甘遂半夏汤加减甘遂甘草不同给药次数对腹水大鼠肝脏病理形态的影响

目的同给药次数条件下的甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水模型大鼠肝脏病理形态的影响。方法采用Walker-256细胞制造癌性腹水模型,将Wistar大鼠按体重随机分为空白组、模型组、阳性对照组、全方给药一次组、去草给药一次组、去遂给药一次组、去草遂给药一次组、全方给药二次组、去草给药二次组、去遂给药二次组、去草遂给药二次组,共计11组。给药一次组每天上午给药1次,给药二次组上午、下午各给药1次,一二次组每天给药总量一致。腹水长成14天后取材,摘取肝脏,制成病理切片,在光镜下观察大鼠肝脏的病理形态变化,并进行半定量评分。结果模型组肝细胞损伤严重,全方给药一次组及二次组肝损伤较模型组明显减轻,且一次组的减轻程度大于二次组。与全方一次组比较,去草一次组、去遂一次组、去草遂一次组肝损伤加重;与全方二次组比较,去草二次组、去遂二次组、去草遂二次组肝损伤加重。结论全方给药一次组和二次组对肝损伤均有一定的改善作用,给药一次组的改善作用优于给药二次组;全方组损伤修复及抗炎作用优于全方去掉一味或两味反药组。     

甘遂半夏汤加减甘遂及不同品种甘草对腹水模型大鼠心肝肾功能的影响

目的通过分析含不同品种甘草的甘遂半夏汤加减反药组合对腹水模型大鼠的心肝肾脏功能指标的变化,探讨甘草品种对甘遂甘草配伍"反"或"不反"的影响。方法 Wistar大鼠220只随机分成11组,空白组、模型组、阳性药组、全方炙甘草组、全方胀果组、全方光果组、去遂炙甘草组、去遂胀果组、去遂光果组、去草组、去草遂组,除空白组和模型组外连续给药10天,然后腹主动脉取血,离心,检测心肝肾功能相关指标。分析方法选择方差分析,方差齐采用LSD方法,方差不齐采用Dunnet T3分析方法。结果 (1)在肝功能中TP和ALB合成方面,全方(炙胀果甘草)组的药效相对优于全方(炙光果甘草)组和全方(炙甘草)组,且三个全方组去掉一味反药或两味反药组在促进由于Walker-256细胞造成的大鼠肝脏ALB和TP合成降低方面的疗效优于三个全方组。(2)含甘遂与不同品种甘草反药组合的甘遂半夏汤全方在对Walker-256细胞造成的大鼠心功能、肾功能和肝功能中AST的含量、ALT的含量、AST/ALT比值和ALP含量变化方面无明显影响。结论甘草、光果甘草和胀果甘草这三个不同品种的甘草对甘遂甘草反药组合在心功能、肾功能和肝功能中AST的含量、ALT的含量、AST/ALT比值和ALP含量方面无明显影响,但在改善由于Walker-256细胞造成的大鼠肝脏蛋白合成异常方面,胀果甘草优于光果甘草和甘草。     

甘遂半夏汤加减甘遂及不同品种甘草对腹水模型大鼠肝脏CYP450m RNA的影响

目的观察含不同品种甘草的甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水模型大鼠肝脏CYP450 mRNA的影响。方法采用Walker-256细胞制造癌性腹水模型,将Wistar大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、阳性对照组、全方炙甘草组、全方炙光果甘草组、全方炙胀果甘草组、去遂炙甘草组、去遂炙光果甘草组、去遂炙胀果甘草组、去炙甘草组、去炙甘草醋甘遂组,共计11组。空白组和模型组灌胃蒸馏水,其余各给药组灌胃相应药物。给药11天后,摘取肝脏,液氮保存,进行PCR实验。结果在CYP2E1 mRNA表达方面,全方炙甘草组、全方炙胀果甘草表达下调,且优于全方去掉一味或两味反药。三个甘草品种的甘遂半夏汤的CYP3A1 mRNA、CYP3A2 mRNA表达上调,且优于全方去掉一味或两味反药。结论 (1)全方炙甘草组、全方炙胀果甘草组在CYP450表达方面表现出一定的药效作用,其中全方炙甘草组优于全方炙胀果甘草,且均优于全方去掉一味或两味反药组。(2)全方炙光果甘草组则未表现出一定的药效作用,但也未表现出毒性作用,弱于去掉一味或两味反药。     

接近临床应用剂量下甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水大鼠利水作用的影响

目的：通过甘遂半夏汤中甘遂甘草反药组合加减应用对癌性腹水模型大鼠利水作用的影响,探讨药效或毒性反应是否与反药组合相关。方法：将雄性Wistar大鼠按体重随机分为空白组、模型组、呋塞米阳性药组、甘遂半夏汤低剂量全方组、甘遂半夏汤低剂量全方去醋甘遂组、甘遂半夏汤低剂量全方去炙甘草组,甘遂半夏汤低剂量全方去炙甘草醋甘遂组,造模第3天开始给药,除正常喂养外,每天上午除空白组、模型组外,其余各组灌胃给药,空白组和模型组灌胃蒸馏水,灌胃体积均为10 mL·kg^-1。给药5 d后,收集大鼠24 h尿量,给药9 d后,所有大鼠禁食不禁水12 h,取材前后称量大鼠体重,间接测量腹水量,放完腹水后腹主动脉取血,离心检测肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、抗利尿激素等指标。结果：甘遂半夏汤低剂量全方组在增加大鼠净体重,降低腹围体重比,降低肾素、血管紧张素、醛固酮、抗利尿激素方面的效果优于其他给药组。结论：甘遂半夏汤低剂量全方组在利水作用方面优于低剂量全方去掉甘遂甘草反药组合中的1味或2味,肾素-血管紧张素-醛固酮系统可能是其发挥利尿作用的一条途径。     

甘遂半夏汤中甘遂甘草反药组合加减应用对腹水大鼠CYP450酶的影响

目的：从细胞色素(CY)P450酶的角度,以甘遂半夏汤复方为载体,探究腹水病理模型下甘遂甘草配伍“反”与“不反”。方法：150只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、甘遂半夏汤全方组(5.68 g·kg^-1·d^-1)、甘遂半夏汤全方去甘遂组(5.57 g·kg^-1·d^-1)、甘遂半夏汤全方去甘草组(4.01 g·kg^-1·d^-1)、甘遂半夏汤全方去甘草甘遂组(3.90 g·kg^-1·d^-1),其中甘遂1.1 g、法半夏9 g、白芍15 g、炙甘草16.7 g、蜂蜜15 g,每组25只,除正常组外,其余各组大鼠腹腔注射Walker-256细胞复制大鼠癌性腹水模型,正常组、模型组灌胃蒸馏水,其余给药组灌胃相应药液,连续给药7 d;用高效液相色谱法(HPLC)检测探针药物浓度,通过计算代谢率来测定CYP450酶活性;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定CYP450酶基因表达;用蛋白免疫印迹法...     

丹参对糖尿病肾病大鼠肾脏水通道蛋白-2表达的影响

目的 探讨肾脏水通道蛋白-2(AQP-2)的表达与糖尿病肾病大鼠水液代谢异常及丹参防治作用的机制.方法 60只健康SD大鼠分为正常组(10只),剩余50只采用高糖高脂饲料刺激加小剂量STZ诱导糖尿病大鼠模型成功30只,随机分为模型组、对照组、观察组每组各10只;免疫组织化学检测AQP-2在各组大鼠肾脏中的分布及蛋白质的表达;RT-PCR方法检测各组大鼠AQP-2 mRNA的表达,并以β-actin相对定量.结果 肾脏免疫组化显示,AQP-2主要在肾脏的集合管表达.在4组动物的肾脏AQP-2蛋白质[相对阳性面积:正常组(0.119±0.035),模型组(0.188±0.027),对照组(0.158±0.036),观察组(0.154±0.033)]和mRNA[正常组(0.51±0.004),模型组(0.81±0.059),对照组(0.78±0.090),观察组(0.70±0.027)]的表达上观察组较模型组均下调(P＜0.01).结论 在糖尿病模型大鼠肾脏组织中AQP-2表达增多,AQP-2的增多可能参与了糖尿病多尿的形成.丹参对水通道蛋白的表达有下调作用,这可能是其利水作用的机制,也是其防治糖尿病肾病的基础.     

补肾活血方对慢性心力衰竭大鼠心功能及肾组织水通道蛋白2的影响

目的探讨补肾活血方治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法 60只SD大鼠随机选出15只为假手术组,其余45只采用冠状动脉结扎及术后给予减食和力竭式游泳建立慢性心力衰竭大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、西药组、中药组。假手术组和模型组大鼠每日给予蒸馏水灌胃2次,每次3 ml;西药组给予卡托普利片12. 5 mg/(kg·d)灌胃;中药组给予补肾活血方9. 2 g/(kg·d)灌胃,持续给药4周。实验期间观察各组大鼠皮毛、活动、体重、喘鸣音等一般情况,心脏彩色超声检测大鼠舒张末期左心室内径(LVEDD)、收缩末期左心室内径(LVESD),并计算左心室射血分数(EF)及左心室短轴缩短分数(FS),测定大鼠血清脑利钠肽(BNP)水平和大鼠肾脏组织中水通道蛋白2 (AQP2)表达。结果模型组大鼠毛色晦暗,甚至脱毛,活动性差,体重减轻,部分大鼠有咳嗽、喘促症状;而西药组、中药组大鼠各症状均有所改善。与假手术组比较,模型组大鼠LVEDD、LVESD升高,EF、FS降低,血清BNP水平和肾组织AQP2表达升高(P 0. 05)。与模型组比较,中药组及西药组大鼠LVEDD、LVESD降低,EF、FS升高,血清BNP水平及肾组织AQP2表达降低(P 0. 05);西药组与中药组各指标比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论补肾活血方可能通过降低慢性心力衰竭大鼠血清BNP,下调肾组织AQP2表达,从而改善心功能。     

甘遂-甘草配伍对大鼠肾脏毒性代谢组学的影响

目的:根据传统用药习惯,从代谢组学的角度来验证甘遂-甘草以1∶4比例配比时对大鼠肾脏的减毒作用,并在此基础上初步探讨其减毒作用机制。方法:实验采用SD雄性大鼠,随机分为空白对照组,甘遂组,甘草组和甘遂-甘草1∶4组。应用核磁共振技术(NMR)和正交-偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法分析给予大鼠甘遂、甘草和甘遂-甘草1∶4配比液后的大鼠肾脏代谢物变化,并结合血浆生化分析和肾脏组织病理切片HE染色检测,明确甘遂-甘草1∶4配伍的减毒作用机制。结果:甘草组极少引起血浆生化指标和病理学改变,同时对大鼠肾脏内源性代谢物的变化不大;甘遂组能引起血浆葡萄糖的升高和肌酸、肌酐的下降,造成肾小管上皮细胞水肿和空泡变性,肾小球个别出现瘀血的现象,同时引起肾脏内源性代谢物如胆碱,磷酸胆碱,苯丙氨酸,谷氨酰胺的减少和异亮氨酸,亮氨酸,缬氨酸,丙氨酸,乙酸,肌酸/肌酐的增加;而甘遂-甘草1∶4组并未出现明显的血浆生化指标改变,仅出现肾小球轻微瘀血及肾小管上皮细胞扩张的现象,同时仅引起胆碱,磷酸胆碱和苯丙氨酸的减少。结论:甘遂-甘草以1∶4配伍存在明显的减毒作用,主要是通过甘遂毒性生物标志物含量的变化和肾脏毒性传统指标的下调来体现其减毒效应。     

甘草配伍甘遂对大鼠肾脏Bcl-2、Bax表达的影响

目的:以Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达水平为指标,观察甘草与甘遂反药对配伍对大鼠肾脏功能的影响及与甘草比例的关系。方法:大鼠50只,随机分为甘遂组、甘遂配伍甘草1:0.25组、甘遂配伍甘草1:0.5组、甘遂配伍甘草1:1组和正常对照组,各组均ig给予相应药物,给药剂量依次为2、2.5、3、4g/kg,连续给药28天。采用免疫组化法检测大鼠肾脏中Bcl-2及Bax蛋白水平;采用RT-PCR法检测其肾脏中Bcl-2及Bax mRNA水平。结果:各给药组2、2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平均显著低于正常对照组;各比例甘草配伍甘遂组2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平显著高于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈正相关。各给药组2、2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著高于正常对照组;各比例甘草配伍甘隧组2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著低于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈负相关。结论:长期应用甘遂可加速大鼠肾脏细胞的凋亡,影响肾脏功能。甘草可抑制甘遂对肾脏的损害,且有明显的剂量依赖关系。     

六味地黄汤对肾阴虚大鼠水通道蛋白2的影响

目的: 从尿液浓缩机制方面研究六味地黄汤的滋阴作用机制。 方法: 36只成年雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组和中药组。采用放免法测定血浆血管升压素(AVP)水平、免疫组化法检测肾髓质水通道蛋白2(AQP₂)表达。 结果: 与正常对照组相比,模型组大鼠的体重、尿量明显减少,AVP水平上升,AQP₂表达增加;中药组上述指标恢复到接近正常组或正常组水平。 结论: 肾阴虚时机体尿液浓缩机制亢进,六味地黄汤的滋阴作用与其抑制亢进的尿液浓缩机制有关。     

真武汤对肾病综合征大鼠肾脏水通道蛋白2的影响

[目的]探讨真武汤对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其可能的作用机制。[方法]40只大鼠随机分成正常对照组(NC组),阿霉素肾病组(NS组),阿霉素肾病+真武汤干预组(A组)和阿霉素肾病+福辛普利干预组(F组),每组10只,分别在第1、2、3、4周末时检测各组大鼠24 h尿蛋白,同时在第4周末检测了大鼠血浆精氨酸血管加压素(AVP)含量和肾脏水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达。[结果]1)阿霉素大鼠在1周末尿蛋白明显升高,真武汤能明显减少大鼠尿蛋白。2)真武汤能下调阿霉素肾病大鼠肾脏AQP2蛋白的表达。3)真武汤能下调阿霉素肾病大鼠血浆AVP含量。[结论]真武汤能改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留状态,其机制可能与其调节肾脏AQP2和血浆AVP含量有关。     

健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠水通道蛋白8的影响

目的观察健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠肝组织AQP8表达的影响。方法将健康SPF级雄性Wistar大鼠90只,随机分为空白组、模型组、健脾活血祛湿方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用改良CCl4-酒精综合法造肝硬化腹水大鼠模型。用荧光定量PCR检测肝组织AQP8m RNA表达水平,免疫组织化学和Western Blotting法检测AQP8蛋白表达。结果模型组AQP8m RNA表达较空白组明显减少(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组AQP8m RNA表达较模型组显著(P0.01),秋水仙碱组与健脾活血祛湿方中、低剂量组AQP8m RNA表达与模型组差异有统计学意义(P0.05);免疫组化结果显示模型组AQP8少量表达,与空白组比较,AQP8蛋白表达量有显著差异(P0.01),健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP9蛋白表达量显著增高(P0.01);健脾活血祛湿方高剂量组与模型组与比较,AQP8蛋白表达量显著增高(P0.01);Western Blotting结果显示健脾活血祛湿方高剂量组表达较模型组明显升高(P0.01),健脾活血祛湿方中剂量组AQP8表达较模型组略有升高,但无统计学意义(P0.05),健脾活血祛湿方低剂量组AQP8表达低于模型组。秋水仙碱组与模型组比较有差异有统计学意义(P0.05)。AQP8基因及蛋白表达升高程度与中药使用剂量有关。结论 AQP8可能在肝硬化腹水的形成及消退中起着重要作用,健脾活血祛湿方可明显提高肝硬化腹水大鼠水通道蛋白AQP8表达,可能是该方起到治疗肝硬化腹水作用的分子生物学基础之一,可以作为治疗肝硬化腹水的新靶点。     

健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠肝功能及水通道蛋白9的影响

目的 观察健脾活血袪湿方对肝硬化腹水大鼠肝功能及肝组织水通道蛋白9（AQP 9）表达的影响。方法 将Wistar大鼠,随机分为6组,即正常 组,模型组,健脾活血祛湿方高、中、低剂量组（52,26,16.25 g·kg-1）,秋水仙碱组（100 μg·kg-1）,观察大鼠的一般情况,测定腹水量、检测谷丙转氨酶（ALT） 、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）的含量及AQP 9 mRNA转录与蛋白翻译水平。结果 健脾活血祛湿方对肝硬化腹水大鼠症状有明显的改善作用,能促进模型大鼠腹水消退 、改善相应肝功能指标,具有良好的保肝作用;与模型组比较,健脾活血祛湿方组AQP 9 mRNA转录与蛋白翻译水平均有不同程度的升高,作用强度与用药剂量呈正相关。结 论 健脾活血祛湿方良好的保肝作用及对AQP 9的升高作用是其治疗肝硬化腹水的靶点之一。     

肺气虚证模型大鼠肾组织水通道蛋白2表达的变化

目的观察肺气虚证模型大鼠肾组织水通道蛋白2（AQP2）表达的变化,为机体水液代谢过程中肺肾相关理论提供依据。方法20只大鼠随机分为模型组和对照组,用免疫组化、Western blot、RT-PCR方法测定肾组织AQP2蛋白及mRNA表达。结果肺气虚证模型组肾组织AQP2表达增加,AQP2mRNA表达增高,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〉0．01）。结论肺气虚证模型大鼠肾组织AQP2表达增强,提示肺主“通调水道”功能可能与影响肾小管AQP2表达有关。     

甘遂半夏汤中甘遂与甘草不同比例配伍 对癌性腹水模型大鼠生物效应影响的研究

目的:通过甘遂与甘草不同比例配伍的甘遂半夏汤对腹水模型大鼠生物效应影响的实验研究,筛选甘遂与甘草反药配伍起效的配比条件。方法:将甘遂与甘草按照2因素7水平的均匀设计原则设置不同配伍比例,实验分为正常组、模型组、甘遂半夏汤中甘草与甘遂配比1组(10.40 g∶1.17 g)、配比2组(6.94 g∶2.23 g)、配比3组(13.87 g∶0.05 g)、配比4组(3.47 g∶0.39 g)、配比5组(0.21 g∶1.56 g)、配比6组(20.80 g∶0.78 g)、配比7组(17.34 g∶1.94 g)以及呋塞米组(0.004 2 g.kg-1)。观察甘遂与甘草不同配比的甘遂半夏汤对癌性腹水模型大鼠尿量、腹水量、腹水肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。数据采用中药组方优化软件对生物效应指标进行甘遂与甘草配比的优化分析。结果:配比1组较模型组能增加腹水大鼠的尿量(P<0.05);配比6,7组降低腹水TNF-α,VEGF水平(P<0.05)。结论:经过中药组方优化软件分析,醋甘遂与炙甘草以1∶15配伍的甘遂半夏汤可能有较好的利水及抗细胞因子作用。     

不同方法炮制甘遂对LO2细胞周期与凋亡的影响

目的:探讨不同方法炮制所得甘遂各样品对人正常肝细胞LO2细胞周期与凋亡的影响.方法:以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后各炮制品(生品、清炒品、酷润品、醋制品)对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态,采用流式细胞术研究甘遂醋制前后各炮制品对LO2细胞周期和凋亡的影响.结果:与阴性对照组比较,甘遂生品可明显降低LO2细胞的活性(P＜0.01)和形态,显著升高S期细胞百分率(P＜0.05),显著降低G2/M期细胞百分率(P＜0.01),显著增加人正常肝细胞LO2细胞的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P＜0.01);与甘遂生品组比较,甘遂各炮制品均能降低对人正常肝细胞L02的增殖抑制作用(P＜0.01)和形态变差的趋势,其降低增殖抑制作用的顺序为醋制品＞醋润品＞清炒品,且呈一定的量-效关系(r醋制=0.999,r醋润=0.913,r清炒=0.914,r生品=0.984);且均能显著增加G2/M期细胞百分率(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01),显著减少人正常肝细胞LO2的早期凋亡率、晚期凋亡坏死率、总凋亡率(P＜0.01),其增加G2/M期细胞百分率的顺序和降低凋亡率的顺序均为醋制品＞醋润品＞清炒品.结论:甘遂炮制后可通过影响LO2细胞周期与凋亡降低其毒性,且甘遂醋制工艺中的炒与醋润2种操作在醋制降低甘遂的肝毒性中能够起到协同作用,从而为揭示上述2种操作在甘遂醋制减毒工艺中的合理性和醋制工艺优化提供了一定的依据.     

黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1和水通道蛋白-5表达的影响

目的探讨补气中药黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)和水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组各10只,予以每ml相当于0.25g黄芪生药的煎剂干预后,使用凝胶电泳测条带积分光密度值来检测确定肺组织AQP-1和AQP-5的表达情况。结果中药组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.572±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.278±0.068),中药组高于模型组(P<0.01)。中药组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.812±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.525±0.045),中药组高于模型组(P<0.05)。中药组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论黄芪可能是通过促进肺组织AQP-1、AQP-5的表达,从而起到对模型大鼠急性肺损伤的防治作用。     

益气活血利水法对心衰大鼠血管加压素-水通道蛋白2系统的影响

目的:研究益气活血利水法对于心衰大鼠精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的影响,以探讨本法对心衰水液潴留的作用机制。方法:选择健康Wistar大鼠,应用腹腔注射阿霉素(3 mg/kg,每周1次,连续6周)及睡眠剥夺,造成心衰大鼠模型,然后分空白组、模型组,芪苈强心组、中药高剂量、中剂量、低剂量6组,服药4周后观察6组大鼠服药后血浆精氨酸血管加压素(AVP)浓度;血管加压素V2受体(V2R)、水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达情况。结果:益气活血利水法可降低心衰大鼠血浆中升高的AVP浓度,与模型组比较,有统计学差异;可部分减弱肾脏组织V2R、AQP2蛋白表达。结论:益气活血利水法通过降低血浆中AVP浓度,下调V2R、AQP2蛋白表达来作用于精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的每个环节而起到改善水液潴留之目的。     

六味地黄丸对肾阴虚大鼠肺肾组织水通道蛋白1表达的影响

目的:观察六味地黄丸对肾阴虚大鼠肺、肾组织水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(10只)、甲状腺素组(30只),采用甲状腺素混悬液灌胃复制肾阴虚大鼠模型4周,造模成功后将模型组大鼠随机分为3组:甲状腺素组、六味地黄丸低剂量组和六味地黄丸高剂量组,每组10只,给药组给予相应剂量六味地黄丸混悬液灌胃4周,观察记录各组大鼠体质量、饮水量和尿量等一般症状体征;末次给药后,实时荧光定量PCR检测大鼠肺、肾组织中AQP1 mRNA的表达,Western Blot测定肺、肾组织AQP1蛋白的表达。结果:与对照组比较,甲状腺素组大鼠体质量显著降低(P<0.01),饮水量明显增多(P<0.01),尿量显著减少(P<0.01);肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白表达显著高于对照组(P<0.01);给予六味地黄丸干预后肾阴虚大鼠的一般症状体征得到显著改善,肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.01)。结论:六味地黄丸可有效纠正肾阴虚大鼠水液代谢紊乱,其机制可能与下调肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白表达有关。     

醋甘遂与炙甘草配伍对癌性腹水模型大鼠细胞色素氧化酶基因和蛋白表达的影响

目的通过检测癌性腹水模型大鼠肝功能指标、血清生物标志物含量及肝细胞色素P450 酶（cytochrome P450）CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1 的基因、蛋白表达,探讨醋甘遂与炙甘草配伍对癌性腹水大鼠CYP450 酶的调节作用,从而揭示二者配伍的作用实质。方法将雄性Wistar 大鼠按体质量随机分为正常组、模型 组、炙甘草组（免煎颗粒剂）、醋甘遂组（研末）、炙甘草-醋甘遂组（草遂组）、甘遂半夏汤组。除正常组外,其 余各组腹腔注射Walker-256 肿瘤细胞株复制癌性腹水模型,连续给药14 d。实验结束后取材,用生化法检测 天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ ALT）、碱性磷酸酶（AKP）活性以及总胆红素（TBIL）、直接 胆红素（DBIL）含量,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测谷氨酸脱氢酶（GLDH）、苹果酸脱氢酶（MDH1）、嘌呤核 苷磷酸化酶（PNP）、对氧磷酶（PON1）含量,HE 染色观察肝组织病理形态学变化,免疫组织化学法检测细胞色 素氧化酶CYP3A1、CYP2E1 蛋白表达,采用RT-qPCR 技术检测CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1 的基因表达。 结果与正常组比较,模型组AST、ALT、TBIL、DBIL、AKP、GLDH、MDH1、PNP 水平明显升高（P＜ 0.05）,PON1 水平明显下降（P＜0.05）;与模型组比较,炙甘草组、草遂组、甘遂半夏汤组PON1 含量明显升 高（P＜0.05）。RT-qPCR 及免疫组织化学结果显示CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1 基因及蛋白表达与正常组比 较明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,各给药组均能下调CYP2D6-1、CYP3A1、CYP2E1 的基因或蛋白表达 （P＜0.05）。HE 染色结果显示,与模型组比较,炙甘草组、草遂组及甘遂半夏汤组肝索紊乱减少,肝血窦扩张 减少。结论本实验提示醋甘遂与炙甘草只有在特定条件下,运用中医的辨证论治思维配伍应用才能起到减毒 的作用。醋甘遂与炙甘草配伍可能通过抑制细胞色素氧化酶的基因、蛋白表达,提高PON1 含量,降低氧化应 激,起到对肝脏的保护作用。