骨关节炎Ⅰ号方对抗过氧化氢致软骨细胞DNA的损伤作用

目的:选用过氧化氢作为实验软骨细胞DNA的损伤因子,探讨骨关节炎Ⅰ号方预防过氧化氢对软骨细胞DNA的损伤作用。方法:实验于2004-01/12在福建省中医学院动物中心完成。骨关节炎Ⅰ号方由仙灵脾、巴戟天、川芎、三七、祖师麻组成。取三四周龄兔关节软骨,经胶原酶Ⅱ消化,建立软骨细胞体外培养体系。随机分成4组,①骨关节炎Ⅰ号方组加入100g/L骨关节炎Ⅰ号方药液,②中药加过氧化氢组加入100g/L骨关节炎Ⅰ号方与1mmol/L过氧化氢组混合液,③过氧化氢对照组加入1mmol/L过氧化氢液,④正常对照组加入磷酸盐缓冲液。均加入软骨细胞培养体系中培养2h,用单细胞凝胶电泳法检测培养体系中软骨细胞的DNA损伤的程度以彗星细胞出现率和慧星尾长的变化做评估指标。结果:①彗尾样细胞出现率:过氧化氢组彗尾样细胞出现率显著高于中药加过氧化氢组(41%,24%,P<0.05)、显著高于中药组(41%,8%,P<0.01)、显著高于正常对照组(41%,9%,P<0.01);中药组与正常对照组彗尾样细胞出现率相似(8%,9%)。②彗星尾长:正常对照组、中药组DNA荧光图像呈圆形;过氧化氢对照组软骨细胞出现慧星状DNA荧光图像;中药加过氧化氢组软骨细胞也出现“拖尾”现象,但较过氧化氢对照组短(20.2950±12.8414,39.3983±12.5368,P<0.05)。结论:过氧化氢组彗星样细胞出现率,彗星尾长都显著高于正常对照组,说明过氧化氢对软骨细胞DNA具有损伤作用。加入骨关节炎Ⅰ号方进行干预后,彗星样软骨细胞百分率、彗星尾长都明显下降,说明骨关节炎Ⅰ号方具有预防过氧化氢对软骨细胞DNA的损伤作用。     

骨关节炎Ⅰ号方预防氢化可的松对兔软骨细胞的损伤作用

背景骨关节炎Ⅰ号方中的补肾活血祛风湿中药具有治疗骨关节炎、预防糖皮质激素副作用的作用.目的建立体外兔关节软骨细胞培养体系,观察骨关节炎Ⅰ号方预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用.设计完全随机设计,对照实验.单位福建省第二人民医院风湿免疫科.材料实验于2003-11/2004-03在福建中医学院骨伤系分子实验室完成.关节炎Ⅰ号方由仙灵脾、巴戟天、川芎、三七、祖师麻组成.用胶原酶Ⅱ消化兔关节软骨,建立软骨细胞体外培养体系,在软骨细胞培养体系中分别加入不同浓度的骨关节炎Ⅰ号方与氢化可的松的混合液,根据加入的药物浓度不同随机分成2组,一组加入1.25g/L氢化可的松和/或150g/L骨关节炎Ⅰ号方,另一组加入2.50 g/L氢化可的松和/或300 g/L骨关节炎Ⅰ号方.每组再分为4个亚组,各组再分别分为对照组、氢化可的松组、氢化可的松+关节炎Ⅰ号方组、关节炎Ⅰ号方组,每组5孔.方法①1.25g/L氢化可的松+150g/L关节炎J号方组每孔分别加入1.25 g/L氢化可的松和150g/L骨关节炎Ⅰ号方混合液0.1 mL.②1.25g/L氢化可的松组每孔分别加入磷酸盐缓冲液和1.25 g/L氢化可的松的混合液0.1 mL.③150g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入150g/L骨关节炎Ⅰ号方药液0.1 mL.④对照组1每孔分别加入磷酸盐缓冲液0.1 mL.⑤2.50g/L氢化可的松+300g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入2.50g/L氢化可的松和300 g/L骨关节炎Ⅰ号方的混合液0.1 mL.⑥2.50g/L氢化可的松组每孔分别加入磷酸盐缓冲液和2.50g/L氢化可的松的混合液0.1 mL.⑦300 g/L骨关节炎Ⅰ号方组每孔分别加入300g/L骨关节炎Ⅰ号方药液0.1 mL.⑧对照组2每孔分别加入磷酸盐缓冲液0.1 mL.⑨上述各组加药培养24h后,用倒置显微镜观察各组软骨细胞形态变化.④采用四氮唑蓝比色法检测各孔软骨细胞的A值,以反映软骨细胞增殖情况.主要观察指标骨关节炎Ⅰ号方与氢化可的松联合用药对兔软骨细胞增殖的影响.结果①软骨细胞形态倒置显微镜观察见对照组软骨细胞呈多角形或梭形贴壁生长,1.25和2.50 g/L氢化可的松浓度培养24 h的软骨细胞呈固缩或漂浮状态,各浓度氢化可的松+骨关节炎Ⅰ号方组、骨关节炎Ⅰ号方组的软骨细胞呈多角形或梭形贴壁生长与对照组无差异.②软骨细胞A值1.25 g/L氢化可的松组明显低于对照组1(0.007 6±0.001 8,0.015 2±0.002 6,t=5.374 0,P＜0.01);1.25 g/L氢化可的松+150 g/L关节炎Ⅰ号方组和150g/L关节炎Ⅰ号方组明显高于1.25g/L氢化可的松组(0.065 6±0.016 9,0.086 6±0.019 0,t=7.630 9,9.255 9,P＜0.01);2.50 g/L氢化可的松组明显低于对照组2(0.0053±0.0014,0.0153±0.0023,t=8.304 5,P＜0.01);2.50 g/L氢化可的松+300 g/L关节炎Ⅰ号方组和300 g/L关节炎Ⅰ号方组明显高于2.50 g/L氢化可的松组(0.0858±0.015 0,0.092 6±0.016 8,t=11.948 3,11.579 4,＜0.01).结论高浓度氢化可的松可导致软骨细胞已严重损伤或死亡,而氢化可的松加中药培养的软骨细胞生长良好,骨关节炎Ⅰ号方有预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用.     

骨关节炎中影响软骨细胞凋亡的因素

目的：近年来国外对骨关节炎的发生及发展机制有许多研究成果，骨关节炎中软骨细胞凋亡影响因素的研究颇具新意。资料来源：应用计算机检索Medline 1985-01／2004—12与骨关节炎中软骨细胞凋亡相关的文献，检索词“osteoarthrltis，chondrocyte，apoptosis”，并限定文献语种为English。资料选择：对资料的摘要进行阅读初审，选取包括试验组和对照组的文献，开始查找全文。纳入标准：①随机对照试验。②试验包括对照组。排除标准：①没有设立对照组的文献。②综述类文献、Meta分析、重复研究。资料提炼：共收集到111篇关于骨关节炎中软骨细胞凋亡影响因素的试验，纳入符合标准的文献35篇。排除的文献为综述类文献28篇和重复研究48篇。35篇文献多为软骨细胞体外培养有关的试验，分别对各种凋亡影响因素进行评价。资料综合：在骨关节炎患者和老年人的软骨中，由于细胞外基质成分降解或通过高级糖基化、酪氨酸亚硝基化等修饰作用破坏了正常的细胞外基质从而使软骨细胞发生炎症反应并促进其死亡。各种机械性刺激是软骨细胞功能的重要调节因素，施加机械压力的加速率也决定软骨损伤和软骨细胞死亡的类型与程度。经某些细胞因子作用的正常软骨和分离培养的软骨细胞产生高水平的NO，而NO产物又能诱导软骨细胞死亡。肿瘤坏死因子受体超家族成员与相应的死亡配体结合能激活凋亡信号通路，当存在其他前凋亡因子或缺乏某些促存活因子时肿瘤坏死因子α能诱导软骨细胞凋亡。正是由于能量代谢受损使软骨细胞对其他的致死因子变得更加敏感。在发育和骨关节疾病相关过程中，软骨细胞的死亡虽然有p53的参与，但其精确的机制有待阐明，同时没有足够的直接证据表明c—myc能够影响软骨细胞的存活或死亡。结论：骨关节炎中影响软骨细胞凋亡的因素很多，机制复杂，许多因素导致软骨细胞凋亡的通路有待进一步阐明。     

骨关节炎中软骨细胞CD80/CD86的表达

目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的一种慢性退行性骨关节疾病。近年的研究显示骨关节炎不但是一种退行性疾病,而且是一种关节内的炎症反应。通过检测OA软骨细胞CD80/CD86的表达情况,探讨软骨细胞在OA发病中的作用。方法收集10例膝关节骨关节炎患者软骨标本为病例组,同时收集8例股骨颈骨折患者软骨标本为正常对照组。进行软骨细胞培养和流式细胞技术,检测软骨细胞CD80/CD86的表达情况。进行统计学分析。结果病例组软骨细胞表达CD80的阳性细胞百分率(2.47%±0.59%)比正常对照组软骨细胞(0.94%±0.25%)高(P<0.01)。病例组软骨细胞表达CD86的阳性细胞百分率(1.71%±0.71%)比正常对照组软骨细胞(0.93%±0.47%)高(P<0.01)。结论CD80/CD86在骨关节炎患者软骨细胞中表达增加,做为抗原提呈细胞的标志分子,提示软骨细胞在骨关节炎中发挥抗原提呈作用。     

骨关节炎中影响软骨细胞凋亡的因素

目的:近年来国外对骨关节炎的发生及发展机制有许多研究成果,骨关节炎中软骨细胞凋亡影响因素的研究颇具新意。资料来源:应用计算机检索Medline1985-01/2004-12与骨关节炎中软骨细胞凋亡相关的文献,检索词“osteoarthritis,chondrocyte,apoptosis”并限定文献语种为English。资料选择:对资料的摘要进行阅读初审,选取包括试验组和对照组的文献,开始查找全文。纳入标准:①随机对照试验。②试验包括对照组。排除标准:①没有设立对照组的文献。②综述类文献、Meta分析、重复研究。资料提炼:共收集到111篇关于骨关节炎中软骨细胞凋亡影响因素的试验,纳入符合标准的文献35篇。排除的文献为综述类文献28篇和重复研究48篇。35篇文献多为软骨细胞体外培养有关的试验,分别对各种凋亡影响因素进行评价。资料综合:在骨关节炎患者和老年人的软骨中,由于细胞外基质成分降解或通过高级糖基化、酪氨酸亚硝基化等修饰作用破坏了正常的细胞外基质从而使软骨细胞发生炎症反应并促进其死亡。各种机械性刺激是软骨细胞功能的重要调节因素,施加机械压力的加速率也决定软骨损伤和软骨细胞死亡的类型与程度。经某些细胞因子作用的正常软骨和分离培养的软骨细胞产生高水平的NO,而NO产物又能诱导软骨细胞死亡。肿瘤坏死因子受体超家族成员与相应的死亡配体结合能激活凋亡信号通路,当存在其他前凋亡因子或缺乏某些促存活因子时肿瘤坏死因子α能诱导软骨细胞凋亡。正是由于能量代谢受损使软骨细胞对其他的致死因子变得更加敏感。在发育和骨关节疾病相关过程中,软骨细胞的死亡虽然有p53的参与,但其精确的机制有待阐明,同时没有足够的直接证据表明c-myc能够影响软骨细胞的存活或死亡。结论:骨关节炎中影响软骨细胞凋亡的因素很多,机制复杂,许多因素导致软骨细胞凋亡的通路有待进一步阐明。     

骨关节炎患者线粒体转录因子A表达与线粒体DNA拷贝数关系的研究

目的研究膝关节骨关节炎患者与正常人外周血及关节软骨细胞中的线粒体转录因子A(TFAM)表达和线粒体DNA拷贝数的关系,探讨其相关性。方法选择20例的膝关节骨关节炎患者为骨关节炎组,以正常关节软骨患者20例为对照组。各收集其外周血及关节软骨细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光PCR(SYBR GREEN I染料法)检测外周血及软骨组织中TFAM mRNA的表达水平和软骨细胞线粒体DNA拷贝数。结果骨关节炎组外周血和软骨细胞TFAM mRNA的表达量均低于正常组患者(P0.05),且二者表达量呈正相关(P0.01);骨关节炎组线粒体DNA的平均拷贝数均于正常组患者软骨细胞(P0.01),且与软骨细胞TFAM mRNA的表达量呈正相关(P0.01)。结论 TFAM通过增加其线粒体DNA拷贝数,这将可以对骨关节炎的病因提出新的解释和补充,可能为骨关节炎的检测和治疗提供新的途径。     

骨关节炎软骨细胞的体外分离培养

背景:由于体外分离培养骨关节炎患者软骨细胞存在难度,同时软骨组织中因富含大量的基质,且软骨细胞分布于其中的软骨陷窝中,因此与其他细胞相比,软骨细胞的分离更为困难.目的:从骨关节炎行人工膝关节置换者的关节软骨中分离软骨细胞,并改良其酶消化法分离软骨组织,观察软骨细胞的生物学特性.设计、时间及地点:对比观察,实验于2007-04/2008-03在解放军第三军医大学烧伤研究所实验室完成.对象:标本取材于解放军第三军医大学西南医院关节外科中心同期收治的10例人工膝关节置换患者软骨组织(＞3 cm).方法:切取原发性骨关节炎患者关节软骨,将软骨剪成1mm×1 mm×1mm左右的碎块,以Ⅱ型胶原酶顺序消化联合胰蛋白酶消化分离关节软骨细胞,同期对比用Ⅱ型胶原酶加胰蛋白酶消化法消化软骨后的收获细胞数及细胞成活率,分离细胞进行原代和传代培养.主要观察指标:以倒置相差显微镜观察体外培养软骨细胞形态;以甲苯胺蓝染色以及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行软骨细胞鉴定;四甲基偶氮唑盐法测定骨关节炎细胞增殖情况.结果:改良的Ⅱ型胶原酶顺序消化联合胰蛋白酶法,对原代关节软骨细胞的分离取得了优良而稳定的效果,与传统的胰蛋白酶消化法相比,收获细胞数为3.72×106,细胞存活率为97.5%,二者相比有显著性差异(P＜0.05).体外培养观察软骨细胞贴壁和生长均较缓慢.原代和传代后细胞Ⅱ型胶原免疫组织化学和甲苯胺蓝异染反应均较弱.软骨细胞增殖和生长缓慢.结论:Ⅱ型胶原酶顺序消化联合胰蛋白酶分离骨关节炎患者软骨细胞的技术简单且易操作,分离培养的软骨细胞符合骨关节炎时软骨退变的表现,可为骨关节炎的病因研究及软骨细胞移植治疗骨性关节炎提供实验基础.     

HMGB1在调节骨关节炎软骨细胞功能中的作用机制

骨关节炎(osteoarthritis, OA)是一种慢性退行性关节疾病,其主要特征是关节软骨破坏,导致患者身体疼痛和残疾,严重影响其生活质量。OA可由多种病因诱发,而关节软骨的病理改变被认为是OA发生的关键驱动因素之一。高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)作为一种真核细胞内的非组蛋白,可参与调节软骨细胞炎症及凋亡过程,从而导致关节软骨受损,诱发OA。本文就HMGB1在OA软骨细胞中的作用机制进行综述,以期为临床防治OA提供新思路。     

自体软骨细胞移植治疗膝骨关节炎的临床研究与应用

目的:综合分析自体软骨细胞移植修复膝骨关节炎中关节软骨缺损的历史、研究现状及发展趋势。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2006-10有关组织工程学技术修复关节软骨缺损的文章,检索词为“articularcartilage defects,chondrocyte implantation”,限定语言种类为英文;同时计算机检索中国期刊数据库1980-01/2006-10有关组织工程学技术修复关节软骨缺损的文章,检索词“关节软骨缺损,软骨细胞移植,关节炎”,限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①有关膝骨关节炎的发病率、中医药防治关节软骨退变的研究。②有关软骨细胞的体外培养的方法研究。③软骨细胞修复关节软骨缺损的历史及前景展望研究。排除标准:重复研究、综述及Mata分析类文章;未排除随机、对照和盲法文章。资料提炼:共收集到103篇有关组织工程学技术修复关节软骨缺损的文献,48篇符合纳入标准,排除55篇文献,其中11篇为重复研究,24篇为临床应用,20篇为软骨细胞支架的研究。48篇文献中有关软骨细胞体外培养的文章19篇,膝骨关节炎的发病率及中医药防治关节软骨退变的文章16篇,软骨细胞修复关节软骨缺损的历史及前景展望的文章13篇。资料综合:自体软骨细胞体外培养大量扩增及生物膜载体的发展,为组织工程化软骨修复软骨缺损开拓了一条新的途径。同时祖国医学在防治关节软骨退变中有着不可替代的优势。因此,自体软骨细胞植入技术结合中医药将会作为一个传统自体软骨细胞移植术的替代品被骨科界广泛接受。结论:体外培养软骨细胞技术,目前已经成熟。组织工程学技术的发展使体外培养软骨细胞修复关节炎中关节软骨缺损进入了一个新的发展时期,基质诱导的自体软骨细胞移植技术结合中医药为修复骨关节炎中关节软骨缺损开辟了新的道路。     

膝骨关节炎脂肪垫对关节软骨细胞的影响

目的:观察人膝骨关节炎(OA)脂肪垫对正常及OA关节软骨细胞的影响。方法:24例人膝脂肪垫和膝关节软骨均由骨科手术室提供,12例为膝关节急性外伤手术患者,12例为膝OA患者行关节置换术后。切取正常及OA膝脂肪垫行苏木精-伊红染色(HE)及瘦素免疫组织化学染色;用OA膝脂肪垫制作脂肪垫培养液(FCM);于急性膝外伤手术标本的表面完整处提取正常软骨细胞,于膝OA关节置换术标本提取OA软骨细胞,分别进行体外培养并鉴定,随机分成正常组、OA组、正常+FCM组及OA+FCM组,其中正常组和OA组均加入完全高糖培养基,正常+FCM组和OA+FCM组均加入FCM,对各组细胞进行形态学观察,于第14天将各组软骨细胞予Ⅱ型胶原(COL2)免疫组化染色及油红O染色,同时应用Western blot技术检测各组软骨细胞中COL2、聚蛋白多糖(Acan)和基质金属蛋白酶(MMP-13)的表达情况。结果:(1)COL2免疫组化染色:OA组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度比正常组显著降低(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度无明显差异,而OA+FCM组显著降低(P0.05)。与正常+FCM组相比,OA+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度显著降低(P0.05)。(2)油红O染色:OA组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度与正常组相比差异无统计学意义。与OA组相比,正常+FCM组和OA+FCM组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度均有增高(P0.05),但OA+FCM组增高更为显著(P0.05)。(3)Western blot结果:OA组COL2、Acan的表达水平低于正常组(P0.05),而MMP-13的表达高于正常组(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组COL2、Acan和MMP-13的表达水平无明显差异;相较于正常组及正常+FCM组,OA+FCM组COL2、Acan的表达水平降低(P0.05),而MMP-13的表达水平增高(P0.05)。结论:OA膝FCM能使正常及OA软骨细胞形态上发生脂肪样变,并通过代谢途径提高软骨细胞MMP-13的表达,加速软骨细胞COL2、Acan的降解,且对OA软骨细胞的破坏更为显著。     

骨关节炎软骨细胞对白细胞介素18的炎症应答

目的探讨IL-18 对骨关节炎软骨细胞的作用。方法取骨关节炎患者的膝关节软骨,进行原代细胞培养。不同浓度的IL-18（0,50,150,300 ng/mL）刺激软骨细胞,RT-PCR检测TNFα和COX-2 mRNA的表达,ELISA检测TNFα、PGE2的水平。应用IL-1 受体阻断剂（IL-1Ra）+IL-18 干预软骨细胞,检测软骨细胞COX-2 的表达量和培养液中PGE2的水平。提取软骨细胞RNA,测定IL-18受体的表达。结果对于COX-2和TNFα,300 ng/mL组和150 ng/mL组mRNA的表达量显著高于对照组（P<0.01,P<0.05）。50、300 ng/mL组的PGE2水平显著高于对照组（P<0.05）。150、300 ng/mL组的TNFα蛋白的浓度显著高于对照组（P<0.05）,IL-1Ra 组的PGE2浓度高于对照组（P<0.01）,但是低于IL-18 组（P<0.01）。软骨细胞能够检测到IL-18 受体的表达。结论IL-18诱导软骨细胞产生炎症应答,这种作用和IL-1β有关但不完全依赖IL-1β。      

膝骨关节炎软骨细胞中差异基因表达的生物信息学分析

目的 对基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中骨关节炎患者软骨细胞基因芯片数据进行生物信息学分析,探究骨关节炎发生的分子机制.方法 在GEO数据库(截至2021年4月23日)中按照检索词"osteoarthritis OR cartilage OR chondrocyte*"分别...     

膝骨关节炎不同证型软骨细胞在t-RNA中的表达

目的:研究膝骨关节炎不同证型软骨细胞在t-RNA中的表达情况。方法 :选取股骨头坏死患者30例,按照脾肾两虚型以及肝肾亏虚型进行辨证分型和分组(各15例)。以实验室培养不同证型的软骨细胞作为研究方法,并对不同证型软骨细胞中t-RNA的表现形式进行观察,通过染色观察后,对软骨组织的表达形式进行研究分析。结果:肝肾亏虚型组中MMP-1/-13RNA在目标基因的表达方面均明显低于脾肾两虚型组,这表明在基因表达方面两种证型之间存在明显的差异。软骨组织细胞的外在形态由t-RNA的转录情况决定,在递变性的不同证型研究中,软骨组织的退化主要的原因取决于软骨组织中t-RNA的转录效果。结论:治疗膝骨关节炎的临床症状,并改善患者的生活质量,应当从神经递质以及细胞增生激素来进行局部控制,并以此来抑制或者促进t-RNA的转录,只有如此才能够有效地控制关节组织的退化进度。在改善人体的基本环境后,对人体的组织成长基本情况会有优化作用。在现代临床治疗膝骨关节炎的临床治疗中,应当从人体软骨组织入手,并以此来作为研究的根本,从细胞核中m-RNA和t-RNA的转录作为研究的根本进行临床试验的研究分析,必然可以在临床检验研究中得出更直接的证据。     

骨桥蛋白对骨关节炎软骨细胞缺氧诱导因子-2α mRNA表达的影响

[目的]本研究探讨在体外实验中,骨桥蛋白(OPN)对缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在软骨细胞表达的影响,揭示OPN在骨关节炎(OA)发病中的作用机制.[方法]从OA患者胫骨表面切取软骨,并在体外培养纯化软骨细胞.用重组人类骨桥蛋白(rh OPN组)和小干扰RNA(siRNA组)对软骨细胞进行干预(对照组不予激活及干预),检测HIF-2α mRNA表达的变化.用抗-CD44单克隆抗体检测可能的配体-受体的相互作用.通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)同时定量软骨细胞OPN mRNA和HIF-2α mRNA的表达.[结果]rh OPN组与对照组相比,HIF-2α mRNA的表达水平显著降低,相反,siRNA组HIF-2α mRNA表达增加.同时,CD44抗体可以抑制OPN对HIF-2α mRNA的表达的影响.[结论]OPN可能通过CD44的相互作用,抑制OA软骨细胞HIF-2α mRNA的表达,从而发挥对OA的保护性作用.     

自由基氧化致线粒体DNA损伤与细胞凋亡

细胞凋亡与自由基氧化密切相关,自由基氧化可致线粒体ＤＮＡ损伤而发生突变,引起细菌衰老甚至死亡,细胞死亡包括坏死和凋亡线粒体ＤＮＡ损伤突变与细胞凋亡间有无关系？本文此对自由基氧化,线粒体ＤＮＡ损伤以及细胞凋亡相关基因与细胞凋亡之间的关系作一综述。     

内翻畸形膝关节骨关节炎患者关节液对软骨细胞的影响

目的 探讨内翻畸形膝关节骨关节炎（KOA）患者关节液对软骨细胞增殖、凋亡、自噬的影响。方法 选取本院2019年5月至8月内翻畸形伴有外侧间室关节软骨病变的KOA患者7例（观察组）及内翻畸形无外侧间室关节软骨病变的KOA患者10例（对照组）。在无菌条件下分离4周龄新西兰大白兔双侧膝关节软骨细胞,观察组患者关节液培养软骨细胞作实验组,对照组患者关节液培养软骨细胞作阴性对照组,另设常规培养软骨细胞作空白组。共培养完成后,观察其对软骨细胞增殖、凋亡及自噬的影响。结果 观察组患者关节液中IL-1β、TNF-α、IL-6、MMP-13的含量水平显著高于对照组（P<0.01）。甲苯胺蓝染色鉴定显示培养的软骨细胞核呈深染色,细胞质呈淡蓝色。与空白组细胞相比,实验组软骨细胞的细胞活力显著降低（P<0.01）,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,并伴随着LC3B蛋白表达显著上升（P<0.01）及显著减少P62蛋白表达（P<0.01）。同时,实验组及阴性对照组软骨细胞中PCNA、Bcl-2、P62与BMP-2蛋白表达水平均显著降低,且Bax、LC3、Beclin-1、 PI3K...     

碱性成纤维细胞生长因子可拮抗过氧化氢对软骨细胞的损伤

背景：碱性成纤维细胞生长因子是否能够拮抗氧自由基带来的软骨细胞损害尚不清楚。目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对过氧化氢诱导的大鼠膝关节软骨细胞损伤的拮抗作用。方法：分别以0.05,0.1,0.2,0.4,0.8,1.6,3.2mmol/L的过氧化氢诱导SD大鼠膝关节软骨细胞凋亡,从中选择有效的诱导凋亡浓度同时加入1μg/L的碱性成纤维细胞生长因子进行干预。结果与结论：MTT结果显示0.2～1.6mmol/L的过氧化氢均可明显诱导SD大鼠膝关节软骨细胞发生凋亡,且随浓度增加,凋亡增加;Hoechst33342染色及流式细胞仪检测发现1μg/L的碱性成纤维细胞生长因子可拮抗过氧化氢诱导的大鼠软骨细胞凋亡。     

成软骨细胞损伤与细胞因子的调节作用

成软骨细胞就是指间充质细胞首先收回其突起,聚集成团,此细胞团中间的细胞经分裂分化转变成的一种大而圆的细胞,是软骨组织发生过程中最原始的细胞,它由间充质细胞分化而来。成软骨细胞产生基质和纤维,当基质的量增加到一定程度时,成软骨细胞就被分隔在陷窝内,分化为成熟的软骨细胞。     

氨基葡萄糖对白细胞介素1β诱导体外培养人骨关节炎软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响

背景:蛋白聚糖和胶原纤维的降解是骨关节炎发病的主要生理和病理学基础,氨基葡萄糖不仅可以减轻骨关节炎疼痛症状,同时可以延缓骨关节炎的病理改变。目的:了解氨基葡萄糖对白细胞介素1β诱导骨关节炎软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响。方法:取骨关节炎患者的软骨细胞,分阶段酶消化法进行体外原代培养。在培养液中加入白细胞介素1β诱导剂,设立不含药兔血清对照组、白细胞介素1β对照组和加入不同浓度兔氨基葡萄糖含药血清的实验组。结果与结论:各浓度氨基葡萄糖含药血清组体外培养软骨细胞释放入培养液中糖胺聚糖百分比均值明显低于对照组(P<0.01),随氨基葡萄糖浓度的增加,糖胺聚糖百分比逐渐降低;蛋白聚糖合成标记物3B3含量的均值较对照组明显增高(P<0.01),与氨基葡萄糖浓度呈正相关;而蛋白聚糖降解标记物5D4含量的均值则正相反;氨基葡萄糖可以增加骨关节炎患者软骨细胞蛋白聚糖mRNA表达,减低基质金属蛋白酶1,3mRNA表达。表明氨基葡萄糖可以抑制白细胞介素1β对骨关节炎患者软骨细胞蛋白聚糖代谢的促进作用,达到保护软骨,防止骨关节炎的目的。