加压素对大鼠内耳水通道蛋白7表达的影响

目的观察加压素对大鼠内耳水通道蛋白7(AQP7)表达的影响,探讨加压素引起膜迷路积水发生机制中水通道的作用。方法大鼠腹腔注射精氨酸加压素50μg/kg,每天1次,共1周。采用大鼠cDNA芯片技术显示加压素注射前后大鼠内耳mRNA表达强度变化。使用RT-PCR技术测量加压素注射前后大鼠内耳AQP7mRNA表达水平变化。结果基因芯片筛选出大鼠内耳水通道蛋白差异表达基因AQP7,RT-PCR显示AQP7mRNA表达显著减少。结论加压素可能引起内淋巴囊AQP7表达减少,影响内淋巴液吸收,引起Corti器钾离子循环通路水渗透性下降,影响内淋巴液循环,从而导致膜迷路积水。     

精氨酸加压素V2受体拮抗剂对阿霉素肾病大鼠肾脏水通道蛋白的影响

目的 探讨精氨酸加压素V2受体(AVP V2R)拮抗剂对阿霉素肾病大鼠肾脏水通道蛋白的影响。方法 24只大鼠分为正常对照组(NC组)、阿霉素肾病未治疗组(NS组)，阿霉素肾病 AVP V2R拮抗剂干预组(NS-V组)和阿霉素肾病 福辛普利干预组(NS-F组)，每组各6只。在第4周末，检测各组大鼠血、尿钠及渗透压等，同时检测大鼠肾脏AQP2、AQP3、AVP V2R的mRNA和蛋白表达情况。结果①阿霉素大鼠在4周末时有明显的高血钠和高血渗透压，同时伴低尿钠和低尿渗透压，而AVP V2R拮抗剂和福辛普利均能降低血钠，改善高血渗透压，AVP V2R拮抗剂还显著提高尿渗透压和尿钠。②与NC组相比，NS组大鼠肾脏AVP V2R表达明显下调，AVP V2R拮抗剂则使其进一步下调。③AVP V2R拮抗剂能上调阿霉素肾病大鼠肾脏AQP2 mRNA的表达，同时降低肾脏AQP2蛋白表达。而福辛普利和AVP V2R拮抗剂均能减少肾脏AQP3 mRNA和蛋白表达。结论 AVP V2R拮抗剂能改善阿霉素肾病大鼠的水钠潴留状态，其机制可能与其调节AQP2和AQP3的表达有关。     

丝瓜络对心衰大鼠肾脏水通道蛋白-2mRNA表达的影响

目的 观察丝瓜络(RLF)对慢性充血性心衰大鼠尿量及肾脏水通道蛋白-2(AQP-2)基因表达的影响,初步探讨RLF的利尿作用及其分子生物学机制.方法 选取Wista大鼠,采用异丙肾上腺素法建立慢性充血性心衰大鼠模型,分别给予RLF 5g·kg-1·d-1,10g·kg-1·d-1,灌胃给药,1次/d,连续用药28d.采用代谢笼法,测定各组大鼠24h尿量;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察各组大鼠肾脏髓质AQP-2 mRNA的表达.结果 丝瓜络连续用药可显著增加心衰大鼠尿量并降低心衰大鼠肾脏髓质AQP-2 mRNA的表达(P＜0.05).结论 丝瓜络对慢性充血性心衰大鼠有明显利尿作用,其分子生物学机制可能与降低肾脏髓质AQP-2 mRNA的表达有关.     

丁香酚对酵母菌发热大鼠血浆及脑脊液中精氨酸加压素含量的影响

目的：探讨丁香酚抑制酵母菌所致发热的机制.方法：建立大鼠酵母菌性发热模型,观察丁香酚对大鼠直肠温度的影响,放免法测定大鼠血浆及脑脊液中精氨酸加压素（AVP）含量的改变.结果：皮下注射酵母混悬液后大鼠直肠温度明显升高（△T由-0.23℃升高至1.13℃,P＜0.01）,血浆及脑脊液中AVP含量也明显增加（分别由1.55,2.57 ng/ml升高至2.03,4.29 ng/ml,P＜0.05）,丁香酚能明显抑制酵母菌所致大鼠发热反应（△T由1.19℃降低至0.03℃,P＜0.01）,同时血浆及脑脊液中AVP含量也进一步增加（分别由2.03,4.29ng/ml升高至3.51,6.69 ng/ml,P＜0.05）.结论：丁香酚通过增加体内AVP的含量而发挥其解热作用.     

丁香酚对脂多糖发热大鼠血浆及脑脊液中精氨酸加压素含量的影响

目的:探讨丁香酚抑制脂多糖所致发热的机制.方法:建立大鼠脂多糖性发热模型,观察丁香酚对大鼠直肠温度的影响,放免法测定大鼠血浆及脑脊液中精氨酸加压素(AVP)含量的变化.结果:腹腔注射脂多糖溶液后大鼠直肠温度明显升高(P＜0.01),血浆及脑脊液中AVP的含量也明显升高(P＜0.05);丁香酚能明显抑制脂多糖所致大鼠发热反应(P＜0.01),同时血浆及脑脊液中AVP含量也进一步增加(P＜0.05).结论:丁香酚通过增加体内AVP的含量而发挥解热作用.     

利尿剂对大鼠肾脏水通道蛋白-2基因表达和尿液水通道蛋白2的影响

目的 探讨临床常用利尿剂呋塞米、双氢克尿噻及安体舒通对正常大鼠肾脏水通道蛋白-2(AQP2)基因表达及尿液水通道蛋白-2浓度的影响.方法 40只健康SD大鼠随机分成4组:对照组、呋塞米组、安体舒通组、双氢克尿噻组.观测尿量、血钠及尿渗量,应用RT-PCR半定量检测肾内髓质AQP2和血管加压素-2型受体(V2-R)mRNA水平,Westernblotting检测肾髓质AQP2蛋白含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测尿液AQP2浓度.结果 ①与对照组比较,利尿剂组大鼠尿量均显著增多(P＜0.05),尿液中AQP2浓度明显增加(P＜0.05).但呋塞米组尿渗量低于对照组(P＜0.05),而双氢克尿噻组和安体舒通组尿渗量高于对照组(P＜0.05).②呋塞米组肾脏AQP2 mRNA、V2-RmRNA和AQP2蛋白表达较对照组明显增加(P＜0.05),而双氢克尿噻组较对照组明显降低(P＜0.05),安体舒通组有所减少但无统计学差异.结论 三类利尿剂均可显著增加正常大鼠尿液AQP2蛋白的排出.但对正常大鼠肾脏水通道蛋白2基因表达的影响并不相同,双氢克尿噻可以抑制正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达,呋塞米能增加正常大鼠肾内髓质AQP2mRNA和蛋白的表达.     

参附强心合剂对心衰大鼠水通道蛋白2水平的影响

目的：观察参附强心合剂对心衰大鼠心功能及水通道蛋白2（AQP-2）水平的影响,探讨参附强心合剂抗心衰水潴留的作用机制。方法用腹主动脉缩窄法制作心衰大鼠模型,造模成功60只大鼠随机分为参附强心合剂大、中、小剂量组,氯沙坦组和模型组,每组12只。前三组分别按成人用药剂量20、10、5倍的参附强心合剂14g/（kg·d）、7g/（kg·d）、3.5g/（kg·d）灌胃;氯沙坦组以成人剂量10倍的氯沙坦10mg/（kg·d）灌胃;模型组以蒸馏水灌胃。另假手术组大鼠12只以蒸馏水灌胃作为空白对照组。给药4周后,心超检查测定左室射血分数（LVEF）,ELISA法检测大鼠尿AQP-2浓度,Western blot检测大鼠肾脏AQP-2表达水平。结果参附强心合剂可改善心衰大鼠心功能,其各剂量组大鼠尿AQP-2浓度及肾脏AQP-2表达水平均明显下降（P〈0.01或P〈0.05）;随参附强心合剂剂量的增加,AQP-2浓度逐渐下降,EF值逐渐升高;EF值与AQP-2间有良好的线性负性相关关系（P〈0.01）。结论参附强心合剂可有效改善心衰大鼠心功能,降低AQP-2浓度,且呈一定的剂量依赖性;其作用机制与降低心衰大鼠AQP-2浓度有关。     

温阳消饮法对CHF模型大鼠肾脏水通道蛋白2表达的影响

目的探讨温阳消饮法消除水饮的部分作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为空白组和A组,A组动物采用阿霉素(Adr)腹腔注射制备慢性心力衰竭(CHF)模型。造模结束后将A组大鼠再随机分为:模型组、温阳消饮组、去桂消饮组。1温阳消饮组:按12 g/(kg·d)等效剂量灌胃给予温阳消饮方药液,每日1次,连续4周;2去桂消饮组:按10 g/(kg·d)等效剂量灌胃给予去桂消饮方药液,每日1次,连续4周;3模型组、空白组:同等条件饲养,不实施任何给药方案。结果与空白组相比,模型组血清脑钠素(BNP)含量明显升高,肾脏组织中水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达降低,差异有显著性(P0.05或P0.01);与模型组相比,温阳消饮组、去桂消饮组血清BNP含量明显降低,肾脏中AQP2蛋白表达增加,差异有显著性(P0.05或P0.01)。结论温阳消饮法可显著降低CHF模型大鼠血清BNP含量,上调CHF模型大鼠肾组织AQP2的表达。     

模拟失重条件对大鼠肾小管水通道蛋白2表达影响的研究

目的 探讨模拟失重条件下大鼠肾小管水通道蛋白2(AQP2)表达的变化.方法 采用尾部悬吊法建立失重模型.48只健康雄性Wistar大鼠分为对照组及尾吊3d组、尾吊5d组、尾吊7d组、尾吊2周组、尾吊4周组.分别于观察终点处死各组大鼠,处死前留取血尿标本,分别检测肾功能和尿渗透压.剥离肾脏组织,分离肾皮质和髓质.电镜观察肾小管超微结构.Western blot方法检测AQP2的表达.ELISA检测血清中抗利尿激素(ADH)的水平.结果 ①电镜下尾吊组大鼠肾脏均表现为肾小管不同程度受损,尾吊5d组大鼠肾小管损伤最严重.②Western blot显示尾吊组AQP2的表达较对照组均升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),其中尾吊5d组大鼠肾脏AQP2表达最明显(P＜0.01).③尾吊5d组尿渗透压显著升高,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.01).各组间ADH及肾功能指标差异无统计学意义.④AQP2蛋白表达量与尿渗透压呈正相关性(r =0.468,P=0.003).结论 模拟失重条件能引起大鼠肾小管AQP2表达上升,以尾吊5d组升高最明显.     

应激状态下大鼠血浆及部分脑区中精氨酸加压素含量的变化

本工作应用放射免疫测定法,测定大鼠在应激状态下血浆、垂体与下丘脑中精氨酸加压素(AVP)含量的变化。实验结果表明:1.在电击、烫伤、捆绑、游永和乙酸麻醉应激下,大鼠下丘脑AVP含量有不同程度升高;2.上述应激下垂体前叶AVP含量升高;3.在不同应激状态下,垂体神经中前叶AVP的释放量     

镇眩汤对大鼠梅尼埃模型水通道蛋白1表达的影响

目的探讨中药复方镇眩汤治疗梅尼埃病的机制。方法采用阻塞前庭导水管的传统方法造模,分为镇眩高、中、低剂量组,西药组、模型组和假手术组,观察大鼠用药前后听觉诱发电位听觉阈值的变化及大鼠内耳水通蛋白1表达的影响。结果模型组与假手术组用药前听阈值分别为(54.21±7.91)和(40.03±6.75)dBL,差异有统学意义(P<0.05);用药后镇眩汤高剂量组听阈值为(41.27±6.58)dBL,模型组为(56.31±7.64)dBL,两组比较差异统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,西药组、镇眩汤高剂量组、中剂量组、假手术组水通道蛋白1表达差异均统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,低、中剂量组水通道蛋白1差异有统计学意义(P<0.05),而高剂量组与药组差异无统计学意义(P>0.05)。结论镇眩汤对大鼠内耳水通道蛋白1的调节作用可能是治疗梅尼埃病的制之一。     

雄激素对大鼠前列腺组织中AQP9水通道蛋白表达的影响

[目的]探讨AQP9水通道蛋白在大鼠前列腺组织中的表达以及雄激素对前列腺AQP9表达的影响。[方法]使用20只8周龄去势大鼠模型,应用定量PCR以及免疫组织化学染色方法检测AQP 9 mRNA和蛋白在大鼠前列腺组织中的表达以及雄激素对大鼠前列腺AQP9表达的影响。[结果]正常大鼠前列腺组织中AQP9 mRNA和蛋白均有所表达（AQP9/β-actin 2.259±0.453）,去势可减少大鼠前列腺中AQP9的表达（0.422±0.048）,睾酮注射可恢复AQP9在前列腺组织中的表达（2.098±0.507）。[结论]大鼠前列腺组织中AQP9的表达受雄激素的调控。     

葡萄糖对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的影响

目的 观察葡萄糖对胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响.方法 体外原代培养Wistar大鼠胸膜间皮细胞,鉴定后将细胞随机分为对照组和葡萄糖组,对照组以D-MEM/F-12培养液培养细胞,葡萄糖组以含不同浓度葡萄糖(50、100及200 mmoL/L)培养液培养细胞24 h;100 mmol/L葡萄糖组分为6、12、18及24 h四个时间组,应用Western印迹、RT-PCR方法 检测细胞中AQP-1表达变化.结果 含50、100及200 mmoL/L的葡萄糖培养液作用细胞24 h后,AQP-1蛋白表达量(积分吸光度)分别为54.02±4.61、127.84±9.41和231.62±22.63,分别为对照组(22.45±2.16)的2.41、5.69和10.32倍(P<0.01),AQP-1表达与葡萄糖浓度相关;以含100 mmoL/L葡萄糖培养液培养细胞6、12、18及24 h后,AQP-1蛋白表达量分别为24.68±2.56、58.68±3.67、89.61±6.62和113.41±7.65,分别为对照组(11.81±1.45)的2.09、4.97、7.59和9.60倍,差异均有统计学意义(P<0.01),AQP-1表达与作用时间相关.AQP-1在mRNA水平表达与蛋白水平表达相一致.结论 葡萄糖上调胸膜间皮细胞AQP-1的表达,具有浓度和时间相关性,AQP-1可能参与胸水的转运.     

苓桂术甘汤对脾阳虚泄泻大鼠水通道蛋白3表达的影响

目的 观察苓桂术甘汤对脾阳虚泄泻大鼠水通道蛋白3(AQP3)表达的影响.方法 用苓桂术甘汤水煎液高、中、低剂量治疗脾阳虚泄泻大鼠,并对治疗后大鼠胃体、胃窦、回肠、结肠组织中的AQP3表达进行分析.结果 治疗组与模型组比较,高、中、低剂量组胃体、胃窦、回肠、结肠组织中AQP3表达有不同程度的增强.结论 苓桂术甘汤对增强脾阳虚型大鼠胃肠道AQP3的表达有一定作用.     

丝瓜络对慢性心力衰竭大鼠肾脏水通道蛋白-2免疫荧光表达的影响

目的 观察中药丝瓜络（RLF）对慢性充血性心力衰竭（CHF）大鼠尿量和肾脏水通道蛋白-2（ AQP-2）免疫荧光表达的影响,探讨RLF的利尿作用及机制.方法采用异丙肾上腺素（ISO）法制备慢性充血性心衰大鼠模型,实验分为4组：正常组、CHF组、RLF大剂量组（10g·kg-1·d-1）和RLF小剂量组（5g·kg-1·d-1）.连续灌胃给药28d,末次给药后30min,采用足趾肿胀法,测量大鼠后肢足趾容积;代谢笼法,连续记录24h尿量;取肾脏髓质,免疫荧光法检测AQP-2的表达.结果丝瓜络连续用药可显著增加心衰大鼠尿量,减少后肢足趾容积（P＜0.05）,并可明显抑制心衰大鼠肾髓质AQP-2免疫荧光的过度表达.结论RLF对心衰大鼠有一定利尿作用,其分子生物学机制可能是通过降低肾脏髓质AQP-2蛋白的表达,从而减少水的重吸收.     

心衰鼠肺水通道蛋白表达变化及内皮素受体拮抗剂对其的影响

【目的】观察充血性心力衰竭大鼠肺组织水通道蛋白 (Aquaporins,AQP)表达的变化及选择性内皮素受体A(en dothelinreceptorA ,ETA)拮抗剂FR139317对其的影响。【方法】 4 0只行左冠状动脉结扎致心肌梗死的大鼠随机分为心衰组和心衰治疗组 ,心衰治疗组予以FR139317每天 1mg/kg皮下注射 ,共 6周 ,另 7只接受假手术的大鼠组成空白对照组。测定血液动力学参数 ,放射免疫法 (RIA)测血浆内皮素 1浓度 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法定量检测肺组织AQP4和AQP5mRNA的表达。【结果】空白对照组、心衰组和心衰治疗组肺组织AQP4mRNA的相对水平为 (0 5 6± 0 12 )、(0 2 0± 0 0 8)及(0 36± 0 14 ) ,P <0 0 0 1;AQP5mRNA相对水平为 (0 6 4± 0 17) ,(0 0 9± 0 0 3)及 (0 38± 0 12 ) ,P <0 0 0 1。AQP4、AQP5mRNA的表达与肺质量与体质量比值呈显著负相关 ,与左心室舒张末压力也呈显著负相关。【结论】心力衰竭大鼠肺组织AQP的表达下降 ,内皮素受体拮抗剂FR139317对AQP表达起一定的调节作用     

水通道蛋白在大鼠前列腺的表达及意义

目的 探讨水通道蛋白（Aquaporins,AQPs）在大鼠前列腺的表达及意义.方法 将雄性健康8周龄SD大鼠30只随机分为A组（对照组）、B组（去势组）和C组（去势＋睾酮替代组）.每组10只分别测定血睾酮水平,脉冲式电流刺激盆神经收集前列腺液,测量前列腺液重量,计算前列腺湿重与体重比,免疫组化检测AQP1、AQP3和AQP4的表达及细胞定位,免疫印迹检测AQP1、AQP3和AQP4蛋白的表达.结果 B组大鼠血睾酮水平[（13.07±1.83）nmol/L]较A组[（92.37±16.23） nmol/L]显著减低（P＜0.05）,B组前列腺液分泌[（1.14±0.14）mg]较A组[（13.57±2.72）mg]显著减少（P＜0.05）,B组前列腺湿重与体重比（0.27±0.12）较A组（1.91±0.07）显著降低（P＜o.05）.免疫组化结果显示,AQP1主要在大鼠前列腺间质的小动脉、小静脉壁表达,AQP3主要在前列腺腺泡上皮细胞膜表达,AQP4则更多的在腺泡上皮靠近基底膜处表达.免疫印迹结果显示,B组AQP1和AQP3的表达较A组均显著降低（P＜0.05）,各组中AQP4的表达无明显变化.结论 AQP1可能与前列腺的生长发育过程有关,AQP3和AQP4可能与前列腺分泌功能有关,雄激素降低后前列腺液分泌减少与AQP3的表达降低有关.