siRNA靶向抑制GHR对结直肠恶性肿瘤SW480细胞增殖影响的研究

目的分析siRNA靶向抑制GHR对结直肠恶性肿瘤SW480细胞增殖的影响。方法将结直肠恶性肿瘤SW480细胞进行培养,将代数生长期的细胞随机分为2组,观察组(siRNA靶向抑制组)10株,对照组(生理盐水组)10株,观察肿瘤SW480细胞增殖受抑制情况。结果观察组的四甲基偶氮唑蓝吸光度值均显著低于同一时间测得的对照组吸光度值;人生长素受体蛋白表达平均值显著低于对照组;人生长素受体mRNA表达ΔCT值显著高于对照组,均有显著性差异(P<0.05)。结论 siRNA对GHR的靶向抑制作用能够显著抑制结直肠恶性肿瘤SW480细胞的生长及增殖。     

ALDH1及Survivin在结直肠癌及癌前病变的表达

目的:研究结直肠癌及癌前病变组织中乙醛脱氢酶1(ALDH1)与Survivin的表达情况。方法:应用免疫组化法检测21例结直肠癌、19例腺瘤伴高级别上皮内瘤变、21例腺瘤伴低级别上皮内瘤变及10例对照组中ALDH1、Survivin的表达情况。结果:ALDH1表达在腺癌组与低级别瘤变组、正常组,高级别瘤变组与低级别瘤变组、正常组,低级别瘤变组与正常组之间均有显著差异(P0.01),腺癌组与高级别瘤变组之间无明显差异。Survivin表达在各组间均有显著差异(P0.01)。两者表达与年龄、性别均无明显关系,两者评分呈高度密切正相关(r=0.84,P0.01)。结论:ALDH1和Survivin可能是结直肠癌及癌前病变发生发展的重要标记物,可作为癌变早期监测指标。     

南蛇藤总萜诱导自噬抑制结直肠癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨南蛇藤总萜(COE)是否通过诱导自噬来抑制结直肠癌细胞增殖。方法:用不同浓度的COE处理体外培养的大肠癌HT-29细胞,噻唑蓝(MTT)法检查细胞存活率,透射电镜(TEM)观察细胞形态,免疫印迹法(Western blot)检测COE对细胞自噬相关蛋白表达的影响,并采用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合COE干预HT-29细胞,用吖啶橙染色细胞、MTT法检测3-MA对COE抑制HT-29细胞增殖的影响。结果:COE抑制HT-29细胞的增殖,作用24h的IC50为156μg/m L;随着COE浓度的升高,TEM示细胞中自噬体明显增多,和COE治疗组比较,COE联合3-MA组的细胞生存率升高,而自噬泡(AVO)的数量显著下降,微管相关蛋白-Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达也降低。结论:COE可能通过上调Bcl-2同源结构域蛋白抗体-1(Beclin-1)和LC3-Ⅱ的表达来增加HT-29细胞的自噬活性,从而抑制HT-29细胞的增殖作用。     

七叶皂苷对结直肠癌细胞增殖、侵袭的作用及机制研究

目的：探究七叶皂苷对氧化三甲胺（TMAO）诱导的结直肠癌细胞株增殖及迁移侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法：取结直肠癌HCT116细胞系,分为对照组、TMAO组、观察组3组,并分别进行处理。对照组不做处理,TMAO组仅使用100 μmol/L TMAO诱导,观察组使用同剂量TMAO诱导后再进行10 μmol/L七叶皂苷治疗处理。随后使用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、划痕愈合实验及细胞迁移侵袭试验技术(Transwell)实验分别检测细胞的增殖、迁移及侵袭行为,并使用蛋白质印迹（Western Blotting）实验检测SRC、pBTK、pTRIO蛋白表达情况。结果：TMAO诱导可增强HCT116增殖及迁移侵袭能力,并显著上调SRC-BTK-TRIO通路相关基因的mRNA水平,而七叶皂苷干预能抑制癌细胞增殖（P<0.01）并降低其迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.01）能力,同时下调SRC（P<0.05）、BTK（P<0.01）、TRIO（P<0.05）蛋白的表达。结论:七叶皂苷可通过下调SRC-BTK-TRIO通路显著抑制HCT116细胞增殖及迁移侵袭能力。     

仙连解毒方对人结直肠癌细胞增殖及糖酵解的调控作用及机制

目的 观察仙连解毒方对人结直肠癌细胞HCT-116增殖及糖酵解的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）比色法测定仙连解毒方处理结直肠癌细胞HCT-116后的存活率,细胞克隆形成实验和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）细胞增殖实验检测细胞增殖能力,葡萄糖试剂盒检测仙连解毒方处理结直肠癌HCT-116细胞48 h葡萄糖摄取量的变化,乳酸试剂盒检测仙连解毒方处理结直肠癌HCT-116细胞48 h乳酸生成量的变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）、乳酸脱氢酶（LDHA）等糖酵解相关蛋白的表达,探讨仙连解毒方对结直肠癌糖酵解过程的影响。结果 仙连解毒方对结直肠癌HCT-116细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）为6.82 g·L^-1;克隆形成实验和EDU细胞增殖实验表明,与空白组比较,仙连解毒方（1.625、3.25、6.50 g·L^-1）均能明显抑制结直肠癌HCT-116细胞增殖（P<0.05,P<0.01）;葡萄糖检测和乳酸检测表明,与空白组比较,仙连解毒方（1.625、3.25、6.50 g·L^-1）能有效抑制葡萄糖摄取和乳酸生成（P<0.05,P<0.01）,且有剂量依赖性;Western blot表明,与空白组比较,仙连解毒方（1.625、3.25、6.50 g·L^-1）均能下调p-mTOR/mTOR、LDHA、GLUT1蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）,且随剂量的增加而降低。结论 仙连解毒方对结直肠癌细胞的增殖和糖酵解中的瓦博格效应（Warburg）具有明显的抑制作用,其机制可能与调控mTOR信号通路,下调LDHA、GLUT1等糖酵解过程中的关键蛋白和酶类的表达水平有关。     

泽泻醇-B-乙酸酯对结直肠癌HCT116细胞增殖和周期的影响

目的:研究泽泻提取物泽泻醇-B-乙酸酯对人结直肠癌细胞株HCT116生长的影响。方法:采用不同浓度的泽泻醇-B-乙酸酯分别作用于大肠癌HCT116细胞24、48、72小时后,应用MTT(四氮甲基唑蓝)测定细胞生长抑制效应,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化。结果:泽泻醇-B-乙酸酯能显著抑制HCT116细胞增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度依赖性。FCM检测结果显示随着作用时间的延长或者药物剂量的增加,G_0/G_1期的细胞显著增加,使细胞发生G_1期阻滞,进入S期、M期的比例降低,细胞增殖受抑。结论:泽泻醇-B-乙酸酯能以时间和浓度依赖的方式抑制HCT116细胞生长;泽泻醇-B-乙酸酯将细胞阻止在G_0/G_1期,进入S期、M期的比例降低,从而通过影响细胞周期进程来抑制细胞增殖。     

异甘草素对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的研究异甘草素对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 10、20、40、60、80、100、120μmol/L异甘草素处理HCT116、HT29细胞后,MTT法检测细胞毒性,流式细胞术检测HCT116细胞凋亡,Western blot法检测HCT116细胞中cleaved caspase-3、pJNK、JNK、pERK1/2、ERK1/2、pP38、P38蛋白表达,Transwell实验检测HCT116细胞侵袭和迁移。结果异甘草素对HCT116、HT29细胞的IC_(50)值分别为22.45、23.69μmol/L。与对照组比较,异甘草素组呈浓度依赖性地显著诱导HCT116细胞凋亡(P0.05),显著上调cleaved caspase-3蛋白表达(P0.05),显著抑制HCT116细胞侵袭和迁移(P0.05),显著下调pJNK/JNK、pERK1/2/ERK1/2、pP38/P38(P0.05)。结论异甘草素能抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。     

结直肠癌患者化疗所致骨髓抑制与中医体质的相关研究

目的：本研究通过对结直肠癌并行卡培他滨+奥沙利铂（XELOX）化疗方案的患者进行中医体质辨识,探讨中医体质与XELOX化疗方案所引起的骨髓抑制的内在相关性,明确其对骨髓抑制发生的预测意义。方法：选取2020年10月―2022年8月于临沂市中医医院肛肠科就诊并诊断为结直肠癌的患者,共80例。在化疗前,通过中医体质辨识问卷对所有入组患者进行体质辨识,后予以XELOX化疗方案进行化疗,化疗4个周期后统计骨髓抑制的发生情况,并运用Logistic回归进行统计分析,探讨结直肠癌患者不同中医体质类型与骨髓抑制发生情况的内在联系。结果：在所有中医体质类型中,气郁质患者的骨髓抑制发生率最高,湿热质患者次之。其中,气郁质患者共16例,发生骨髓抑制者11例,占比68.75%(11/16);湿热质患者共25例,发生骨髓抑制者16例,占比64.00%(16/25)。气郁质患者的骨髓抑制程度主要为2度,共6例,占比37.5%(6/16);湿热质患者的骨髓抑制程度主要为1度,共9例,占比36.0%(9/25)。运用Logistic回归统计分析发现,气郁质[P=0.033,比值比（Odds Ratiio,OR）=1...     

腹腔镜结直肠癌根治术治疗结直肠癌的效果

〔摘 要〕 目的：研究结直肠癌临床治疗上运用腹腔镜结直肠癌根治术的治疗效果。方法：选取 2018 年 1 月至 2020 年 12 月在遂溪县人民医院接受治疗的 50 例结直肠癌患者,用随机数字表法将其分为对照组和观察组,各 25 例。对照组予以 传统开腹手术治疗,观察组采用腹腔镜结直肠癌根治术治疗,比较两种手术方案对患者相关指标、临床疗效和预后等因素 的影响。结果：观察组患者手术时间长于对照组,术中出血量少于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。观察组患 者肛门排气时间、肠鸣音恢复时间、首次进食时间、住院时间均短于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。观察组 的并发症发生率低于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。治疗后,两组患者 C 反应蛋白水平高于治疗前,白细胞 介素 –6 和肿瘤坏死因子水平低于治疗前,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;观察组患者治疗后各项炎症因子水平均优于 对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：采用腹腔镜结直肠癌根治术治疗结直肠癌的临床优势显著,可优化手 术指标,缩短术后康复时间,同时也有利于减轻炎症因子水平,安全性高。     

消岩汤含药血清介导下Survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

[目的]分析消岩汤含药血清介导下Survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响,探究其抑瘤机制。[方法]在Invitrogen公司的网上设计系统中设计靶向Survivin基因的siRNA序列,并将其转染A549细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测消岩汤以及转染组对A549细胞生长抑制的情况,免疫组化法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。[结果]MTT法显示消岩汤具有抑制A549细胞生长的作用,其作用具有一定的时间依赖性,转染中药组的抑制率显著高于转染对照组及非转染中药组。经免疫组化法检测,转染对照组对Survivin蛋白表达的抑制率明显高于非转染中药组,但显著低于转染中药组。流式细胞术检测结果显示消岩汤及重组质粒以诱导细胞晚期凋亡为主,转染中药组A549细胞凋亡率显著高于其他各组。[结论]消岩汤可诱导A549细胞的凋亡,联合应用转染靶向Survivin基因的重组质粒可增强其体外诱导A549细胞凋亡的作用。     

基于肿瘤干细胞的西黄丸抗结肠癌作用研究

[目的]探讨西黄丸对结肠癌肿瘤干细胞增殖、迁移及浸润能力的影响并研究其对肿瘤干细胞多能干基因表达的影响。[方法]小鼠CT26结肠癌细胞荷瘤Balb/C小鼠,原代培养肿瘤干细胞,噻唑蓝(MTT)细胞毒性实验分别检测西黄丸对肿瘤干细胞及肿瘤细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测西黄丸对肿瘤干细胞浸润及迁移能力的影响;定量逆转录-聚合酶链反应(q RT-PCR)检测西黄丸对肿瘤干细胞多能干基因表达的影响。[结果]西黄丸能有效抑制肿瘤干细胞及肿瘤细胞的增殖,其抑制作用呈剂量依赖性;与肿瘤细胞相比,西黄丸对肿瘤干细胞的直接毒作用更强,其IC_(50)浓度更低;西黄丸还能抑制肿瘤干细胞浸润及迁移,显著下调多能干基因Sox2、Oct4及Nanog的表达。[结论]西黄丸能有效抑制结肠癌肿瘤干细胞的增殖、迁移及浸润,并显著下调多能性基因的表达。西黄丸对肿瘤干细胞的抑制作用可能是其抗结肠癌的基础。     

厚朴酚对人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响

目的：研究厚朴酚对H446细胞增殖和凋亡的影响。方法：MTT法测定厚朴酚对H446细胞的细胞毒作用。结果：厚朴酚可明显抑制H446细胞增殖,作用呈明显的时间和剂量依赖性。结论：厚朴酚可抑制H446细胞增殖。     

乌索酸体外抑制人胃癌BGC-823细胞增殖的作用

目的探讨乌索酸(UA)对体外培养的人胃癌细胞系BGC-823增殖的抑制作用。方法用MTT法在不同浓度、不同给药时间、不同溶剂溶解的条件下,以5-Fu作对照,观察UA对人胃癌细胞系BGC-823细胞的体外增殖抑制效果。结果UA在低浓度条件下(5~20mg/L)对BGC-823细胞抑制率呈浓度依赖性。25~2000 mg/L时随着浓度的增加抑制率无明显差异;UA对BGC-823细胞作用呈时间依赖性;不同溶剂溶解UA,抑制率无差异(P>0.05);UA对BGC-823细胞抑制率明显高于5-Fu(P<0.01)。结论UA对体外培养的人胃癌细胞系BGC-823有明显的增殖抑制作用,用药量小时呈现浓度依赖性及时间依赖性;其增殖抑制作用强于5-Fu。溶剂不同对UA增殖抑制作用无影响。     

伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞的增殖及细胞周期的影响

目的研究伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞的增殖及细胞周期的影响。方法通过MTT法比较在31.25μmol/L、62.50μmol/L、125μmol/L、250μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L共6个浓度的伪士的宁培养24小时、48小时、72小时后对HT-29细胞增殖的抑制作用;通过显微镜细胞观察法检测细胞生长状态;利用流式细胞术检测250μmol/L伪士的宁对HT-29细胞周期的影响。结果伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞有一定的抑制作用,其抑制作用与浓度和作用时间呈正相关,1000μmol/L培养72小时作用最显著,抑制率为97.47%;随着伪士的宁浓度增加,作用时间增大,HT-29细胞密度逐渐变小,局部可见固缩细胞或死亡细胞。伪士的宁(250μmol/L)作用于HT-29细胞后,与空白组相比,G1期细胞数量明显增加,S期细胞数量不变,G2期细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05),表明伪士的宁可诱使HT-29细胞在G1期发生阻滞,诱导细胞凋亡。结论伪士的宁对人结肠癌HT-29细胞增殖具有显著抑制作用,且其作用呈现时间依赖和剂量依赖关系,其抑制作用机制可能与阻滞细胞周期有关。     

绿原酸抑制结肠癌HCT116细胞的机制研究

目的探讨绿原酸对结肠癌HCT116细胞抑制作用的机制。方法以绿原酸处理HCT116细胞,未处理组为对照组,通过基因表达谱芯片筛选出处理前后的差异表达基因,应用Real-time PCR技术对胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、雄性性别决定基因相关高迁移率族盒基因(SOX4)、N-myc下游调节基因1(NDRG1)4个基因进行验证,Western blotting法检测上调基因中NDRG1的蛋白表达水平。结果基因表达谱芯片检测表明,经绿原酸处理后的结肠癌细胞中表达上调的基因为161个(差异倍数大于2),表达下调的基因为64个(差异倍数小于0.5)。这些基因主要涉及细胞信号转导、生物过程、细胞组分等功能。Real-time PCR检测证实IGFBP3、NDRG1基因经绿原酸处理后表达明显上调(P0.05)。Western blotting检测表明,经绿原酸处理后NDRG1基因的蛋白表达水平上调。结论基因表达谱芯片结合Real-time PCR技术筛选出绿原酸处理后的差异表达基因,为揭示绿原酸抑制结肠癌细胞的作用机制提供依据。     

中老年结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的研究

目的探讨结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的临床病理意义。方法采用切口末端标记法（IUNEL），电镜观察显示凋亡细胞，免疫组化En Vosion法显示PCNA及p53蛋白表达，利用图像系统分析癌细胞DNA倍体。结果高分化型癌凋亡指数（Apoptosis Index，AI）、AI／PI（PCNA Index，PI）均高于低分化型癌（P〈0．05），而PI值、DNA〉王倍华值则高分化型低于低分化型癌（P〈0.05）；癌侵及黏膜下层、肌层、浆膜层时AI、AI／PI值逐层递减，而PI值、DNA〉王倍华值则逐层递增（P〈0．05）；肿瘤直径〈3cm、3-5cm、〉5cm3组AI、AI／PI值随肿瘤增大而递减（P〈0.01），其PI值、DNA〉王倍华值随肿瘤增大而递增（P〈0．05）,淋巴结阳性组PI值较阴性组高（P〈0．05），p53阴性组较p53阳性组AI值高（P〈0．05）。结论高分化、体积小的早期结直肠癌AI值较低，PI值增高；AI与PI呈负相关；PI值与淋巴结转移有关。显示癌瘤进展以细胞增殖为主而凋亡受抑。p53基因突变可显著降低癌细胞凋亡。     

中老年结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的研究

目的探讨结直肠癌细胞凋亡与增殖活性的临床病理意义。方法采用切口末端标记法(I UNEL),电镜观察显示凋亡细胞,免疫组化En Vosion法显示PCNA及p53蛋白表达,利用图像系统分析癌细胞DNA倍体。结果高分化型癌凋亡指数(Apoptosis Index,AI)、AI/PI(PCNAIndex,PI)均高于低分化型癌(P<0.05),而PI值、DNA>王倍华值则高分化型低于低分化型癌(P<0.05);癌侵及黏膜下层、肌层、浆膜层时AI、AI/PI值逐层递减,而PI值、DNA>王倍华值则逐层递增(P<0.05);肿瘤直径<3 cm、3~5 cm、>5 cm3组AI、AI/PI值随肿瘤增大而递减(P<0.01),其PI值、DNA>王倍华值随肿瘤增大而递增(P<0.05),淋巴结阳性组PI值较阴性组高(P<0.05),p53阴性组较p53阳性组AI值高(P<0.05)。结论高分化、体积小的早期结直肠癌AI值较低,PI值增高;AI与PI呈负相关;PI值与淋巴结转移有关。显示癌瘤进展以细胞增殖为主而凋亡受抑。p53基因突变可显著降低癌细胞凋亡。     

胸苷酸合成酶基因在结直肠癌中的作用研究

目的探讨结直肠癌患者胸苷酸合成酶(TS)基因编码区结构改变与患者5-氟尿嘧啶(5-Fu)药物反应的关系。方法对43例原发性结直肠癌患者进行Dukes’系统分级,并对不同病理分级、分期患者TS的DNA基因外显子结构进行测序分析。结果 Dukes’A期5例,Dukes’B期13例,Dukes’C期21例,Dukes’D期4例;组织学分级G1级6例,G2级25例,G3级12例。各期标本均没有发现TS DNA基因的变异。结论 TS的DNA基因编码区没有变异,不能确定其与5-Fu药物抵抗有关。     

基于Hedgehog信号通路的熊果酸诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的机制研究

目的 研究熊果酸通过经典Hedgehog信号通路影响人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法 通过显微镜观察熊果酸对SW480细胞形态的影响;采用MTT比色法检测熊果酸对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测熊果酸对细胞迁移的影响;Hoechest/PI染色法观察熊果酸对细胞凋亡的影响;荧光探针法检测熊果酸对细...