杂交兰根状茎的增殖与分化成苗技术

以杂交兰种子萌发后形成的根状茎为材料,研究不同基本培养基、不同植物生长调节剂对其根状茎增殖、分化成苗以及幼苗生根移栽的影响。结果表明:1/2MS培养基较适合根状茎的增殖分化;较适宜的杂交兰增殖和分化培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;杂交兰较适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L;闭瓶3 d后,再开盖炼苗3 d后可移栽,移栽基质为苔藓,25 d后成活率达95.6%。     

文心兰高效再生体系的建立

[目的]建立文心兰高效再生体系,为利用转基因技术进行品种改良提供科学依据.[方法]以文心兰柠檬绿的无菌苗叶片为材料,探讨不同植物生长调节剂配比对其原球茎诱导的影响,开展增殖、生根及移栽研究,建立其高效稳定的再生体系.[结果]影响文心兰原球茎诱导的3种植物生长调节剂主次排序为萘乙酸(NAA)>噻苯隆(TDZ)>6-苄氨基嘌呤(6-BA),在1/2MS培养基中添加0.5 mg/L NAA、0.5 mg/L 6-BA和0.3 mg/L TDZ的诱导率最高,达48.0%.培养基中活性炭含量及碳水化合物种类对文心兰原球茎增殖的影响存在明显差异,不同活性炭含量处理间的原球茎增殖系数存在显著差异(P<0.05,下同),添加1.0 g/L活性炭较添加0.5 g/L活性炭的增殖系数显著升高,不同碳水化合物种类间的原球茎增殖系数排序为海藻糖>麦芽糖>蔗糖,最佳增殖和分化培养基为1/2MS+4.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭+20 g/L海藻糖.添加10%椰子水的文心兰幼苗生根数显著高于添加10%香蕉汁和10%苹果汁,每株平均生根量接近4.00条,即生根效果最佳的培养基为1/2MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+10%椰子水.移栽过程中根部用水苔包裹后再移至椰糠中,保证光照、水分适宜,适当添加缓释肥,移栽成活率可达100%.[结论]利用海藻糖或麦芽糖作为碳源的文心兰原球茎增殖效果较优,生根数和生根质量优势明显;不同植物生长调节剂配比、碳源和有机物的添加对文心兰组织培养具有明显的促进效果.     

金线莲原球茎的诱导与快速繁殖

[目的]寻求金线莲原球茎诱导、增殖、分化与生根的最佳培养基及影响原球茎增殖与分化的主要因子。[方法]以金线莲茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、NAAT、DZ和S-3307,对原球茎的诱导、继代增殖、苗的分化、生根等进行研究。[结果]原球茎诱导的最佳培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L,诱导率达93.3%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+S-33071.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系数达9.4;芽分化的最佳培养基为MS+S-33071.5 mg/L+TDZ 0.4 mg/L+NAA 1.5 mg/L+琼脂0.7%,分化率达91.7%;最佳的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.7%,生根系数达4.4;组培苗移栽30 d后,存活率均达93%左右。[结论]S-3307是金线莲原球茎增殖的主要因子,TDZ是原球茎分化的主要因子。     

铁皮石斛茎段丛生芽的增殖培养研究

[目的]研究铁皮石斛茎段丛生芽的最适增殖培养方式。[方法]以铁皮石斛茎段为外植体,研究不同基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度、有机添加物及培养时间对铁皮石斛丛生芽增殖的影响。[结果]MS培养基优于1/2MS、B5和N6;香蕉对丛生芽的分化有明显的促进作用;培养60 d时丛生芽的增殖倍数最高,生长势好。[结论]丛生芽的最佳增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L,培养时间以60 d为宜。     

线艺兰的组织培养及植株再生研究

采用线艺兰建兰茎尖、腋芽为外植体,通过对类原球莘的诱导、增殖、分化、生根和移植等影响因素研究,运用正交试验筛选出最佳的根状茎增殖培养基为B5+6-BA 0.5mG/L+NAA 1.0 mg/L+蔗糖20g/L,根状茎最高增殖倍数达13.5%;最适宜的分化培养基为B5+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.2mg/L+AgNO₃ 5mg/L+蔗糖30g/L,其芽分化率最高为44.1%.最佳乍根培养基为1/2B5+NAA0.2mg/L+AC 0.5g/L+蔗糖30g/L.NAA对线艺兰根状茎的增殖影响最大.6-BA则对根状茎的分化成芽起显著性影响,其次是AgNO₃,而NAA影响不大.     

墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种组培快繁技术

以墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种原球茎为试材,探索不同培养基配方对其增殖、分化及生根的影响。结果表明,原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(NAA)1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L,增殖率可达317.77%;原球茎使用培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L培养时的分化率为54.96%,分化效果相对最好;培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L有利于不定芽的增殖,增殖率为227.5%;1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+活性炭1.0 g/L为最适生根培养基,生根率达81.00%,且苗体生长健壮。     

正交试验优化红颜草莓离体再生体系

[目的]优化红颜草莓离体再生体系。[方法]采用正交试验,研究不同培养基、植物生长调节剂的种类及浓度对红颜草莓叶片不定芽再生的影响。[结果]IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,诱导率为90.00%;最佳分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,分化率为8.1%;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,平均每个不定芽的增殖倍数为7.67;最适继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均苗高5.98 cm;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均根数为4.5根。[结论]为进一步研究草莓的遗传转化奠定了基础。     

青天葵组织培养条件优化

分别以MS、1/2MS为基本培养基,采用正交试验研究植物生长调节剂对青天葵根状茎繁殖和新球茎诱导的影响,进而优化青天葵组织培养繁殖技术。结果表明:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA利于根状茎增殖,增殖倍数为6.5;MS+1.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA适于诱导新球茎获得再生植株,诱导系数为11.5,球茎移栽发芽成活率达到90%。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。     

茅苍术愈伤组织诱导及其分化培养研究

[目的]研究不同植物生长调节剂对茅苍术不同外植体愈伤组织诱导及分化的影响。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究茅苍术愈伤组织诱导和分化的最优培养条件。[结果]最佳诱导培养方法:以叶片为外植体,反面朝下接种于培养基,培养基配方为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA。愈伤组织分化不定芽的最优培养基配方为1/2MS+4.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA。[结论]为茅苍术组培快繁技术与细胞培养技术奠定基础。     

香水百合组织培养和快速繁殖条件的优化

以香水百合无菌试管苗小鳞茎作为外植体,从外植物体创伤、基本培养基、植物生长调节剂的配比以及培养基的物理状态等几个方面研究了百合鳞茎增殖的最优条件,并对百合组培苗的生根条件进行了优化。结果表明,一定的外植体创伤处理、氮元素含量较高的基本培养基和合适的植物生长调节剂浓度组合有利于鳞茎的增殖,香水百合鳞茎最佳增殖培养基配方为N6+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA;在MS+1.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基中,液体培养的鳞茎增殖倍数极显著高于固体培养;香水百合小苗的最佳生根培养基配方为1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA。     

杂交兰原球茎增殖及分化研究

[目的]对杂交兰原球茎的增殖及分化进行研究。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究培养基、6-BAI、BA和AC对杂交兰原球茎增殖的影响;设置几种不同培养基对原球茎的分化进行探讨。[结果]培养基和6-BA对原球茎的增殖影响不大,IBA浓度为0.1 mg/L、AC浓度为1.0 mg/L时,原球茎增殖效果最好;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好。[结论]在培养基中添加NAA有利于原球茎的分化。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

金线莲快繁技术体系的优化

[目的]研究全线莲快繁技术.[方法]通过对不同基础培养基、植物生长调节剂种类(NAA、6-BA)及不同添加量对金线莲丛生芽数量、生根情况和株高等影响的研究,同时进行不同品种金线莲之间生长情况的比较以及控制光照条件下金线莲的生长情况比较.[结果]用改良MS培养基,添加不同浓度的NAA和6-BA,得出最佳的增殖培养配方为改良MS培养基+NAA 0.4 mg/L+ 6-BA1 mg/L,生根最佳培养基配方为改良MS培养基+IBA 0.4 mg/L.[结论]该研究为金线莲产业化发展做好准备工作.     

植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎增殖与分化的影响

以春兰‘宋梅’为试验材料,研究了植物生长调节物质及有机添加物对春兰根状茎的增殖与分化的影响,结果表明适合春兰根状茎增殖的培养基为:1/2MS+3~5 mg/L NAA+0.1 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂;最适合根状茎芽分化的培养基为:1/2MS+0.5 mg/L NAA+3 mg/L BA+10%椰子汁+30 g/L蔗糖+6.8 g/L琼脂。     

双瓣茉莉离体微繁技术

以双瓣茉莉带腋芽的茎段为外植体,在附加不同浓度TDZ、6 - BA、IBA、NAA的WPM培养基、MS培养基上进行离体培养,建立起双瓣茉莉组织培养快速繁殖的技术体系.适宜的腋芽诱导培养基为WPM+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5 mg/L;芽的继代增殖培养基为WPM+6- BA 2.0 mg/L+ IBA 0.1 mg/L;成苗培养基为WPM +6-BA 0.1或0.2 mg/L+ IBA 0.2 mg/L;生根培养基以蛭石代替琼脂,附加1.0 mg/L的NAA.     

珍贵树种山白兰的组织培养研究

[目的]研究山白兰组织培养快速繁殖。[方法]以山白兰盆栽苗的带芽茎段为外植体,MS为基本培养基,通过添加不同种类及浓度的植物生长调节剂,对山白兰进行了组织培养试验。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最适宜的芽诱导培养基,芽的诱导率达到88.9%;MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L为最适宜的增殖培养基,芽的增殖系数可达到2.6;生根诱导难度较大,在1/2 MS+NAA 2.0 mg/L上生根率达到54.5%。[结论]结果为山白兰的进一步开发和应用,丰富广西林木种质资源提供参考。     

新疆紫草快繁技术研究

[目的]建立新疆紫草组培快繁技术体系.[方法]以新疆紫草无菌苗的茎尖为外植体,筛选适合茎尖萌发、增殖、生根的激素组合.[结果]茎尖最佳萌发培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,其萌发率为100;.芽增殖培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L,芽增殖倍数为13.50倍,继代壮苗培养基为MS+NAA 0.3 mg/L +6-BA 0.5 mg/L,生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率为84;.降低6-BA浓度到0.05 mg/L可大幅降低玻璃化发生率.经过此培养基继代后,再在原生根配方中生根,生根率提高到95.32;.[结论]茎尖是新疆紫草快繁的最佳外植体.     

绞股蓝愈伤组织增殖及芽分化研究

以绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)茎段为外植体,以MS为基础培养基,通过添加不同植物生长调节剂,筛选诱导愈伤组织增殖、芽分化以及生根的最适培养基。结果表明,绞股蓝最适愈伤组织增殖培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L,愈伤组织体积增加2.7倍;最适芽分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,平均生芽数为5.7;最适生根培养基为MS培养基添加0.1 mg/L NAA,生根率为91%。     

挪威槭“普林斯顿金”快繁技术研究

为建立完整的挪威槭"普林斯顿金"离体快繁技术,特进行了其快繁技术研究。结果表明,宜以挪威槭"普林斯顿金"的休眠芽为外植体;采用0.1%升汞浸泡10 min的消毒效果较好;不定芽诱导培养的适宜基本培养基为改良B5,添加NAA+6-BA+TDZ有利于挪威槭"普林斯顿金"的不定芽分化诱导;继代增殖培养的适宜培养基配方为改良B5+NAA 0.05 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L(pH 5.5),生根培养的适宜培养基配方为1/2 MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.5 mg/L+25g/L蔗糖(pH 6.2)。