Toll样受体2、4及核因子-κB在溃疡性结肠炎黏膜组织中的表达及临床意义

目的探讨Toll样受体2、4(TLR2、TLR4)与核因子-κB(NF-κB)在溃疡性结肠炎(UC)黏膜组织中的表达,以及三者在UC发病机制中的作用。方法采用免疫组化法检测70例UC患者肠黏膜组织TLR2、TLR4与NF-κB的表达水平,并与44例结肠息肉患者的正常黏膜组织对比。结果 TLR2、TLR4和NF-κB在UC组表达率均高于对照组(P<0.01);且随内镜分级增高,UC组TLR2、TLR4和NF-κB的表达阳性细胞数均呈逐渐增加趋势(P<0.05),三者在活动期和非活动期中的表达也存在统计学差异(P<0.01),NF-κB分别与TLR2、TLR4呈显著正相关(r=0.823,P<0.01;r=0.752,P<0.01)。结论 UC组织中TLR2、TLR4和NF-κB表达异常,可能在UC发病机制中起重要作用,检测其变化对疾病活动度的评价具有重要的临床意义。     

腰椎间盘退变患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1、白细胞介素-1β表达及相关性研究

目的:探讨在腰椎间盘退变(LDD)患者髓核组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平及相关性。方法:选取LDD患者40例为观察组,选取同期非退行性椎间盘病变患者43例为对照组。根据Pfirrmann分级系统,观察组又分为轻度病变组(10例)、中度病变组(16例)和重度病变组(14例)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平。采用Western blot法及免疫组化染色检测Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。采用HE染色和病理学评分(HDS)对椎间盘组织的病理损伤程度进行组织学评分。比较各组患者髓核组织Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平。分析Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平与Pfirrmann分级、HDS组织学评分的相关性,以及Caspase-1与IL-1βmRNA表达水平间的相关性。分析LDD患者疾病严重程度的影响因素。结果:观察组Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达水平高于对照组(均P<0.05);在观察组中,随着疾病程度逐...     

磷酸化p38MAPK在退变和正常腰椎间盘髓核组织中的作用

目的观察随腰椎间盘退变（NP）程度的加重,NP中磷酸化p38MAPK的定位及表达情况,探讨其与椎间盘退变程度间的关系。方法用腰椎间盘MRI退变分级系统评定留取的MRI资料的退变程度,免疫组化法检测NP组织中磷酸化p38MAPK的表达,光镜下观察磷酸化p38MAPK的表达定位及表达程度。结果随着髓核退变程度的加重,其表达量明显提高、增强,不同退变等级颈椎间盘髓核中磷酸化p38MAPK的表达有显著差异;退变腰椎间盘髓核中磷酸化p38MAPK的含量随着椎间盘退变程度的加重逐渐增加,二者之间符合以椎间盘MRI退变等级为自变量,磷酸化p38MAPK相对含量为因变量的直线关系：Y=0．423X-0．675,p38MAPK信号转导通路参与髓核退变过程。结论磷酸化p38MAPK的含量随着椎间盘退变程度的加重逐渐增加。     

非压迫性椎间盘髓核突出所致神经根损伤大鼠血清白细胞介素23、白细胞介素17的表达水平及意义

目的 探讨非压迫性椎间盘髓核突出所致神经根损伤大鼠血清白细胞介素(IL)-23、IL-17的表达水平及意义.方法 将48只雄性SD大鼠随机分成实验组、对照组,每组24只.实验组大鼠建立非压迫性椎间盘髓核突出模型.分别于造模后1周、3周、5周时,每组随机抽取8只大鼠,测定大鼠右后肢疼痛缩爪阈值以及血清IL-17、IL-2...     

Toll样受体4、核因子-κb通路在溃疡性结肠炎发病机制中的应用

目的:通过研究Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、髓样分化分子88(myeloid differentiation factor,Myd88)、核因子-κb(nuclear factor-κb,NF-κb)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型结肠组织中的表达以及外周血中白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的表达水平,探讨TLR4/NF-κb信号通路在UC发病中的作用。方法:将健康SD大鼠40只随机分为模型组(A组)和正常对照组(B组),每组各20只,运用复合法(三硝基苯磺酸+乙醇)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型,造模成功后,进行大体形态损伤评分,HE染色观察大鼠结肠黏膜组织学改变,采用RT-PCR法检测UC各组大鼠结肠黏膜组织中TLR4、Myd88和NF-κb表达,采用ELISA法检测外周血中IL-1的表达。结果:与B组比较,A组大鼠结肠黏膜大体形态评分、组织学损伤评分、结肠黏膜组织中TLR4、Myd88和NF-κb的表达及外周血中IL-1的表达均显著增高(P0.01)。结论:UC大鼠模型中TLR4、Myd88、NF-κb和IL-1的表达明显升高,TLR4可能通过介导NF-κb引发信号通路下游的基因表达,从而导致炎症因子的释放。     

白细胞介素17及23在慢性放射性肠炎中的表达及临床意义

检测白细胞介素17（IL-17）和白细胞介素23（IL-23）在慢性放射性肠炎患者肠黏膜组织中的表达,并分析其表达与疾病的关系。方法纳入31 例慢性放射性肠炎为研究对象,选取健康对照30 例。对病情的评估采取临床症状和内镜下表现结合的形式。用免疫组织化学法测定IL-17及IL-23 的蛋白表达,并分析其与临床特征的关系。结果慢性放射性肠炎中IL-17 及IL-23 的阳性表达高于正常肠黏膜组织（均p=0.000）。IL-17及IL-23在慢性放射性肠炎患者肠黏膜中的表达与症状积分及内镜评分呈正相关（均p=0.000）。慢性放 射性肠炎患者肠黏膜中IL-17 与IL-23 的表达相关（r =0.731,p =0.000）。结论IL-17 及IL-23 在慢性放射性肠炎组织中高表达,且与疾病严重程度呈正相关,提示IL-17/IL-23 免疫轴可能参与慢性放射性肠炎的发生、发展。     

血清白细胞介素-17和白细胞介素-23在狼疮性肾炎预测中的应用

浙江省台州市第一人民医院检验科,浙江台州318020[摘要]目的探讨血清白细胞介素-17和白细胞介素-23在狼疮性肾炎预测中的应用。方法对2016年8月~2018年8月我院狼疮性肾炎患者120例及健康体检者60例的临床资料进行回顾性分析,分为三组,统计分三组人员的一般资料、血清IL-17、IL-23水平及活动组患者治疗前后的血清IL-17、IL-23水平。结果活动组者的SLEDAI评分、24 h尿蛋白、AI、CI均显著高于稳定组(P0.05),病理类型II型、III型比例均显著低于稳定组(P0.05),IV型比例显著高于稳定组(P0.05),活动组、稳定组、对照组的Scr水平逐渐降低(P0.05),白蛋白、C3C4水平逐渐升高(P0.05)。活动组患者的血清IL-17水平显著高于稳定组、对照组(P0.05);活动组患者的血IL-23水平显著高于稳定组、对照组(P0.05),稳定组患者的血清IL-23水平又显著高于对照组(P0.05)。活动组患者治疗后的血清IL-17、IL-23水平均显著低于治疗前(P0.05);完全缓解患者的血清IL-23水平显著低于部分缓解、未缓解患者(P0.05),部分缓解患者的血清IL-23水平又显著低于未缓解患者(P0.05)。结论血清白细胞介素-17和白细胞介素-23在狼疮性肾炎预测中的应用价值高。     

Toll样受体-4在稽留流产患者中的表达及其临床意义

目的 探讨Toll样受体-4与稽留流产患者易感性之间的关系.方法 收集稽留流产患者30例及正常孕妇30例的宫颈阴道灌洗液,采用酶联免疫吸附试验方法 对稽留流产患者及正常孕妇的宫颈阴道灌洗液中Toll样受体-4的表达进行检测.结果 稽留流产患者宫颈阴道灌洗液中Toll样受体-4浓度[(8.25±2.07)ng/mL]高于对照组[(3.72±1.96)ng/mL](P<0.0s).结论 宫颈阴道灌洗液中Toll样受体-4的浓度升高可能是稽留流产的易感因素之一.     

Toll样受体3和Toll样受体4在原发性IgA肾病患儿肾组织中的表达及意义

目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)3和TLR4在原发性IgA肾病患儿肾组织中的表达及意义.方法 选择2014年7月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的64例原发性IgA肾病患儿为研究对象,所有患儿于超声引导下定位穿刺获取肾组织标本行病理学检查,根据牛津分类法将患儿分为M0组...     

ADAMTS-4在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及其意义

目的 探讨ADAMTS-4在退变的腰椎间盘髓核组织中的表达及其意义. 方法 应用免疫组织化学方法检测40例(男27例,女13例)退变的腰椎间盘和8例(男3例,女5例)特发性脊柱侧凸腰椎间盘髓核组织中ADAMTS-4蛋白的表达.将获得的数据进行统计学分析. 结果 40例实验组髓核组织中32例表达阳性,8例对照组中均无阳性表达.ADAMTS-4在退变腰椎间盘髓核中的表达明显增加(χ2=10.53,P<0.005). 结论 髓核中ADAMTS-4的表达增强可能是腰椎间盘退变的重要因素之一.     

FasL-844T/C基因多态性与退变腰椎间盘髓核FasL表达的关系

目的 研究FasL-844T/C基因多态性、腰椎MRI和退变的腰椎间盘髓核组织中FasL表达之间的关系.方法 采集105例腰椎间盘突出症患者静脉血和髓核组织;利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析对FasL-844T/C基因多态性进行了检测;采用S-P法染色检测FasL在髓核组织中的表达.结果MRI研究发现,与CC基因型携带者相比,携带TT基因型的个体腰椎间盘退变的积分显著增高(P=0.003);与CC基因型携带者相比,TT基因型携带者髓核细胞表达FasL的积分有统计学差异(P=0.048),但CT基因型携带者与CC基因型携带者之间髓核细胞表达FasL的积分无统计学差异(P=0.264);腰椎间盘退变积分和椎间盘髓核组织FasL表达无相关性.结论 FasL-844T/C基因多态性与腰椎间盘突出症患者的椎间盘髓核组织FasL表达存在相关性;腰椎间盘退变积分和椎间盘髓核组织FasL表达无相关性.     

锌指蛋白A20及其相关炎症因子在椎间盘髓核细胞退变前后的表达变化

目的 检测椎间盘髓核细胞退变前后锌指蛋白A20及其相关炎症因子的表达变化.方法 获取我院骨科患者术中切除的椎间盘组织,分为正常组和退变组,采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况,免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及NF-κB p65蛋白的表达.体外培养胚胎小鼠髓核细胞,分为对照组(只加入等量的PBS)、内毒素(LPS)刺激组和NF-κB抑制组,分别以Real-time PCR检测LPS刺激细胞和加入NF-κB抑制剂后,A20、TNF-α、IL-1β、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;Western blot检测A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化.结果 退变组髓核细胞数量显著少于正常组,并有明显的聚集现象;退变组髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65蛋白表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13mRNA与蛋白的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P＜0.05),A20、TNF-α、IL-1 β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组显著增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 髓核细胞炎症反应与椎间盘退变的发生、发展密切相关,A20可能通过NF-κB信号通路对抑制髓核细胞退变时炎症反应起到关键作用.     

椎间孔镜下髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的效果

目的 探讨椎间孔镜下髓核摘除手术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效.方法 经保守治疗无效的腰椎间盘突出症患者100例,行椎间孔镜下髓核摘除术.于术后各时点记录VAS评分及Oswestry功能障碍评分（ODI评分）,于术后1年时行MacNab疗效评价.结果 术后各时点VAS评分和ODI指数均低于术前（P＜0.05）;术后1年时优效、良效、可效分别为66、28、6例,优良率为94.0％（94/100例）.结论 椎间孔镜下髓核摘除手术治疗腰椎间盘突出症效果确切.     

单枚PDN～SOLO型假体置换术治疗腰椎间盘突出症30例

目的观察单枚人工髓核PDN～SOLO型假体置换术治疗腰椎间盘突出症的效果。方法2003年3月至2005年6月,我院共施行单枚PDN～SOLO型假体置换术治疗腰椎间盘突出症30例,其中男17例,女13例,年龄25～61岁,平均43．1岁;第5腰椎～第1骶椎9例,第4～5腰椎17例,第3～4腰椎2例,第3～4腰椎并第4～5腰椎2例,术前均通过CT或MRI检查证实临床症状是由腰椎间盘突出症所致。均采用单枚PDN—SOLO置入,SOLO-525型3例,SOLO-725型24例,SOLO-925型3例。结果所有患者术后临床症状均消失,运动功能明显改善。25例获得随访,随访时间6～18个月,平均15．5个月。所有患者病变椎间隙的高度较术前均有增高（6～12mm）。术后早期并发症主要包括一过性腰部酸痛和低热,少见并发症包括假体移位脱出。结论人工髓核置换手术可以明显改善患者临床症状和功能,有效提高椎间盘高度,并发症轻微,可以接受,近期效果肯定,但长期效果尚待进一步随访。     

Transplantation of gene-modified nucleus pulposus cells reverses rabbit intervertebral disc degeneration

Background  Intervertebral disc degeneration is the main cause of low back pain. The purpose of this study was to explore potential methods for reversing the degeneration of lumbar intervertebral discs by transplantation of gene-modified nucleus pulposus cells into rabbit degenerative lumbar intervertebral discs after transfecting rabbit nucleus pulposus cells with adeno-associated virus 2 (AAV2)-mediated connective tissue growth factor (CTGF) and tissue inhibitor of metalloproteinases 1 (TIMP1) genes in vitro.

Methods  Computer tomography (CT)-guided percutaneous annulus fibrosus injury was performed to build degenerative lumbar intervertebral disc models in 60 New Zealand white rabbits. rAAV2-CTGF-IRES-TIMP1-transfected rabbit nucleus pulposus cells were transplanted into degenerative lumbar intervertebral discs (transplantation group), phosphate-buffered saline (PBS) was injected into degenerative lumbar intervertebral discs (degeneration control group) and normal lumbar intervertebral discs served as a blank control group. After 6, 10 and 14 weeks, the disc height index (DHI) and signal intensity in intervertebral discs were observed by X-ray and magnetic resonance imaging (MRI) analysis. The expression of CTGF and TIMP1 in nucleus pulposus tissue was determined by Western blotting analysis, the synthesis efficiency of proteoglycan was determined by a ³⁵S-sulfate incorporation assay, and the mRNA expression of type II collagen and proteoglycan was detected by RT-PCR.

Results  MRI confirmed that degenerative intervertebral discs appeared two weeks after percutaneous puncture. Transgenic nucleus pulposus cell transplantation could retard the rapid deterioration of the DHI. MRI indicated that degenerative intervertebral discs were relieved in the transplantation group compared with the degeneration control group. The expression of collagen II mRNA and proteoglycan mRNA was significantly higher in the transplantation group and the blank control group compared with the degeneration control group (P <0.05).

Conclusions  CT-guided percutaneous puncture can successfully build rabbit degenerative intervertebral disc models. Both CTGF and TIMP1-transfected cell transplantation helps to maintain disc height, and promotes the biosynthesis of type II collagen and proteoglycan in intervertebral discs, reversing the degeneration of intervertebral discs.

     

小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗腰椎间盘突出症的疗效观察

目的探讨小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法将我科2009年9月～2012年9月期间应用小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗的腰椎间盘突出症患者38例作为观察对象,观察术后患者的手术时间、切口长度、出血量、并发症以及患者术前术后JOA评分情况。结果全部病例的手术时间30～95min,最长1例手术时间长达95min。手术切口3-6cm,平均（4．3±0．1）cm,术中出血量达50～250mL,平均出血量达（92．4±3．1）mL。术中出现神经根损伤1例,未发生椎间隙感染、硬膜撕裂等并发症。术后当天开始腰腿痛完全消失,2例马尾综合征（急诊手术）分别在术后3d及5d内明显改善,肛周感觉恢复,括约肌不再松弛。1例术后症状加重,经脱水、激素治疗,1周后好转,半个月后症状完全消失。术后患者的JOA各项评分均较术前明显改善,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗腰椎间盘突出症具有手术创伤小,患者恢复快,保留了直视操作等优点,值得推广和应用。     

甲状腺相关眼病患者血清IL-17 和IL-23 的表达 及临床意义

目的 探讨甲状腺相关眼病（TAO）患者血清中白细胞介素17（IL-17）、白细胞介素23（IL-23） 的表达水平及其临床意义。方法 选取2014 年1 月-2016 月10 月该院就诊的TAO 患者46 例,按临床活动度 评分（CAS）将其分为TAO 非活动期组（CAS<3）23 例,TAO 活动期组（CAS ≥ 3）23 例。另选22 例健 康体检者作为对照组（NC 组）。采取ELISA 法检测血清中IL-17 与IL-23 浓度,分析IL-17、IL-23 浓度和 CAS 之间的相关性。结果 3 组性别、年龄比较,差异无统计学意义（P >0.05）。TAO 活动期组CAS 评分高 于TAO 非活动期组（P <0.05）;TAO 活动期组和非活动期组血清IL-17 水平分别为（1 268.21±215.03）和 （983.52±207.14）pg/ml,均高于NC 组（582.63±171.39）pg/ml（P <0.05）,且TAO 活动期组高于TAO 非 活动期组（P <0.05）;TAO 活动期组和非活动期组血清IL-23 水平分别为（906.83±193.89）和（727.93±172.32） pg/ml,均高于NC 组的（278.22±58.61）pg/ml（P <0.05）,且TAO 活动期高于TAO 非活动期（P <0.05）。 TAO 患者的IL-17、IL-23 水平与临床活动性评分（CAS）均呈正相关（r =0.6305 和0.6892,均P =0.000）。 结论 IL-17、IL-23 在TAO 患者外周血中均高表达。     

雌激素β受体在人椎间盘髓核细胞上的表达

目的：研究雌激素β受体（ERβ）在人椎间盘髓核细胞上的表达。方法：7例椎间盘突出症患者,手术切除之髓核组织经体外消化、细胞培养,提取总RNA,RT-PCR检测ERβ基因的表达;另外通过免疫组织化学方法检测ERβ在人椎间盘髓核细胞中的分布。结果：7例样本RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,在323 bp处有单一高亮条带;免疫组织化学方法亦证实细胞质中有ERβ的分布。结论：人椎间盘髓核细胞中存在ERβ的表达。     

Autologous nucleus pulposus transplantation to lumbar 5 dorsal root ganglion after epineurium discission in rats: a modified model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc

Background  Nucleus pulposus of intervertebral discs has proinflammatory characteristics that play a key role in neuropathic pain in lumbar herniated intervertebral disc. One of the most commonly used animal models (the traditional model) of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc is created by L4–L5 hemilaminectomy and the application of autologous nucleus pulposus to cover the left L4 and L5 nerve roots in rats. However, such procedures have the disadvantages of excessive trauma and low success rate. We proposed a modified model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc in which only the left L5 dorsal root ganglion is exposed and transplanted with autologous nucleus pulposus following incision of epineurium. We aimed to compare the modified model with the traditional one with regard to trauma and success rate.

Methods  Thirty Sprague-Dawley male rats were randomized into three groups: sham operation group (n=6), traditional group (n=12), and modified group (n=12). The amount of blood loss and operative time for each group were analyzed. The paw withdrawal threshold of the left hind limb to mechanical stimuli and paw withdrawal latency to heat stimuli were examined from the day before surgery to day 35 after surgery.

Results  Compared with the traditional group, the modified group had shorter operative time, smaller amount of blood loss, and higher success rate (91.7% versus 58.3%, P <0.05). There was no decrease in paw withdrawal latency in any group. The sham operation group had no decrease in postoperative paw withdrawal threshold, whereas the modified and traditional groups had significant reduction in paw withdrawal threshold after surgery (mechanical hyperalgesia).

Conclusions  Transplantation of nucleus pulposus onto the L5 dorsal root ganglion following incision of epineurium in rats established an improved animal model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc with less trauma and more stable pain ethology.