养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB表达的影响

目的:研究养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-Kappa B(NF-κB)表达的影响。方法:将SD雄性大鼠60只随机分为5组,每组12只,分别为正常组、假手术组、养阴润目丸组、新泪然组、模型组。养阴润目丸组、新泪然组及模型组3组均采用去势法制造干眼模型。治疗3个月后,取大鼠结膜上皮细胞,采用免疫组化法检测IL-1、TNF-α、NF-κB的表达。结果:养阴润目丸组和新泪然组结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB的表达明显少于模型组(均P0.05)。结论:养阴润目丸能有效治疗干眼的作用机制可能与下调结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB的表达有关。     

隔药饼灸对慢性支气管炎模型大鼠肺组织内p-p38MAPK、ICAM-1的影响

目的:观察隔药饼灸对慢性支气管炎大鼠p-p38MAPK、ICAM-1的影响。方法:将48只SD大鼠随机分成空白组、模型组、隔药饼灸组、隔纸垫灸组,每组12只。选用改良烟熏法建立大鼠慢性支气管炎模型,干预后,测定肺泡灌洗液中性粒细胞含量,各组大鼠ICAM-1 mRNA选用RT-PCR术测定、ICAM-1及p-p38MAPK蛋白选用Western blot检测。结果:与空白组比较,模型组中性粒细胞、p-p38MAPK、ICAM-1 mRNA及蛋白含量增高显著(P 0. 01)。与模型组比较,隔药饼灸组中性粒细胞数目减少(P 0. 05),p-p38MAPK、ICAM-1 mRNA及蛋白含量显著降低(P 0. 01)。与隔纸垫灸组比较,隔药饼灸组中性粒细胞、p-p38MAPK蛋白、ICAM-1 mRNA及蛋白降低更明显(P 0. 05)。结论:隔药饼灸可通过减少pp38MAPK蛋白含量、降低ICAM-1 mRNA及其蛋白水平,抑制中性粒细胞的释放,以改善炎性反应环境治疗慢性支气管炎。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用及大黄素的干预研究

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在IL-1β诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化中的作用及大黄素的干预效应。方法将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E)分为对照组、IL-1β诱导组、IL-1β+SB 203580组和IL-1β+大黄素组。培养48 h后用倒置相差显微镜观察细胞形态,细胞免疫化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白(CK)、p38MAPK及磷酸化-p38MAPK(p-p38MAPK)的表达情况。结果IL-1β可诱导部分NRK52E由卵圆形转变为梭形,同时CK表达减弱,α-SMA、p38MAPK及p-p38MAPK的表达增强。SB 203580阻断p38MAPK通路后可显著抑制IL-1β诱导的细胞形态改变,同时上调CK表达,下调α-SMA及p-p38MAPK的表达。大黄素对IL-1β诱导的细胞形态改变及α-SMA、p38MAPK及p-p38MAPK的表达也有明显抑制作用,其抑制作用与SB 203580的阻断作用相比无显著性差异。结论p38MAPK参与介导IL-1β诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化过程,大黄素可通过干扰p38MAPK信号通路抑制大鼠肾小管上皮细胞转分化。     

白及多糖对胃溃疡模型大鼠胃组织TNF-α、IL-1β、IL-6及JNK、p38 MAPK基因蛋白表达水平的影响

目的:探讨白及多糖对胃溃疡(GU)模型大鼠胃组织JNK、p38 MAPK基因、蛋白及其介导炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平的影响。方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组和模型组,模型组大鼠采用乙酸直接烧灼法复制GU模型,将GU模型大鼠按随机数字表法分为模型组、盐酸雷尼替丁0. 3 g/kg组和白及多糖0. 125、0. 25、0. 5 g/kg组,每组10只。各组灌胃相应药物或蒸馏水,连续15日。采用ELISA法检测各组大鼠胃溃疡病灶组织炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6含量,RT-PCR法检测胃溃疡病灶组织TNF-α、IL-1β、IL-6、JNK及p38 MAPK基因表达水平,WB法检测JNK及p38 MAPK蛋白表达水平。结果:与空白组比较,GU大鼠病理见胃底腺结构紊乱,胃黏膜上皮细胞脱落等,溃疡长度显著增加,胃组织炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6含量升高,基因表达显著上调,JNK及p38 MAPK基因及蛋白表达水平显著上调;与GU模型组比较,白及多糖0. 5 g/kg组大鼠病理见胃黏膜出现较多腺体,炎症细胞浸润、坏死层明显减少,组织病理学检查评分明显降低;白及多糖各剂量组TNF-α、IL-1β及IL-6含量明显降低,基因表达均下调,JNK及p38 MAPK基因及蛋白表达水平均下调,以白及多糖0. 5 g/kg组最显著。结论:白及多糖可通过下调JNK及P38 MAPK基因和蛋白表达水平,抑制炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6异常分泌而发挥保护胃黏膜的作用。     

制大黄-川芎“药对”抑制造影剂肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡信号通路的机制研究

目的研究制大黄-川芎“药对”抑制造影剂。肾病（CIN）大鼠。肾小管上皮细胞凋亡信号通路的机制。方法将32只雄性sD大鼠分为正常组（A组）、模型组（B组）、药对组（C组）、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（D组）。C组于造模前7天每日灌胃“药对”水煎液,D组造模前3天每日腹腔注射NAC（150μg／g）。B、C、D3组按照文献方法制备CIN模型。造模后24h处死大鼠,测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;HE染色观察肾脏病理改变,Western印迹检测肾组织p-p38MAPK、Bcl-2及Bax表达。结果与A组比较,B、C、D组大鼠血清肌酐、尿素氮均明显升高（P〈0．05,P〈0．01）,出现肾间质水肿、肾小管上皮细胞胞浆空泡样变,p-p38MAPK、Bax蛋白表达上调,Bcl-2表达下降。与B组比较,C、D组血清肌酐、尿素氮明显降低（P〈0．05）,肾脏病理改变显著减轻,p-p38MAPK、Bax蛋白表达下降,而Bcl-2表达增加（P〈0．01）。结论p38MAPK通路活化参与了CIN大鼠急性。肾损伤过程,且制大黄-川芎“药对”能通过抑制该通路活化保护CIN大鼠肾功能。     

The Experimental Study on Effects of Kangyan Tongluo Guanchang Decoction on TNF-α and ICAM-1 of Rat Model with Chronic Salpingitis

目的 抗炎通络灌肠方对慢性输卵管炎性大鼠TNF-α,ICAM-1影响的实验研究;方法 56只雌性SD大鼠随机分为7组,每组8只.A组为正常对照组,B～G6个组为模型组,其中B组为生理盐水组,C组为桂枝茯苓丸组,D组为庆大霉素组,E组为抗炎通络灌肠方低剂量组(等效量),F组为抗炎通络灌肠方中剂量组(2倍量),G组为抗炎通络灌肠方高剂量组(4倍量).采用赵广兴混合菌株接种大鼠法和Taylor- Robinson支原体阴道接种法,制作慢性输卵管炎性大鼠模型.于造模后第30天开始给药灌肠,B组予生理盐水,C、D、E、F、G组分别予对应剂量的药物.给药剂量:按人和大鼠体表面积折算的剂量,换算后,B组给予生理盐水1.8ml/kg·d;C组给予桂枝茯苓丸0.2376g/kg·d;D组给予庆大霉素0.72万U/kg·d;E组给予抗炎通络灌肠方23.45g/kg·d(等效量);F组给予抗炎通络灌肠46.9g/kg·d(2倍量);G组给予抗炎通络灌肠方93.8g/kg·d(4倍量).各组连续用药20天.在用药的第21天处死大鼠,取输卵管组织备测.免疫组化法测定输卵管组织TNF-α,ICAM-1蛋白阳性表达面积;结果 A组输卵管组织少见有TNF-α、ICAM-1蛋白表达;B组输卵管组织TNF-α、ICAM-1蛋白表达较多,明显高于A组(P＜0.01);C、D、E、F、G组表达较少,明显低于B组(P＜0.01);且E、F、G组TNF-α、ICAM-1蛋白表达明显少于C、D组(P＜0.01);G组TNF-α表达低于E、F组(P＜0.05),G组ICAM-1表达低于E组(P＜0.05).结论 提示慢性输卵管炎模型大鼠存在TNF-α、ICAM-1过表达的现象;抗炎通络灌肠方可通过下调输卵管上皮细胞TNF-α,ICAM-1的表达,控制炎症的发展,起到保护组织的作用,且疗效好于桂枝茯苓丸组、庆大霉素组.     

复方肾炎片联合强的松对阿霉素幼鼠肾病模型ET_(-1)及TGF_(-β1)表达的影响

目的:复方肾炎片联合强的松对阿霉素幼鼠肾病模型ET-1及TGF-β1表达的影响。方法:32只4周龄雄性大鼠建立阿霉素肾病模型后随机分为模型对照组(B组)、复方肾炎片组(C组)、强的松组(D组)和联合用药组(E组),每组8只,另取8只做为正常对照组(A组),造模前(T1)及12周末(T2)检测各组大鼠血及肾组织ET-1、TGF-β1水平并行肾脏透射电镜检查。结果:①B组、C组、D组ET-1水平T2时较T1时及A组T2时均有显著增高,T2时C组、D组、E组治疗后较B组T2时均有显著性改善(P<0.05)。B组TGF-β1水平T2时较T1时及A组T2时均有显著增高,T2时C、D、E组较B组T2时均有显著性改善。②B组、C组、D组ET-1mRNA表达量,较A组均有显著增高,C组、D组、E组较B组均有显著性改善。B组TGF-β1mRNA表达量较A组有显著增高,C、D、E组治疗后较B组均有显著性改善。③B组系膜区细胞增生,上皮细胞有空泡形成,C组及D组系膜细胞损伤及肾小管蛋白颗粒均有减轻。E组上皮细胞、系膜区细胞等均未见明显异常,肾小管可见少量蛋白颗粒。结论:复方肾炎片联合强的松治疗阿霉素肾病大鼠可显著降ET-1及TGF-β1水平,改善系膜细胞及上皮细胞等损害,起到有效的治疗作用。     

抗炎通络灌肠方对慢性输卵管炎性大鼠TNF-α，ICAM-1影响的实验研究

目的抗炎通络灌肠方对慢性输卵管炎性大鼠TNF-α,ICAM-1影响的实验研究;方法56只雌性SD大鼠随机分为7组,每组8只。A组为正常对照组,B—G6个组为模型组,其中B组为生理盐水组,C组为桂枝茯苓丸组,D组为庆大霉素组,E组为抗炎通络灌肠方低剂量组（等效量）,F组为抗炎通络灌肠方中剂量组（2倍量）,G组为抗炎通络灌肠方高剂量组（4倍量）。采用赵广兴混合菌株接种大鼠法和Taylor。Robinson支原体阴道接种法：制作慢性输卵管炎性大鼠模型。于造模后第30天开始给药灌肠,B组予生理盐水,C、D、E、F、G组分别予对应剂量的药物。给药剂量：按人和大鼠体表面积折算的剂量,换算后,B组给予生理盐水1．8ml／kg·d;C组给予桂枝茯苓丸0．2376g／kg·d;D组给予庆大霉素0．72万U／kg·d;E组给予抗炎通络灌肠方23．45g／kg·d（等效量）;F组给予抗炎通络灌肠46．9g/kg·d（2倍量）;G组给予抗炎通络灌肠方93．8g／kg·d（4倍量）。各组连续用药20天。在用药的第21天处死大鼠,取输卵管组织备测。免疫组化法测定输卵管组织TNF-α,ICAM-1蛋白阳性表达面积;结果A组输卵管组织少见有TNF-α、ICAM-1蛋白表达;B组输卵管组织TNF-α、ICAM-1蛋白表达较多,明显高于A组（P〈0．01）;C、D、E、F、G组表达较少,明显低于B组（P〈0．01）;且E、F、G组TNF-α、ICAM-1蛋白表达明显少于C、D组（P〈0．01）;G组TNF-α表达低于E、F组（P〈0．05）,G组ICAM-1表达低于E组（P〈0．05）。结论提示慢性输卵管炎模型大鼠存在TNF-α、ICAM-1过表达的现象;抗炎通络灌肠方可通过下调输卵管上皮细胞TNF-α,ICAM-1的表达,控制炎症的发展,起到保护组织的作用,且疗效好于桂枝茯苓丸组、庆大霉素组。     

电针“内关”对心肌肥厚模型大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶信号通路的影响

目的:探讨电针“内关”穴治疗心肌肥厚的作用机制.方法:SD大鼠40只用随机数字表法分为正常组、模型组、模型+p38抑制剂组、模型十电针组,每组10只.采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素3 mg/(kg·d)建立心肌肥厚大鼠模型,模型+p38抑制剂组在造模基础上每日皮下注射0.3 mg/kg p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB 203580;模型十电针组电针“内关”穴,采用连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min,1次/d,共14 d.其他两组不予治疗干预.放射免疫法技术检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫印迹法检测p38MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)含量.观察电针“内关”穴对TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK的影响.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均显著升高(均P＜0.01);经抑制剂和电针处理后,模型+p38抑制剂组和模型十电针组大鼠TNF-α、IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(均P＜0.05),与正常组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);模型+p38抑制剂组和模型十电针组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针“内关”可以明显抑制心肌肥厚p38 MAPK的磷酸化,这种保护作用可能通过抑制TNF-α、IL-1β等炎性因子的表达实现对p38 MAPK信号通路调节.     

通经蠲痹胶囊对大鼠实验性膝骨关节炎血清中IL-1β、MMP-3含量的影响

目的:观察通经蠲痹胶囊对大鼠实验性膝骨关节炎血清中IL-1β、MMP-3含量的影响。方法:将40只健康SD大鼠随机分为通经蠲痹胶囊组(A组)、筋骨痛消丸组(B组)、模型组(C组)和空白组(D组)各10只,采用Hulth造模法建立大鼠膝骨性关节炎模型。以通经蠲痹胶囊、筋骨痛消丸为干预治疗手段,检测比较各组大鼠血清中IL-1β及MMP-3的含量。结果:试验后各组大鼠血清中IL-1β及MMP-3的含量有所差异,其中A、B、C三组明显高于D组(P0.01);A、B两组明显低于C组(P0.05);A、B两组比较无明显差异(P0.05)。结论:通经蠲痹胶囊对Hulth造模所致的膝骨关节炎具有一定的治疗效果。     

中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响

目的:观察复方中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响,探讨其疗效机制.方法:通过左膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨性关节炎模型,36只新西兰兔随机分为6组:A组(正常组),B组(造模组)、C组(空白对照组)、D组(关节康组)、E组(西乐葆组)和F组(壮骨关节丸组).木瓜蛋白酶注射结束后2周D、E、F组分剐予以关节康、西乐葆、壮骨关节丸治疗4周,取左膝关节软骨行IL-1β、TGF-β1免疫组化染色.结果:关节康组提高关节软骨TGF-β1表达的效果最明显,而西乐葆组降低关节软骨IL-1β表达的效果最明显.结论:关节康治疗膝骨性关节炎的疗效机理可能在提高关节软骨的TGF-β1含量,降低IL-1β含量,从而直接或间接促进了损伤关节软骨的修复.     

黄芩苷对幽门螺杆菌诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞损伤的保护作用及机制

目的:探讨黄芩苷(baicalin)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导人胃黏膜上皮GES-1细胞(human gastric epithelial GES-1 cells)损伤的保护作用及机制研究。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入baicalin(15,30,60 mg·L~(-1))和p38分裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580 20μmol·L~(-1)共培养。噻唑蓝(MTT)比色法测细胞增殖、流式细胞术测细胞凋亡、酶联免疫吸附法(ELISA)测细胞白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及IL-8水平、比色法测细胞乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性、蛋白免疫印迹法(Western blot)测细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2,p-p38 MAPK及total-p38 MAPK(T-p38 MAPK)蛋白表达。结果:与空白组比较,Hp可抑制GES-1细胞增殖,促进GES-1细胞凋亡,诱导GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8并增加LDH活性,增加GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并降低Bcl-2蛋白表达(P0.01);与Hp感染组比较,中、高浓度baicalin组可促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P0.01);与高浓度baicalin组比较,SB203580可进一步促进GES-1细胞增殖,减少GES-1细胞凋亡,减少GES-1细胞分泌IL-1β及IL-8水平并降低LDH活性,降低GES-1细胞内p-p38 MAPK,Bax蛋白表达并增加Bcl-2蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:baicalin可通过抗炎、促增殖并抗凋亡减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制p38 MAPK通路有关。     

肾气丸对自然衰老大鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的保护作用及其机制研究

目的研究肾气丸对衰老所致雄性大鼠睾丸支持细胞紧密连接功能损伤的保护作用及其可能的分子机 制。方法将SPF 级SD 雄性大鼠随机分为4 组,分别为青年对照组（2 月龄）、衰老模型组（17 月龄）及肾气丸 低、高剂量组（0.1、0.4 g·kg-1,17 月龄）,每组8 只,分别给予普通饲料或含药饲料持续喂养4 个月。HE 染色 法观察睾丸组织形态变化并测量生精上皮厚度和生精小管直径;透射电镜观察睾丸组织紧密连接超微结构; Western Blot 法检测睾丸组织中波形蛋白（Vimentin）、闭合蛋白（Occludin）、闭锁连接蛋白-1（Zonula occludens-1,ZO-1）和β-连环蛋白（β-catenin）表达水平;双标免疫荧光法检测睾丸支持细胞中Vimentin、 β-catenin、ZO-1 和磷酸化p38 丝裂原活化蛋白激酶（Phosphorylated p38 Mitogen-activated protein kinase, p-p38MAPK）的表达和定位。结果HE 结果显示,肾气丸能明显改善自然衰老大鼠睾丸组织形态学变化,提 高生精上皮厚度（P＜0.05）和生精小管直径（P＜0.05,P＜0.01）;透射电镜结果显示,肾气丸能明显改善自然 衰老大鼠支持细胞紧密连接超微结构;Western Blot 结果显示,肾气丸能明显上调自然衰老大鼠睾丸组织中 Vimentin、Occludin、ZO-1 和β-catenin 蛋白表达水平（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）;免疫荧光结果显示,肾 气丸能明显上调衰老大鼠睾丸支持细胞Vimentin、ZO-1 和β-catenin 蛋白表达水平,下调支持细胞p-p38MAPK 蛋白表达水平。结论肾气丸可减轻自然衰老大鼠睾丸支持细胞紧密连接损伤,其机制可能与下调支持细胞 p38MAPK 信号通路有关。     

活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α诱导人内皮细胞与中性粒细胞黏附及相关通路蛋白表达的影响

目的探讨活血及活血解毒配伍中药含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与外周血中性粒细胞(PMN)黏附、炎症反应及相关通路蛋白的影响。方法采用随机数字表法将32只大鼠分为空白对照组、芎芍胶囊组、黄连胶囊组及芎芍胶囊加黄连胶囊组,每组8只,各给药组按临床等效剂量灌胃,采血制备含药血清。空白对照组予等体积蒸馏水作对照。常规方法培养HUVECs,以TNF-α(100 ng/m L)为刺激物,制备HUVECs细胞损伤模型。细胞分为5组:空白对照组、模型组、活血组、解毒组及活血解毒组。空白对照组及模型组给予正常大鼠血清,其他3组以10%含药血清干预24 h后收集细胞,应用孟加拉玫瑰红染色法观察HUVECs与PMN发生病理性黏附情况;酶联免疫法检测细胞上清液相关炎症因子E选择素(E-selectin)、细胞黏附分子-1(ICAM-1)及白细胞介素-1β(IL-1β)含量;Western blot法检测丝裂素活化蛋白激酶p38(p38MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)蛋白磷酸化水平。结果与空白对照组比较,模型组细胞出现明显的氧化损伤,PMN黏附数量明显增加,IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平升高,且HUVEC上清p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达增加(均P0.01)。与模型组比较,活血组、解毒组及活血解毒组HUVECs与PMN黏附数量减少(P0.05),细胞培养上清液IL-1β、E-selectin及ICAM-1水平降低(P0.05,P0.01),且内皮细胞p-p38MAPK、p-ERK 1/2蛋白表达降低(P0.01)。结论活血及活血解毒含药血清能减轻TNF-α诱导的HUVECs损伤,抑制HUVECs-PMN黏附和黏附因子释放。其机制可能与调节内皮细胞MAPK通路p38MAPK、ERK 1/2蛋白磷酸化水平有关。     

半夏泻心汤对重症急性胰腺炎大鼠肠道损伤的保护作用及肠组织p38MAPK/NF-κB表达的影响

目的观察半夏泻心汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道损伤的保护作用及肠组织p38MAPK/核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响并探讨其机制。方法将雄性8周龄SD大鼠30只均分为假手术组、模型组和半夏泻心汤组,用牛磺胆酸钠建立SAP模型,造模2 h后半夏泻心汤组以5 g/kg进行灌胃。24 h后检测血清中血清淀粉酶(AMY)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,观察大鼠胰腺和回肠的病理改变,检测p38MAPK、p-p38MAPK及NF-κB在回肠组织中的表达情况。结果实验结束时模型组和半夏泻心汤组分别死了3只和1只大鼠;与假手术组比较,模型组和半夏泻心汤组AMY、IL-6、IL-1β和TNF-α含量增高;与模型组比较,半夏泻心汤组AMY、IL-6、IL-1β和TNF-α含量降低;假手术组胰腺和回肠未见病理损害,模型组胰腺组织出现明显水肿、出血、脂肪组织坏死及炎细胞浸润,回肠组织绒毛上皮脱落,仅有固有膜,同时伴有水肿炎细胞浸润,胰腺和回肠病理评分较假手术组增加;给予半夏泻心汤治疗后,胰腺和回肠的病理损伤较模型组明显减轻,病理学评分也降低;模型组p38MAPK、p-p38MAPK及NF-κB表达均较假手术组增加;半夏泻心汤组p38MAPK、p-p38MAPK及NF-κB表达较模型组减少,但较假手术组增加(均P 0.05)。结论半夏泻心汤通过减少p38MAPK/NF-κB表达从而发挥SAP大鼠肠道保护作用。     

补肾活血汤对大鼠骨性关节炎TNF-α、IL-1β、MMP-1表达的影响

目的:探讨补肾活血汤对大鼠骨性关节炎肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法:选择SD大鼠60只,按照随机数字的方法分为4组,对照组(A组)、低剂量组(B组)、中剂量组(C组)和高剂量组(D组),每组15只大鼠, A组大鼠仅每日对膝关节利用75%酒精消毒,B组、C组、D组大鼠均给予补肾活血汤关节腔内注射,B组大鼠的剂量为每次0.2 mL,C组大鼠的剂量为每次0.4 mL,D组大鼠的剂量为每次0.6 mL,对4组大鼠治疗前后的关节积液中的TNF-α,IL-1β,MMP-1含量进行对比。对4组大鼠治疗前后的足肿胀度进行对比。对4组大鼠的肿胀消退时间进行对比。结果:4组大鼠治疗前的TNF-α,IL-1β,MMP-1数据差异均无统计学意义(F=1.235,1.584,1.337,P0.05)。治疗后,4组大鼠的TNF-α,IL-1β,MMP-1含量均低于治疗前,数据差异均有统计学意义(t=2.055,4.079,6.306,9.121,2.060,3.735,4.938,5.772,2.104,3.910,5.327,7.536,P0.05),在治疗后的组间比较中,数据差异有统计学意义(F=47.561,58.996,79.632,P0.05),q检验结果显示,TNF-α,IL-1β,MMP-1均为D组C组B组A组,4组大鼠治疗前的足肿胀度比较,数据差异均无统计学意义(F=2.142,P0.05)。治疗后,4组大鼠的足肿胀度数值均低于治疗前,数据差异均有统计学意义(t=2.094,4.049,7.157,12.332,P0.05),在治疗后的组间比较中,数据差异有统计学意义(F=59.658,P0.05),q检验结果显示,足肿胀度为D组C组B组A组,在4组大鼠的肿胀消退时间比较中,数据差异具有统计学意义(F=45.661,P0.05),q检验结果显示,肿胀消退时间为D组C组B组A组。结论:利用补肾活血汤干预骨关节炎的大鼠模型,可以改善TNF-α、IL-1β及MMP-1的浓度状况,提升恢复效果,值得继续在人体试验方面做深入研究。     

参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎模型大鼠IL-1β、IL-4及p38MAPK基因蛋白表达的影响

目的:研究参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜组织内IL-1β、IL-4及p38MAPK基因和蛋白表达的影响。方法:SPF级Wistar大鼠48只,雌雄各半,按随机数字表法分为空白组(n=8)和模型组,采用内外综合因素法复制脾虚湿困型UC大鼠模型,造模成功后将大鼠按随机数字表法分为模型组、参苓白术散组(24g/kg、12g/kg、6g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg),每组8只;其中空白组、模型组大鼠每日按容积10g/kg体重灌服蒸馏水;参苓白术散各组每日分别给予24g/kg、12g/kg、6g/kg剂量的参苓白术散煎剂灌胃;柳氮磺胺吡啶组给予0.2g/kg剂量的柳氮磺胺吡啶药液灌胃,连续治疗3周后,ELISA法检测各组大鼠结肠组织内IL-1β、IL-4含量;q PCR法检测结肠组织内IL-1βmRNA、IL-4 mRNA及p38MAPK mRNA表达;Westernblot法检测结肠组织内p38MAPK蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,结肠组织内IL-1β含量及IL-1βmRNA表达水平显著升高,IL-4含量及IL-4 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),p38MAPK基因和蛋白表达水平明显升高;与模型组比较,参苓白术散组大鼠一般生存状况明显改善,结肠组织内IL-1β含量及IL-1βmRNA表达水平明显降低,IL-4含量及IL-4mRNA表达水平明显升高,p38MAPK基因和蛋白表达水平明显降低,以参苓白术散治疗组(24g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg)治疗作用明显;参苓白术散治疗组(24g/kg)和柳氮磺胺吡啶组(0.2g/kg)相比较,二者之间差异无统计学意义。结论:参苓白术散水煎液(24g/kg、12g/kg)具有改善脾虚湿困型UC大鼠一般生存状况,并通过上调结肠组织IL-4蛋白含量及其mRNA表达水平,下调IL-1β和p38MAPK基因蛋白表达水平而发挥保护结肠黏膜的作用。     

芪桂益脉灵干预急性心肌缺血再灌注大鼠模型炎症因子ICAM-1,VCAM-1和p38MAPK通路的实验研究

目的:观察芪桂益脉灵(QGYML)对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)和内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1),p38MAPK通路的影响。方法:50只大鼠随机分为空白组、假手术组、单纯缺血再灌注组、QGYML低剂量组、QGYML高剂量组5组,灌胃1 h后,结扎左冠状动脉前降支,结扎60 min,再灌注180 min,测定VCAM-1、ICAM-1、p38、p-p38蛋白表达。结果:各组p38蛋白表达基本一致,差异无统计学意义(P0.05);单纯缺血再灌注组与假手术组比较,VCAM-1、ICAM-1、p-p38蛋白表达升高(P0.05),差异有统计学意义;灌药组与单纯缺血再灌注组比较,VCAM-1、ICAM-1、p-p38蛋白表达明显降低(P0.05),差异有统计学意义,高剂量组效果更佳。结论:芪桂益脉灵可以下调VCAM-1和ICAM-1在内皮细胞膜上的表达,抑制p38MAPK通路,对急性心肌缺血再灌注损伤有抑制作用。     

中药+贴敷治疗对兔腰椎间盘突出IL-1β活性影响的实验研究

目的:观察活血祛痛汤及中药贴敷治疗对突出椎间盘组织中IL-1β含量的影响,探寻中医药抗炎止痛机理。方法:将90只新西兰大白兔随机分为5组,A组:正常对照组,B组:模型对照组,C组:活血祛痛汤组,D组:中药贴敷组,E组:活血祛痛汤+中药贴敷组,每组18只,其中B、C、D、E组采用侧方腹膜外入路纤维环切开法手术造模,术后一周开始治疗,分别于治疗满2、4、6周后每组各处死6只,用ELISA法检测各组动物椎间盘组织中IL-1β含量,并进行各组间比较。结果:与A组相比,B组椎间盘组织中IL-1β含量在2、4、6周明显升高,有统计学差异(P<0.01)。与B组相比,C、D、E三组椎间盘组织中IL-1β含量在2、4、6周均有不同程度降低,尤其在4、6周下降明显,有统计学差异(P<0.05);与C、D组相比,E组IL-1β含量下降,4、6周有统计学差异(P<0.05)。结论:活血祛痛汤及中药贴敷治疗均能降低突出椎间盘组织中IL-1β含量、抑制炎症和免疫反应,治疗4～6周效果最明显,两种治疗方法综合运用效果更佳。     

清眩润目饮对蒸发过强型干眼模型鼠角结膜炎症因子表达的影响

目的探讨清眩润目饮对蒸发过强型干眼模型鼠角、结膜炎症因子表达的影响。方法将18只SD大鼠随机分为3组,空白对照组、模型组、清眩润目饮组,空白对照组不做任何处理,其余2组采用纤维电针改良的灼烧器直接灼烧模型鼠睑板腺开口造模;清眩润目饮组予中药清眩润目饮灌胃qd,模型组以等量生理盐水灌胃qd,连续灌胃28 d。各组分别于造模前、造模后即刻、造模后4 w行角膜荧光素染色(CFS)、泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌量检查(SIT)。造模后28 d处死动物,并进行角、结膜炎性因子水平及相关蛋白含量测定及用光镜观察角、结膜组织病理学改变。结果 (1)CFS、BUT、SIT:造模后4 w,清眩润目饮组的CFS评分、BUT、SIT均优于模型组(P0.05),且结果与同期空白对照组接近(P0.05)。(2)各组大鼠结膜组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量比较:模型组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α较空白对照组大鼠数值明显升高(P0.01);清眩润目饮组较模型组IL-1β、IL-6、TNF-α降低(P0.01);清眩润目饮组较空白对照组,无统计学显著性(P0.05)。(3)各组大鼠结膜组织TLR4和MYD88蛋白表达量比较:模型组大鼠TLR4、MyD88蛋白较空白对照组大鼠数值明显升高(P0.01);清眩润目饮组较模型组降低(P0.01)。(4)病理组织学检查:空白对照组实验鼠角、结膜组织内未见明显炎性细胞浸润;模型组、清眩润目饮组实验鼠角、结膜组织中均有不同程度的炎性细胞的表达,中药清眩润目饮组角、结膜炎性细胞表达明显弱于模型组。结论清眩润目饮可以减轻睑板腺功能障碍所致蒸发过强型干眼角、结膜的炎性反应,降低炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,影响TLR4、MyD88蛋白质在角、结膜中的表达,其对干眼的治疗作用可能与此有关。