60Coγ射线诱导人外周血淋巴细胞核质桥的剂量-效应关系研究

目的 确定核质桥判定标准,建立 ⁶⁰Co γ 射线诱导正常人外周血淋巴细胞中核质桥（NPB）的剂量-效应曲线。 方法 用 ⁶⁰Co γ 射线照射3名健康男性离体外周血,照射剂量分别为0、1、2、3、4、5和6 Gy,剂量率为1 Gy/min,采用胞质分裂阻滞微核（CBMN）法进行细胞培养、收获、制片、染色。在光学显微镜下分析双核细胞中NPB及微核（MN）。 结果 在0~6 Gy ⁶⁰Co γ 射线照射后,人外周血双核淋巴细胞中的NPB符合泊松分布,且NPB频率随吸收剂量增加而增加（H=19.51,P<0.01）,拟合回归方程为线性平方模式y=（1.39×10^-3）x² + （4.94×10^-3）x （R²=0.981,P < 0.01）。 结论 成功建立 0~6 Gy ⁶⁰Co γ 射线诱导正常人外周血淋巴细胞中NPB的剂量-效应曲线。     

60Coγ射线重过滤低剂量率照射剂量学研究

Luckey1980年发现低剂量辐射能诱导机体适应性反应，近年来刘树铮教授等亦通过流行病学和实验室研究，证实了低剂量辐射能提高机体免疫。     

低剂量γ射线诱导小鼠细胞不同辐射敏感株对基因突变适应性反应

作者用低剂量γ射线预照射同源但辐射敏感性不同的小鼠乳癌细胞ＳＫ－１和ＳＸ－９，观察其对随后较大剂量照射所引起ｈｐｒｔ基因突变的影响．结果，具有辐射抗性的ＳＲ－１细胞经５ｍＧｙ或１ｃＧｙ低剂量顶照射后，能显著降低随后３Ｇｙ照射诱发的ｈｐｒｔ基因突变频率．而ＤＮＡ双链断裂修复能力缺陷的电离辐射敏感细胞ＳＸ－９，经相同处理后，并不减轻随后的较大剂量照射所诱发的基因突变率．表明ＤＮＡ双链断裂修复缺陷的细胞，对低剂量辐射诱导的适应性反应能力差．     

60Coγ射线诱导的新生大鼠大脑皮质神经细胞凋亡

目的 采用电离辐射诱导的新生大鼠大脑皮质神经细胞损伤模型,探讨电离辐射诱导发育脑神经细胞死亡的特征和机制。方法 新生大鼠接受单次2.0 Gyγ射线照射后,采用DNA凝胶电泳、TUNEL和HE染色鉴定大脑皮质神经细胞死亡的类型和时程变化特点;应用免疫组织化学方法研究p53和iNOS在细胞死亡过程中的可能作用。结果 DNA凝胶电泳、TUNEL和HE染色表明,2.0 Gyγ射线照射可诱导新生大鼠大脑皮质神经细胞凋亡。大脑皮质各区域凋亡指数于照射后4 h开始增高,至12 h达到峰值;照射后相同时间点各皮质区域凋亡指数比较,新皮质最高,海马次之,旧皮质最低;P53和iNOS免疫阳性细胞计数定量结果显示,照射后相同时间点各皮质区域P53和iNOS免疫阳性细胞数差异无统计学意义。结论 2.0 Gyγ射线照射诱导了新生大鼠大脑皮质神经细胞凋亡;不同皮质区域的神经细胞对电离照射引起的损伤反应是相似的,但不同皮质区域的神经细胞凋亡存在差异。     

60Co γ射线诱导人淋巴细胞线粒体基因表达效应的研究

目的 探讨电离辐射诱导正常人B淋巴细胞线粒体辐射敏感基因mRNA水平的剂量-效应关系。 方法 用0、0.5、1、3、5、8、10和15 Gy ⁶⁰Co γ射线分别照射指数增长期的人淋巴细胞永生化细胞株,24 h后用反转录PCR和实时荧光定量PCR方法检测7个相对辐射敏感基因,包括ND3、Cyt b、COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ、ATPase6和ATPase8基因mRNA的表达水平,观察其剂量-效应关系。 结果 ⁶⁰Co γ射线照射后24 h,线粒体7个辐射敏感基因表达总体上调。线粒体呼吸链复合体Ⅳ亚基Ⅰ(COXⅠ)基因表达在受到8 Gy照射后增强最明显,为对照组的13倍左右。除COXⅠ和COXⅡ外,其余5个基因在受照后表现出一定的剂量-效应关系。其中,ND3、ATPase6和ATPase8这3个基因在3~15 Gy的范围内线性关系良好,而COXⅢ基因在3~10 Gy的范围内也有十分良好的线性关系。结论 ⁶⁰Co γ射线照射后24 h,线粒体基因表达水平总体上调,其中ND3、ATPase6、ATPase8和COXⅢ这4个基因在一定剂量范围内线性关系良好,可以作为联合辐射损伤生物标志物进一步研究。     

放射工作人员外周血淋巴细胞核质桥水平及其影响因素分析

目的初步探讨放射工作人员的性别、年龄、工龄、工种和年有效剂量等因素对其外周血淋巴细胞核质桥(NPB)的影响。方法收集100例河南省放射工作人员外周血,利用细胞分裂阻滞实验(CBMN法)制备人外周血淋巴细胞NPB标本,分析NPB率和NPB细胞率及各类因素对NPB的影响。结果放射工作人员NPB率高于正常健康人群(Z=-8.123,P<0.01)。性别对NPB的影响差异无统计学意义(P>0.05),年龄、工龄、工种和年有效剂量均对NPB有影响(χ^2=7.202~45.571,P<0.05)。结论NPB能反映出长期小剂量慢性照射对职业受照人群健康的影响。     

60Coγ射线诱导人淋巴细胞线粒体COX基因表达改变的研究

目的 探讨电离辐射诱导人淋巴细胞线粒体COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ基因表达的改变。方法 用1、3、5、8和10 Gy ⁶⁰Co γ射线分别照射指数增长期的人淋巴细胞永生化细胞株,8 h后用逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ基因在mRNA水平上的表达;流式细胞术检测其在蛋白水平上的表达;比色法检测COX活性,来分析辐射诱导线粒体COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ基因表达改变的量效关系。同时,以5 Gy γ射线照射人淋巴细胞,分别于照后不同时间(0.5、4、8、12、24、48和72 h),同样通过上述指标来分析3种线粒体基因的表达变化,观察其时效关系。 结果 在mRNA水平上,线粒体COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ基因表达总体上调。COXⅠ和COXⅢ基因在0～3 Gy剂量范围内具有量效关系,而COXⅡ基因在0～8 Gy剂量范围内具有量效关系(F_COXⅠ=116.62,F_COXⅡ=17.89,F_COXⅢ=8.20,P<0.05);5 Gy 照后4 h左右COXⅡ和COXⅢ基因表达上调最显著,而COXⅠ基因持续低表达(F _COXⅠ=31.99,F_COXⅡ=19.47,F_COXⅢ=20.64,P<0.05)。在蛋白水平上,不同剂量照射后,COXⅠ和COXⅡ蛋白表达先下调后上调,COXⅢ蛋白表达下调(F_COXⅠ=16.96,F_COXⅡ=32.5,F_COXⅢ=6.51,P<0.05);5 Gy照后4 h,COXⅠ蛋白表达明显增强,达到8 h后出现COXⅡ蛋白表达显著上调,而COXⅢ蛋白表达普遍下调(F_COXⅠ=14.68,F_COXⅡ=17.18,F_COXⅢ=2.52,P<0.05)。此外, 受照后COX活性普遍降低。结论 电离辐射可以诱导人淋巴细胞线粒体COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ基因表达的改变,基因表达总体增强的同时,COX活性普遍降低。     

不同剂量60Coγ射线照射对小鼠脾细胞DNA含量的影响

不同剂量~（６０）Ｃｏγ射线照射对小鼠脾细胞ＤＮＡ含量的影响李子蓉，韩苇，任冬青一般认为，电离辐射对机体细胞的ＤＮＡ代谢可产生重要的影响，如哈成代谢抑制，分解代谢增强等．脾脏既是机体重要的免疫器官，亦是辐射敏感器官，故由电离辐射引起的脾细胞ＤＮＡ的变?..     

60Co γ射线对盐诱导激酶2的诱导表达作用

目的 探讨电离辐射对盐诱导激酶2（SIK2）蛋白和mRNA的诱导表达作用及细胞周期相关性。方法 HepG2细胞用⁶⁰Co γ射线照射,蛋白质印迹法和实时定量PCR法分别检测细胞的SIK2蛋白和mRNA的表达,胸腺嘧啶双阻滞法同步化细胞,流式细胞术测定细胞周期的变化。结果 HepG2细胞2 Gy照射后4、6、10 h,SIK2蛋白表达显著增加 （t=3.00、3.98、4.17,P<0.05）;10 Gy大剂量照射后,SIK2蛋白表达增加的趋势与2 Gy一致,但增加的幅度较前者低。2和10 Gy照射后SIK2基因 mRNA均在10 h出现了增加（t=4.54、2.74,P<0.05）。照后10 h出现了细胞G₂/M阻滞高峰。利用同步化细胞分析表明,细胞周期不同时相中SIK2 mRNA的表达无明显差别。结论 2和10 Gy照射均能诱导SIK2蛋白表达增加,2 Gy的作用更加明显。细胞照射后10 h,SIK2 mRNA的表达水平增加,但与辐射诱发细胞G₂/M期阻滞引起不同时相细胞的分布变化无关。     

60Coγ射线照射血T淋巴细胞分泌细胞因子功能的研究

为了防止输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)，国内外学者普遍认为应使用^60Coγ射线辐射血液制品。但经不同剂量^60Coγ射线辐射是否会影响离体全血T淋巴细胞分泌IL-2、IL-6、INF-γ与TNF-α功能国内外报道较少。为此，笔者应用流式细胞术对此进行了研究。     

松胞素B对辐射诱导淋巴细胞核质桥水平影响的研究

目的 探索胞质分裂阻滞分析中,松胞素B终浓度和加入时间对辐射诱导淋巴细胞核质桥水平的影响。方法 本研究按照不同松胞素B终浓度分为2、4、6、8、10 μg/ml 5个终浓度组,此外,按照不同松胞素B加入时间分为0、28、40、44 h组4个加入时间组。用2 Gy（吸收剂量率为1 Gy/min）⁶⁰Co γ射线照射正常人离体外周血（设0 Gy对照组）,采用胞质分裂阻滞分析法,进行细胞培养、收获、制片、染色。在光学显微镜下分析单核细胞、双核细胞、多核细胞的比例,以及双核细胞中核质桥率及微核率。结果 各终浓度组和加入时间组（0 h组除外）的核分裂指数、双核细胞比例均随松胞素B终浓度的升高而升高,随松胞素B加入时间的推迟而降低。2 Gy射线照射后,各终浓度组和加入时间组（0 h组除外）核质桥率差异无统计学意义（P>0.05）;5个终浓度组间微核率具有随松胞素B终浓度的增加而下降的趋势,4个加入时间组间微核率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 不同松胞素B终浓度和加入时间可使辐射诱导的核质桥率在一定范围内变化,但差异无统计学意义。适当增加松胞素B终浓度、提前加入时间可使双核细胞比例升高,有助于提高分析效率。     

三维培养条件下电离辐射诱导适应性反应研究

目的研究在三维细胞培养条件下,电离辐射诱导人成纤维细胞发生适应性反应。方法采用人成纤维细胞进行三维条件培养,以60Co进行照射（诱导剂量D1为0.1Gy,攻击剂量D2为2Gy）,以Western blot检测生长相关基因p53和p21的表达,免疫荧光染色及共聚焦法观察形态学变化。结果三维培养条件下,细胞生长与二维（单层）培养形态学表现明显不同,细胞形态伸展,呈现伪足和多微丝状,细胞正常∶异常∶中间态比例为87.05%∶6.1%∶6.85%。经过2Gy（D2）照射后细胞明显收缩,伪足和微丝消失,与对照组比较,细胞变为正常∶异常∶中间态比例30.4%∶67.45%∶2.15%;预先给以0.1Gy即D1＋D2照射后则出现异常细胞数量减少,正常细胞有所增加,同时不典型的中间态细胞比例增加,细胞比例为正常∶异常∶中间态35.5%∶34.7%∶30.4%。结论人成纤维细胞在三维培养条件下,预先低剂量60Co照射可以降低随后高剂量照射引起的形态学改变,诱导产生适应性反应。     

X射线照射对人外周血淋巴细胞mIL-2R表达的影响

目的 观察X射线照射对人外周血淋巴细胞mIL-2R表达的影响。方法 采用单克隆抗体间接免疫荧光标记FCM检测。结果 4Gy和6Gy单次照射组mIL-2R表达明显低于对照组(分别P<0.01).75mGy及100mGy单次照射组mIL2R表达明显高于对照组(分别P<0.01).预先给予75mGy照射, 继之又给予4Gy组mIL-2R表达明显高于单纯4Gy照射组。结论 ①4Gy以上X射线照射使mIL-2R的表达明显降低。②75mGy及100mGy小剂量照射后人外周血淋巴细胞mIL-2R表达显着增高。③75mGy预照射可诱导mIL-2R表达对其后4Gy照射的适应性反应。     

The influence of redox status on inter-individual variability in the response of human peripheral blood lymphocytes to ionizing radiation

Purpose: Ionizing radiation (IR) can act on atomic structures, producing damage to biomolecules. Earlier investigations evaluating individual radiosensitivity in vitro were focused on cytogenetic biomarkers (chromosomal aberrations – CA and micronuclei – MN). Since IR can also cause oxidative damage by producing reactive oxygen species, the main goal of this investigation was to establish the influence of redox status on CA and MN frequency in human peripheral blood lymphocytes.

Materials and methods: Blood samples from 56 healthy donors were irradiated at doses of 0, 0.75, 1.5 and 3?Gy and then analyzed cytogenetically and biochemically.

Results: The results showed inter-individual variability in all analyzed parameters, as well as dose-dependent increases in almost all of them. Correlation analysis indicated no association between CA, MN and oxidative stress parameters. However, findings for overall response (HRR) parameters showed that donors with lower values for parameters of antioxidant status had increased levels of cytogenetic damage and higher responses to irradiation and vice versa.

Conclusion: Besides well-established cytogenetic biomarkers of radiation exposure, our results indicated promising future use for biochemical oxidative status parameters in routine radiation protection practice, since together they can provide a complete radiation response profile in cases of continuous low-dose exposure, as well as in a radiation emergency.     

阳江天然高本底辐射诱导人体淋巴细胞适应性反应

目的本研究是为了探讨阳江天然高本底辐射是否能引起人体淋巴细胞的适应性反应。方法从阳江高本底辐射地区（ＨＢＲＡ）采集居民外周血,离体照射１５Ｇｙ６０Ｃｏγ射线,然后分析染色体畸变率。结果ＨＢＲＡ居民的染色体畸变率显著地低于在相同条件下离体照射的对照地区居民的畸变率。结论在人体内受到天然高本底辐射照射的淋巴细胞同样能产生适应性反应。     

X射线照射对人外周血淋巴细胞mIL2R表达的影响

目的观察Ｘ射线照射对人外周血淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ表达的影响。方法采用单克隆抗体间接免疫荧光标记ＦＣＭ检测。结果４Ｇｙ和６Ｇｙ单次照射组ｍＩＬ２Ｒ表达明显低于对照组（分别Ｐ＜０．０１）。７５ｍＧｙ及１００ｍＧｙ单次照射组ｍＩＬ２Ｒ表达明显高于对照组（分别Ｐ＜０．０１）。预先给予７５ｍＧｙ照射,继之又给予４Ｇｙ组ｍＩＬ２Ｒ表达明显高于单纯４Ｇｙ照射组。结论①４Ｇｙ以上Ｘ射线照射使ｍＩＬ２Ｒ的表达明显降低。②７５ｍＧｙ及１００ｍＧｙ小剂量照射后人外周血淋巴细胞ｍＩＬ２Ｒ表达显著增高。③７５ｍＧｙ预照射可诱导ｍＩＬ２Ｒ表达对其后４Ｇｙ照射的适应性反应。     

低水平环境因子与适应性反应

简要叙述了低水平环境因子诱导适应性反应的研究现状。强调了极低剂量率电离辐射诱导适应性反应的可能及其剂量效应和时间效应关系的特点。分析了低水平电离辐射诱导适应性反应机理研究的最新进展。讨论了低水平环境因子诱导适应性反应科学资料的实际应用前景。提出了今后进一步研究的建议