尿α1—微球蛋白监测在烧伤临床治疗中的意义

目的 探讨尿中α１－微球蛋白与烧伤病人肾功能的关系及其对烧伤治疗的指导作用。方法 ３６例病例分成５组：正常对照组，轻度烧伤组，中度烧伤组，重度烧伤组，特重烧伤组。采用放免法测定各组病例在规定时相的尿α１－ＭＧ，尿β２－微球蛋白，尿白蛋白及血ＢＵＮ，血Ｃｒ，各指标分别制表，进行组间和指标间对照分析。     

儿童尿液α1-微球蛋白检测的临床意义

目的：为探讨尿液α1－微球蛋白在儿童某些疾病中的变化及其在肾脏疾病的诊断意义。方法：采用放免法,测定了32例正常儿童的尿液α1－微球蛋白作为对照;检测患儿122例,含肾疾患21例,肺炎31例,其它非肾脏损害病儿27例,糖尿病43例,同时检测了尿β1－微球蛋白、α1－微球蛋白和微白蛋白,分别与正常对照组进行t检验分析。结果：肾疾患和肺炎组的尿α1－微球蛋白明显增高,差异有显著性。结论：尿α1－微球蛋白测定,可作为一种判定肾脏早期损伤的敏感指标。     

尿α1-微球蛋白在新生儿窒息后肾损伤中的意义

目的探讨尿α1-微球蛋白在新生儿窒息后肾功能损伤的意义。方法窒息新生儿58例按出生时Apgar评分分为轻度窒息组32例、重度窒息组26例;同期选择30例健康足月新生儿作为健康对照组。所有患儿在生后3d内采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测尿α1-微球蛋白（α1-MG）浓度,并与其血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平进行对比。结果重度窒息组和轻度窒息组的BUN、Cr和尿α1-MG水平高于健康对照组,且重度窒息组BUN、Cr和尿α1-MG水平显著高于轻度窒息组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。轻度窒息组和重度窒息组尿α1-MG异常检出率均显著高于同组血清BUN和Cr异常检出率,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论尿α1-MG是评价新生儿窒息后肾功能损害的敏感指标。     

血、尿α_1-微球蛋白、β_2-微球蛋白在糖尿病肾病早期诊断中的意义

采用放射免疫测定方法（ＲＩＡ）,观察４３例糖尿病患者血、尿α１微球蛋白（α１ＭＧ）、β２微球蛋白（β２ＭＧ）及血肌酐（ＳＣｒ）变化。结果显示：常规尿蛋白阴性,ＳＣｒ含量异常者占２５５％,尿中α１ＭＧ／Ｃｒ、β２ＭＧ／Ｃｒ、血α１ＭＧ、β２ＭＧ异常者分别占７９０７％、６７４４％、３７２１％、５５８１％。各种微球蛋白测定的阳性率与ＳＣｒ比较,差异有显著性（Ｐ＜００５）。结果说明血、尿α１ＭＧ、β２ＭＧ在诊断糖尿病早期肾损伤中有一定的临床意义。并提示血、尿α１ＭＧ、β２ＭＧ测定在反映肾脏损伤中比ＳＣｒ敏感。     

尿α1-微球蛋白与β2-微球蛋白在早期妊娠高血压肾病中的诊断价值比较

目的 比较尿α1-MG与β2-MG在早期妊娠高血压肾病中的诊断价值.方法 选取160例早期妊娠高血压肾病患者为研究对象,通过检测尿α1-MG与β2-MG的含量及其阳性率与高血压分级的关系,并与对照组比较,分析微量尿蛋白在早期妊娠高血压肾病中的诊断价值.结果 2、3级妊娠高血压患者尿β2-MG含量为(5.16±2.32)、(9.67±1.36) mg/L,均较1级的(1.33±0.41) mg/L升高(P＜0.05);3级妊娠高血压患者尿α1-MG含量较1级的(6.51±2.70) mg/L升高(P＜0.05).结论 1级妊娠高血压尿α1-MG与β2-MG含量均较低,肾脏功能未见明显损害,进入2级高血压时,肾功损害明显,随着高血压分级升高和病程延长,肾功能损害也加重,尿α1-MG与β2-MG可作为高血压肾病诊断的敏感指标.     

尿液pH值对α1-微球蛋白、β2-微球蛋白测定的影响

目的 探讨尿液pH值对α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)测定的影响.方法 免疫散射比浊法测定正常对照组与肾脏疾病组尿液在pH值调节前后α1-MG、β2-MG含量的变化.结果 尿α1-MG在正常对照组与肾脏疾病组pH值调节前后无显著性差异(P＞0.05),较稳定;尿β2-MG在正常对照组无明显变化,但在肾脏疾病组pH值调节前后有显著性差异(P＜0.05).结论 尿α1-MG较稳定,不受pH值的影响;β2-MG不稳定,在酸性环境中易分解破坏.在临床实验室实际工作中,尿α1-MG优于尿β2-MG指标的检测.     

血,尿α1—微球蛋白,β2—微球蛋白在糖尿病肾病早期诊断中的意义

采用放射免疫测定方法（ＲＩＡ）观察４３例糖尿病患者血,尿α１－微球蛋白（α１－ＭＧ）β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）及血肌酐（ＳＣｒ）变化。结果显示：常规尿蛋白阴性,ＳＣｒ含量异常者占２５．５％,尿中α１－ＭＧ／Ｃｒ,β２－ＭＧ／Ｃｒ血α１－ＭＧβ２－ＭＧ异常者分别占７９．０７％,６７．４４％,３７．２１％,５５．８１％,各种微球蛋白测定的阳性率与ＳＣｒ比较,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结果说明血,     

尿微量白蛋白和α1-微球蛋白在糖尿病肾病早期筛查和治疗中的作用

目的 探讨尿微量白蛋白(U-Alb)和α1-微球蛋白(α1-MG)在糖尿病肾病早期筛查和治疗中的作用.方法 测定96例糖尿病患者和93例健康体检者血尿素氮(BuN)、肌酐(Cr)、尿蛋白定性、尿微量白蛋白和α1-微球蛋白并进行分析.结果 糖尿病组尿微量白蛋白和α1-微球蛋白的测定结果明显高于健康对照组(P<0.01),具有统计学意义.结论 定期进行尿微量白蛋白和α1-微球蛋白的联合检测对糖尿病肾病早期诊断有重要意义.     

血、尿α1-微球蛋白测定在原发性肾脏病中的诊断意义

目的探讨血、尿α1-微球蛋白在原发性肾脏疾病中的诊断意义.方法采用放射免疫法检测了780例原发性肾脏病病人血、尿α1-微球蛋白的含量,分析了305例非肾穿病人血肌酐值及375例肾穿病人肾脏病理改变与血、尿α1-微球蛋白含量的关系,并与10例正常人进行了对照.结果随着肾功能的不断恶化及肾穿病理的加重,患者血、尿α1-微球蛋白浓度明显升高,并具有统计学意义.结论血、尿α1-微球蛋白测定可作为诊断原发性肾脏病的一种指标.     

小儿肺炎支原体肺炎尿α_1微球蛋白测定的价值

目的 :探讨小儿肺炎支原体肺炎肾脏损害发生率及尿α1 微球蛋白测定的价值。方法 :对小儿支原体肺炎组、其他原因所致肺炎组及正常对照组分别测定尿α1 微球蛋白和尿常规 ,支原体肺炎及其他原因所致的肺炎同时测定血尿素氮 ,三组进行对比分析。结果 :三组尿α1 微球蛋白测定异常率分别是 :支原体肺炎组 2 4 % ,其他原因肺炎组 7.2% ,正常对照组 0 .5 % ,三组比较差异显著 ,P<0 .0 1。支原体肺炎组三种测定方法比较 :尿α1 微球蛋白测定异常率 2 4% ,尿常规蛋白定性异常率 10 .5 % ,血尿素氮异常率 1.5 % ,三种测定方法比较差异显著 ,P<0 .0 1。结论 :支原体肺炎肾脏损害的发生率明显高于其他原因所致的肺炎 ,尿α1 微球蛋白测定与尿常规蛋白定性、血尿素氮测定比较 ,更敏感 ,能早期发现肾脏损害。     

血、尿α_1-微球蛋白测定在原发性肾脏病中的诊断意义

目的 探讨血、尿α-1微球蛋白在原发性肾脏疾病中的诊断意义。方法 采用放射免疫法检测了780例原发性肾脏病病人血、尿α_1-微球蛋白的含量,分析了305例非肾穿病人血肌酐值及375例肾穿病人肾脏病理改变与血、尿α_1-微球蛋白含量的关系,并与10例正常人进行了对照。结果 随着肾功能的不断恶化及肾穿病理的加重,患者血、尿α_1-微球蛋白浓度明显升高,并具有统计学意义。结论 血、尿α_1-微球蛋白测定可作为诊断原发性肾脏病的一种指标。     

Quantification of the isomerization of Asp residue in recombinant human alpha A-crystallin by reversed-phase HPLC

A method for determining the isomerization of Asp residues in proteins is described and demonstrated by quantifying the isomerization of Asp(151) in recombinant human alphaA-crystallin. First, four types of dodecapeptide fragment ((146)IQTGLD(151)ATHAER(157)) in which the Asp residue was either L-Asp, D-Asp, L-isoAsp or D-isoAsp were synthesized, and RP-HPLC conditions were established for their separation. Next, the Asp(151)-containing peptide fragments isolated from the tryptic hydrolysate of recombinant alphaA-crystallin were analyzed under these conditions. New peaks, the retention times of which were the same as those of peptides containing D-Asp, L-isoAsp and D-isoAsp, were generated when alphaA-crystallin was incubated for 140 days at 37 degrees C. An amino acid composition, amino acid sequence, and enantiomeric analysis revealed that two peaks with retention times identical to those of peptides containing L-isoAsp and D-isoAsp represented dodecapeptide fragments containing L-isoAsp(151) and D-isoAsp(151), respectively. RP-HPLC analysis under other condition suggested that the peak with retention time identical to that of peptide containing D-Asp represented dodecapeptide fragments containing D-Asp(151). The present method does not require acid hydrolysis, which generates further isomerization products as artifacts, and thus make possible the sensitive quantification of each type of Asp isomer individually at a specific site in a protein. In our analysis of the Asp(151) residue in human alphaA-crystallin, the degree of isomerization from L-Asp to D-Asp can be determined to a level as low as 0.3%.     

自发性癫痫大鼠皮质和海马中GLT-1、EAAC1表达异常

目的探讨自发性癫痫大鼠(SER)皮质和海马中GLT-1、EAAC1 mRNA与蛋白的表达情况。方法应用RT-PCR技术检测GLT-1、EAAC1 mRNA的表达;应用Westernblot方法检测GLT-1、EAAC1蛋白的表达;应用免疫组化方法定位GLT-1、EAAC1蛋白。结果SER皮质中GLT-1蛋白表达低于正常Wistar大鼠(P<0.05);EAAC1 mRNA及蛋白表达均低于正常Wistar大鼠(P<0.01);SER海马中GLT-1蛋白表达高于Wistar大鼠(P<0.01);免疫组化结果显示GLT-1、EAAC1在SER、Wistar大鼠皮质和海马中均有表达,且位于细胞膜上。结论SER皮质中GLT-1、EAAC1表达下调可能促进了癫痫的发生;海马中GLT-1蛋白表达上调可能是一种代偿性神经保护机制。     

重组蛋白在大肠杆菌分泌表达的研究进展

长期以来,大肠杆菌是表达外源蛋白的首选表达系统,重组蛋白分泌表达与胞内表达相比有很大优越性,在细胞周质腔不仅能促进重组蛋白二硫键的形成及正确折叠,还能促进分泌蛋白的N-端加工。本文综述了近年来在大肠杆菌中表达可溶性外源蛋白的进展,目的是为了提高外源蛋白的生物活性。     

Im人成熟型TGF-β1重组表达载体的构建

目的构建人类成熟型TGF-β1（hTGF-β1）基因的表达载体,探索TGF-β1在大肠埃希菌中的表达,获得重组表达载体pET32a-hTGFβ1。方法Trizol法抽提人新鲜胎盘组织的总RNA,RT-PCR法扩增人成熟型TGF-β1基因,PCR产物纯化后经BglⅡ和HindⅢ双酶切后与相同酶切的pET32a（＋）载体连接,构建重组载体pET32a-hTGF-β1。结果成功构建了hTGF-β1重组表达载体pET32a-hTGFβ。结论hTGF-β1基因的原核表达载体的成功构建,为下一步表达、纯化该基因的蛋白产物以及hTGF-β1多克隆抗体的制备提供了依据。     

冠心病患者外周血单个核细胞TLR5的测定及临床意义

目的:检测Toll样受体5(Toll-like receptor 5,TLRS)在冠心病(CHD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法:用逆转录聚合酶链扩增法(RT-PCR)的方法检测50例CHD患者及40例健康对照者PBMCs TLR5 mRNA的表达情况.结果:CHD患者外周血单个核细胞Toll样受体5 mRNA表达水平高于健康对照组,分别为(0.793±0.284)和(0.211±0.319)(P＜0.01).结论:TLR5及其介导的天然免疫应答与动脉粥样硬化的发生发展存在一定的相关性.     

非融合重组人碱性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌中的克隆及高效表达

目的:获得大肠杆菌中高效表达的非融合重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF).方法:采用RT-PCR技术,以人胎儿脑组织的总RNA克隆出hbFGF基因,再以此为模板,设计引物,对hbFGF的TIR(翻译起始区)部分碱基进行改造和降低G C含量,最后将该新基因克隆于质粒载体pET-3C,转化于大肠杆菌中表达.结果:非融合rhbFGF在大肠杆菌中高效表达,占总蛋白量的30％以上.采用离子交换和亲和层析方法纯化后,生物活性与标准蛋白一致.结论:非融合rhbFGF及调整TIR区域的碱基序列能有效提高重组蛋白的表达效率.     

子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究

目的研究子宫腺肌病中孕激素受体亚型的表达,探讨孕激素受体亚型（hPR）在子宫腺肌病发病中的作用机制。方法运用免疫蛋白印迹法（Western blot）和RT-PCR方法测定子宫腺肌病患者（24例）病灶及其在位内膜及对照组（19例）子宫内膜标本中孕激素受体亚型在蛋白和mRNA水平的表达,计算机图像分析、半定量研究孕激素受体亚型的表达。结果子宫腺肌病异位内膜中hPRs的表达均明显低于在位内膜和对照组,研究组在位或异位内膜中,hPR-A含量均高于hPR-B;而在mRNA水平上则差异无统计学意义（P〉0.05）。结论子宫腺肌病异位内膜hPRs蛋白的表达均明显低于在位内膜,而在mRNA水平上却无显著性差异;hPR蛋白的活性可能受转录后调节。     

鼻咽癌中环氧化酶-2的实验研究

目的 研究环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达,探讨其与鼻咽癌的增生、浸润及转移的关系。方法 在26例鼻咽癌及相应癌旁组织和10例正常鼻咽部黏膜组织中,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测环氧化酶-2 mRNA的表达。结果 在鼻咽癌组织中环氧化酶-2 mRNA高表达,在正常鼻咽部黏膜环氧化酶-2 mRNA中低表达,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论 环氧化酶-2与鼻咽癌的生长、浸润及转移有密切关系。