雌兔去势对膝关节软骨及关节液和血清中透明质酸的影响

目的：观察雌激素水平变化对兔膝关节软骨及关节液和血清中透明质酸的影响。方法：56只雌兔随机分为4组，A组正常对照，B组关节固定，为OA模型组，C组切除卵巢后不补充雌激素，D组切除卵巢后补充雌激素，分别于第2、4、6、8周抽血和关节液，测定HA水平，并取右股骨内侧髁软骨组织进行光镜和电镜观察。结果：B、C组关节液HA均下降，血清HA均上升，与A组比较差异有显著性意义（P〈0．05），D组关节液和血清HA与A组比较均无显著性差异（P〉0．05）；标本观察显示，B、C两组关节软骨均有OA改变，但B组重于C组，D组软骨退变程度较C组轻。结论：雌激素水平下降，可致软骨退变．关节液及血清HA水平发生变化，其比值下降明显。雌激素水平下降可能关系到OA的发生发展，关节液HA及血清HA比值下降，血清HA升高可能是OA的重要指标。     

兔膝关节内注射透明质酸钠后胶原纤维及关节外相关韧带组织的变化

目的:在兔固定的膝关节内定期注入透明质酸钠,观察关节内外组织的变化。方法:实验于2003-10/2004-04在大连医科大学完成。实验分组:新西兰兔24只,随机分为透明质酸钠组、生理盐水组、单纯对照组,每组8只。实验干预:用树脂绷带将兔右膝关节固定于伸直位,膝关节注射部位开窗,左膝自由活动(自身对照侧)。透明质酸钠组膝关节腔内注入透明质酸钠0.1mL,生理盐水组注射同等剂量的生理盐水,单纯对照组不向关节内注射任何药物,每周1次,共5次。实验评估:5周后麻醉下处死动物,去除外固定,采用改良Clarke-Weeknesser关节伸屈范围检查标准测量右膝关节的活动范围;采用改良的Rydell-Balazes肉眼粘连评分标准评估膝关节内纤维粘连情况;光镜下观察股间肌、股直肌、髌内外侧支持带的纤维变性情况。结果:动物饲养过程中死亡4只,进入结果分析透明质酸钠组7只,生理盐水组6只,单纯对照组7只。①右膝关节的活动范围:透明质酸钠组大于生理盐水组和单纯对照组[(37.86±2.94)°,(15.67±2.23)°,(14.29±1.96)°,P<0.01]。②膝关节内纤维粘连评分:透明质酸钠组小于生理盐水组和单纯对照组(1.44±0.49,3.33±0.44,3.44±0.57,P<0.01)。③光镜下透明质酸钠组股间肌、股直肌的纤维变性较生理盐水组和单纯对照组减轻,髌内外侧支持带胶原纤维成分的变化也减轻。结论:在固定的兔膝关节内注射透明质酸钠不但可以明显抑制关节内的纤维性粘连;还可以抑制关节外股间肌、股直肌、髌内外侧支持带的组织变性。     

高脂饮食兔膝关节软骨的变化

背景：血清胆固醇水平增高与人群中骨关节病发病率增高呈正相关,而对于高脂饮食是否参与关节软骨退变过程从而诱发骨关节炎,目前尚不清楚。
　　目的：观察经高脂喂养后新西兰兔膝关节软骨形态学改变,探索饮食在关节软骨退变过程中的作用。
　　方法：将新西兰兔40只随机分为2组：对照组饲以基础饲料,高脂组饲以高脂饲料(20%猪油混合80%的基础饲料)。每4周末抽取空腹血样,测三酰甘油、总胆固醇水平。饲养28周后,取兔膝关节行大体观察后,取股骨髁部软骨行扫描电镜观察。
　　结果与结论：与对照组相比,高脂组血清三酰甘油、总胆固醇水平均显著升高(P<0.05)。扫描电镜观察发现,高脂组髁软骨表面粗糙,陷凹变浅,排列杂乱,形态不规则,大小不均,软骨表面呈局灶性剥脱改变,排列变得不规整,孔隙不均匀,软骨表面出现断裂空洞。进一步放大倍数观察可见软骨表面小山峰样结构变浅、变平,孔隙基本消失。结果证实,长期高脂饮食可诱发和加重软骨损伤,提示其可能参与了骨关节炎的发生发展。     

膝关节负荷改变对关节软骨的影响

目的：观察一侧膝关节固定的条件下对侧膝关节软骨的影响。方法：6月龄，体质量2．5kg新西兰白兔lO只，分实验组和对照组。实验组分a，b两部分，a组3只、b组5只。用石膏固定一侧膝关节5．5周。a组去除固定后即刻取对侧膝关节软骨标本。b组去除固定4周后取对侧膝关节软骨标本。通过光镜及扫描电镜观察膝关节负荷改变对关节软骨的影响。对照组2只，膝关节不做任何处理。结果：兔一侧膝关节固定5．5周，对侧膝关节由于承重增加，在去除固定后即刻，对侧膝关节软骨即出现退行性改变。去除固定4周，对侧膝关节软骨尚未恢复正常。结论：①一侧膝关节固定，对侧膝关节由于负荷的增加可导致退行性变化。②在相同时间段，关节固定对软骨的影响大于负荷改变对软骨的影响。     

膝关节镜术后注射透明质酸钠对关节功能恢复的探讨

目的:通过临床随机对照研究探讨膝关节镜术后关节腔内注射透明质酸钠治疗的效果。方法:对关节镜手术118例于手术结束时在关节腔内注射透明质酸钠2ml,术后第4天抽出关节积液,再注入透明质酸钠2ml;1次/周,连续4次为1个疗程,根据病情注射一二个疗程。观察患者关节疼痛(休息痛及运动痛)、肿胀、压痛、活动度及行走情况6个项目综合评分。与同期手术未用药的58例进行比较。结果:用药组术后疼痛程度、关节肿胀、压痛、活动度评分均低于未用药组。结论:透明质酸钠在膝关节镜手术后关节腔内注射是一种行之有效的关节保护剂和生物止痛剂,有助于关节功能恢复。     

兔膝关节软骨及软骨下骨改变生存环境后的转归

目的 应用关节镜灌洗术、软骨下钻孔术、骨膜或软骨膜移植等方法治疗关节软骨损伤，透明软骨得不到真正的修复。因此以自体或异体软骨细胞、骨髓基质细胞为种子细胞修复关节软骨并观察关节透明软骨细胞和骨髓基质细胞在体内不同微环境中的变化。方法 新西兰兔9只，在股骨髁髌骨滑车关节面钻取两个直径2．5mm、深3mm的骨软骨块，将软骨面向下、软骨下骨向上原位倒置。分别于4，8，12周取材，做大体观察和苏木精一伊红(HE)染色、safrallin-O染色、Ⅱ型胶原免疫组化。结果 4周时倒置体表面有纤维组织覆盖，原关节软骨细胞形态结构正常。8—12周，倒置体表面有纤维软骨再生，原关节透明软骨基本保持其原有特性。结论 以骨松质为支架的骨髓基质细胞未能完全修复关节软骨损伤。修复关节软骨最好采用同一组织来源的透明软骨细胞。     

透明质酸与关节软骨损伤的修复

成人关节软骨损伤后自我修复能力非常有限。透明质酸钠作为一种独特的线性黏多糖，是构成关节软骨和滑液的主要成分。许多动物实验与临床应用研究已证明，关节内应用透明质酸钠有明显的营养、润滑软骨和止痛效果。目前有许多促进软骨再生的研究，采用的方法也不尽相同，但效果均不理想。如关节软骨的移植方法受到软骨来源的极大限制，软骨刨刮、软骨下骨钻孔、磨造、凝胶或纤维植入、电磁场、激光刺激等方法的确切效果还未能得到广泛认可。组织工程学及多肽生长因子的研究尚未成热，要将它们应用于骨关节疾病的临床治疗还受到诸多因素的影响和限制。透明质酸作为一种经济、安全、有效的生物制剂，完全可以利用其来源广泛、提纯简便、用药方法安全易行、价格适宜的特点在关节软骨损伤修复领域发挥更大的作用。     

膝关节退行性骨关节病软骨下骨改变MRI分型探讨

目的探讨膝关节退行性骨关节病软骨下骨改变MRl分型的可行性及临床意义。方法回顾性分析了535例病人636个关节的1551处软骨下骨改变MRI表现，将其分为4型，Ⅰ型为局限型，Ⅱ型为表浅型，Ⅲ型纵深型，Ⅳ型为囊肿型。结果Ⅰ型911处（58．7％）；Ⅱ型165处（10．6％）；Ⅲ型302处（19．5％）；Ⅳ型173处（11．2％）。结论MRI是膝关节退行性骨关节病软骨下骨改变影像学分型较为理想的检查方法，能够为临床制定治疗方案提供更为详细的影像学参考资料。     

膝关节负荷改变对关节软骨的影响

目的:观察一侧膝关节固定的条件下对侧膝关节软骨的影响。方法:6月龄,体质量2.5kg新西兰白兔10只,分实验组和对照组。实验组分a,b两部分,a组3只、b组5只。用石膏固定一侧膝关节5.5周。a组去除固定后即刻取对侧膝关节软骨标本。b组去除固定4周后取对侧膝关节软骨标本。通过光镜及扫描电镜观察膝关节负荷改变对关节软骨的影响。对照组2只,膝关节不做任何处理。结果:兔一侧膝关节固定5.5周,对侧膝关节由于承重增加,在去除固定后即刻,对侧膝关节软骨即出现退行性改变。去除固定4周,对侧膝关节软骨尚未恢复正常。结论:①一侧膝关节固定,对侧膝关节由于负荷的增加可导致退行性变化。②在相同时间段,关节固定对软骨的影响大于负荷改变对软骨的影响。     

膝关节镜术后注射透明质酸钠对关节功能恢复的探讨

目的：通过临床随机对照研究探讨膝关节镜术后关节腔内注射透明质酸钠治疗的效果。方法：对关节镜手术118例于手术结束时在关节腔内注射透明质酸钠2ml，术后第4天抽出关节积液，再注入透明质酸钠2ml；1次/周，连续4次为1个疗程，根据病情注射一二个疗程。观察患关节疼痛（休息及运动痛）、肿胀、压痛、活动度及行走情况6个项目综合评分。与同期手术未用药的58例进行比较。结果：用药组术后疼痛程度、关节肿胀、压痛、活动度评分均低于未用药组。结论：透明质酸钠在膝关节镜手术后关节腔内注射是一种行之有效的关节保护剂和生物止痛剂，有助于关节功能恢复。     

Effective lubrication of articular cartilage by an amphiphilic hyaluronic acid derivative

Background

Intra-articular injection of hyaluronic acid based therapies is gaining popularity as a treatment option for non-operative management of patients with symptomatic osteoarthritis. Although there is an abundance of evidence for both biological and mechanical mechanisms of joint protection by hyaluronic acid, one clear intention of viscosupplementation is to reduce friction and wear by providing an extrinsic lubricant. We tested the in vitro friction response of a novel hyaluronic acid derivative that presents amphiphilic features to promote adhesion to the cartilage surface and thereby improve cartilage lubrication.

Methods

Migrating Contact Area and Static Contact Area friction tests were conducted on bovine articular cartilage to assess the efficacy of two lubricants, a chemically modified amphiphilic hyaluronic acid and synovial fluid from a healthy joint, as well as a phosphate buffered saline negative control.

Findings

No differences in lubrication (P = 0.34) were evident between the three test articles during the Migrating Contact Area test, which represents articulation of healthy articular cartilage.The modified hyaluronic acid presented an equilibrium friction coefficient 2.8 times less than that of the synovial fluid (P ≤ 0.0005) and five times less than that of the PBS control (P ≤ 0.0001) during the Static Contact Area test, representing a mixed lubrication condition.

Interpretation

The present study demonstrated that a chemically modified amphiphilic hyaluronic acid can provide equivalent lubrication to synovial fluid during articulation of loaded healthy articular cartilage and can provide superior lubrication as indicated by a lower coefficient of friction than synovial fluid under loading conditions potentially associated with cartilage wear.     

关节软骨退化性骨性关节炎的修复与运动

学术背景:研究表明,强度大、持续时间长的运动会对关节软骨产生一些负面的影响。目的:阐述骨性关节炎的发病机制以及运动和骨性关节炎发生的关系,并综述骨性关节炎的治疗方法,以期对骨性关节炎针对性的预防和治疗有所帮助。检索策略:检索1998/2007highwire Stanford.关于运动与骨性关节炎研究的文献,检索词为Osteoarthritis和Exercise。文献评价:初检文题中含有Osteoarthritis和Exercise得到137篇文献。阅读标题和摘要进行初筛,引用文献37篇,其中动物实验和在体、离体、细胞学实验33篇,综述、述评、讲座类文献4篇。资料综合:①软骨组织由软骨细胞、定位在细胞外膜上的胶原纤维、蛋白多糖、水等组成。②骨性关节炎时软骨组织发生变化;炎症加剧软骨的退化;重复的机械性压力和运动训练与骨性关节炎的形成高度相关。③骨性关节炎的治疗包括:药物治疗、手术治疗、软骨细胞移植、运动疗法和基因治疗。结论:关节受伤会增大骨性关节炎发生的危险,关节重复的承受高负荷压力更易使运动者关节受伤和退化。造成关节软骨退化的原因很多,机械负荷能够使软骨组织基质发生改变。关节软骨退化的发生和体育运动的关系密切相关。高强度的运动与人们骨性关节炎的发生相关。目前,尚未发现能使软骨组织损伤痊愈的治疗方法。基因治疗能加快和改善软骨组织的修复。     

兔陈旧性关节软骨缺损模型的制备

背景:临床所见的骨性关节炎的软骨缺损大多为不规则的、深至软骨下的陈旧性骨缺损,但目前关节软骨缺损动物模型多为新鲜骨缺损.目的:观察制动时间和缺损大小对兔关节软骨陈旧性缺损的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-04/2006-05在南方医科大学创伤骨科组织工程实验室完成.材料:6周龄新西兰大白兔6只,随机分为6,12周观测组两组,每组3只 6侧膝关节.干预:无菌操作下显露两侧股骨髁关节面,用牙科钻打圆形孔,每孔直径4 mm,深度约3 mm,达软骨下骨,术毕下肢固定,笼中自由喂养,后膝伸直位制动12周复制的膝关节陈旧性软骨缺损模型.主要观察指标:制动6,12周模型取出关节软骨缺损区标本进行大体观察和组织学切片观察.结果:6只兔均进入结果分析.兔关节软骨及周围组织情况:12周时炎症反应较6周轻,纤维瘢痕化较6周明显;12周时出现增生性改变,尤其是关节周围的肌腱、关节囊、韧带、滑囊等结缔组织较6周时更易形成瘢痕、粘连、纤维化等陈旧性损伤组织学改变.12周后可见自行修复不完全,缺损明显.结论:构建的兔后膝股骨髁关节面软骨缺损直径4 mm,深度约3 mm,达软骨下骨,符合实验要求,适用于骨性关节炎的基础实验.     

兔膝关节软骨缺损动物模型的建立

背景:以往制备骨关节模型的方法成模时间较长.目的:建立一个理想的兔膝关节软骨缺损动物模型.设计、时间及地点:随机分组设计,对照动物实验,于2007-03/2008-10在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成.材料:用新西兰大白兔16只,雌雄不限,体质量3.2～4.0 kg.方法:以6g/L戊巴比妥钠行耳缘静脉注射麻醉下,通过在实验兔后腿关节的股骨髁关节面部位用电动骨钻,在控制其直径4.5 mm,深度为3 mm,造成其关节软骨的缺损,制模后2,6,12,18周取出其股骨髁.主要观察指标:用大体观察、组织学染色共聚焦显微镜观察缺损部位软骨修复情况.结果:实验兔后腿关节的股骨髁关节面的关节软骨缺损后,在制模后2,6周缺损部位凹陷明显,只有少许肉芽组织和纤维组织生长填充,未见软骨细胞爬行生长,12,18周见缺损部位以纤维组织增生为主,底部及边缘可见骨组织和软骨增生,但是镜下形念仍与正常软骨组织区别较大,表面仍未见软骨细胞爬行生长.结论:实验建立的兔膝关节软骨缺损模型成模时间短,且缺损部位不能通过自我修复达到自愈.     

兔膝关节软骨缺损对关节退变的影响

目的:探讨软骨损伤与关节退变之间的关系,以及持续被动运动治疗在其中的作用.方法:新西兰大白兔15只共30个膝关节随机分为3组,采用在关节软骨上钻孔的方法建立软骨损伤模型,术后按照不同的处理分为假手术组、对照组和持续被动运动(CPM)组,各组采取相应的处理方法.术后12周处死实验兔并进行关节软骨大体评分、HE染色评分和MMP-3免疫组化染色.结果:A组软骨表现正常.B组软骨在肉眼观察、病理学表现和MMP-3阳性细胞分数改变上均显示有明显退变.C组的各项指标均与A组接近而与B组差异有显著性意义(P＜0.05).结论:人为造成兔膝关节软骨缺损,可以进展成为骨关节炎(OA).软骨缺损后早期给予CPM治疗8h/d,连续4周,在12周后可有效减缓OA的发生.     

玻璃化法保存兔关节软骨的实验研究

目的观察玻璃化法保存兔关节软骨的效果。方法选取10只大白兔,软骨标本取材后,低温冷冻组5只和玻璃化保存组5只,分别通过台盼蓝拒染法检测兔关节关节软骨细胞存活率和MTT法测软骨细胞相对活性。结果玻璃化保存组兔关节关节软骨细胞存活率和软骨细胞相对活性均优于低温冷冻组,差异均有显著性(P<0.05)。结论玻璃化法保存兔软骨,软骨存活率高,软骨修复区的组织更接近正常软骨。     

组织工程软骨与柚皮苷联合修复兔膝关节软骨缺损的组织学证实

背景：目前临床上虽有多种方法用于治疗软骨缺损,但没有从根本上解决关节软骨缺损修复问题。目的：通过组织学研究进一步评价柚皮苷结合组织工程软骨修复兔关节软骨缺损的效果。方法：取兔骨髓间充质干细胞体外增殖后,复合于改建后的脱细胞真皮基质载体上,制成组织工程软骨,植入到兔膝关节软骨缺损,并以柚皮苷汤灌胃,于4,8周后分别对修复组织进行苏木精-伊红、Masson三色染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原染色、Ⅹ型胶原染色等组织学检查。结果与结论：术后8周,柚皮苷结合干细胞复合体组缺损处修复组织变成乳白色,半透明光滑组织,缺损修复组织与周围正常软骨已基本难区分,表面光滑。组织学检查发现修复缺损处基本为新生软骨填充。结果证实,柚皮苷结合组织工程软骨能提高家兔膝关节软骨缺损的修复质量。     

平衡消肿灌洗液对关节软骨影响的研究与分析

目的观察自制平衡消肿灌洗液对兔活体膝关节灌注后关节软骨的影响，为关节镜手术提供更理想的灌洗液。方法选用健康兔24只（48膝），随机将其分为平衡消肿灌洗液组，透明质酸钠组，林格氏液组。并于灌注后、第1、2、5周末进行关节软骨形态学观察及组织学检查。结果灌注后5周，平衡消肿灌洗液灌注组关节软骨的形态学、组织学完全正常，软骨蛋白多糖含量高于2个对照组。结论平衡消肿灌洗液可维持甚至提高软骨的蛋白多糖含量，对关节软骨有更为显著的保护、营养作用，促进软骨恢复，对关节的影响小，是关节镜手术较为理想的灌洗液。