白杨素对口腔鳞状细胞癌KB细胞凋亡的影响及其机制

目的：探讨白杨素对口腔鳞状细胞癌KB细胞凋亡的影响及其机制,为临床上口腔鳞状细胞癌的治疗提供思路。方法：用不同浓度白杨素(1,2,4,8,16和32 μmol/L)处理KB细胞24 h,采用MMT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,化学发光法检测caspase-3/7活性,JC-1法检测KB细胞线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)的活化。结果：白杨素以浓度依赖方式抑制KB细胞增殖并诱导其凋亡,促进caspase-3/7的活化,降低KB细胞线粒体膜电位;同时抑制AKT和PI3K磷酸化。结论：白杨素诱导KB细胞凋亡作用可能与线粒体功能障碍和抑制PI3K/AKT通路相关。     

黄芩素对人舌鳞状细胞癌CAL27细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：探讨黄芩素对人舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌) CAL27细胞增殖的影响,阐明其潜在的作用机制。方法：将对数生长期CAL27细胞分为对照组和不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0和200.0μmol·L^-1)黄芩素组,采用结晶紫染色法观察各组细胞克隆形成情况,CCK-8法检测各组细胞增殖率,2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞中活性氧(ROS)水平,罗丹明123 (Rhodamine123)荧光探针检测各组细胞线粒体膜电位(MMP)水平。对数生长期CAL27细胞分为对照组和不同浓度(50、100和200μmol·L^-1)黄芩素组,采用流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率。对数生长期CAL27细胞分为对照组、不同浓度(50和100μmol·L^-1)黄芩素组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、50μmol·L^-1黄芩素+NAC组和100μmol·L^-1黄芩素+NAC组,采用DCFH-DA荧光探针和Rhodamine123荧...     

p38丝裂原活化蛋白激酶在口腔扁平苔癣及口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：探讨口腔扁平苔癣（oral lichen planus,OLP）及口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）病变组织中p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases,MAPK）、磷酸化p38MAPK及其下游核转录因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）的表达情况,初步探讨p38MAPK通路在OLP及OSCC发病过程中的作用。方法：收集53例OLP、45例OSCC及18例正常对照口腔黏膜组织的石蜡切片,免疫组织化学染色分析法检测p38MAPK、磷酸化p38MAPK及NF-κB在3组中的表达及分布情况。同时收集11例OLP、5例OSCC及7例正常对照组织的新鲜冰冻组织,采用Western blotting法进一步比较p38MAPK、磷酸化p38MAPK在3组中的表达情况。结果：免疫组织化学染色分析显示：p38MAPK及NF-κB在细胞核及细胞质中均有表达,在OLP中主要在固有层淋巴细胞中呈高表达,而在上皮细胞表达阳性率低;磷酸化p38MAPK在OSCC中阳性表达率显著高于OLP及正常对照组。Western blotting结果显示：p38MAPK在OLP、OSCC及正常对照组中均有表达;磷酸化p38MAPK在8例（8/11）OLP、5例（5/5）OSCC和4例（4/7）正常对照组中有表达。结论：p38MAPK广泛存在于口腔黏膜的各种生理、病理过程中,它的磷酸化形式可能参与了OSCC的发生和发展,其在OLP发病和进展中的作用仍需进一步探索。     

LncRNA MEG3对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的 本研究旨在探究LncRNA MEG3在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）组织和细胞中的表达水平及对OSCC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。 方法 qRT-PCR法检测OSCC患者口腔粘膜组织、肿瘤组织、及Tca8113细胞系中LncRNA MEG3的表达水平。构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒转染Tca8113细胞,分为3组：转染过表达pcDNA3.1-MEG3的质粒（MEG3组）和空质粒pcDNA3.1-NC （NC组）;空白对照组（BLANK组）加入PBS。分别采用qRT-PCR法、CCK-8法、流式细胞术和Transwell检测LncRNA MEG3表达、细胞增殖、凋亡率和侵袭能力。结果 与正常口腔粘膜组织和细胞相比,LncRNA MEG3在OSCC组织和细胞中的表达下调（P<0.05）。体外实验发现,与空白对照组和NC组相比,过表达LncRNA MEG3组细胞增殖和侵袭能力受到抑制,凋亡率明显升高（P<0.05）。结论 LncRNA MEG3在OSCC组织和细胞中低表达;LncRNA MEG3过表达可抑制OCSS细胞的增殖和侵袭,促进凋亡。     

维生素C碳点对口腔鳞状细胞癌KB细胞增殖、自噬和凋亡的影响

目的：研究维生素C碳点对口腔黏膜鳞状细胞癌（口腔鳞癌）KB细胞的杀伤作用,探讨其相关作用机制。方法：以不同浓度（5、10、20、40和80 mg·L^-1）维生素C碳点体外处理口腔鳞癌KB细胞作为实验组,以0 mg·L^-1维生素C碳点组作为空白对照组。MTT法检测各组细胞增殖率,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力,Western blotting法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3蛋白表达水平,流式细胞术检测KB细胞的凋亡率。结果：与空白对照组比较,20、40和80 mg·L^-1维生素C碳点组KB细胞的增殖率及克隆形成能力均明显降低（P<0.01）,40 mg·L^-1维生素C碳点组KB细胞中LC3 Ⅱ蛋白表达水平和细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：维生素C碳点能够有效地杀伤口腔鳞癌KB细胞,抑制KB细胞的增殖并减弱其克隆形成能力,其杀伤作用可能与KB细胞自噬和凋亡的发生有关。     

雷公藤内酯醇对皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖与凋亡的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对体外培养的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖与凋亡的影响.方法:以体外培养的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,MTT比色法测定TP对A431细胞株增殖活性的影响,光镜观察细胞形态学的改变,流式细胞仪检测TP作用于A431细胞株后细胞周期的分布及凋亡率的变化.结果:随着TP剂量的增加及作用时间的延长,TP对A431细胞株增殖活性的抑制作用增强,TP不但能够引起细胞形态的改变(漂浮细胞及核固缩现象增多),而且能够诱导A431细胞株凋亡,改变细胞周期的分布,与对照组相比G0/G1期细胞比例增多(P<0.05),S期细胞比例减少(P<0.05).结论:TP通过诱导A431细胞凋亡并抑制其增殖发挥抗肿瘤作用.     

薯蓣素抑制口腔鳞状细胞癌的机制研究

目的 研究薯蓣素对人口腔鳞状细胞癌的抑制作用。方法 薯蓣素处理TSCCa 和TCa8113 细胞,MTS 和软琼脂集落实验检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌增殖的影响。蛋白质免疫印迹检测薯蓣素对口腔鳞状细胞癌 糖酵解调控蛋白及凋亡调控分子表达的影响。检测过表达己糖激酶HK2 对薯蓣素诱导细胞凋亡的作用。结果 薯蓣素抑制TSCCa 和TCa8113 细胞的增殖具有剂量和时间依赖性（P <0.05）。薯蓣素抑制口腔鳞状细胞癌 糖酵解（P <0.05）,并下调HK2 和葡萄糖转运蛋白Glut1 的表达。薯蓣素能诱导口腔鳞状细胞癌Caspase-3 和 PARP 剪切体表达上调,过表达HK2 抑制薯蓣素诱导的细胞凋亡。结论 薯蓣素对口腔鳞状细胞癌的抑制作用 与其下调HK2 和对糖酵解的抑制有关。     

术前诱导化疗对口腔鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响

目的评价术前诱导化疗对口腔鳞状细胞癌增殖及凋亡特性的影响.方法20例口腔鳞癌患者,术前诱导化疗有效及特效组病人10例,同期未行术前化疗单纯手术组10例,共计20例.采用免疫组化和原位DNA末端标记法分别检测诱导化疗前后K i-67和细胞凋亡的表达情况,计算出术前诱导化疗有效及特效组增殖指数和凋亡指数.结果术前诱导化疗有效及特效组口腔癌中K i-67蛋白表达和增殖指数明显低于同期未行术前化疗单纯手术组.其凋亡细胞、凋亡指数较诱导化疗前明显增加.结论术前诱导化疗对抑制口腔鳞状细胞癌增殖,诱导细胞凋亡具有重要作用.     

阿托伐他汀对人舌鳞癌CAL-27细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其机制

目的：探讨阿托伐他汀（ATO）对人舌鳞癌CAL-27细胞体外增殖、凋亡和迁移的影响,阐明其作用机制。方法：CAL-27细胞分为对照组和1、5、10、20及40μmol·L-1 ATO组。ATO作用后,CCK-8法检测各组CAL-27细胞存活率,克隆形成实验检测各组CAL-27细胞克隆形成率,Hoechst33342荧光染色和流式细胞术检测各组CAL-27细胞凋亡率,细胞划痕实验检测各组CAL-27细胞迁移率,Western blotting法检测各组CAL-27细胞中P53、P21、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase）-3、Caspase-9和周期蛋白依赖性激酶6 (CDK6)蛋白表达水平。结果：培养24和48 h后,与对照组比较,不同浓度ATO组细胞存活率明显降低（P<0.05）。培养48 h后,与对照组比较,不同浓度ATO组细胞克隆形成率（P<0.01）和细胞迁移率（P<0.05）明显降低,40μmol·L-1 ATO组细胞基本丧失克隆和迁移能力;不同浓度ATO组细胞凋亡率明显升高（P&l...     

大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响

[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制。[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素（50、25、12.5 μg/mL）组和顺铂（40 μg/mL）组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）mRNA、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白（cyclin B1、cyclin D1）和周期蛋白依赖性激酶（CDK1、CDK2）表达。[结果]与空白对照组比较,大蒜素（50、25 μg/mL）组细胞周期G₂/M期比例显著提高（P<0.05）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,Bcl-2 mRNA表达显著下调且Bax mRNA表达显著上调（P<0.05或P<0.01）,Bax/Bcl-2值显著提高（P<0.01）,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调（P<0.05或P<0.01）。[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

沙利霉素对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨沙利霉素(salinomycin)对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨沙利霉素对信号通路的影响。方法:培养口腔鳞状细胞癌细胞系CAL-27,将1、2、4、8、16、32 μmol/L沙利霉素和1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共同培养,24 h和48 h后用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞增殖的影响;0、2、4、8 μmol/L沙利霉素和0、5、10、20 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共培养48 h后,通过流式细胞术检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CAL-27细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate-specific proteases-3,Caspase-3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(cysteine-containing aspartate-specific proteases-9,Caspase-9)、脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)和磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated protein kinase B,p-Akt)的表达。结果:CCK-8实验表明沙利霉素和顺铂均能显著抑制口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖,且抑制作用呈时间依赖性和药物浓度依赖性,但是相对于临床一线化疗药物顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖的抑制效果更加显著(P<0.001)。细胞周期检测表明,与加入二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的对照组相比,8 μmol/L沙利霉素与CAL-27细胞共同培养48 h后,细胞休眠期/DNA合成前期的CAL-27细胞比例明显升高(40.40%±1.99% vs.64.46%±0.90%,P<0.05), DNA合成期和DNA合成后期/有丝分裂期的CAL-27细胞比例出现降低(24.32%±2.30% vs.18.73%±0.61%,P<0.05,35.01%±1.24% vs.16.54%±1.31%,P<0.05);顺铂对CAL-27细胞周期没有特异性改变。蛋白免疫印迹法结果显示,沙利霉素在上调CAL-27细胞中Caspase-3和 Caspase-9蛋白表达(P<0.05)的同时下调PARP、Akt和p-Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论:相对于顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖有更强的抑制作用,并且能将口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞周期阻滞在细胞休眠期/DNA合成前期,同时能够诱导CAL-27细胞发生凋亡,这一机制可能和Akt/p-Akt 信号通路相关。     

Survivin在口腔鳞状细胞癌中的表达和研究进展

口腔癌是颌面部较常见的粘膜上皮性肿瘤,其中发病率最高的是鳞状细胞癌,一般占口腔癌的80%以上,且近年来其发病率有上升趋势。口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell car-cinomas OSCC)简称口腔鳞癌,多发生于40~60岁的成人,男性多于女性,部位以舌、颊、牙龈、腭最多见,恶性度较高,常     

沙利霉素对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨沙利霉素(salinomycin)对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨沙利霉素对信号通路的影响。方法:培养口腔鳞状细胞癌细胞系CAL-27,将1、2、4、8、16、32 μmol/L沙利霉素和1.25、2.5、5、10、20、40、80 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共同培养,24 h和48 h后用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞增殖的影响;0、2、4、8 μmol/L沙利霉素和0、5、10、20 μmol/L顺铂与CAL-27细胞共培养48 h后,通过流式细胞术检测沙利霉素和顺铂对CAL-27细胞周期的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CAL-27细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate-specific proteases-3,Caspase-3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(cysteine-containing aspartate-specific proteases-9,Caspase-9)、脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)和磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated protein kinase B,p-Akt)的表达。结果:CCK-8实验表明沙利霉素和顺铂均能显著抑制口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖,且抑制作用呈时间依赖性和药物浓度依赖性,但是相对于临床一线化疗药物顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖的抑制效果更加显著(P<0.001)。细胞周期检测表明,与加入二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)的对照组相比,8 μmol/L沙利霉素与CAL-27细胞共同培养48 h后,细胞休眠期/DNA合成前期的CAL-27细胞比例明显升高(40.40%±1.99% vs.64.46%±0.90%,P<0.05), DNA合成期和DNA合成后期/有丝分裂期的CAL-27细胞比例出现降低(24.32%±2.30% vs.18.73%±0.61%,P<0.05,35.01%±1.24% vs.16.54%±1.31%,P<0.05);顺铂对CAL-27细胞周期没有特异性改变。蛋白免疫印迹法结果显示,沙利霉素在上调CAL-27细胞中Caspase-3和 Caspase-9蛋白表达(P<0.05)的同时下调PARP、Akt和p-Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论:相对于顺铂而言,沙利霉素对CAL-27细胞增殖有更强的抑制作用,并且能将口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞周期阻滞在细胞休眠期/DNA合成前期,同时能够诱导CAL-27细胞发生凋亡,这一机制可能和Akt/p-Akt 信号通路相关。     

180例口腔鳞状细胞癌病理临床分析

口腔粘膜鳞状细胞癌为口腔的常见恶性肿瘤，其发病率、性别、好发年龄及部位分布等在不同的国家和地区不尽相同：为了解本地区口腔鳞状细胞癌的发病情况，笔者统计了洛阳市中心医院1980年7月-2005年7月期间的全部口腔粘膜活检资料，以供参考。     

口腔鳞状细胞癌肿瘤血管形成与细胞凋亡的关系

目的 探讨口腔鳞状细胞癌凋亡与肿瘤血管生成的关系.方法 60例口腔鳞状细胞癌组织为恶性组,10例口腔良性肿瘤为良性组,10例正常人牙龈组织作为正常组,观察口腔鳞状细胞癌的凋亡指数(AI)与癌灶内微血管密度(IMVD)的关系.肿瘤癌灶内IMVD的检测采用CD34抗原SP免疫组织化学染色;凋亡检测采用DNA原位末端标记检测法(TUNEL法).结果 3组IMVD差别有统计学意义;TNM分期与IMVD有关;IMVD与口腔鳞状细胞癌的颈淋巴结转移有密切的关系.恶性组AI低于正常组及良性组(P＜0.01),而正常组与良性组之间差别则无统计学意义(P＞0.05).TNM分期与AI有关;颈淋巴结转移与AI无明显相关.结论 口腔鳞状细胞癌的IMVD不仅与肿瘤的TNM分期、分化程度、颈淋巴结转移有关,而且与其AI也有密切的关系.     

miR-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

目的 口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病率高,在全世界恶性肿瘤中居第六位。越来越多的证据表明,microRNAs在调控OSCC中起着关键作用,本研究旨在探讨微小RNA (miRNA)-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响。 方法 人正常口腔上皮细胞系(HGF-1)和口腔鳞状细胞癌细胞株(YD-38、MK-1)购自美国典型培养库(ATCC);采用实时定量PCR(RT-PCR)技术检测口腔鳞状细胞癌组织和癌细胞中miR-1301的水平;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测调控miR-1301的表达水平后OSCC细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测调控miR-1301的水平后细胞的迁移能力。 结果 和正常口腔上皮细胞HGF-1(4.32±0.86)相比,OSCC细胞YD-38(2.25±0.24)和MK-1(3.32±0.85)中miR-1301的水平显著下调(均P<0.05);稳定转染miR-1301模拟物后继续培养细胞24、48、72 h,细胞的增殖水平分别为(0.26±0.02)、(0.32±0.03)、(0.42±0.04),miR-NC组的水平为(0.30±0.02)、(0.52±0.05)、(0.89±0.07),转染miR-1301模拟物后,细胞的增殖能力显著下调(均P<0.05),而在12 h时2组细胞增殖情况比较差异无统计学意义(P>0.05);与miR-NC组(1.00±0.10)相比,转染miR-1301模拟物(0.65±0.05)后,YD-38细胞的迁移能力显著下调(P<0.05),而转染miR-1301抑制剂则有相反的效果。 结论 miR-1301在口腔鳞状细胞癌组织和细胞中显著下调,转染miR-1301模拟物能够抑制OSCC细胞的增殖和迁移能力,miR-1301可能为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的分子靶点。