CUEDC2通过上皮-间质转化促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移

目的:探讨CUE结构域2（CUE domain-containing 2,CUEDC2）蛋白对人乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测上皮-间质转化（EMT）标志物上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）和转录因子SLUG的表达。结果:过表达CUEDC2蛋白能够下调E-cadherin蛋白和基因的表达,而上调转录因子SLUG基因和蛋白的表达。结论:CUEDC2可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮-间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生,CUEDC2可能是人乳腺肿瘤侵袭转移的治疗靶点。     

乳腺癌的上皮间质转化与多药耐药

乳腺癌细胞的上皮问质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）由转化生长因子β家族（TGF—β）等多种细胞因子和信号通路参与,该现象的发生能够促进肿瘤细胞侵袭、转移和干细胞特性获得,诱导乳腺癌细胞对化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗产生获得性耐药。其中,多药耐药（muhidrug resistance,MDR）现象的产生是导致乳腺癌治疗失败的重要原因,而PI3K／Akt信号通路是EMT与MDR的共同调控途径。因此,针对乳腺癌细胞EMT的相关研究可以帮助人们在肿瘤抗耐药治疗中找到新的策略。     

乳腺癌上皮间质转化与耐药关系的研究进展

肿瘤上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是指肿瘤在各种因素作用下上皮细胞转变为具有高侵袭、转移能力间质表型的过程。EMT与细胞上皮表型标志物E-钙黏蛋白表达下调、间质表型标志物上调和相关基因表达改变有关。EMT的发生能够促进乳腺癌侵袭、转移和干细胞特性获得,诱导乳腺癌细胞对化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗产生获得性耐药。同时研究发现,乳腺癌耐药细胞能够发生EMT,并获得干细胞表型。因此,针对乳腺癌细胞EMT的相关研究可以帮助人们在肿瘤抗耐药治疗中找到新的策略。本文旨在对EMT与乳腺癌发生获得性耐药之间关系的最新研究进展作一综述。     

乳腺癌上皮-间质转化后引发BCRP介导的多药耐药的研究

背景与目的:研究发现肿瘤的侵袭浸润和转移增强是上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT)所致,而EMT的发生也与肿瘤细胞多药耐药现象的发生密切相关.本研究通过分析乳腺癌组织和细胞中EMT与乳腺癌耐药蛋白表达的相关性,探讨EMT对乳腺癌中乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein, BCRP)介导多药耐药的影响.方法:免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中Snail、BCRP的表达:构建Snail真核表达载体pCDNA3.1-Snail,转染至MCF-7细胞,采用免疫荧光、Western blot、Real-time PCR检测转录抑制因子snail、上皮标志物E-钙粘素、间质标志物vimentin以及多药耐药蛋白BCRP的表达;MTT法检测细胞对米托蒽醌的耐药指数.结果:免疫组化结果显示乳腺癌组织中Snail、BCRP的表达呈显著相关:免疫荧光、Western blot、Real-time PCR显示与亲本MCF-7细胞相比,转染Snail后的MCF-7细胞中E-cadherin表达水平明显降低,而snail、vimentin和BCRP的表达水平明显增加;MTT结果显示细胞对米托蒽醌的耐药指数增加至9.93.结论:转染snail真核表达载体pCDNA3.1-snail可使乳腺癌MCF-7细胞发生EMT, 并导致细胞中BCRP表达增加,引发BCRP介导的多药耐药.     

miR-200家族在上皮-间质转化中的研究进展北大核心CSCD

0引言 microRNAs（简称miRNAs）是一类进化上高度保守的小分子非编码RNA,长度为21～23nt左右,具有转录后调控基因表达的功能。在癌组织中,它们的调节功能普遍异常,因此被认为是癌基因或是肿瘤抑制因子。miR．200家族成员通过结合并抑制靶基因mRNA的表达,抑制上皮间质转化、肿瘤细胞迁移、侵袭转移,这些靶基因包括参与上皮-间质转化的ZEBl基因和ZEB2基因,snail2,VEGFR-1,D．cateni/Wnt通路中β-catenin基因,EGFR抑制子抗性基因ERRFI-1和化疗药物抗性基因TUBB3,然而在胃癌细胞或胃癌组织中,由于上皮基因的沉默缺失,miR-200家族成员的表达普遍下降。     

上皮-间质转化与乳腺癌转移

癌细胞的远处转移是肿瘤发展的最终形式，也是癌症患者死亡的最主要原因。尽管早期乳腺癌患者通过规范化治疗，5年生存率达到了目前的98％；但转移性乳腺癌患者的5年生存率较40年前相比，只是从20％提高到目前的26％，     

上皮间质转化与肿瘤耐药

肿瘤药物治疗过程中常常要面临肿瘤细胞耐药的问题。上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)在肿瘤耐药方面的作用为解决该问题提供了可能。该文围绕EMT基本特征、EMT与肿瘤耐药的关系、EMT在肿瘤耐药过程中机制的研究进展进行详细综述。     

上皮-间质转化与肿瘤耐药性的研究进展

上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞表型向间质细胞表型转变的过程,在肿瘤发生及其演变中发挥着重要的作用。近期研究表明,EMT在多种肿瘤的化疗耐药中发挥重要作用,而化疗药物也能增强肿瘤的恶性程度包括诱导EMT表型的产生。本文结合国内外最新报道,对EMT与肿瘤耐药关系的研究进展进行综述。      

JNK/MAPK在LPS诱导乳腺癌细胞MCF-7上皮间质转化过程中的作用

目的：探讨JNK/MAPK在LPS诱导乳腺癌细胞上皮间质转化（ EMT）过程中的作用。方法：将乳腺癌细胞 MCF-7分为3组：正常对照组、LPS（10μg/ml）处理组、LPS﹢SP-600125诱导实验组。应用real-time RT-PCR与Western blot法检测上皮细胞表面标志E-钙黏蛋白（ E-cadherin）和间质细胞表面标志N     

浸润性乳腺癌上皮-间质转化1例

0 引言上皮-间质转化( epithelial-mesen chymal transition,EMT)是胚胎发育、组织重建和伤口修复中的基础过程,同时也是肿瘤浸润、转移的一个非常重要的机制.在EMT过程中,上皮细胞之间连接松散,细胞失去基底面至表面的极性排列,形态呈梭形;上皮标志物E-钙黏素表达下降,间质标志物N-钙黏素、波形蛋白等表达增加;细胞侵袭和转移能力增强[1].这些EMT典型变化通常都是在细胞培养或动物移植瘤实验中发现的.     

TGF-β1诱导上皮间质转化过程中线粒体合成与功能的改变

目的：研究在转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导上皮间质转化过程中线粒体合成与功能的改变。方法：体外培养人肺癌A549细胞,经不同浓度（0、2.5、5、10、20、40 ng/mL） TGF-β1处理24和48 h后观察其形态变化;采用CCK-8法检测经TGF-β1处理48 h后A549细胞的活力;流式细胞术检测细胞凋亡、活性氧（ROS）、线粒体活性氧及线粒体膜电位的变化;酶标仪检测ATP含量;Western blot分别检测细胞中上皮间质转化（EMT）相关标记物（E-cadherin和α-SMA）及线粒体合成相关蛋白（NRF-1及mt-TFA）的表达水平。结果：与对照组相比,随着TGF-β1浓度增加,A549细胞活力逐步上升,呈剂量-效应关系（r=0.941,P < 0.05）;5~20 ng/mL TGF-β1处理组凋亡率明显升高（P均 < 0.05）;不同浓度TGF-β1处理A549细胞48 h后大部分细胞呈现明显的间质细胞形态,出现上皮间质转化;Western blot结果显示,与对照组比较,经TGF-β1处理48 h后上皮标记物E-cadherin蛋白表达水平逐渐降低（P < 0.05）,间质标记物α-SMA表达水平逐渐升高（P < 0.05）;流式细胞术检测结果显示,5~20 ng/mL TGF-β1处理后细胞内ROS含量上升（P < 0.05）,线粒体活性氧上升（P < 0.05）,线粒体膜电位荧光强度下降（P < 0.05）,ATP含量降低（P < 0.05）,线粒体合成相关蛋白NRF-1和mt-TFA表达水平均下调（P均 < 0.05）。结论：TGF-β1诱导细胞发生上皮间质转化过程中线粒体的合成与功能受到影响,并由此促进了EMT的发生。     

上皮-间质转化与胃癌

上皮-间质转化（EMT）是上皮细胞向间质细胞转化的现象。近年来发现EMT可以通过多种机制影响胃癌的发生发展,促进肿瘤细胞迁移和侵袭。EMT的发生涉及多个信号通路,与微小RNA、幽门螺杆菌、转录因子等有关,其有望成为治疗侵袭性胃癌的新靶点。     

Fzd2诱导ER阴性乳腺癌细胞上皮-间质转化

目的:分析Frizzled 2（Fzd2）在雌激素受体阴性（ER-）乳腺癌中的表达及其对ER-乳腺癌细胞上皮-间质转换（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响。方法:采用免疫组化方法检测Fzd2在乳腺癌组织中的表达;采用Western blot检测Fzd2、E-cadherin、Vimentin、Slug、Zeb1在乳腺癌细胞中的表达;采用伤口愈合试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭。结果:Fzd2在ER-乳腺癌组织及细胞系中过表达;Fzd2敲减促进Hs578T细胞表达E-cadherin,减少Hs578T细胞表达Vimentin、Slug和Zeb1;Fzd2敲减抑制Hs578T细胞迁移和侵袭。结论:Fzd2诱导ER-乳腺癌细胞发生EMT;Fzd2可能作为ER-乳腺癌防治的一个潜在靶向分子。     

MicroRNA与肿瘤上皮-间质转化关系的研究进展

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,在肿瘤的发生、发展、转移中发挥重要作用。microRNA(miRNA)作为一类长度为19-25个核苷酸的短链非编码RNA,是转录后调控网络中重要的调控因子,与肿瘤EMT相关基因表达之间关系密切,已成为肿瘤领域的研究热点。现对近年来miRNA与肿瘤EMT关系的研究进展做一综述。     

乳腺癌中P53的表达与上皮-间质转化的相关性及其临床意义

  目的   探讨乳腺癌组织中P53的表达和上皮-间质转化（EMT）的相互关系及其临床意义。方法:免疫组织化学法检测63例乳腺癌组织中P53、Twist、Snail、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达情况，分析乳腺癌突变型P53蛋白表达与临床病理特征，患者预后和EMT发生之间的关系。   方法   免疫组织化学法检测63例乳腺癌组织中P53、Twist、Snail、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达情况，分析乳腺癌突变型P53蛋白表达与临床病理特征，患者预后和EMT发生之间的关系。   结果   P53、Twist和Snail的阳性率以及EMT的发生率分别为44.4%（28/63）、54.0%（34/63）、68.3%（43/63）和41.3%（26/63）。乳腺癌P53表达与组织学分级相关（P < 0.05），与其他临床病理特征无关（P>0.05）。P53与Twist、Snail的表达存在相关性，而Twist、Snail和EMT发生相关（P < 0.05）。多因素分析显示，淋巴结转移、P53和EMT是乳腺癌患者预后的独立影响因素。   结论   P53的表达与乳腺癌组织学分级和EMT的发生相关，是患者预后的独立影响因素，可作为乳腺癌治疗的重要靶点。       

乳腺癌干细胞上皮-间质转化标志物表达变化及意义

目的 探讨乳腺癌干细胞上皮．间质转化标志物表达变化及其临床意义。方法采用无血清悬浮培养法,从MCF-7细胞培养乳腺癌微球体细胞,应用流式细胞仪检测微球体细胞中CD44和CD24的表达,采用Westernblot方法检测微球体细胞中E-钙黏素、N-钙黏素、纤维连接蛋白、波形蛋白的表达水平,体外穿膜实验检测肿瘤细胞的迁移、侵袭能力。结果乳腺微球体富集了CD44＋CD24-的乳腺癌干细胞,并能在含血清培养基中增殖分化。该微球体细胞的上皮标志物E-钙黏素表达水平下调,而间质标志物N-钙黏素、纤维连接蛋白、波形蛋白的表达水平上调,同时乳腺癌干细胞的迁移、侵袭能力显著增强。结论乳腺癌干细胞具有上皮-间质转化的特征,具有显著增强的迁移、侵袭能力。     

上皮间质转化在卵巢癌进展及化疗耐药中的研究进展

卵巢癌是致死性最高的妇科恶性肿瘤,居全球女性因癌症死亡原因第8位,其预后差的主要原因是就诊时已处于疾病的晚期,且迅速对化疗产生耐药。越来越多的证据表明,上皮间质转化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）在卵巢癌的进展中发挥重要作用,并且促进化疗耐药。本文将重点探讨EMT在卵巢癌进展过程中各环节所发挥的作用,同时对EMT介导的不同类型的化疗耐药机制进行探讨。     

肿瘤坏死因子-β1通过诱导上皮-间质转化促进人膀胱癌T24细胞株的侵袭

目的:体外实验研究TGF-β1诱导人膀胱癌细胞T24发生上皮-间质转化（EMT）的作用及其机制。方法:以人膀胱癌细胞T24作为研究对象,使用不同浓度TGF-β1干预24 h,光镜下观察T24细胞形态学变化;分别采用Real time-PCR（RT-PCR）和Western blot 法检测细胞中上皮表型蛋白E-cadherin和间质表型蛋白Vimentin mRNA 和总蛋白的表达。Transwell小室实验检测细胞的侵袭与迁移潜能。结果:TGF-β1可激活T24细胞的EMT程序,并上调Vimentin mRNA 和蛋白的表达水平和下调E-cadherin mRNA 和蛋白的表达水平。此外,TGF-β1可促进T24细胞体外侵袭潜能,而TGF-β1拮抗剂LY2109761可阻断这一过程。结论:EMT过程的激活参与了TGF-β1介导的人膀胱癌T24细胞的侵袭。     

尼古丁诱导肺癌细胞上皮间质转化促进其侵袭转移

背景与目的我们的前期研究发现尼古丁能诱导肺癌细胞上皮间质转化。本研究的目的是探讨尼古丁诱导的上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）与肺癌侵袭之间的关系。方法应用不同浓度尼古丁处理肺腺癌A549细胞,应用Real-time PCR和Western blot方法检测EMT相关分子标志物E-钙粘蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）mRNA和蛋白表达水平,应用免疫荧光技术检测β-链蛋白（β-catenin）蛋白表达位置的变化,应用划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测尼古丁对肺癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果尼古丁明显下调肺癌细胞株A549 E-cadherin mRNA和蛋白水平表达（P<0.01, P<0.01）,并具有浓度和时间依赖性;尼古丁明显上调肺癌细胞株A549 Vimentin mRNA和蛋白水平表达（P<0.01, P<0.01）;尼古丁诱导肺癌细胞株A549细胞β-catenin蛋白发生核转移;划痕实验和侵袭实验观察到尼古丁处理的肺癌细胞株A549细胞的迁移和侵袭能力明显增强（P<0.01, P<0.01）。结论尼古丁能够诱导肺癌细胞发生EMT,并且促进肺癌细胞株A549细胞的体外侵袭潜能。     

姜黄素通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制TGF-β1诱导的肺癌细胞上皮间质转化

摘 要：［目的］ 探讨姜黄素对TGF-β诱导的肺癌A549细胞上皮间质转化、侵袭转移的影响及其可能的机制。［方法］ 通过转化生长因子TGF-β1诱导肺癌细胞株A549发生上皮间质转化;利用不同浓度姜黄素干预由TGF-β1诱导的肺癌 A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞划痕实验、Transwell 侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力变化,Western blot法检测上皮表型标记蛋白E-cadherin和间质表型标记蛋白N-cadherin、Vimentin的表达及PI3K/AKT/mTOR信号通路中AKT、mTOR磷酸化的情况,并利用PI3K抑制剂LY290004、mTOR抑制剂Rapamycin通过上述方法对姜黄素的作用进行印证。［结果］ 与对照组相比,姜黄素显著增加A549细胞E-cadherin的表达,抑制N-cadherin和Vimentin蛋白及TGF-β1刺激p-AKT和p-mTOR的表达,且呈明显的剂量—时间依赖关系;同时抑制TGF-β诱导的侵袭迁移。［结论］ 姜黄素可通过PI3K/AKT/mTOR通路明显抑制TGF-β1诱导的肺癌A549细胞上皮间质转化,降低其侵袭迁移能力。