肿瘤患者外周血单个核细胞诱导的CD3AK细胞体外抗肿瘤作用的初 …

采用抗ＣＤ３单抗体（１０μｇ／ｍ）联合ＩＬ－２（５０Ｕ／ｍｌ）诱导肿瘤病人外周血单个核细胞成为ＣＤ３ＡＫ细胞，并观察其体外增殖及抗肿瘤作用，结果显示：肿瘤病人的ＮＫ活性显著低于正常人，但其ＣＤ３ＡＫ细胞体外杀伤Ｋ５６２细胞的细胞毒活性与正常人比较无明显差异（Ｐ〉０．０５）。本研究初步表明：由肿瘤病人外周血单个核细胞诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞，可作为过继免疫治疗的效应细胞进行自身淋巴细胞治疗。     

螺旋藻多糖对CD3AK细胞增殖能力的影响

研究了螺旋藻多糖（ＰＳ）对ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ，ＣＤ３ＡＫ ｃｅｌｌｓ）增殖能力的影响。结果表明，当ＰＳ浓度为２．５μｇ／ｍｌ培养体系条件下，对ＣＤ３ＡＫ细胞具有明显的刺激细胞增殖作用（Ｐ〈０．０２）；对培养长达２３ｄ的ＣＤ３ＡＫ细胞杀伤肿瘤细胞（ＫＬ５６２细胞）的活性仍维持在较高的水平（４６．５％￣５０％）。     

硒酸酯多糖对CD3AK细胞活性的增强作用

目的：研究硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对ＣＤ３ＡＫ细胞增殖活性和杀瘤活性的增强效应。方法：应用ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）和小剂量ｒＩＬ－２从正常外周血单个核细胞中诱生ＣＤ３ＡＫ细胞；观察ＫＳＣ在诱生和扩增阶段对ＣＤ３ＡＫ细胞增殖特性（增殖指数、激活率、克隆率和分裂指数）、ＩＬ－２Ｒ表达水平和对Ｒａｊｉ、Ｌ４２１０细胞杀伤活性的影响。结果：ＫＳＣ（５μｇ／ｍｌ）单独对ＣＤ３ＡＫ细胞的殖无明显作用，但增强Ｉ     

返流性痛病淋巴细胞经活化后CD69,CD71和HLA—DR表达及其意义

目的：探讨返流性肾病的发病与免疫致病的关系。方法：通过全血体外培养法,对１２例返充性肾病患儿中血淋巴细胞体外活化,并用流式细胞仪测定淋巴细胞活性化抗原ＣＤ６９,ＣＤ７１和ＨＬＡ－ＤＲ。结果：在分裂原ＰＤＢ或ＰＨＡ刺激下,正常组淋巴细胞与Ｃｏｎｔｒｏｌ组对比,ＣＤ６９＋、ＣＤ７１＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋显著增殖（Ｐ〈０．０５）,返流性肾病组则无明显差异（Ｐ〉０．０５,ＣＤ６９除外）。结论：返流性肾病存在细     

CD3AK细胞的培养与抗肿瘤活性研究

目的 体外扩增经ＣＤ３单抗（ＣＤ３ＭｃＡｂ）活化的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ），并测定其抗肿瘤细胞作用和表型变化。方法 取１３例肺癌和２例肝癌病人外周血，经密度梯度离心获取淋巴细胞，以ＣＤ３ＭｃＡｂ和ＩＬ－２作为诱导剂，采用液相三步扩增方法扩增培养，并分别用ＭＴＴ和ＩＦＡ法与自体ＬＡＫ对照细胞比较细胞动力学、细胞毒作用和表型变化。结果 ＣＤ３ＡＫ细胞扩增速度、数量和抗肿瘤活性均优于自体ＬＡＫ细胞，其表型     

肿瘤患者外周血单个核细胞诱导的CD_3AK细胞体外抗肿瘤作用的初步观察

采用抗ＣＤ３单抗（１０μｇ／ｍｌ）联合ＩＬ－２（５０Ｕ／ｍｌ）诱导肿瘤病人外周血单个核细胞成为ＣＤ３ＡＫ细胞，并观察其体外增殖及抗肿瘤作用，结果显示：肿瘤病人的ＮＫ活性显著低于正常人，但其ＣＤ３ＡＫ细胞体外杀伤Ｋ５６２细胞的细胞毒活性与正常人比较无明显差异（Ｐ＞００５）。本研究初步表明：由肿瘤病人外周血单个核细胞诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞，可作为过继免疫治疗的效应细胞进行自身淋巴细胞治疗     

妇科良,恶性肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞体外扩增能力比较

为探讨妇科良，恶性肿瘤患者ＣＤ３ＡＫ细胞的体外增殖能力，对其外周血淋巴细胞用ＣＤ３ＭＡｂ＋ＩＬ－２诱导ＣＤ３ＡＫ细胞，体外动脉观察ＣＤ３ＡＫ细胞增殖倍数，并与同期培养的ＬＡＫ细胞进行对比。     

抗CD3McAb和rhGM—CSF对再障患者CFU—GM生长的体外影响的研究

用ＣＦＵ－ＧＭ单固体琼脂培养技术研究了抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和重组人集落刺激因子对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长进行研究。结果表明：１０μｇ／ｍｌ的抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和０．１μｇ／ｍｌ的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ均可增加ＡＡ患者ＣＦＵ－ＧＭ的集落数,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ作用较ｒｈＧＭ＝ＣＳＦ显著,且不同患者对抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的敏感性不同,对ＡＡ患者,临床治疗时,应先行     

自然杀伤细胞的独立刺激信号——CD45分子交联

目的：探讨表面分子在自然杀伤（ＮＫ）细胞活化中的信号分子作用及其机制。方法：采用多种粘附分子单抗及配体刺激ＮＫ细胞，ＥＬＩＳＡ法定量检测刺激后ＮＫ细胞释放的γ干扰素（ＩＦＮ－γ）作为ＮＫ细胞活化指标，观察各种粘附分子在ＮＫ细胞释放ＩＦＮ－γ中的信号作用。结果：单一ＣＤ４５单抗刺激即可使ＮＫ细胞活化；两种分别为ＩｇＧ１，ＩｇＧ２ａ亚类的ＣＤ４５单抗及ＩｇＧ２ａ亚类ＣＤ４５单抗的Ｆ（ａｂ′）２均体现对     

植物血凝素激活的LAK细胞激活培养条件与其生物学特性关系的研究

将ＰＨＡ和ｒＩＬ ２合理配伍应用于ＬＡＫ细胞的激活培养中，研究了ＰＨＡ ＬＡＫ细胞的增殖、细胞毒活性及表型。结果表明：培养条件中加入适量ＰＨＡ可促进ＰＨＡ ＬＡＫ的增殖（Ｐ＜０．０５），不影响其细胞毒活性。ＰＨＡ／ｒＩＬ ２共同预刺激组于培养第２ｄ细胞数明显下降（３０％～４０％），但其到达增殖高峰的时间、峰值及扩增倍数与同一培养条件下的ＰＨＡ单独预刺激组相比，差别无显著性（均为Ｐ＞０．０５）；但前者对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ的杀伤高峰值大于后者（Ｐ＜０．０１）。各组ＰＨＡ ＬＡＫ中有０．６０～０．７７的细胞为ＣＤ３＋Ｔ细胞，但ＰＨＡ ＬＡＫ／ｒＩＬ ２共同预刺激者的ＣＤ３＋、ＣＤ８＋细胞所占比率较ＰＨＡ单独预刺激者为高（Ｐ＜０．０５）。     

CD3AK细胞治疗对原发性肝癌患者免疫功能影响的研究

为了观察ＣＤ３ＡＫ细胞对原发性肝癌（简称肝癌）患者免疫功能的影响。采用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗６５例不能切除的肝癌患者，分别于治疗前后测定患者Ｔ细胞亚群（ＡＰＡＡＰ法）和血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平（ＦＬＩＳＡ法）。结果ＣＤ３ＡＫ细胞治疗后肝癌患者Ｔ细胞亚群ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋升高，ｓＩＬ－２Ｒ水平下降，统计学有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。提示ＣＤ３ＡＫ细胞治疗肝癌对提高     

抗CD3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法，ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性，ＩＬ－２，ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：     

协同刺激信号α—CD28单抗增强肿瘤特异性CTL体内外的杀瘤活性

目的 采用α－ＣＤ２８单抗增强α－ＣＤ３单抗刺激的肿瘤特异性Ｔ细胞的杀瘤活性。方法 采用２种方案培养ＦＢＬ－３免疫的小鼠脾细胞。（１）使用α－ＣＤ３单抗４８ｈ后,加入α－ＣＤ２８单抗同时使用４８ｈ后,加入α－ＣＤ３单抗、α－ＣＤ２８单抗和２０Ｕ／ｍｌ ｒＩＬ－２（α－ＣＤ３＋α－ＣＤ２８＋ＩＬ－２组）。＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准４ｈ－＾５１Ｃｒ释放法检测两组效应细胞的杀伤     

脐血CD34+细胞体外扩增的实验研究

目的：探讨用体外扩增脐血造血干细胞进行成人脐血移植的可能性。方法：从１５份新鲜脐血标本中纯化ＣＤ３４＋细胞，将其接种于含２０％的胎牛血清（ＦＢＳ）的ＩＭＤＭ培养基中，分别加入由Ｆｌｔ３配体（Ｆｌｔ３　ｌｉｇａｎｄ，ＦＬ）、干细胞因子（ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｆａｃｔｏｒ，　ＳＣＦ）、血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，　ＴＰＯ）及白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１，ＩＬ－６）组成的三组细胞因子组合（Ａ组：ＦＬ＋ＴＰＯ；Ｂ组：ＦＬ＋ＳＣＦ＋ＴＰＯ；Ｃ组：ＦＬ＋ＳＣＦ＋ＴＰＯ＋ＩＬ－６）培养扩增１４ｄ。结果：①各组对各阶段造血细胞均有扩增效果，其中Ｂ、Ｃ组优于Ａ组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；②　经体外１４ｄ的培养扩增后，单份脐血可产生足够量的造血干细胞用于成人脐血移植。结论：脐血ＣＤ３４＋细胞经体外扩增可用于成人脐血移植。     

CD3εY171点突变对CD8ε／CD3ε融合分子介导的T淋巴细胞？…

目的 观察ＣＤ３εＹ１７１／Ｐ１７１点突变及ｂｃｌ－２基因对Ｔ淋巴细胞凋亡的影响,方法 通过电穿孔对ＣＤ７８阴性的人ＪｕｒｋａｔＴ（ＪＫ）淋巴细胞转染ＣＤ３εＹ１７１／Ｐ１７１点突变的ＣＤ８ε融合分子,对表达野生型ＣＤ８ε融合分子的人ＴＪＫ转染ｂｃｌ－２基因分别获得稳定表达细胞株（Ｔ１ＪＫ,ＴＪＫ／ｂｃｌ－２）,利用ＣＤ８ε单克隆抗体刺激细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 ＣＤ３εＹ１７１／Ｐ１     

早孕蜕膜中淋巴细胞抗原的表达及IFN－γ测定

本文以几种抗淋巴细胞表面标志的单克隆抗体，采用花环标记、碱－磷酶抗碱－磷酶（ＡＰＡＡＰ）法、酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法，对２３例早孕蜕膜组织中的淋巴细胞及γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）进行了测定。结果发现，早孕蜕膜淋巴细胞中ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１６＋及Ｂ细胞百分率（ｘ±ｓ）分别为２９．５２±６．８０％、２３．６０±４．８６％、２０．９１±４．０６％、１．０７±１．００％、７．８１±２．５６％，ＣＤ４／ＣＤ８为１．２０±０．２０。ＣＤ３－淋巴细胞呈大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ）形态，蜕膜组织浸液中ＩＦＮ－γ含量＜０．６μｇ／Ｌ。提示，早孕蜕膜中存在较多ＣＤ３－、ＣＤ１６－的形态呈ＬＧＬ的ＮＫ细胞，ＣＤ４＋细胞与ＣＤ８＋细胞的比值较正常外周血明显降低     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

栓塞加门静脉灌输CD3AK细胞治疗中晚期肝癌的研究

动态观察肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗、灌输ＣＤ３Ａ职晚期肝癌的临床疗效及对机体免疫功能的影响。将２０例中晚期肝癌随机分为Ａ、Ｂ两组,Ａ组（１０例）肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗。灌输ＣＤ３Ａ细胞治疗,Ｂ组（１０例）肝动脉化疗栓塞加门静脉插管化疗。另设Ｃ组（１０例）肝良肿瘤患者作为对照组。结果Ａ组患者的细胞免疫指标（ＣＤ３、ＸＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８、ＮＫＣ、ＩＬ－２Ｒ、Ｔ淋巴细胞转化主）及体液免疫     

CD3AK细胞在肿瘤病患者治疗中的疗效观察

ＣＤ３ＡＫ细胞在肿瘤病患者治疗中的疗效观察袁跃传，孙秉中，杨平地，朱华锋，沈素芸（西京医院血液内科）关键词ＣＤ３ＡＫ细胞，肿瘤，生物治疗中图法分类号Ｒ７３０．５１抗ＣＤ３分子单克隆抗体活化、低剂量白细胞介素２（ＩＬ－２）维持增殖的新型抗瘤免疫活性细胞...     

低密度脂蛋白对贮脂细胞内钙离子浓度的影响

研究低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对大鼠肝脏贮脂细胞（ＦＳＣ）胞内钙离子浓度的影响及钙拮抗剂对其的干预作用。采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ标记法检测不同浓度ＬＤＬ（１０、２５、５０、１００、２００、５００μｇ／ｍｌ）对ＦＳＣ胞内Ｃａ＾２＋浓度峰值的主在细胞外液含钙或不含钙时，１００μｇ／ｍｌＬＤＬ剂量组对ＦＳＣ胞内Ｃａ＾２＋浓度的影响，同时测定钙拮抗剂尼卡地平和维拉帕米对ＬＤＬ引起增钙的拮抗作用，结果：ＬＤＬ能