胸腹水细胞沉渣包埋技术及应用

胸腹水细胞学查检常规方法是胸腹水离心涂片后HE染色、镜检。该方法存在缺点：首先涂片中的细胞为散在单个或少数成团细胞，在光镜下有时很难鉴别增生间皮细胞、组织细胞、肿瘤细胞；其次不能像石蜡包埋细胞块，该方法克服了以上缺点，有利于提高胸腹水细胞学诊断的准确率。     

脱落细胞免疫细胞化学技术

在脱落细胞学诊断中免疫细胞化学技术是一项很重要的内容,随着新的抗体在识别抗原的特异性和多价性上日益完善,这项技术在临床病理诊断中的应用也越来越广泛。但在常规的脱落细胞学检查中,常因细胞涂片免疫细胞化学染色不够理想而未能充分展示出其应有的优势。因此,建立免疫细胞化学质控标准（质量保证和质量控制）对提高脱落细胞诊断准确率具有重要意义。     

胸腹水细胞染色体检查对诊断恶性肿瘤的意义

胸腹水是一种常见临床体征，产生的机制复杂．涉及的病种较多．恶性肿瘤是导致胸腹水的主要原因之一。经典的脱落细胞学诊断方法，特异性较高．但敏感性不足．仅在28-60％，而近几年发展起来的胸腹水染色体检查则敏感性较高．约为80％．尤其是当临床高度怀疑为恶性胸腹水，而细胞学检查阳性或难以肯定为癌细胞时染色体检查可弥补其不足，两法同时检测特异性100％．敏感性可达92％。     

免疫细胞化学在细胞病理学中的应用

免疫细胞化学（ICC）在细胞病理学中是一很有用的辅助诊断方法。目前在甲醛固定的石蜡包埋切片和冷冻组织切片中应用的抗体也多数能应用于乙醇或甲醛固定的细胞涂片。免疫细胞化学常用的标本制备方法有4种：直接涂片（CS）法、细胞离心涂片法（cytospin）、细胞块石蜡包埋（CB）法和液基薄层制片法。CS法和细胞离心涂片法由于涂片背景有较多的血细胞、细胞碎片及大量蛋白液,往往出现高背景着色。蛋白质聚集在细胞周围,     

前列腺穿刺组织石蜡包埋技术的改进方法北大核心CSCD

前列腺穿刺是确诊前列腺病变的重要手段,通常将10~12针系统穿刺作为首次前列腺穿刺策略[1],经会阴B超引导下的前列腺癌12点穿刺组织的病理检查确诊率可达90%以上[2],因穿刺取材的组织量少,所以前列腺细针穿刺技术可以作为一种微创、有效、较安全的诊断手段。如何充分利用少量的前列腺穿刺组织制作出高质量的病理切片直接关系到病理诊断的准确性,其中石蜡包埋操作是影响切片制作质量的重要环节,而传统的穿刺组织包埋方法往往无法同时兼顾包埋效率和质量,为了提高前列腺穿刺组织的石蜡包埋效率和质量,我们经多次试验并不断改进,摸索出一种高效且质量可靠的石蜡包埋方法。     

逆转录聚合酶链反应检测石蜡包埋组织中细胞周期蛋白D1 mRNA对套细胞淋巴瘤的诊断价值

目的 探讨用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和竞争性RT-PCR法检测套细胞淋巴瘤（MCL）石蜡包埋组织中细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白和mRNA在常规病理工作中的可行性及其诊断和鉴别诊断价值。方法 收集淋巴结内MCL38例、对照组包括结内小B细胞淋巴瘤58例（B小淋巴细胞性淋巴瘤14例,淋巴浆细胞性淋巴瘤3例,滤泡性淋巴34例,淋巴结边缘区B细胞淋巴瘤7例）和淋巴结反应性增生病例20例,用免疫组织化学EnVision法和RT-PCR法、竞争性RT-PCR法检测cyclin D1蛋白及其mRNA的表达,以看家基因PGK作为内对照检测RNA。结果 （1）38例结内MCL中,cyclin D1蛋白阳性率为71．1％（27／38）,对照组均为阴性。（2）116例标本中,可检出内对照PGK基因mRNA表达103例（88．8％）。38例MCL中PGK阳性36例（94．7％）。（3）38例结内MCL中,34例可检出cyclin D1 mRNA表达,去除PGK和cyclin D1 mRNA均阴性的2例,MCL中cyclin D1 mRNA表达的阳性率为94．4％（34／36）。对照组中B小淋巴细胞性淋巴瘤1例检出cyclin D1 mRNA表达,其余病例均未检出cyclin D1 mRNA表达。PCR结果全部经测序证实。（4）用竞争性RT-PCR,38例结内MCL中27例可检出cyclin D1 mRNA高表达,去除2例PGK也为阴性的病例,MCL中cyclin D1 mRNA高表达率为75．0％（27／36）。对照组小B细胞恶性淋巴瘤及淋巴结反应性增生无1例有cyclin D1 mRNA高表达。结论 RT-PCR方法和竞争性RT-PCR方法可在石蜡包埋组织中检测cyclin D1 mRNA的表达,均可用于MCL的诊断。     

人体体液脱落细胞冷冻切片的可行性分析与临床应用

体液细胞学检查是基层医院病理科的常规工作之一,多数病理医师采用离心后取沉淀物直接涂片染色观察细胞的形态。由于直接法观察细胞数量有限,且体液中脱落的微小组织涂片时染色不佳,影响阳性检出率。常规细胞石蜡切片将体液沉淀物制成切片后观察微小组织,耗时长(至少48 h )。为提高阳性检出率并能在短时间内得出结果,本文对人体体液细胞快速冷冻切片进行探讨和临床应用,现介绍如下。     

应用多重逆转录聚合酶链反应技术检测石蜡包埋三种软组织肉瘤中融合基因的表达

目前,用于软组织肉瘤（soft tissue sarcoma,STS）染色体易位或其融合基因检测的技术方法很多,以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法最为常用。然而对于一些形态学缺乏特征性排列结构的小圆细胞肿瘤,运用RT-PCR技术对不同融合基因逐一检测和排除,也存在检测程序繁琐、耗时、耗材等不足。针对此问题,我们设计了多重引物,应用多重RT-PCR技术检测石蜡包埋STS融合基因的表达,建立一套稳定高效、适合临床常规STS融合基因表达检测的分子诊断方法。     

培养细胞免疫细胞化学技术的特点与临床应用

培养细胞免疫化学技术作为一种跨领域的研究手段,是将免疫细胞化学技术与细胞培养技术密切结合的技术,可获得单纯从体内实验难以达到的效果。培养细胞免疫组织化学技术与组织切片的免疫组织化学技术基本原理和操作是相同的,但又有许多要特别注意的细节。[第一段]     

用免疫细胞化学鉴别胸腹水脱落细胞在肿瘤诊断中的价值

探讨免疫细胞化学鉴别胸腹水中上皮来源恶性肿瘤细胞和间皮源性细胞的价值。应用免疫细胞化学方法,检测80例患者胸腹水恶性肿瘤细胞和间皮细胞的细胞学形态及ESA、CEA、CK、D2-40、CR、Mesothlial、KI67、Vimentin等8种蛋白的表达情况。结果表明：胸腹水脱落细胞学检测和这8种蛋白联合检测可鉴别上皮来源恶性肿瘤细胞和间皮细胞。两种方法联合检测胸腹水,提高了脱落细胞学疑难病例诊断的准确率。     

超声波快速石蜡细胞块切片技术在细针穿刺活检中的应用

细针穿刺(fine needle aspiration，FNA)细胞学检查可以对体表及实质器官的肿块作定性及分类诊断，但有局限性，对少见疑难病难以定性和分类，文献报道细胞块切片可一定程度地弥补细胞学诊断的局限性，因在制作细胞块切片过程中可部分恢复原组织结构，其中的微小组织碎片经切片也更清楚地显示其组织学特征，对疾病的病理诊断、分类有一定帮助。     

液基细胞学结合端粒酶活性检测诊断胸腹水良恶性细胞的应用

目的:探讨液基细胞学结合端粒酶活性检测诊断浆膜腔积液良恶性细胞的应用价值。方法:收集201例(临床病理证实为97例恶性,104例良性)胸腹水标本,每例标本采用液基细胞技术制成薄层细胞片,做HE染色,用于细胞学检查;同时采用PCR-TRAP技术检测端粒酶活性。结果:细胞学检查对恶性胸腹水诊断的敏感度为81.4%(79/97),特异性为90.4%(94/104),端粒酶活性检测方法对恶性胸腹水诊断的敏感度为92.8(90/97),特异性为98.1%(102/104),将两种方法相结合,在恶性腹水中二者同时为阳性为74.2%(72/97),而在良性胸腹水中同时为阳性为0.0%(0/104),将两种方法相结合对恶性胸腹水的诊断敏感性为99.0%(96/97),特异度为100.0%(104/104)。结论:液基细胞学结合端粒酶活性检测分析用于胸腹水良性与恶性细胞的鉴别诊断较细胞学方法敏感,避免漏诊。     

套细胞淋巴瘤石蜡包埋组织中细胞周期蛋白D1和t(11;14)易位检测的临床病理意义

目的 探讨套细胞淋巴瘤石蜡包埋组织中细胞周期蛋白(cyclin)D1和t(11;14)易位检测的可行性及其诊断和鉴别诊断价值。方法 收集套细胞淋巴瘤36例,对照组小B细胞恶性淋巴瘤71例,均为石蜡包埋组织,运用免疫组织化学方法观察cyclin D1的表达;用半巢式聚合酶链反应(PCR)法检测t(11;14)易位,以看家基因β-肌动蛋白(actin)作为内对照检测DNA质量。结果 (1)36例套细胞淋巴瘤中26例(72．2％)表达cyclin D1,对照组无1例表达。(2)107例标本中101例(94．4％)可检出β-actin DNA表达。36例套细胞淋巴瘤中22例检出t(11;14)易位,对照组无1例检出。去除B-actin和t(11;14)易位均阴性2例,套细胞淋巴瘤中t(11;14)易位检出率为64．7％。(3)36例套细胞淋巴瘤中cyclin D1染色和(或)t(11;14)易位检测阳性病例为29例,总阳性率为80．5％。结论套细胞淋巴瘤石蜡包埋组织中cyclin D1和t(11;14)易位的检测具较高的特异性和可行性,两者的综合应用有助于正确的诊断和鉴别诊断。     

BIOMED-2系统引物用于检测T细胞淋巴瘤石蜡样本T细胞受体γ基因重排的研究

目的 了解BIOMED-2系统T细胞受体(TCR)γ引物组合对T细胞淋巴瘤的常规石蜡包埋组织样本中TCR基因重排的检出情况及其实用性.方法 用酚/氯仿法提取55例各种组织类型的T细胞淋巴瘤石蜡包埋组织样本的DNA并通过扩增看家基因β-globin检测其质量,利用BIOMED-2系统TCR-γ引物组合和TCR-γ基因通用型引物(TVG/TJX)对55例进行TCR基因重排检测,比较二者的检出率并进行统计学分析.结果 BIOMED-2系统TCR-γ引物组合和TCRγ基因通用型引物(TVG/TJX)的TCR基因重排检出率分别为76.4%和60.0%,前者高于后者,二者的差异无统计学意义(P>0.05).结论 BIOMED-2系统TCRγ引物组合适用于本组T细胞淋巴瘤石蜡包埋组织样本的TCR基因重排检测.     

塑料包埋非脱钙骨技术在骨组织学与图像分析中的应用

骨是一种坚硬的结缔组织,细胞间质含大量的矿物质、有机盐和无机盐。为获得高质量的骨组织学图像和准确的骨组织计量学参数。我们对非脱钙切片、染色和图像处理做了一些工作,现总结如下。     

骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片在MDS诊断中联合应用的临床研究

目的将骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片二者结合,研究骨髓增生异常综合征（Myelo dysplastic syndrome,MDS）的病态造血情况。方法利用骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片对临床已诊断的48例MDS病人的骨髓造血情况作一总结和分析。结果在48例MDS病例中,骨髓涂片与骨髓活检塑料包埋超薄切片诊断相吻合的有35例,另有13例有所差异。结论把骨髓活检塑料包埋超薄切片技术和骨髓涂片检查相结合,互为补充,能更全面的反映骨髓增生异常综合征（MDS）的病理改变。但是这两种方法也有它们的局限性。     

骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片在MDS诊断中联合应用的临床研究

目的 将骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片二者结合,研究骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)的病态造血情况.方法 利用骨髓活检塑料包埋技术与骨髓涂片对临床已诊断的48例MDS病人的骨髓造血情况作一总结和分析.结果 在48例MDS病例中,骨髓涂片与骨髓活检塑料包埋超薄切片诊断相吻合的有35例,另有13例有所差异.绪论把骨髓活检塑料包埋超薄切片技术和骨髓涂片检查相结合,互为补充,能更全面的反映骨髓增生异常综合征(MDS)的病理改变.但是这两种方法也有它们的局限性.     

LCT与ICC结合在胸腹水细胞学鉴别诊断中的应用

目的:探讨液基薄层细胞检测(LCT)技术与免疫细胞化学(ICC)技术在胸腹水细胞学鉴别诊断中的意义.方法:在87例胸腹水液基细胞涂片中应用免疫细胞化学技术检测癌胚抗原(CEA)、上皮细胞膜抗原(EMA)、间皮细胞(MC)抗体及波形蛋白(Vimentin)的表达并与HE染色比较.结果:腺癌中CEA、EMA、MC、Vimentin阳性表达率分别为88.2%、90.2%、5.9%和3.9%.增生性间皮细胞中CEA、EMA、MC、Vimentin阳性表达率分别为5.6%、2.8%、97.2%和88.9%.结论:免疫细胞化学技术可应用于胸腹水LCT涂片.选择一组特异的抗体(CEA、EMA、MC、Vimentin)并结合脱落细胞HE染色可以在转移性腺癌与增生性间皮细胞的鉴别诊断中起重要作用.