灵敏度为0.10 ng/mL;C肽浓度范围在0.09~17.25ng/mL线性回归方程为Y=1.008X-0.2891,相关系数r=0.983;20名健康体检者检测C肽的结果为1.042~2.901ng/mL,100%的检测结果在厂家提供的参考区间内。结论深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus化学发光免疫分析检测系统检测C肽的基本分析性能与厂家声明或相关文献基本一致,可以替换深圳新产业MAGLUMI 4000,用于临床常规工作的开展。     

BECKMAN DXI800化学发光检测系统固定吸试剂针前后雌二醇测定结果的比较分析

目的比较BECKMAN DXI800化学发光检测系统固定吸试剂针前后雌二醇(E_2)测定结果 ,并对所得结果进行统计分析,以便找出更优的E_2检测方法。方法选择63份年龄不同的患者血清标本和1份广西区临床检验中心统一发放的质控品,设计一系列实验组合,并且按照实验室操作标准用BECKMAN DXI800化学发光检测系统进行检测不同实验组E_2的浓度;然后对仪器进行设置固定一根吸试剂针,再次检测相同实验组E_2的浓度。比较固定吸试剂针前后E_2检测结果的差异,并进行统计分析。结果固定吸试剂针前与固定吸试剂针后患者血清E_2的检测结果配对秩和检验,差异无统计学意义(P>0.05)。固定吸试剂针前检测质控品E_2结果的偏倚度与固定吸试剂针后检测质控品E_2结果的偏倚度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。固定吸试剂针后检测质控品E_2结果的变异系数比固定吸试剂针前检测质控品E_2检测结果的变异系数低。结论 BECKMAN DXI800化学发光检测系统固定吸试剂针前后E_2检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。固定吸试剂针后E_2测定结果较固定吸试剂针前E_2测定结果变异系数更小、标准差更小,精密度更高,重复性更好。     

化学发光免疫法检测前列腺特异性抗原的临床应用

目的 利用化学发光免疫法定量检测前列腺特异性抗原(PSA),分析其在临床诊断前列腺癌中的应用情况.方法 将60例前列腺癌患者设为A组,60例良性前列腺增生患者设为B组,60例健康体检者设为C组,对三组受试者血清中总前列腺特异性抗原(tPSA),游离前列腺特异性抗原(fPSA)进行化学发光免疫法检测,并分析其水平差异.结果 经检测,A组和B组的tPSA含量显著高于C组,而且A组tPSA含量显著高于B组,差异显著,存在统计学意义(P＜0.05);另外A组fPSA/tPSA比值低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对PSA进行化学发光免疫法检测,具有较高的临床诊断价值,可为前列腺癌临床诊断提供可靠的参考依据.     

化学发光免疫分析法检测乙肝病毒感染性标志物的临床应用

目的 探讨化学发光免疫分析法检测乙肝病毒感染性标志物的临床应用效果.方法 抽取我院2013年1月至2014年1月接收的疑似乙型肝炎病人800例,采用化学发光免疫分析法(CLIA)和酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别检测患者的乙肝病毒血清标志物.结果 HBsAg、HBeAg、HBeAb的检出率CLIA高于ELISA(P＜0.01),两种方法HBsAb、HBcAb的检出率无明显差异(P＞0.05);低水平HBsAg检测ELISA敏感性低于CLIA;ELISA检出的最低浓度为0.128IU/mL,CLIA法检出的最低浓度为0.0311U/mL.结论 采用CLIA检测乙肝病毒感染性标志物相比ELISA更准确,可有效应用于乙肝临床诊断和病情动态监测.     

游离甲状腺素化学发光免疫分析方法的建立

目的 采用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,使用鲁米诺-双氧水-辣根过氧化物酶化学发光体系作为检测体系,建立测定血清中游离甲状腺素的化学发光免疫分析方法.方法 利用竞争法建立游离甲状腺素的检测体系,分别对该体系进行分析性能评估、2016年度内分泌室间质评,并与进口全自动发光试剂盒检测结果进行一致性检验.结果在4~64pmol/L的校准曲线范围内相关系数0.9995,最低检出限为0.54pmol/L,批内和批间精密度均小于7.0%,稳定性结果良好,不影响检测结果.2016年全国室间质评测定结果均在允许范围内,与进口西门子发光试剂盒有很好的临床符合性,两种试剂盒的样本测值差异不具有统计学意义.结论 本方法利用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,在节约包被原料的同时改善了精密度且提高了灵敏度,最后通过临床血样的一致性评价,与参比试剂盒具有同等的临床使用价值.